1、,項目十二 尿液分析儀檢驗,任務(wù)一 尿液干化學(xué)分析儀的臨床應(yīng)用,學(xué)習(xí)目標,了解尿液干化學(xué)分析儀發(fā)展史、結(jié)構(gòu)及檢測原理 掌握尿液干化學(xué)檢驗中各項目的原理、方法 重點掌握尿液干化學(xué)檢驗中的注意事項及臨床意義 掌握干化學(xué)檢查過程中應(yīng)注意的問題,現(xiàn)代尿液分析儀類型,干化學(xué)分析儀檢驗 全自動尿沉渣分析儀 流式細胞術(shù)分析儀 影像式尿沉渣,尿干化學(xué)試帶測試原理、臨床應(yīng)用級及質(zhì)量控制,主要內(nèi)容,干化學(xué)尿液分析儀試劑帶檢測原理 干化學(xué)尿液分析儀檢驗的干擾因素及質(zhì)量控制 干化學(xué)尿液分析儀檢驗的臨床應(yīng)用,歷史回顧,16世紀：英國物理學(xué)家Robert Boyle發(fā)明石蕊試紙，用于測定溶液pH 1937年：費格爾利用“

2、蛋白質(zhì)誤差（protein error）原理，首次發(fā)明了測定尿蛋白的一種單顏色反應(yīng)，此發(fā)明奠定了以后發(fā)展浸入即讀（Dip-and-Read）干化學(xué)試帶的基礎(chǔ),1956年：聯(lián)合尿糖、蛋白、pH等的多聯(lián)試紙問世，從3-4個項目組合到九十年代的尿液10項干化學(xué)試帶，已經(jīng)達到比較理想的境地 1970年起，用于判讀尿試帶顏色變化的半自動化儀器問世,1980年:具有自動進樣，點滴，試帶傳輸和打印功能的全自動尿干化學(xué)分析儀問世,歷史回顧,歷史回顧-中國,1966年：北京協(xié)和醫(yī)院檢驗科生產(chǎn)出12種用于測定尿液中化學(xué)成分的試紙，包括尿蛋白、尿糖、酮體、膽紅素、pH、潛血等項目 1980年，北京協(xié)和醫(yī)院與美國Am

3、es公司簽訂雙方協(xié)作計劃，首次從美國引進一批自動化和半自動化檢驗設(shè)備,中級醫(yī)刊，1966年特刊,8項目半自動尿液干化學(xué)分析儀,近代尿液分析儀,1985年，國內(nèi)不少廠家如桂林醫(yī)療電子儀器廠等引進日本京都第一化學(xué)或日本榮研化學(xué)的技術(shù)，生產(chǎn)8項的干化學(xué)試帶生產(chǎn)線 然后還引進了MA-4210等型號的尿液分析儀 進入上世紀90年代以后，尿液干化學(xué)分析儀器和試帶已經(jīng)擴展為10項至11項,MA-4210尿液化學(xué)分析儀,近代尿液分析儀,Clinitek 500型半自動尿液干化學(xué)分析儀,Roche 2400全自動尿液干化學(xué)分析系統(tǒng),近代尿液分析儀,Clinitek Atlas 全自 動尿液干化學(xué)分析儀,迪瑞H8

4、00全自動尿液干化學(xué)分析儀,愛科來AUTION MAX AX-4280全自動尿干化學(xué)分析儀和iQ-200尿液有形成分分析儀連接運行,尿干化學(xué)試帶結(jié)構(gòu)及組成,試帶構(gòu)成,第一層尼龍膜起保護作用，防止大分子物質(zhì)的污染 第二層絨制層，包括碘酸鹽層和試劑層，碘酸鹽層可破壞Vitc等干擾物質(zhì)，試劑層與尿液所測定物質(zhì)發(fā)生化學(xué)反應(yīng) 第三層是固有試劑的吸水層，可使尿液均勻，快速地浸入，并能抑制尿液流到相鄰反應(yīng)區(qū),第四層選取尿液不浸潤的塑料片為支持體,干化學(xué)檢測原理,不同型號尿干化學(xué)分析儀使用配套的專用試帶 各試劑模塊與尿中被測成分的反應(yīng)呈現(xiàn)不同的顏色變化，顏色的深淺與尿中相應(yīng)物質(zhì)呈正比 空白塊，固定塊作用,檢測

5、參數(shù),8項:PH、PRO、GLU、KET、BIL 、URO、ERY、NIT 9項：增加WBC 10項：SG 11項：Vit C,腎病四聯(lián)試帶：PH、PRO、ERY、SG 糖尿病五聯(lián)試帶：PH 、PRO 、GLU、KET 、SG 肝病二聯(lián)試帶： BIL、URO,尿白細胞,測定原理,模塊成分 吲哚酚酯 重氮鹽 粒細胞胞含有酯酶，先與試紙帶吲哚酚酯反應(yīng)作用生成吲哚酚，再與重氮鹽氧化縮合生成紫色縮合物 其顏色深淺與細胞多少呈比例關(guān)系,注意事項,本法主要檢測粒細胞酯酶，不與淋巴細胞反應(yīng) 尿中含福爾馬林、呋喃坦啶、大量膽紅素可致假陽性 高比重尿、高蛋白（5g/L)、VC、尿中含頭孢霉素、慶大霉素、四環(huán)素以

6、及硼酸、草酸可致假陰性,注意事項,尿液標本應(yīng)新鮮，尿液在膀胱時間過長，或標本存儲時間過長，引起白細胞破壞，導(dǎo)致干化學(xué)陽性，鏡檢陰性的假陽性出現(xiàn) 綜合酯酶、亞硝酸鹽、鏡檢、結(jié)合臨床分析結(jié)果 白細胞和紅細胞10/l、亞硝酸鹽和蛋白陰性，可以使用干化學(xué)過篩而不進行鏡檢,鏡檢標準 腎科及泌尿系病人 以鏡檢作為診斷或療效依據(jù)的，如結(jié)石、結(jié)晶、腫瘤 尿液外觀異常時 依據(jù)醫(yī)師指定要求做沉渣鏡檢的標本。,注意事項,只要完全符合以下條件的可不進行顯微鏡檢查。 白細胞結(jié)果為陰性 亞硝酸鹽為陰性尿 蛋白為陰性 尿紅細胞檢查10/l 排除藥物及其它因素的干擾,尿中白細胞試帶法與鏡檢結(jié)果比較,臨床意義,白細胞增多主要見

7、于泌尿系炎癥 腎盂腎炎、膀胱炎、尿道炎、前列腺炎，腎小球腎炎 中性粒細胞見于急性炎癥 淋巴細胞、單核細胞見于腎移植、慢性炎癥、新月形腎小球腎炎、抗癌藥物引起的間質(zhì)性腎炎 嗜酸性細胞見于過敏性炎,癥、變態(tài)反應(yīng)引起的泌尿系炎癥 急性腎小管壞死，可見單核細胞減少或消失 女性生殖系統(tǒng)炎癥分泌物污染,Vit C,概述,人、靈長類和豚鼠不能合成 VC的閾值14mg/L 通過消化道需能吸收 通過尿液排出，其重吸收機制和葡萄糖基本一致 攝入45mg/L,血液中6mg/L,模式 左旋抗壞血酸 左旋脫氫抗壞血酸 測定方法 同時測定：二硝基苯肼比色法和高效液相色譜法 測定左旋抗壞血酸：干化學(xué)法和二氯靛酚藍,檢測原理

8、,模塊組成：2,6-二氯靛酚鈉、中性紅、亞甲基綠磷酸二氫鈉、磷酸氫二鈉 VC含有1，2-烯二醇，在酸性條件使氧化態(tài)粉紅色2,6-二氯靛酚還原為無色的2，6-二氯二對酚胺,注意事項,在堿性環(huán)境中不穩(wěn)定，標本要新鮮，及時測定，防止被細菌破壞 只對左旋抗壞血酸反應(yīng) PH4.0時，內(nèi)源性酚和巰基化合物如半胱氨酸、硫代硫酸鈉使結(jié)果偏高,著重反映飲食VC含量，反映體內(nèi)VC營養(yǎng)狀況，VC低見于攝入不足或抗壞血酸病，長期增高與結(jié)石形成有關(guān) 維生素C含量的高低對血紅蛋白、葡萄糖、膽紅素、尿膽原、亞硝酸鹽及白細胞產(chǎn)生負干擾 尤其注意酮體陽性，葡萄糖陰性或葡萄糖干化學(xué)和班氏結(jié)果不一致時,半胱氨酸,比色法測定VC,使

9、用活性碳將抗壞血酸氧化成氧化型，與2，4-二硝基苯肼結(jié)合成紅色脎，脎溶解于硫酸，比色,尿干化學(xué)檢測的原理,方法比較-尿干化學(xué)法,優(yōu)點：標本用量少；速度快；項目多；重復(fù)性好、準確性高；適用大批量標本篩查 缺點 不能替代對病理性標本的顯微鏡檢查，對白細胞、管型和結(jié)晶的檢查屬于間接檢查 很難判斷紅細胞形態(tài)特征,測定蛋白以白蛋白為主，故不適于腎病患者 易受藥物、外源性物質(zhì)或人為因素影響，出現(xiàn)假陽性或假陰性 亞硝酸鹽只能檢查出有硝酸鹽還原酶的細菌 多聯(lián)試帶保存和使用要求高,篩查的目的,檢出異常標本和排除健康標本， 特別是避免假陰性。 對假陽性可通過鏡檢進一步排除,質(zhì)量控制,標本必須新鮮，最好2小時內(nèi)完成

10、，過久影響結(jié)果 避免混入陰道分泌物混入尿標本，否則，引起白細胞假陽性 了解病人飲食及用藥情況,試劑帶要求,一定要在失效期內(nèi) 避光、防潮、干燥保存 使用時一次只取出所需要的試劑帶，并立即蓋緊，多余試劑帶不可放回容器內(nèi) 打開蓋子后不能再放冰箱,不可合并各瓶中的試劑帶。 不可觸摸試劑帶上各反應(yīng)檢測塊。,質(zhì)量控制,操作嚴格、規(guī)范、正確 2種濃度質(zhì)控液,臨床應(yīng)用,全自動尿沉渣分析儀,種類,流式細胞術(shù)尿沉渣分析儀,流式細胞術(shù)尿沉渣分析儀 流式細胞計數(shù)儀原理和電阻抗相結(jié)合 影像式尿沉渣分析系統(tǒng) 流式細胞分析技術(shù)和粒子成像分析技術(shù),影像式尿沉渣分析儀,流式細胞術(shù)尿沉渣分析儀,光學(xué)檢測系統(tǒng) 液壓系統(tǒng) 電阻抗檢測

11、系統(tǒng) 電子系統(tǒng),參數(shù),熒光強度（FI):反映細胞染色質(zhì)強度 前向熒光脈沖寬度（FLW）：主要反映染色質(zhì)長度 前向散射光強度（Fsc）：成比例反映細胞大小 前向散射光脈沖寬度（Fscw):反映細胞長度,定量參數(shù) WBC/l、RBC/ l 、EC/ l 、CAST/ l 、 BACT/ l 、conductivity 標記參數(shù) Path CAST、SRC、YLC、XTAL、SPERM等 紅細胞、白細胞 isomorphic RBC、dysmorphic RBC、Non-Lysed RBC#,%、RBC-MFI、 RBC-MFsc、 RBC-FI-DWSD、WBC-MFsc) FI-Fsc、Fscw

12、-Flw散點圖,紅細胞：FI極低,Fsc大小不均 白細胞：FI大, Fsc較紅細胞大 細菌：FSC比白細胞和紅細胞小,FI比紅細胞大,比白細胞小 上皮細胞：均有細胞核,主要分布在Fscw-Flw散點圖左上角 管型：透明管型有極高的Fscw 和低的FLW;病理性管型含有其他內(nèi)容物，有較高的Fscw和較高的FLW,FSCW,FSC,酵母細胞和精子：較高的FI，F(xiàn)sc在紅細胞和白細胞之間;酵母的FSCW較精子的小,將其區(qū)分開來 結(jié)晶出現(xiàn)在紅細胞區(qū)域,草酸鹽更靠近FSC,尿酸鹽和紅細胞分不清,FSCW,FSC,紅細胞,80%的紅細胞Fsc84ch,稱為非均一性血尿 80%的紅細胞Fsc126ch,稱為

13、均一性血尿 介于兩者之間，混合性血尿 結(jié)晶、真菌、結(jié)晶增多影響結(jié)果 血尿伴菌尿，尿滲量700mOsm/L,PH 7.0或放置時間過長，導(dǎo)致改變,白細胞,存活的白細胞，F(xiàn)sc較強而FI弱 死亡白細胞， Fsc較弱而FI強 白細胞前向散射光（FSC)強,前向熒光（FI）弱，急性感染；否則FSC弱，F(xiàn)I強慢性感染。 利用WBC-MFsc來判別白細胞狀態(tài)，結(jié)合白細胞定量判斷急性還是慢性感染:,當其WBC-MFsc73.3時,可初步診斷為急性尿路感染;當其WBC-MFsc 38.1時,可初步診斷為慢性尿路感染,并可指導(dǎo)臨床用藥 影響：上皮細胞、真菌、滴蟲、脂肪滴等，使白細胞增加,臨床應(yīng)用,方法學(xué)評價,不需離心尿樣，自動進樣 所需標本量少 工作效率高，50100/h，并報告多個參數(shù)，且可定量 采集信息量大，標本9l,相當于50個高倍鏡視野，粒子總數(shù)04000，明顯高于手工鏡檢,有形成分不能確認，需離心顯微鏡區(qū)分 應(yīng)用時間短，經(jīng)驗不足，