1、動(dòng)脈血壓的神經(jīng)體液調(diào)節(jié)及藥物的影響 【目的】 通過(guò)觀察神經(jīng)、體液因素及藥物等對(duì)動(dòng)脈血壓的作用及影響，加深理解動(dòng)脈血壓作為心血管功能活動(dòng)的綜合指標(biāo)、及其相對(duì)恒定的調(diào)節(jié)原理和重要意義。學(xué)習(xí)大動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本方法和技術(shù)。 【實(shí)驗(yàn)原理】 動(dòng)脈血壓是心血管功能活動(dòng)的綜合指標(biāo)。正常心、血管的活動(dòng)在神經(jīng)、體液因素的調(diào)節(jié)控制下，保持相對(duì)穩(wěn)定，動(dòng)脈血壓相對(duì)恒定。因而通過(guò)改變神經(jīng)、體液因素或施加藥物，觀察動(dòng)脈血壓的變化，以間接反映諸因素對(duì)心、血管功能活動(dòng)的調(diào)節(jié)及影響。動(dòng)脈血壓的相對(duì)恒定對(duì)于保持各組織、器官正常的血液供應(yīng)和物質(zhì)代謝是極其重要的，動(dòng)脈血壓的劇烈變化會(huì)顯著影響各組織、器官的正?；顒?dòng)。當(dāng)動(dòng)脈血壓大大降低時(shí)，

2、會(huì)造成組織、器官的血供嚴(yán)重不足，功能障礙，甚至危及生命，此時(shí)需要及時(shí)救治。 心臟受交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)（迷走神經(jīng)）的雙重支配。交感神經(jīng)興奮通過(guò)其末梢釋放的去甲腎上腺素（norepinepherine，NE）與心肌細(xì)胞膜上的b1受體結(jié)合，引起心率加快、心肌收縮力增強(qiáng)，心輸出量增加，血壓升高。迷走神經(jīng)興奮通過(guò)其末梢釋放的乙酰膽堿（Acetylcholine，Ach）與心肌細(xì)胞膜上的M受體結(jié)合，引起心率減慢、心房肌收縮力減弱，心輸出量減少，血壓降低。 絕大多數(shù)血管受交感神經(jīng)支配。交感縮血管神經(jīng)興奮通過(guò)其末梢釋放的NE與血管平滑肌上的a受體結(jié)合，引起血管收縮，循環(huán)外周阻力增大，血壓升高。反之，交感縮血

3、管神經(jīng)的緊張性降低，血管舒張，循環(huán)外周阻力減小，血壓下降。 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)切斷、刺激支配心、血管的神經(jīng)以及給藥或體液因素等方法，除可直接觀察心率、心臟收縮力及縮血管效應(yīng)外，還可通過(guò)觀察動(dòng)脈血壓的變化間接了解心、血管活動(dòng)的變化情況。 【實(shí)驗(yàn)器材和藥品】 1動(dòng)物 家兔。 2器材 兔手術(shù)臺(tái)、捕綁固定用繩、哺乳類(lèi)動(dòng)物手術(shù)器械、紗布、搪瓷碗、盛毛筒、量筒、手術(shù)燈、動(dòng)脈插管、股動(dòng)脈插管、動(dòng)脈夾、血壓換能器、石蠟油、多道生理記錄儀或計(jì)算機(jī)記錄分析系統(tǒng)、心電圖記錄導(dǎo)線、雙凹夾、鐵支架、保護(hù)電極、電子刺激器、2ml注射器、5ml注射器、20ml注射器、有色絲線、棉線、20%氨基甲酸乙酯、肝素（1000單位/毫升）、

4、5%檸檬酸鈉、1：1萬(wàn)腎上腺素、1：1萬(wàn)去甲腎上腺素、生理鹽水、1%肝素生理鹽水、0.1%多巴胺、1：10萬(wàn)異丙腎上腺素、2.5%妥拉唑林、0.1%普萘洛爾。 【實(shí)驗(yàn)步驟和方法】 1實(shí)驗(yàn)裝置 計(jì)算機(jī)Biolap98軟件系統(tǒng)的使用：打開(kāi)計(jì)算機(jī)，顯示windows桌面。點(diǎn)擊圖標(biāo)“biolap98”，進(jìn)入BL-310智能型生物信號(hào)顯示與處理系統(tǒng)。點(diǎn)擊“可進(jìn)行生理、藥理、毒理、病理等實(shí)驗(yàn)”，進(jìn)入主畫(huà)面。點(diǎn)擊菜單“輸入信號(hào)”欄，選擇通道1及標(biāo)導(dǎo)聯(lián)顯示動(dòng)物心電，通道2顯示壓力曲線；點(diǎn)擊菜單“顯示方式”欄，選擇雙通道顯示方式。調(diào)節(jié)增益至100左右，時(shí)間常數(shù)為“DC”，濾波用“1kHz”。 如用多道生理記錄儀

5、，則打開(kāi)電源后，校正兩個(gè)通道的掃描電壓，并調(diào)節(jié)增益至適當(dāng)位置。打開(kāi)記錄儀，調(diào)節(jié)描筆的位置，校正描筆的擺動(dòng)幅度。 電子刺激器的準(zhǔn)備 打開(kāi)電源，選擇“連續(xù)”刺激方式，波寬為0.5ms，電壓為23V，頻率為16Hz。將刺激電極連接于刺激器。 檢查血壓換能器，用石蠟油將其充滿(mǎn)，將換能器三通管與動(dòng)脈插管的導(dǎo)管相連，將換能器導(dǎo)線與計(jì)算機(jī)或多道生理記錄儀相連。 2準(zhǔn)備動(dòng)物 秤重后，用20%氨基甲酸乙酯按每公斤體重1克的劑量從耳緣靜脈緩慢注入，動(dòng)物麻醉的標(biāo)志為四肢松軟，角膜反射消失。麻醉后用繩子將動(dòng)物背位固定于手術(shù)臺(tái)上，打開(kāi)手術(shù)臺(tái)底部的電燈保溫。剪去頸部手術(shù)野的毛以便施行手術(shù)。 3手術(shù) 沿頸部正中線切開(kāi)皮膚6

6、7厘米，用止血鉗沿正中線分離皮下組織及肌肉（胸舌骨?。┞冻鰵夤?。用兩把組織鉗分別夾住氣管兩側(cè)的皮膚和肌肉的邊緣，并將其拉向兩側(cè)，即可見(jiàn)到氣管兩側(cè)與氣管平行的左、右頸總動(dòng)脈及與其相伴而行的一束神經(jīng)，這束神經(jīng)中包括迷走神經(jīng)、交感神經(jīng)和減壓神經(jīng)。由于神經(jīng)被包繞于動(dòng)脈鞘中，所以應(yīng)小心分離頸動(dòng)脈鞘，仔細(xì)辨認(rèn)三條神經(jīng)。迷走神經(jīng)最粗，交感神經(jīng)較細(xì)，減壓神經(jīng)最細(xì)且常與交感神經(jīng)緊貼再一起。一般先分離頸總動(dòng)脈與迷走神經(jīng)，然后分離減壓神經(jīng)與交感神經(jīng)。每條神經(jīng)各分離出23厘米，并在各神經(jīng)下穿一條不同顏色的絲線以便區(qū)別和使用。右側(cè)頸總動(dòng)脈下穿一條線備用，左側(cè)頸總動(dòng)脈用于血壓測(cè)量，在其遠(yuǎn)心端（頭端）和近心端各穿一條線

7、備用。 4插動(dòng)脈插管 插管前先用肝素生理鹽水注滿(mǎn)插管，檢查插管有無(wú)破裂，插管尖端是否光滑，不光滑時(shí)要用砂紙磨搽。再次鈍性分離左頸總動(dòng)脈，盡可能長(zhǎng)的向頭端分離，然后結(jié)扎動(dòng)脈頭端。用動(dòng)脈夾（與動(dòng)脈垂直并處于水平位置）夾住動(dòng)脈的近心端，在盡可能長(zhǎng)的靠遠(yuǎn)心端處用眼科剪將動(dòng)脈剪開(kāi)一斜口，約剪開(kāi)管徑的一半，然后將動(dòng)脈插管向心臟方向插入動(dòng)脈，用已穿好的線結(jié)扎緊插入動(dòng)脈的插管，并將同一結(jié)扎線固定于插管壁。在插管的適當(dāng)位置固定插管并使其與動(dòng)脈的走向一致，以防止插管刺破動(dòng)脈。 向耳緣靜脈內(nèi)注射肝素以抗凝，每公斤體重1000單位。注射后一分鐘左右即可打開(kāi)、移去動(dòng)脈夾，此時(shí)即可見(jiàn)血液沖入動(dòng)脈插管，同時(shí)在顯示器上可見(jiàn)有

8、壓力波動(dòng)圖象，打開(kāi)記錄儀可記出壓力搏動(dòng)曲線。 5心室搏動(dòng)觀察裝置 將帶有小旗的針灸針于胸骨柄下緣左側(cè)垂直刺入，直至小旗隨心室搏動(dòng)而搖動(dòng)為止，表明針尖已刺入心室肌。 6心電引導(dǎo) 將心電引導(dǎo)線與針灸針相連接，然后將針灸針刺入動(dòng)物各肢體末端并固定，在顯示器上可觀察到心電圖象，作為心率、心律的觀察指標(biāo)。 【觀察項(xiàng)目】 1觀察描記正常血壓曲線 從正常血壓曲線上可見(jiàn)到三級(jí)波：一級(jí)波即心跳波，是由于心臟舒縮而引起的血壓波動(dòng)，與心率及其節(jié)律一致。二級(jí)波即呼吸波，是由于呼吸時(shí)肺的張縮而引起的血壓波動(dòng)，與呼吸周期及其節(jié)律一致。一般一個(gè)呼吸波中有35個(gè)心跳波。三級(jí)波，不很明顯，有時(shí)可清楚看到，其原因不完全清楚，可能

9、是由于血管運(yùn)動(dòng)中樞緊張性活動(dòng)的周期性變化所致。三級(jí)波歷時(shí)最長(zhǎng)，有數(shù)個(gè)呼吸波組成。 2觀察心率及心室收縮強(qiáng)度 從心電圖上可準(zhǔn)確觀察和記數(shù)心率。心室收縮強(qiáng)度可通過(guò)觀察針灸針上小旗的擺動(dòng)幅度進(jìn)行估計(jì)（可設(shè)一個(gè)數(shù)值為正常強(qiáng)度，實(shí)驗(yàn)時(shí)與其比較，給出大概的變化值）。 3用動(dòng)脈夾夾閉右頸總動(dòng)脈15秒鐘，同時(shí)觀察、記錄血壓及心率的變化。 4用保護(hù)電極、以適當(dāng)強(qiáng)度和頻率刺激右側(cè)減壓神經(jīng)，同時(shí)觀察、記錄血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。然后用兩條線在減壓神經(jīng)中部結(jié)扎，再于兩結(jié)扎間剪斷。用上述同樣電刺激分別刺激減壓神經(jīng)的中樞端和末梢端，同時(shí)觀察、記錄上述各指標(biāo)的變化。 5先在手術(shù)燈下觀察兩耳血管網(wǎng)的密度及血管擴(kuò)張程度

10、，再結(jié)扎右側(cè)交感神經(jīng)，并于結(jié)扎線的末梢端（近心端）剪斷，稍待片刻后再觀察兩耳血管網(wǎng)的密度及血管擴(kuò)張程度的變化。然后用上述電流刺激交感神經(jīng)頭側(cè)端，同時(shí)觀察右耳血管網(wǎng)的密度及血管擴(kuò)張程度的變化。 6用兩條線在右側(cè)迷走神經(jīng)中部結(jié)扎，并于兩結(jié)扎間剪斷，用上述電流分別刺激近心端和頭側(cè)端，觀察、記錄血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。 7從耳緣靜脈注入1：1萬(wàn)的腎上腺素0.3毫升，觀察、記錄血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。待完全恢復(fù)后，靜脈注射1：1萬(wàn)的去甲腎上腺素0.3毫升，并進(jìn)行同樣觀察。 8從耳緣靜脈注入0.1%多巴胺0.5ml/kg，觀察血壓變化。待血壓恢復(fù)正常后，再注入同樣劑量的多巴胺，隨即注入2.

11、5%妥拉唑林0.3ml/kg，觀察血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。 9從耳緣靜脈注入1：10萬(wàn)異丙腎上腺素0.5ml/kg，觀察血壓、心率及心室收縮強(qiáng)度的變化。待血壓等指標(biāo)恢復(fù)正常后，再注入同樣劑量的異丙腎上腺素，隨即注入0.1%普萘洛爾0.5ml/kg，并進(jìn)行同樣觀察。 10股動(dòng)脈插管和放血 在后肢腹股溝部切開(kāi)皮膚35厘米，用血管鉗分離皮下組織及筋膜，可看到股神經(jīng)、股靜脈和股動(dòng)脈，股動(dòng)脈的位置在中間偏后，恰被股神經(jīng)和股靜脈所遮蓋。小心分離出股動(dòng)脈約23厘米，穿線備用。用兩個(gè)動(dòng)脈夾分別夾閉末梢端和近心端，在兩個(gè)動(dòng)脈夾之間剪一斜口，向近心端方向插入股動(dòng)脈插管，并結(jié)扎固定；插管所連導(dǎo)管的末端置于量杯中，為防止血液凝固，可在量杯中加入少許5%檸檬酸鈉或肝素。待準(zhǔn)備就緒，松開(kāi)近心端動(dòng)脈夾（不要移去）開(kāi)始放血，同時(shí)密切觀察血壓變化，當(dāng)血壓降至原水平的50%上下或出現(xiàn)休克