1、細菌的接種及注意事項,滅菌接種環(huán),1.要充分滅菌接種環(huán)，以免污染其標本 。 2.要適當冷卻再取標本，以免帶不出標本中的菌種。,取標本,1.蘸取標本時應適量，以免標本太少漏檢。 2.液體標本，如尿液，應注意混勻。,接種,1.細菌的接種方法有很多，如平板劃線法、斜面接種法、穿刺接種法，等等。但我們用的最多的是： 平板劃線法意義 指把混雜在一起的微生物，用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線，稀釋得到較多的獨立分布的單個菌落，即將樣本在固體培養(yǎng)基表面多次做由點到線稀釋而達到分純的目的。,一區(qū)：所占區(qū)域大約是平板面積的1/51/4,二區(qū)：由一區(qū)向二區(qū)帶出三四條平行線,三區(qū)：由二區(qū)引出三四次，但 三區(qū)面

2、積最大,CO2在細菌培養(yǎng)中的意義,1有些細菌在初次分離培養(yǎng)時，需要5-10的CO2。因為細菌在生長過程中能夠分解培養(yǎng)基中的某些含氮物質產生氮，對該菌有殺滅作用，而CO2能中和細菌產生的氮，以減少對細菌的毒性。如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、牛布魯菌等。 2.為細菌提供碳源，促進細菌的生長。如肺炎鏈球菌，草綠色鏈球菌。,在細菌室的培養(yǎng)箱上有一個CO2的開關，為什么要用CO2呢？,常見細菌的鑒別及其特點,陽性球菌,葡萄球菌-金黃色葡萄球菌,金葡特點,是人類化膿性感染最常見的病原菌， 可以引起局部感染，也可以引起全身感染。 血漿凝固酶，陽性。 血平板上呈黃色菌落，大而凸起，表 面光滑，有溶血環(huán)。 G+陽

3、性球菌，葡萄狀排列，無芽孢，無莢膜。,1.,2.,3.,4.,葡萄球菌-表面葡萄球菌,表葡特點,正常存在于人體皮膚、黏膜表面，多見于院內感染，如體內異物留置，靜脈導管等 血漿凝固酶，陰性 表葡形態(tài)同金葡相似，但是為白色、扁平菌落，無溶血環(huán),1.,2.,3.,3.,鏈球菌,常見的鏈球菌主要有化膿性鏈球菌、草綠色鏈球菌、肺炎鏈球菌 。 根據(jù)抗原結構不同可以把鏈球菌分為A、B、C、D等二十個群，但對人類有致病性的大多數(shù)屬于A群，少量屬于B群。,根據(jù)在血平板上溶血分為以下三種： 甲型（型）溶血性鏈球菌，又稱草綠色鏈球菌，菌落周圍有草綠色溶血環(huán)，致病力弱，是條件致病菌。 乙型（型）溶血性鏈球菌，產生強烈

4、的溶血毒素，在血平板上可使菌落周圍出現(xiàn)24mm的無色透明溶血環(huán)。 丙型（r-）鏈球菌，菌落周圍無溶血環(huán)，又叫不溶血性鏈球菌，通常不致病。,肺炎鏈球菌,菌落特點：在血平板上0.51.5mm,灰白色半透明，表面光滑，扁平，周圍環(huán)繞草綠色溶血環(huán)，培養(yǎng)放置24h以上的菌落，還會因為產生自溶酶的作用，而致菌落中央塌陷而邊緣隆起，呈臍窩狀。,肺炎鏈球菌、群、群的區(qū)分： pt試驗,抑菌環(huán)14, 鑒定為肺鏈,桿菌肽試驗,群,CAMP試驗,B群,Opt實驗,桿菌肽實驗,11,葡萄球菌與鏈球菌的鑒別：,1.涂片涂片革蘭染色，葡萄球菌呈葡萄串樣，鏈球菌呈鏈狀。 2M-H試驗當染片不能區(qū)別時，接種到M-H平板，長成菌

5、落之后，可挑單個菌落做觸酶試驗，+是葡萄球菌，是鏈球菌。,腸球菌,腸球菌屬特點：+，成圓球形或橢圓形，單個，成對，或短鏈，均可。 在血平板上可形成灰白色不透明表面光滑，0.51.0mm大小的菌落，可有溶血現(xiàn)象。,以糞腸球菌和屎腸球菌為常見：,阿拉伯糖 山梨醇 屎腸球菌 陽性 陰性 糞腸球菌 陰性 陽性,陰性桿菌,大腸桿菌：G-桿菌，有鞭毛、菌毛，無芽胞。菌落23mm,圓形凸起，灰白濕潤，光滑半透明，邊緣整齊。某些菌落可產生有透明溶血環(huán)。,鮑曼不動桿菌,菌落特點： 圓形、凸起光滑、邊緣整齊不透明、灰白色 有粘性的菌落 多數(shù)菌落不溶血 在中國蘭上為粉紅色菌落,菌落特點： 較大菌落、凸起、灰白色黏液

6、型、 相鄰菌落容易發(fā)生融合 可挑出長絲狀細絲,肺炎克雷伯桿菌,變形桿菌,遷徙生長,菌落特點： G-，兩邊鈍圓，有明顯的多形性，呈球形或絲狀，無芽胞無莢膜，有鞭毛，運動活潑。普通變形桿菌和奇異變形桿菌的大多數(shù)菌株呈遷徙擴散生長，迅速彌漫。波紋狀薄膜布滿整個培養(yǎng)基表面。,嗜麥芽假單胞菌,菌落特點： G-桿菌，細長略彎曲。不透明，灰黃色菌落，在血平板上可產生氨味。本菌氧化酶陰性，與大多數(shù)假單胞菌不同。,在普通瓊脂培養(yǎng)基上能產生水溶性綠色素，使整個培養(yǎng)基變?yōu)榫G色 菌落灰綠色、半透明、大而扁平、表面濕潤、邊緣不齊；有金屬光澤；有生姜樣芳香氣味；菌落周圍有寬大的蘭綠色透明溶血環(huán)。,銅綠假單胞菌,銅綠假單胞菌,流感嗜血桿菌、副流感嗜血桿菌,在巧克力平板上生長