1、5.1 DNA的粗提取和鑒定，1，基礎知識，(1)提取DNA的方法，1。提取生物大分子的基本思維方式，選擇某種程度的物理或化學方法，分離其他物理或化學性質的生物大分子，2。DNA提取的基本思考，DNA提取，其他成分去除，利用DNA DNA和蛋白質等成分在濃度不同的NaCl溶液中溶解不同。利用牙齒特征選擇合適的鹽濃度，DNA就會完全溶解，雜質沉淀?；蛉芙馄渌煞?，DNA析出，3 .DNA等大分子的理化性質，DNA不溶于酒精溶液，DNA不溶于酶、高溫、耐洗滌劑，DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質溶于酒精。進一步分離DNA和蛋白質。DNA不溶于酒精溶液。DNA不影響酶、高溫、耐洗滌劑、蛋白質

2、水解蛋白和DNA。高溫的大部分蛋白質不能忍受6080，DNA是80以上的變性，洗滌劑溶解細胞膜，去除脂質和蛋白質，但對DNA沒有影響。試劑：(2)在DNA DNA中，二苯胺用藍色、沸水染色?，F(xiàn)象：(1)實驗物質的選擇；(2)破細胞，獲得含DNA的濾液；(3)濾液中雜質的去除(精煉)；(4)DNA沉淀和鑒定魚卵；豬肝；雞血；哺乳動物的紅細胞；液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的大腸桿菌可以選擇任何含有DNA的生物物質DNA含量比較高的組織。從核DNA的數(shù)量來看，豬的38萬億，雞的78萬億，哺乳動物的0萬億，獼猴桃的58萬億，洋蔥的16萬億，豌豆的14萬億，菠菜的12萬億，大腸桿菌的1萬億。請選擇一個動植物材料。沒

3、有哺乳動物的血細胞核和細胞器。液體培養(yǎng)基中大腸桿菌的DNA楊怡減少。魚卵是減數(shù)分裂的產物。(b)碎細胞，含有DNA的過濾器，1，動物細胞，2，植物細胞，易碎，細胞膜應溶解。雞血細胞溶液：加入一定量的蒸餾水，用玻璃棒攪拌，過濾后收集過濾器。想想為什么放蒸餾水做雞，蒸餾水是對雞血細胞的低滲透液體，水分牙齒大量進入血細胞，使血細胞牙齒膨脹。加入混合作用，加速雞血細胞細胞膜，核膜破裂釋放DNA，加入洗滌劑和鹽，充分攪拌，研磨，過濾后收集研磨液，洗滌劑和鹽的作用分別是什么？洗滌劑離子洗滌劑溶解細胞膜，有助于DNA釋放食鹽NaCl，DNA溶解在研磨液中，研磨，粉碎細胞壁，釋放細胞核內的DNA。缺乏研磨會減

4、少提取的DNA的楊怡，看不到絲綢沉淀物，用二苯胺看不到藍色等。，為了純化提取的DNA，需要進一步處理過濾器。過濾器/研磨液中可能含有什么成分？答：可能含有核蛋白、多糖、RNA等雜質。研磨的目的是什么，如果不充分研磨，會對實驗結果產生什么影響？1 .DNA的溶解性，2 .DNA中的酶、高溫、耐洗滌劑、(3)去除過濾器中的雜質，方案2和方案3的原理有何不同？情景2:利用蛋白酶分解雜質蛋白質，將提取的DNA與蛋白質分離。案例3:利用DNA和蛋白質進行高溫耐受性不同，將蛋白質變性、DNA分離、(4) DNA的析出和鑒定、濾液體積等冷卻酒精溶液(體積分數(shù)95)、23min停止，在溶液中以白色絲粗提取的D

5、NA用玻璃棒向一個方向混合。2.DNA的鑒定，在兩個試管中分別加入2mol/L NaCl溶液5ml。其中，在一個試管中放入DNA線，分別混合4毫升二苯胺試劑，然后放入沸水中加熱5min，冷卻，比較兩個試管中溶液的顏色變化，觀察現(xiàn)象。溶解史溶液加入藍色，檸檬酸鈉溶液的目的是防止血凝。溶解DNA，將2mol/L的NaCl溶液稀釋為0.14mol/L，使DNA最大限度地釋放，在沒有藍色的情況下提取的DNA含量低，或者在實驗工作中可能發(fā)生錯誤。再準備，4，評估專題結果，(1)是否提取DNA，練習，1，說明提取DNA的實驗工作中主要步驟的目的。答：提取DNA的第一步是選擇DNA含量高的生物材料。否則，在

6、實驗中，在一定程度上丟失會使檢測變得困難。第二階段是DNA的釋放和溶解。牙齒階段是實驗成功與否的關鍵。應該盡可能溶解細胞內的所有DNA。第三步是根據(jù)DNA的純化，即DNA的溶解特性、酶和耐高溫性的不同特性，盡可能地分離DNA和雜質。最后一步是鑒定檢查整個實驗結果的DNA。2，你認為從細胞中提取某些蛋白質和提取DNA一樣容易嗎？答：蛋白質提取比DNA提取難。這是因為與DNA相比，蛋白質對溫度、鹽濃度、pH等條件更加敏感，很容易被停用。另外，由于蛋白質的空間結構多樣，理化性質不同，蛋白質提取沒有統(tǒng)一的方法，只能根據(jù)特定蛋白質的特性摸索提取條件，設計特定的方法。2 .實驗中NaCl的物質濃度對2 molL和0.14 molL牙齒DNA有何影響？1 .在DNA粗提取實驗過程中，將蒸餾水兩次放在燒杯中的作用是()。A .血液稀釋，樣品清洗B .血細胞破裂，NaCl濃度降低，DNA