1、05年分生一名詞解釋：1 SiRNA: 利用雙鏈小片段RNA高效、特異性降解細(xì)胞內(nèi)同源mRNA，從而阻斷體內(nèi)靶基因表達(dá)，使細(xì)胞出現(xiàn)靶基因缺失的表型。2 Blue/white screen: 藍(lán)白斑篩選。即-半乳糖苷酶基因失活篩選。其原理是：某些質(zhì)粒載體帶有大腸桿菌乳糖操縱子的lacZ基因，該基因含一段編碼-半乳糖苷酶氨基末端145個(gè)氨基酸肽的DNA片斷，IPTG可誘導(dǎo)此片斷合成，此片斷能與宿主細(xì)胞所編碼的缺陷型-半乳糖苷酶實(shí)現(xiàn)基因內(nèi)互補(bǔ)，形成完整的半乳糖苷酶。該酶能催化指使劑底物Xgal形成藍(lán)色菌落。當(dāng)外源基因插入lacZ基因中MCS(多克隆位點(diǎn))，lac肽基因閱讀框架被破壞，細(xì)菌內(nèi)將無(wú)半乳糖

2、苷酶活性，結(jié)果重組克隆呈白色菌落。3 Knock down: （基因）敲除。是指對(duì)一個(gè)結(jié)構(gòu)已知但功能未知的基因，從分子水平上設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，將基因去除，或用其它順序相近基因取代，然后從整體觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，推測(cè)相應(yīng)基因的功能?；蚯贸梢越K止某一基因的表達(dá)外，還包括引入新基因及引入定點(diǎn)突變，既可以是用突變基因或其它基因敲除相應(yīng)的正?；颍部梢杂谜；蚯贸鄳?yīng)的突變基因。4 G-protein : G蛋白。是三聚體GTP結(jié)合調(diào)節(jié)蛋白的簡(jiǎn)稱，位于質(zhì)膜內(nèi)胞漿的一側(cè)，由，三個(gè)亞基組成，二聚體通過(guò)共價(jià)結(jié)合錨定于膜上起穩(wěn)定亞基的作用，而亞基本身具有GTP酶活性。G蛋白在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過(guò)程中起著分子開(kāi)關(guān)的作用，當(dāng)G蛋

3、白亞基與GDP結(jié)合，處于關(guān)閉態(tài)；當(dāng)胞外配體與受體結(jié)合形成復(fù)合物時(shí)，導(dǎo)致受體胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域與亞基偶連，并促使亞基結(jié)合的GDP被GTP交換而被活化，即處于開(kāi)啟狀態(tài)，從而傳遞信號(hào)。5 DNA-chip: DNA芯片。指通過(guò)微陣列技術(shù)將高密度DNA片斷陣列通過(guò)高速機(jī)器人或原位合成方式以一定的順序或排列方式使其附著在如玻璃片等固相表面作為探針，熒光標(biāo)記的樣品DNA/RNA借助堿基互補(bǔ)作用與探針進(jìn)行雜交，從而進(jìn)行大量的基因表達(dá)及檢測(cè)等方面的研究。6 Off-target effect: 脫靶效應(yīng)。指的是與一個(gè)內(nèi)源性基因某一位點(diǎn)并不完全同源的RNA亦能通過(guò)抑制翻譯而導(dǎo)致基因表達(dá)的靜默。7 Super gene

4、family: 超基因家族。指一個(gè)共同的祖先基因通過(guò)各種各樣的變異，產(chǎn)生了結(jié)構(gòu)大致相同但功能卻不盡相似的一大批基因，這一大批基因分屬于不同的基因家族，但可以總稱為一個(gè)超基因家族。8 Environment genetic project : 環(huán)境基因工程，指專門鑒定體積暴露在特定環(huán)境下的那些顯示易感或抗性基因的DNA多態(tài)性。9 Tumor vaccine: 腫瘤疫苗。腫瘤疫苗的本質(zhì)是將某一抗原組份作用于生物體，從而激發(fā)該機(jī)體對(duì)該抗原或抗原載體的免疫保護(hù)，這種抗原形式或抗原的載體形式即是疫苗。腫瘤疫苗的形式有細(xì)胞性疫苗和可溶性抗原疫苗兩大類。細(xì)胞疫苗是將腫瘤細(xì)胞進(jìn)行某些處理滅活后直接作用于機(jī)體。

5、可溶性抗原或多肽疫苗則是在體外通過(guò)基因工程的方法制備出已知某腫瘤的抗原成分，與不同的佐劑聯(lián)合應(yīng)用達(dá)到免疫激發(fā)的目的。二 問(wèn)答題：1 請(qǐng)從“一條基因一條蛋白”到“一條蛋白一條基因”說(shuō)說(shuō)你對(duì)基因概念的變化的理解。2 基因診斷的優(yōu)缺點(diǎn)及發(fā)展前景。3 逆轉(zhuǎn)錄酶在RNA病毒感染宿主及自身復(fù)制中的意義。4 PCR與細(xì)胞內(nèi)DNA復(fù)制的異同點(diǎn)。（不少于5點(diǎn)）5 試從腫瘤多基因，多機(jī)制說(shuō)明腫瘤的基因篩選。答 1. 基因概念演變過(guò)程如下：基因一次是1909年丹麥生物學(xué)家W.Johannsen首先使用，以代替在此之前所用的“遺傳因子”這個(gè)術(shù)語(yǔ)。在開(kāi)始使用“基因”一詞時(shí)，基因是遺傳性狀的符號(hào)，并未設(shè)計(jì)到基因的物質(zhì)概念

6、。 1926年Morgan發(fā)表了“基因論”，指出基因?qū)嵲谔囟ㄈ旧w上，而且是呈直線排列在染色體上的遺傳顆粒，位于同源染色體的同一位置的相對(duì)基因叫做等位基因；基因是世代相傳的，基因決定了遺傳性狀的表達(dá)。 20世紀(jì)40年代，Bendle和Tatum用X射線照射鏈孢霉菌使其產(chǎn)生不同的突變體，發(fā)現(xiàn)突變可以影響代謝反應(yīng)，故認(rèn)為突變可致催化代謝的酶發(fā)生缺陷，因而提出了“一個(gè)基因，一個(gè)酶”的學(xué)說(shuō)。 20世紀(jì)50年代初，Benzer在研究T4噬菌體的一群緊密連鎖的突變?nèi)簳r(shí)發(fā)現(xiàn)了順?lè)葱?yīng)，從而提出了“順?lè)醋印备拍睢Ｒ粋€(gè)順?lè)醋蛹词且粋€(gè)基因。但后來(lái)“順?lè)醋印倍嘤糜谥窻NA分子中對(duì)應(yīng)于一個(gè)結(jié)構(gòu)基因的序列，現(xiàn)代分子生物

7、學(xué)中所稱單順?lè)醋覴NA和多順?lè)醋覴NA,即是由此而來(lái)。 20世紀(jì)60年代，遺傳密碼的破譯使人們對(duì)基因表達(dá)的機(jī)制有了更多的了解，認(rèn)識(shí)到基因是基因組中的一個(gè)區(qū)域（一段DNA序列），其轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是編碼一條多肽鏈的RNA分子或者是一個(gè)有獨(dú)力功能的RNA分子（tRNA或rRNA）。 20世紀(jì)90年代以來(lái)，對(duì)基因的結(jié)構(gòu)與功能的研究不斷深入，許多基因的核苷酸序列被測(cè)定，對(duì)基因的認(rèn)識(shí)更加豐富，逐漸形成了基因的現(xiàn)代概念?；虻默F(xiàn)代分子生物學(xué)概念是：基因是核酸分子中貯存遺傳信息的遺傳單位，是RNA和蛋白質(zhì)相關(guān)遺傳信息的基本存在形式，是指貯存RNA序列信息和有功能蛋白質(zhì)多肽鏈序列信息、以及表達(dá)這些信息所必需的全部核苷

8、酸序列。大部分生物中構(gòu)成基因的核苷酸物質(zhì)是DNA，少數(shù)生物（如RNA病毒）中是RNA.題中“一條基因一條蛋白”反應(yīng)的是20世紀(jì)40年代“一個(gè)基因，一個(gè)酶”的學(xué)說(shuō)，而“一條蛋白一條基因”反應(yīng)的是基因的現(xiàn)代概念。兩種學(xué)說(shuō)都是正確的，體現(xiàn)了對(duì)基因概念的理解的不斷深化。 基因診斷是指采用分子生物學(xué)的技術(shù)方法來(lái)分析受檢者的某一特定基因的結(jié)構(gòu)（DNA水平）或功能（RNA水平）是否異常，以此來(lái)對(duì)相應(yīng)的疾病進(jìn)行診斷?；蛟\ 斷有時(shí)也稱為分子診斷或DNA診斷(DNA diagnosis)。 與傳統(tǒng)的方法相比，基因診斷具有下列優(yōu)點(diǎn)：（1）應(yīng)用范圍廣。（2）簡(jiǎn)便、快速、經(jīng)濟(jì)。（3）特異性強(qiáng)，敏感性高，且便于定量操作

9、。（4）可預(yù)先診斷。2 基因診斷的應(yīng)用：輔助遺傳病的臨床診斷遺傳病患病風(fēng)險(xiǎn)分析，如出生缺陷的產(chǎn)前診斷，植入前遺傳診斷，遺傳篩選等。其他疾病易感性預(yù)測(cè)性診斷，如腫瘤或其他家族性疾病（糖尿病、高血壓、肥胖和AD等多基因病）的易感性預(yù)測(cè)。療效評(píng)價(jià)及用藥指導(dǎo)，例如評(píng)價(jià)臨床治療急性淋巴細(xì)胞性白血病。法醫(yī)學(xué)個(gè)體認(rèn)定病原體診斷，包括病毒、細(xì)菌、真菌、支原體、衣原體、立克次體、螺旋體以及寄生蟲等的診斷。3 逆轉(zhuǎn)錄酶的三種反應(yīng)活性RNA指導(dǎo)的DNA合成RNA水解DNA指導(dǎo)的DNA合成逆轉(zhuǎn)錄酶的意義：（1）用于合成cDNA，建立cDNA文庫(kù)；（2）獲得基因或探針；（3）用于RT-PCR。4.原理相同，都是利用堿基

10、配對(duì)互補(bǔ)的原則而且復(fù)制的時(shí)候都是半保留復(fù)制，都需要引物，底物都是dNTP。不同點(diǎn)：所處的反應(yīng)環(huán)境不同，復(fù)制方式不同，所需酶原料不同，復(fù)制起始點(diǎn)不同，聚合酶不同，終止方式不同1。一個(gè)體內(nèi)一個(gè)體外2。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）不會(huì)產(chǎn)生岡崎片斷 3。一個(gè)細(xì)胞只在有絲和減數(shù)分裂的時(shí)候進(jìn)行DNA復(fù)制而PCR可以反復(fù)進(jìn)行 4。細(xì)胞中的DNA復(fù)制受到許多復(fù)雜的因子的調(diào)控 5。兩者進(jìn)行的溫度不同。6。PCR產(chǎn)物短小，DNA復(fù)制不精確; 體內(nèi)DNA復(fù)制是整體染色體的復(fù)制5. 試從腫瘤多基因，多機(jī)制說(shuō)明腫瘤的基因篩選。07級(jí)醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)考試醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)考試題型：名詞解釋6個(gè)（每個(gè)5分，30分），問(wèn)答7個(gè)（每個(gè)1

11、0分，70分）。75分及格。一名詞解釋：基因，遺傳圖，基因表達(dá)，基因工程，熒光原位雜交，PCR-SSCP,1 基因：是指攜帶有遺傳信息的DNA或RNA序列，也稱為遺傳因子。是控制性狀的基本遺傳單位?；蛲ㄟ^(guò)指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成來(lái)表達(dá)自己所攜帶的遺傳信息，從而控制生物個(gè)體的性狀表現(xiàn)。 2 遺傳圖：以具有遺傳多態(tài)性的遺傳標(biāo)記為路標(biāo)，遺傳學(xué)距離為圖距建立給予遺傳學(xué)功能的圖譜3 基因表達(dá)：是指基因轉(zhuǎn)錄及翻譯的過(guò)程4 基因工程（gene engineering ）：又稱為重組DNA技術(shù)，是指將外源基因通過(guò)體外重組后導(dǎo)入受體細(xì)胞，并使其能在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)。5 熒光原位雜交（fluorescence

12、 in-situ hybridization,FISH）：是一種利用非放射性的熒光信號(hào)對(duì)原位雜交樣本進(jìn)行檢測(cè)的技術(shù)。6 單鏈構(gòu)型多態(tài)性分析法（PCR-SSCP）：將PCR產(chǎn)物雙鏈DNA（dsDNA）變性為單鏈DNA（ssDNA），加樣于變性聚丙烯酰胺凝膠進(jìn)行電泳，由于DNA分子在凝膠中的電泳遷移率與其分子量和空間結(jié)構(gòu)有關(guān)，而空間結(jié)構(gòu)又與ssDNA序列有關(guān)。因此，電泳結(jié)束后，ssDNA帶位置的差異即可反映出PCR產(chǎn)物序列的差異，從而對(duì)DNA中的單個(gè)堿基的替代、微小缺失或插入進(jìn)行檢測(cè)。二問(wèn)答題：HBV復(fù)制？答1、是目前已知的感染人類的最小的嗜肝雙鏈DNA病毒。2、結(jié)構(gòu)特別精密濃縮：（1）環(huán)狀的部分

13、雙螺旋結(jié)構(gòu)，長(zhǎng)約3.2kb。2/3為雙螺旋結(jié)構(gòu)，1/3為單鏈，兩條鏈不等長(zhǎng)。（2）長(zhǎng)鏈為負(fù)鏈，短鏈為正鏈。a、長(zhǎng)鏈：5端與3端與一種蛋白質(zhì)共價(jià)相連。b、短鏈：約為長(zhǎng)鏈2/3。短鏈間的空隙可由DNA聚合酶充填。（3）基因重疊使病毒在很小的基因組中容納大量的遺傳信息。a.重疊的基因序列較多，有4個(gè)開(kāi)放讀碼框（ORF），分別編碼病毒的核殼（C）、包膜（S）蛋白、病毒復(fù)制酶、與病毒基因表達(dá)有關(guān)的蛋白質(zhì)。b、調(diào)節(jié)序列位于基因內(nèi)部：是節(jié)約使用遺傳物質(zhì)的一種方式。啟動(dòng)子存在于編碼蛋白質(zhì)序列內(nèi)；增強(qiáng)子位于聚合酶基因中；polyA附加信號(hào)位于ORFC中；GRE位于ORFS和聚合酶基因中。3、逆轉(zhuǎn)錄復(fù)制。遺傳信息

14、的傳遞過(guò)程？答central dogma：中心法則：遺傳信息從DNA傳遞給RNA，再?gòu)腞NA傳遞給蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)錄和翻譯過(guò)程，以及遺傳信息從DNA傳遞給DNA的復(fù)制過(guò)程對(duì)癌基因，原癌基因和抑癌基因的認(rèn)識(shí)？答 癌基因：在人體正常細(xì)胞中存在，調(diào)控細(xì)胞生長(zhǎng)和分化的原癌基因被致癌因素激活，發(fā)生數(shù)量上或結(jié)構(gòu)上的變化轉(zhuǎn)化為癌基因，可致細(xì)胞癌變。抑癌基因：正常細(xì)胞中對(duì)細(xì)胞的增殖分化有調(diào)節(jié)作用，對(duì)細(xì)胞的異常生長(zhǎng)和惡性轉(zhuǎn)化具有抑制作用的基因。限制性內(nèi)切酶在分子克隆中的作用，并舉例說(shuō)明？載體的認(rèn)識(shí)？答 載體（vector）：指能攜帶外源DNA片段導(dǎo)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增或表達(dá)的工具。本質(zhì)為DNA。制備的目的基因或外源性D

15、NA片段必須與合適的載體連接形成重組體，才能進(jìn)入受體細(xì)胞并進(jìn)行復(fù)制和表達(dá)。包括克隆載體和表達(dá)載體。特征：能自我復(fù)制并具較高的拷貝數(shù)，分子量一般10Kb；帶有遺傳篩選標(biāo)記；有適當(dāng)?shù)南拗泼盖形稽c(diǎn)，便于外源基因的插入和篩選。結(jié)合你的專業(yè)，談?wù)剬?duì)基因診斷的認(rèn)識(shí)？答 基因診斷：利用分子生物學(xué)和分子遺傳學(xué)技術(shù)，從DNA/RNA水平檢測(cè)和分析基因的存在和結(jié)構(gòu)、變異及表達(dá)狀態(tài)，從而對(duì)疾病作出診斷的方法對(duì)疾病或與致病相關(guān)的基因（DNA）的表達(dá)產(chǎn)物（mRNA、蛋白質(zhì)）的確定和序列測(cè)定，實(shí)現(xiàn)疾病的早期診斷。特點(diǎn):特異度高?？蓹z測(cè)DNA片段的缺失、插入、重排，甚至單個(gè)堿基的突變。靈敏度高。待測(cè)標(biāo)本只需微量,目的基因只

16、需pg水平。穩(wěn)定性高。基因的組成是核酸，比蛋白質(zhì)穩(wěn)定得多，且被測(cè)基因不需為活性狀態(tài)。診斷范圍廣,適用性強(qiáng)。能對(duì)某些疾病作出確切診斷,確定與疾病的關(guān)聯(lián)狀態(tài)。臨床應(yīng)用前景好。途徑：1、基因突變的檢測(cè)：a、限制性核酸內(nèi)切酶酶譜分析。b、分子雜交：定義。利用探針與靶DNA雜交，可識(shí)別靶DNA中的特異核苷酸序列。c、DNA芯片技術(shù)；d、DNA測(cè)序技術(shù)2、基因連鎖分析：限制酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性連鎖分析（RFLP）：DNA序列的多態(tài)性如果發(fā)生在限制性內(nèi)切酶的識(shí)別位點(diǎn)上，就會(huì)造成酶切位點(diǎn)的缺失或新位點(diǎn)的出現(xiàn)，酶切后DNA片段長(zhǎng)度發(fā)生變化。若某一致病基因與特異的多態(tài)性片段緊密連鎖，就可用這一多態(tài)性片段作為“遺傳標(biāo)記

17、”來(lái)判斷基因組中是否攜帶致病基因。3、mRNA檢測(cè)：可利用反轉(zhuǎn)錄PCR擴(kuò)增mRNA來(lái)研究基因轉(zhuǎn)錄。先進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，然后進(jìn)行常規(guī)PCR。原核生物和真核生物基因組的不同點(diǎn)？答1、原核生物為裸露的環(huán)形DNA；真核生物細(xì)胞核中含線性DNA，線粒體也含少量環(huán)狀DNA。2、原核基因組只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)；真核基因組遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于原核基因組，結(jié)構(gòu)復(fù)雜，具有多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)。3、原核基因組中大部分用來(lái)編碼蛋白質(zhì)；真核基因組中不編碼區(qū)域占90以上。 4、前者一般不含內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄和翻譯偶聯(lián)連續(xù)進(jìn)行；真核生物基因不連續(xù)，含內(nèi)含子，轉(zhuǎn)錄后要剪接、翻譯。5、原核基因組中重復(fù)序列不多；真核基因組存在大量重復(fù)序列。6、原核基因組形成多順?lè)?/p>

18、子結(jié)構(gòu)；真核基因由一個(gè)結(jié)構(gòu)基因與相關(guān)的調(diào)控區(qū)組成，轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為單順?lè)醋印?7、原核生物有基因重疊，即同一段DNA片段能夠編碼23種蛋白質(zhì)分子。10、真核基因組有自私基因。8、原核基因組具有操縱子結(jié)構(gòu)；真核基因組中功能相關(guān)的基因構(gòu)成基因家族。9、原核生物基本上是單倍體，真核基因組是二倍體。09年分子生物學(xué)名詞解釋：JunkDNA、基因工程、FISH、ct、laboratory on chip、堿裂解法、酚抽提法、lentivirus vector1 Junk DNA：處于DNA尾部的重復(fù)序列是不編碼蛋白質(zhì)的“垃圾DNA”。2 基因工程（gene engineering ）：又稱為重組DNA技術(shù)，是指將外源基因通過(guò)體外重組后導(dǎo)入受體細(xì)胞，并使其能在受體細(xì)胞內(nèi)復(fù)制和表達(dá)的技術(shù)。3 縮微芯片實(shí)驗(yàn)室（laboratory on a chip），是通過(guò)采用類似集成電路制作過(guò)程中半導(dǎo)體光刻加工的縮微技術(shù)，把樣品制備、生化反應(yīng)和檢測(cè)分析等復(fù)雜、不連續(xù)的過(guò)程全部集成到芯片上，使其連續(xù)化和微型化，構(gòu)建成所謂的縮微實(shí)驗(yàn)室(microlab)。4 熒光原位雜交（fluorescence in-situ hybridization,FISH）：是一種利用非放射性的熒