1、1,實驗三,紅細胞壓積測定 網織紅細胞計數 紅細胞沉降率（血沉）的測定,2,一、紅細胞壓積測定,3,概念,一定量的抗凝全血，經規(guī)定速度和時間離心沉淀，沉下的紅細胞體積與全血體積之比，即為紅細胞壓積。,4,器材,紅細胞壓積管（溫氏管） 為平底厚壁玻璃管。管上刻有0-10cm刻度，其讀數一邊由下而上供測紅細胞壓積用；另一邊由上而下，供紅細胞沉降率測定用。,5,靜脈血采集方法,抽取病人靜脈血2ml，于EDTA二鉀抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K2ML）24小時室溫保存。,6,操作步驟,用細長毛細滴管吸取混均的抗凝血，插入溫氏管底部，然后將血液緩慢注入至刻度“10”處，注意防止氣泡產生。 用

2、水平離心機以3000r/min離心30min，讀取暗紅細胞層，再離心10分鐘。,7,判讀結果,可見血液被分離成五個層次，自上至下為： 淡黃色（血漿層） 乳白層（血小板層） 灰紅層（有核細胞層，含白細胞及有核紅細胞） 暗紅層（含二氧化碳血紅蛋白的紅細胞） 最底層為鮮紅層（含氧合血紅蛋白的紅細胞層）。 讀取紅細胞層的柱高的毫米數，乘以1，即為每升血液中紅細胞體積的升數。,8,正常參考范圍,男：0.400.50L/L（4050 vol %) 女：0.370.48L/L (3748vol %),9,臨床意義,脫水、燒傷、大手術后，通過測定壓積以決定是否靜脈輸液及輸液量。 血細胞比容增高： 見于各種原因

3、引起的血液濃縮；及各種原因所致的紅細胞絕對性增多，如真性紅細胞增多癥。 血細胞比容降低： 見于各種貧血，但必須結合紅細胞數和血紅蛋白量。,10,二、網織紅細胞計數,11,概念,網織紅細胞是未完全成熟的紅細胞。 紅細胞由骨髓進入外周血，需24-48h合成最后20的血紅蛋白，殘余的嗜堿性物質才能完全消失，成為成熟的紅細胞。將其分為五型：花冠型、絲球型、網型、破網型、點粒型。,12,靜脈血采血方法,抽取病人靜脈血2ml，于EDTA二鉀抗凝的真空采血管中（1.5mgEDTA-K2ML）24小時室溫保存。,13,細胞受色原理,網織紅細胞較成熟的紅細胞稍大，胞漿中殘存多少不等的嗜堿性物質，經煌焦油藍活體染

4、色呈淺藍或深藍色的網狀結構。,14,試劑,10g/L煌焦油藍等滲鹽水溶液： 煌焦油藍1g 枸櫞酸鈉0.4g 氯化鈉0.85g 蒸餾水加至100ml,15,操作步驟,于玻片的一端加10g/L煌焦油藍等滲鹽水溶液一滴，任其自然干燥備用。 取末梢血一滴于干燥染料上，用推片攪動混勻后，將兩玻片蓋合，待3min以上時間，才推制血片。 油鏡下，計數1000個紅細胞中的網織細胞數。,16,正常參考值,成人： 0.51.5 絕對值：24x 109/L84 x109/L 兒童： 36,17,18,臨床意義,網織紅細胞顯著增加:表示骨髓紅細胞生成旺盛， 常見于溶血性貧血（可高達70）。 其次急性失血性貧血，急性失

5、血后 5-10天達到高峰，2周后恢復正常。 營養(yǎng)性巨幼紅細胞性貧血和缺鐵性貧血可因缺乏造血物質，僅輕度增加（也可正?；驕p少）。 網織紅細胞數量持續(xù)上升，常提出慢性失血，如消化道潰瘍等。 網織紅細胞顯著降低，表示骨髓增生低下，見于再生障礙性貧血。,19,貧血治療效果觀察，如缺鐵性貧血和營養(yǎng)性巨幼紅細胞性貧血，經相應治療后1-2日開始增多，1周左右達到最高峰，因此觀察網織紅細胞數量的反應，是貧血療效的評價指標。 骨髓受白血病、腫瘤等浸潤時，血中網織紅細胞也可呈不規(guī)則的病理性輕度增多，此系病理刺激所至，它不反應造血旺盛。,臨床意義,20,三、紅細胞沉降率的測定,21,目的,了解紅細胞沉降率及掌握其測

6、定方法。 掌握血沉測定的正常值及臨床意義。,22,原理,將加有抗凝劑的血液置于一特制的具有刻度的玻管內，置于血沉架上，紅細胞因重力作用而逐漸下沉，上層留下一層黃色透明的血漿。 經一定時間，沉降的紅細胞上面的血漿柱的高度，既表示紅細胞的沉降率。,23,材料及用具,血沉管 血沉管架 肝素溶液 注射器等。,24,方法及步驟,取0.13mol/L枸櫞酸鈉0.4ml放入試管中； 抽取病人靜脈血1.6ml，注入枸櫞酸鈉液中充分混勻； 用魏氏血沉管吸血到0刻度，并直立于血沉架上1小時，觀察紅細胞下沉的毫米數，即為紅細胞沉降率。,25,注意事項,采血后實驗應在3小時內完畢，否則血液放置過久，會影響試驗結果的準確性。 沉降管應垂直豎立，不能有傾斜。 沉降率隨溫度升高而加快，故應在室溫22-27時進行。 在吸血之前，須將血液充分搖均（但不可過分震蕩以免紅細胞破壞）。 吸血時，要絕對避免產生氣泡。,26,方法及參考值,魏氏自然沉降法： 男性15mm /h 女性20mm /h,27,臨床意義,1.增快見于： (1)生理性：運動、月經期、妊娠3月以上直至分娩后3周、60歲以上高齡者及年幼小兒。,28,臨床意義,(2)病理性： 各種炎癥：急性細菌性炎癥后23天，血沉可增快；風濕熱活動期、結核活動期，血沉亦可增快。 組織損傷及壞死持續(xù)23周，心肌梗死發(fā)病1周左右血沉增快。 惡性腫瘤。 其他各種高球蛋白血癥