1、多發(fā)性骨髓瘤微小殘留病灶,內(nèi)容,多發(fā)性骨髓瘤患者為什么需要檢測MRD？ 評估和監(jiān)測MRD 使用MRD信息來改善骨髓瘤患者的結(jié)局,骨髓瘤患者的生存期持續(xù)改善,Kristinsson SY, et al. Leukemia. 2014;28:1346-1348.,Yrs After Diagnosis,Ages 0-50 Yrs,1973-19791980-19891990-19992000-2009,Cumulative Percent Survival,美國SEER NCI,新藥的使用，很多MM患者都能獲得很好的緩解,Mailankody S, et al. Nat Rev Clin Onco

2、l. 2015,May;12(5):286-295,2011 IMWG 治療緩解評價標(biāo)準(zhǔn),Raikumar SV,et al. Blood,2011(117), 4691-4695,2015年NCCN療效評估更新,NCCN Guidelines version 2.2015. Multiple Myeloma,持續(xù)獲得CR的患者，生存更優(yōu),基線FISH高危和流式細(xì)胞MRD陽性，是預(yù)測CR不能持續(xù)的2個獨立因素。,Cancer 2008;113:3559. Blood. 2012;119(3):687-691,達(dá)到sCR的患者，OS更優(yōu),Immunohistochemistry (sCR),Ka

3、poor P, et al. J Clin Oncol. 2013;31:4529-4535.,1.0,0.8,0.6,0.4,0.2,0,Yrs Since Transplantation,Probability of OS,sCR n=109 median OS: NR CR n=37 median OS: 81 months nCR n=91 median OS: 60months,The 5-year OS is 80%, 53%, and 47%, for patients achieving sCR, CR, and nCR, respectively (P0 .001).,診斷時

4、,PR (50% M蛋白降低),nCR (僅免疫固定電泳陽性),CR (免疫固定電泳陰性),1 x 1012,骨髓瘤細(xì)胞數(shù)目,1 x 108,MRD狀態(tài)是一個相對的評估,Cure,MRD-,非定量 ASO-PCR（骨髓）,定量ASO-PCR（骨髓） 高質(zhì)量的流式細(xì)胞技術(shù)（骨髓）深度測序（骨髓）,1 x 104,1 x 106,MRD+,0,Mailankody S, et al. Nat Rev Clin Oncol. 2015,May;12(5):286-295,10,MRC IX: HDT/ASCT后100天MRD狀態(tài)聯(lián)合細(xì)胞遺傳學(xué)因素對患者預(yù)后的影響,Rawstron A, et al.

5、J Clin Oncol.2013;31:2540-2547,無不良細(xì)胞遺傳學(xué)因素且MRD-的患者預(yù)后最好； 有不良細(xì)胞遺傳學(xué)因素且MRD持續(xù)陽性的患者預(yù)后最差。,Adverse: gain(1q), del(1p32),t(4;14), t(14;20), t(14;16), del(17p) Favorable profiles comprised the remainder and included hyperdiploidy, t(11;14), and t(6;14).,內(nèi)部資料，僅供醫(yī)學(xué)藥學(xué)專業(yè)人士參考，嚴(yán)禁翻印及傳播,MRD- MRD- (n = 63),MRD+ MRD- (n

6、 = 84),MRD+ MRD+ (n = 189),Transplant-eligible pts included in the GEM2000 31:2540-2547.,P .001,Progression (%),Mos From MRD Assessment,Median: 9 yrs,Median: 5 yrs,Median: 3 yrs, 6 yrs,MRD狀態(tài)可反應(yīng)MM患者化療敏感性,MRD- (n = 213),CR but MRD+ (n = 88),nCR/MRD+ (n = 54),PR (n = 131),Transplant-eligible pts includ

7、ed in the GEM2000 31:2540-2547.,HDT/ASCT后獲得CR的患者如MRD持續(xù)陽性則生存與獲得 nCR/PR的患者相似,Mos From MRD Assessment,內(nèi)容,多發(fā)性骨髓瘤患者為什么需要檢測MRD？ 評估和監(jiān)測MRD 使用MRD信息來改善骨髓瘤患者的結(jié)局,骨髓流式細(xì)胞技術(shù)檢測骨髓瘤MRD,惡性漿細(xì)胞：CD19-； a|CD38表達(dá)較弱；b|CD45-； c|CD56+; d|CD117+; e|CD27-; f|CD81-.,Mailankody S, et al. Nat Rev Clin Oncol. 2015;12(5):286-295,流式細(xì)

8、胞技術(shù)檢測MRD推薦的抗體,the European Myeloma Network and International Clinical Cytometry Society and European Society for Clinical Cell Analysis Myeloma MRD Consensus Committee 推薦采用這些被驗證過的抗體組合之一。 Key standard markers: CD38, CD19, CD56, CD45, and CD138 Additional markers to consider: CD27, CD81, CD117,Mailank

9、ody S, et al. Nat Rev Clin Oncol. 2015,May;12(5):286-295,測試樣本顯著影響流式細(xì)胞技術(shù)MRD判讀,4個版面顯示正常漿細(xì)胞（黑點）和惡性漿細(xì)胞（綠點），來自同一個患者的骨髓樣本。 a|84個惡性漿細(xì)胞，分析了3,000,000個細(xì)胞。 b|30個惡性漿細(xì)胞，分析了1,000,000個細(xì)胞。 c|14個惡性漿細(xì)胞，分析了500,000個細(xì)胞。 d| 僅6個惡性漿細(xì)胞，分析了100,000個細(xì)胞,Mailankody S, et al. Nat Rev Clin Oncol. 2015,May;12(5):286-295,MRD of bone

10、 marrow based on blind biopsies Limitation on any test performed Potential for false negatives,骨髓流式細(xì)胞技術(shù)檢測骨髓瘤MRD：美國30個主要中心的調(diào)查結(jié)果,MRD檢測方案各中心存在很大差異。,大部分中心在患者獲得CR的時候檢測MRD。,1. Flanders A, et al. Blood. 2013;122:1088-1089. 2. Rawstron AC, et al. Haematologica. 2008;93:431-438.,分子水平MRD檢測,ASO-PCR 高通量VDJ 測序 高

11、通量外顯子測序,高通量測序MRD結(jié)果預(yù)測CR患者的預(yù)后,定量；擴增、測序免疫球蛋白基因片段，采用IGH-VDJH，IGH-DJH和IGK通用引物。,高通量MRD狀態(tài)將CR患者群分為了2類，預(yù)后的差別非常大,Martinez-Lopez J, et al. Blood. 2014;123:3073-3079.,TTP (%),100,80,60,40,20,0,100,150,0,50,Mos,P = .0009,n = 26,n = 36,TTP (CR Pts),MRD-MRD+Threshold: 10-5,評估骨髓瘤MRD的檢測技術(shù),Mailankody S, et al. Nat Re

12、v Clin Oncol. 2015,May;12(5):286-295,內(nèi)容,多發(fā)性骨髓瘤患者為什么需要檢測MRD？ 評估和監(jiān)測MRD 使用MRD信息來改善骨髓瘤患者的結(jié)局,免疫學(xué)緩解能轉(zhuǎn)化為更優(yōu)的PFS-65歲，非移植患者,患者年齡65歲； 治療方案： VMP(6療程)-VP VTP(6療程)-VT 采用4色流式細(xì)胞技術(shù)檢測MRD,Paiva B et al; J Clin Oncol. 2011;29(12):1627-33.,免疫學(xué)緩解能轉(zhuǎn)化為更優(yōu)的PFS和OS-65歲，移植患者,4色流式細(xì)胞技術(shù)，于移植后100天檢測MRD。 獲得CR的患者，評估MFC狀態(tài)。,Paiva. Blood

13、. 2008;112:4017-4023,免疫學(xué)緩解能轉(zhuǎn)化為更優(yōu)的PFS，Not OS -65歲，移植患者,214例患者在移植后達(dá)到CR （MRC Myeloma IX） MRD檢測： 6色流式細(xì)胞技術(shù)； MRD-CR vs MRD+CR， PFS有顯著性差異（p=0.0068）,OS 沒有顯著性差異（p=0.0928）,Rawstron A, et al. J Clin Oncol. 2013;31(20):2540-7.,MRD每降低一個log，PFS和OS持續(xù)改善,圖A和圖B，所有移植后100天接受MRD評估患者； 圖C和圖D，所有移植后100天接受MRD評估且獲得CR的患者。,流式細(xì)胞

14、技術(shù)測定的MRD水平比0.01%的界值更有臨床意義，能夠獨立預(yù)測OS。 MRD每降低一個log，大約增加1年的生存期。,Rawstron. Blood. 2015;125(12):1932-1935,復(fù)發(fā)患者化療/ASCT挽救治療后達(dá)到CR，MRD陰性，TTP顯著延長,Paiva B, et al. haematol.2014.115162,4色流式細(xì)胞技術(shù)檢測MRD,復(fù)發(fā)患者，異基因移植挽救治療后達(dá)到CR，MRD狀態(tài)不影響TTP,異基因移植后，再次復(fù)發(fā)可能更多表現(xiàn)在髓外，影響了骨髓MRD檢測的價值。,4色流式細(xì)胞技術(shù)檢測MRD,Paiva B, et al. haematol.2014.11

15、5162,MM維持治療: 哪些患者需要維持治療 12:133-134.,Induction,HDT/ASCT,Maintenance,R,Maintenance,No Maintenance,MRD+,MRD-,Consolidation,Serial MRD monitoring,GEM2012MENOS65 (NCT01916252) 31(20):2540-7.,Subset (n = 99) of trial pts randomized to thalidomide maintenance therapy or placebo after ASCT,MRD 與PFS and OS相關(guān),Mailankody S, et al. Nat Rev Clin Oncol. 2015,May;12(5):286-295,MRD檢測結(jié)果&治療選擇-期待！,利用