1、.,1,生化檢驗質(zhì)控方法之大全,.,質(zhì)量控制（quality control，QC）是利用現(xiàn)代科學(xué)管理的方法和技術(shù)檢測分析過程中的誤差，控制與分析有關(guān)的各個環(huán)節(jié)，確保實驗結(jié)果的準確可靠。也稱為實驗室質(zhì)量保證。,定義：,.,3,1947年Sundeman首先調(diào)查發(fā)現(xiàn)不同實驗室對同一份標本的實驗結(jié)果有驚人的誤差。 1950年Levey和Jennings就將工業(yè)質(zhì)控圖移植臨床生化實 驗室，此后，質(zhì)控圖和數(shù)理統(tǒng)計一直成為臨床生化檢驗質(zhì)量控制（QC）的重要手段。 1953年世界上出現(xiàn)了商品性的控制血清。 1954年發(fā)展到國與國之間的質(zhì)量調(diào)查。 1960年代初已發(fā)展為全面質(zhì)量控制。 1974年在日本召開了

2、第一次臨床生化檢驗質(zhì)量控制國際 專題討論會。 隨后WHO和國際臨床生化學(xué)會都設(shè)有質(zhì)控領(lǐng)導(dǎo)機構(gòu)，向各國提供標準品和控制物，領(lǐng)導(dǎo)和管理國際性的質(zhì)量控制工作。,專業(yè)發(fā)展,.,4,主要內(nèi)容 第一節(jié) 全過程質(zhì)量控制 第二節(jié) 室內(nèi)質(zhì)量控制 第三節(jié) 室間質(zhì)量評價 第四節(jié) 實驗室認可 第五節(jié) 試劑盒的選擇和評價,.,5,第一節(jié) 全過程質(zhì)量控制,全面質(zhì)量控制的內(nèi)容 分析前質(zhì)量控制 分析中質(zhì)量控制 分析后質(zhì)量控制,.,全面質(zhì)量控制的內(nèi)容主要包括標本分析前的 質(zhì)量保證、分析中的質(zhì)量控制和分析后的質(zhì)量評 估三個主要過程的質(zhì)控。它們之間的實驗保證體 系見圖4-1。,全面質(zhì)量控制的內(nèi)容,.,7,內(nèi)容主要為： 人員的素質(zhì)和

3、穩(wěn)定性 實驗室的設(shè)置和工作環(huán)境 實驗儀器的質(zhì)量保證 檢測方法的選擇和評價 試劑盒的選擇與評價 病人準備 標本的采集、處理和儲存 實驗室用水等,（一）分析前質(zhì)量控制,.,8,內(nèi)容主要包括： 標本的正確處理和應(yīng)用 項目操作規(guī)程的建立 室內(nèi)質(zhì)控和結(jié)果分析 登記和填發(fā)報告等,(二)分析中的質(zhì)量控制,.,9,內(nèi)容主要有： 運送實驗報告 室內(nèi)質(zhì)控的數(shù)據(jù)管理 參加室間質(zhì)評 病人投訴調(diào)查 臨床信息反饋等,（三）分析后的質(zhì)量評估,.,10,圖4-1 全面質(zhì)量控制實驗保證體系,分析后質(zhì)量評估,分析中質(zhì)量控制,分析前質(zhì)量保證,分析中質(zhì)量控制,檢查病人 申請檢驗,病人 準備,標本 采集,標本 運送,人員素質(zhì) 工作環(huán)境

4、 實驗用水 實驗室管理,臨床醫(yī)生,運送報告 病人投訴 室間質(zhì)評,儀器質(zhì)量保證 方法選擇與評價 試劑選擇與評價,反饋信息,標本處理,建立操作規(guī)程 室內(nèi)質(zhì)控及分析 標本分析測定,室內(nèi) 復(fù)查,保留標本 隨時復(fù)查,登記 填發(fā)報告,.,11,第二節(jié) 室內(nèi)質(zhì)量控制 臨床生化實驗室常規(guī)開展的室內(nèi)質(zhì)控（Internal quality control，IQC），旨在檢測和控制常規(guī)工作的精密度和準確度，提高常規(guī)工作中天內(nèi)和天間標本檢測的一致性。能及時地、準確地報告檢驗結(jié)果。,.,12,人員培訓(xùn) 建立標準化操作規(guī)程 儀器的檢定與校準 質(zhì)控品,一、室內(nèi)質(zhì)量控制的任務(wù),.,13,實驗室每個工作人員都應(yīng)對開展質(zhì)量控制工

5、作的重要性、基礎(chǔ)知識、一般方法有充分的了解，并在實踐過程中不斷學(xué)習(xí)、提高。每個實驗室都應(yīng)培養(yǎng)一批開展質(zhì)控工作的技術(shù)骨干。,1人 員 培 訓(xùn),.,14,標準化操作規(guī)程（standard operational procedure，SOP）包括儀器使用及維護的操作規(guī)程，試劑、質(zhì)控品、標準品等使用的操作規(guī)程和每個檢驗項目的操作規(guī)程等。,2建立標準化操作規(guī)程,.,15,對本實驗室的相關(guān)儀器如分光光度計、量具、自動生化分析儀以及其它測定儀器等要定期按要求進行檢定和校準如對自動化分析儀、分光光度計的摩爾吸收系數(shù)的定期校準。所有校準和檢定都應(yīng)有時間、結(jié)果、變更和頻度的記錄和說明。,3儀器的檢定與校準,.,1

6、6,4質(zhì)控品,定義,為質(zhì)控目的而制備的標本稱為質(zhì)控品。質(zhì)控品含有與測定標本同樣的基礎(chǔ)物質(zhì)（通常為小牛血清）其分析物應(yīng)具有參考值、病理值和醫(yī)學(xué)決定水平三種水平濃度。,.,17,是指對臨床診治疾病具有決定性作用的被分析物的濃度，是臨床上按照不同病情給予不同治療方案而確定的閾值。,醫(yī)學(xué)決定水平,定義：,.,18,某一測定成分可有多個醫(yī)學(xué)決定水平。如血糖有四個決定水平。2.8mmol/L表示低于此值出現(xiàn)低血糖癥狀，7.1mmol/L表示空腹時確定糖尿病的水平，8.9mmol/L表示出現(xiàn)尿糖，16.5mmol/L 以上出現(xiàn)高血糖昏迷。,特點：,.,19,根據(jù)質(zhì)控品的物理性狀不同分為凍干質(zhì)控品、液體質(zhì)控品

7、和混合血清等。 根據(jù)有無測定值可分為定值（藍色標簽）質(zhì)控品和非定值（紅色標簽）質(zhì)控品。 各實驗室可根據(jù)各自的情況選用以上一種質(zhì)控品作為室內(nèi)質(zhì)控品。,質(zhì)控品的種類,.,20,人血清基質(zhì)，分布均勻。 無傳染性。 添加劑和調(diào)制物的數(shù)量少。 瓶間CV%酶類應(yīng)小于2%，其它應(yīng)小于1% 。 凍干品復(fù)溶后穩(wěn)定，28時不少于24小時，20時不少于20天；某些不穩(wěn)定成分（如BIL，ALP等）在復(fù)溶后4小時的變異應(yīng)小于2% 在實驗室的有效期應(yīng)在一年以上。 合理的成本。,質(zhì)控品應(yīng)具有的特征是：,.,21,嚴格按質(zhì)控品說明書操作。 凍干質(zhì)控品的復(fù)溶要確保溶劑的質(zhì)量。 凍干質(zhì)控品復(fù)溶的加量要準確一致。 凍干質(zhì)控品復(fù)溶應(yīng)

8、輕輕搖勻切忌劇烈震搖。 質(zhì)控品應(yīng)按規(guī)定方法保存不用超期品。 質(zhì)控品要與標本同樣測定條件下測定。,質(zhì)控品的正確使用和保存,.,22,二、室內(nèi)質(zhì)量控制的主要方法,確定質(zhì)量目標 設(shè)定靶值和控制限 Levey-Jennings質(zhì)控圖 多規(guī)則質(zhì)控技術(shù),.,質(zhì)量目標是實驗室選用的質(zhì)控方法所需達到的目標，質(zhì)量目標可用總允許誤差的形式表示 目前中國尚未確立各項目的總允許誤差，可參考美國（表-）和歐洲（表-）,一、確定質(zhì)量目標,.,24,最佳變異(optimal conditions variance OCV)表示實驗室在最佳條件下測定項目所能達到的最好精密度水平。 常規(guī)變異(routine condition

9、s variance RCV)表示實驗室在常規(guī)條件下測定項目所能達到的精密度水平。 RCV2OCV時，不可接受二者是反映實驗室工作水平的基礎(chǔ)指標，也是開展室內(nèi)質(zhì)控工作的基礎(chǔ)工作。,最佳變異和常規(guī)變異的設(shè)定,.,25,1、穩(wěn)定性較長的質(zhì)控品 暫定靶值的設(shè)定：對新批號的質(zhì)控品進行測定，根據(jù)至少20次質(zhì)控測定的結(jié)果，計算出平均值和標準差，作為暫定靶值和暫定標準差。 常用靶值的設(shè)立：以最初20個數(shù)據(jù)和三至五個月在控數(shù)據(jù)匯集的所有數(shù)據(jù)的累積平均數(shù)作為質(zhì)控品有效期內(nèi)的常用靶值和常用標準差。 2、穩(wěn)定性較短的質(zhì)控品 3、特殊情況的處理,二、設(shè)定靶值和控制限,.,26,對新批號的質(zhì)控品應(yīng)確定控制限，控制限通常

10、是以多個標準差表示，即以標準差的倍數(shù)表示。不同項目（定量測定）的控制限要根據(jù)其采用的質(zhì)控規(guī)則來決定。,4、設(shè)定控制限,.,27,1、均數(shù)標準差（ -s）質(zhì)控圖 是臨床最常用的質(zhì)控圖，以監(jiān)測分析的精密度。均數(shù)標準差（-S）質(zhì)控圖,三、Levey-Jennings質(zhì)控圖,根據(jù)前面確定的靶值（ ）和標準差繪制 -s質(zhì)控圖，得到均值線（ ）、警告線（ 2s）和失控線（ 3s）。與質(zhì)控圖制作相同批號的控制血清，每天隨病人標本分析，結(jié)果點在圖上，直線連接。,（1）方法:,.,28,d,均數(shù),+2S,-2S,+3S,-3S,正常分布,.,29,正常分布規(guī)律： 95%數(shù)據(jù)落在 2s內(nèi) 不能有連續(xù)5次結(jié)果在同一

11、側(cè) 不能有5次結(jié)果漸升或漸降 不能連續(xù)2個點落在 2s以外 不應(yīng)該有落在 3s以外的點,（2）結(jié)果分析：,.,30,趨勢變化,漂移,精密度變化,-3S,+3S,+2S,-2S,d,2S,.,31, 漂移，提示存在系統(tǒng)誤差。 趨勢性變化，說明試劑或儀器的性能已發(fā) 生變化。 精度變化，提示測定的偶然誤差較大，如 儀器、試劑不穩(wěn)定等。,異常表現(xiàn):,.,32,（1) 方法： 要求在常規(guī)條件下，同時測定2份定值質(zhì)控血清，并要求質(zhì)控血清所含測定物濃度最好分別為醫(yī)學(xué)決定水平的上限（高值）或下限（低值），或者是分析方法測定范圍的上限和下限。將測定結(jié)果分別繪成2份不同濃度的 s質(zhì)控圖，當有一份質(zhì)控血清測定值處于

12、質(zhì)控圖上2s3s界限內(nèi)，發(fā)出“警報”信號時，即應(yīng)采用其余各條規(guī)則對質(zhì)控圖進行全面檢查，若符合其中一條，就應(yīng)把該批分析測定的結(jié)果判為“失控”。,2.Westgard多規(guī)則質(zhì)控法,.,33, 12S警告規(guī)則：當2份質(zhì)控血清中的任意1份測定值處于2s3s界限內(nèi)，為“警報”信號。 13S規(guī)則：當2份質(zhì)控血清中的任意1份測定值超過3s界限，為“失控”。提示存在隨機誤差。,（2）判斷規(guī)則：,2s,-2s,-3s,3s,x,.,34, R4S規(guī)則：同一批中二個質(zhì)控結(jié)果之差超出4s范圍，其中一個超出2s限值，另一個超出2s限值，為“失控”，屬隨機誤差過大。 22S規(guī)則：同批兩個質(zhì)控品結(jié)果同方向超出2s限 值，

13、或同一質(zhì)控品連續(xù)兩次質(zhì)控結(jié)果超出2s限值為“失控”，多由系統(tǒng)誤差造成。,3s 2s,-2s -3s,3s 2s X -2s -3s,.,35, 41S規(guī)則：當1份質(zhì)控血清的測定結(jié)果連續(xù)4次超過1s或1s界限，或2份質(zhì)控血清的測定結(jié)果同時連續(xù)2次超過1s或1s界限時，為“失控”，一般由系統(tǒng)誤差所至。 10 規(guī)則：當1份質(zhì)控血清測定結(jié)果連續(xù)10次偏于均值一側(cè)時，或2份質(zhì)控血清的測定結(jié)果同時連續(xù)5次偏于 一側(cè)時，為“失控”，是系統(tǒng)誤差所致。,s,2S,3S,-s,-2s,-3s,s,-s,.,36,1、操作者在測定質(zhì)控時，如發(fā)現(xiàn)質(zhì)控數(shù)據(jù)違背了質(zhì)控規(guī)則，應(yīng)填寫失控報告單，對失控結(jié)果要進行回顧、分析是否

14、人為錯誤操作等原因。 2、重新測定一次，若在控，則說明是由于人為原因所致，若仍然失控，則應(yīng)更換同一批號另一瓶質(zhì)控血清，若在控則說明是質(zhì)控物變質(zhì)或污染。,（三）失控后處理,質(zhì)控品必須分裝、冷凍保存,.,37,3、如仍失控，取另外一個批號的質(zhì)控物或定值血清，以同樣方法測定一次，如結(jié)果在控，提示前一批質(zhì)控血清可能存在問題，認真查找質(zhì)控變質(zhì)原因，予以改正。 4、如仍不在允許范圍內(nèi)，則仔細檢查儀器各部分性能是否正確，若仍然失控，更換試劑，重新測定，如在控則可能由于試劑放置時間過長變質(zhì)。 5、如結(jié)果仍失控，則仔細檢查儀器各部分性能是否正常，包括光路、水路、電路等系統(tǒng)，維修保養(yǎng)后重測。,.,范例一BUN結(jié)果

15、偏高,解決方案： 1、換定標液，將朗道的定標液換成試劑本身的定質(zhì)控做所有項目質(zhì)控，然后用質(zhì)控單獨做BUN項目質(zhì)控后，BUN標液，結(jié)果仍偏高，排除定標液的本身問題。 2、用定標液做質(zhì)控結(jié)果亦偏高，排除質(zhì)控品問題。 3、先用結(jié)果降低。 結(jié)論：試劑本身存在一定的系統(tǒng)誤差，可能項目之間存在交叉污染。 解決辦法：更換試劑的位置，更換干燥棒，如不行則需更換不同廠家的試劑。 結(jié)果：更換試劑位置，結(jié)果恢復(fù)正常。,.,39,范例二 RF出現(xiàn)負值,可能原因分析： 1、RF采用的是免疫比濁法，其測定的付波長為700nm，儀器在700nm處有很強的非特異性吸收峰，導(dǎo)致付波長吸收峰增高，當標本的濃度很低時，主波長的吸光

16、度值比付波長的低，結(jié)果出現(xiàn)負值。 2、定標液濃度較高，而比濁法不能用線性定標方式，必須采用多點定標的方法。低濃度時就很可能出現(xiàn)負值。 3、抗原抗體反應(yīng)出現(xiàn)后帶現(xiàn)象。 可能的解決方案： 1、將檢測的付波長去掉（可能會結(jié)果偏高，乳糜血的干擾） 2、更換定標液 3、稀釋。,.,40,.,41,.,42,.,43,.,44,.,45,第三節(jié) 室間質(zhì)量評價,室間質(zhì)量評價（external quality assessment，EQA）是指多家實驗室分析同一標本，由外部獨立機構(gòu)收集、分析和反饋實驗室檢測結(jié)果，評定實驗室常規(guī)工作的質(zhì)量，觀察實驗的準確性，建立起各實驗室分析結(jié)果之間的可比性。,.,46,鑒定實

17、驗室的工作缺陷（操作程序、制度） 建立方法的可接受限 鑒定方法的可信性 為實驗室執(zhí)照評定或認可提供客觀依據(jù) 評價實驗室工作人員的能力 評價實驗室結(jié)果的可比性 目的是通過實驗室間的比對，觀察各實驗室結(jié)果的準確性、一致性，并采取一定措施，使各實驗室結(jié)果漸趨一致。,（一）室間質(zhì)評的目的,.,47,（二）室間質(zhì)評應(yīng)具備的條件 要有一支素質(zhì)較高的質(zhì)控技術(shù)隊伍 室間質(zhì)評要有室內(nèi)質(zhì)控的基礎(chǔ) 要有良好質(zhì)控血清作為調(diào)查樣本 樣本定值方法可靠，有參考實驗室作后盾 統(tǒng)一測定方法及校準品,.,48,1方法 組織若干實驗室，共同在規(guī)定時間內(nèi)測定同一批樣品、收集測定結(jié)果，作統(tǒng)計分析并按規(guī)定評分。,（二）室間質(zhì)評的方法,.

18、,49,能力比對分析（proficiency testing,PT）是室間質(zhì)量評價技術(shù)方案之一，現(xiàn)已成為全球性室間質(zhì)量保證系統(tǒng)的主要內(nèi)容，以保護病人的利益和公眾的福利。 PT方案是通過實驗室之間的比對判斷實驗室的檢測能力的活動。 美國國會1988年臨床實驗室修正案（Clinical laboratory improvement amendment,CLIA88）強制性地將PT作為實驗室認可的主要內(nèi)容之一。,能力比對分析,.,50,表4-3 美國CLIA88能力比對檢驗對臨床化學(xué)的分析質(zhì)量要求,.,51,.,52,國際CLIA88的PT方案規(guī)定，臨床生物化學(xué)項目每年至少進行3次PT調(diào)查，每次調(diào)查

19、至少包括5個不同的質(zhì)控樣本，在一年內(nèi)，對于任一項至少可得15個測定結(jié)果。通過各實驗室間持續(xù)的比較，作出結(jié)果判斷。,（一）方法,.,53,針對某一項目的得分（Score）： S1 = 對調(diào)查的全部項目的得分： S2 =,（二）計算,.,54,國際CLIA88技術(shù)細則規(guī)定，S1、S2均應(yīng)大于80，否則判為不滿意。 且如果S1或S2連續(xù)兩次或兩次以上不滿意，即為失敗，對于某一個接受結(jié)果，不再進行優(yōu)劣分級。,（三）判斷,.,55,PT是對實驗室常規(guī)工作進行評價的活動，目的是為了全面提高檢驗的質(zhì)量。 所以對PT調(diào)查的標本應(yīng)完全按照病人標本一樣對待，與病人標本同時進行分析，切忌互相核對結(jié)果，這樣才能反映實

20、驗室真正的日常工作水平。 各實驗室應(yīng)該與PT組織者密切合作，解決實驗中出現(xiàn)的各種問題，不斷提高檢驗質(zhì)量。,（四） 目的意義,1目的,.,56,通過能力比對分析可獲得本實驗室與使用同一方法的其他實驗室結(jié)果的差異，以及與做同一試驗但使用不同方法的實驗室結(jié)果比較的情況。 能力比對分析還可評價實驗室的分析能力，監(jiān)控實驗室可能出現(xiàn)的技術(shù)問題，可作為實驗室質(zhì)量保證的外部監(jiān)督工具。,2意義,.,57,變異指數(shù)得分法 1985年全國臨床檢驗質(zhì)量控制會議上通過的提案，建議變異指數(shù)得分計算公式如下： V = VI = 其中，為各實驗室某項目的測定值，T為靶值，V為變異百分數(shù)，VI為變異指數(shù)，CCV為已選定的變異系

21、數(shù)。,補 充,.,58,表4-5 WHO推薦的CCV值,K+ Na+ Cl- Ca2+ P3+ Glu,2.9 1.6 2.2 4.0 7.8 7.7,5.7 7.7 8.9 3.9 7.5 9.6,BUN UA Cr TP Alb TBIL,.,59,判 斷 標 準,在計算時，VIS只計整數(shù)位，不帶正負符號。當VI 400時,VIS = VI; 當VI 400時，VIS = 400。,我國的標準為： VIS80為優(yōu)良 80 VIS150為及格 VIS200，表明結(jié) 果中有臨床上不允 許的誤差。 VIS=400的測定結(jié)果 會造成臨床的嚴重失 誤，是絕對不許可的,WHO的標準為: VIS50為優(yōu)

22、秀 VIS100為良好 VIS150為及格。,.,60,VIS方案過去運用的相當廣泛，但隨著科學(xué)的發(fā)展，已暴露出自身的不足，比如說酶、HDL、膽固醇等指標已成為當今實驗室的常規(guī)項目，但由于VIS方案還沒有給出它們的CCV值，所以無法計算VIS。而CCV值的確定是一個復(fù)雜而漫長的過程，并需要隨著儀器的更新隨時進行調(diào)整，從而使VIS的計算值無法真正代表當前的實際水平。,VIS方案的評價,.,61,一、定義 實驗室認可（laboratory accreditation）是由權(quán)威性專業(yè)組織按照一定的標準對實驗室或?qū)嶒炇夜ぷ魅藛T進行檢查、考核，認可能夠開展或勝任某些工作，并授予資格的過程。,第四節(jié) 實驗

23、室認可,.,62,認可委員會 一系列標準及檔案 經(jīng)選拔和培訓(xùn)并取得資格的評審員,二、基本組成,.,63,第五節(jié)臨床生物化學(xué)實驗方法的選擇與評價,一、實驗方法的選擇 二、實驗方法的評價 三、臨床診斷實驗的性能評價,.,64,一、實驗方法的選擇,方法分級 1、決定性方法：準確度最高，系統(tǒng)誤差最小，經(jīng)過詳細的研究，沒有發(fā)現(xiàn)產(chǎn)生誤差的原因或在某些方面不夠明確的方法。用于發(fā)展及評價 參考方法和標準品。 2、參考方法：指準確度和精密度已經(jīng)充分證實的分析方法，干擾因素小，系統(tǒng)誤差小，有適當?shù)撵`敏度、特異性直線性及較寬的分析范圍。用于鑒定常規(guī)方法和二級標準品。 3、常規(guī)方法：指性能符合臨床或其他目地的需要，有

24、適當?shù)姆治龇秶?，而且?jīng)濟實用。,.,65,標準品的分級： 標準品：一種或幾種物理化學(xué)性質(zhì)已經(jīng)充分確定，被用于校準儀器或證實一種測定方法的物質(zhì)。 1、一級標準品：已經(jīng)確定為穩(wěn)定而均一的物質(zhì)，它的數(shù)值已經(jīng)由決定性方法確定，或由高度準確的若干方法確定，所含雜質(zhì)也已經(jīng)定量，且有證書，用于校準決定性方法，評價及校準參考方法以及為二級標準品定值。 2、二級標準品：這類標準品可由實驗室自己配制或為商品，其中有關(guān)物質(zhì)的量由參考方法定值，主要用于常規(guī)方法的標化或為控制物定值。 3、控制物：控制物有凍干或是溶液，以參考方法用一級或二級標準品定值，用于質(zhì)量控制，一般不用于標化。,一、實驗方法的選擇,.,66,實驗方

25、法的選擇要求,1、實用性 2、可靠性 3、真實性,.,67,二、實驗方法的評價,評價實驗與分析誤差類型的關(guān)系,分析誤差的類型,評價實驗,初步實驗,指標,偶然誤差 重復(fù)性實驗 精密度 恒定誤差 干擾實驗 準確度 比例誤差 回收實驗 準確度,.,三、診斷性試驗評價的相關(guān)指標,1.敏感度 2.特異度 3.陽性似然比 4.陰性似然比 5.受試者工作曲線,.,69,三、臨床生物化學(xué)診斷實驗的性能指標,1、靈敏度 診斷實驗檢出的陽性病人的百分率 臨床靈敏度（%）= 實際上檢測為陽性病人數(shù)/理論上為陽性病人數(shù) 2、臨床特異度 指診斷實驗檢查確定未患病的百分率 臨床特異度=檢查結(jié)果為陰性的人數(shù)/全部受檢未患病

26、的人數(shù),.,70,3、參考值：系指一個地區(qū)的健康人群中，規(guī)定若干條規(guī)格標準，在總體中抽樣進行調(diào)查測定，將測定結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理求出均值和標準差，通常將均值定為參考值，將X2S定為參考范圍。,.,4、似 然 比（Likelihood ratio；LR）,似然比指的是患某種疾病的患者進行某種檢測所得的指定數(shù)值范圍內(nèi)敏感度和特異度之間關(guān)系. 陽性似然比：診斷實驗的真陽性率與假陽性率之比。PLR =敏感度/（1-特異度） 陰性似然比：診斷實驗的假陰性與真陰性之比。 NLR=（1-敏感度）/特異度,.,5、ROC 曲 線,ROC曲線(Receiver Operator Characteristic cur

27、ve)：真陽性率對假陽性率作圖。并將所對應(yīng)的點連接起來所得到的曲線。,.,血糖測定及其sen與spe,.,.,75,第六節(jié) 試劑盒的選擇和評價,本節(jié)主要內(nèi)容 生化檢驗試劑的發(fā)展 試劑盒的選擇和評價,.,76,臨床生化試劑盒 臨床生化商品試劑與標準液按檢測項目組合成一套放在一個包裝盒內(nèi)叫試劑盒（reagent kit），或叫試劑組合（reagent set ）。 與自動化分析儀匹配的試劑盒的研制、生產(chǎn)和供應(yīng)走向產(chǎn)業(yè)化的道路，它無疑是臨床生化發(fā)展史上一個巨大的技術(shù)進步。,.,77,試劑盒的分類和發(fā)展,臨床生化診斷試劑種類繁多，有液體型、粉劑型、片劑型，有單一試劑、雙試劑、干試劑、多試劑等。 縱觀近

28、20多年來的發(fā)展，臨床生化體外診斷試劑盒的分類和發(fā)展歷史可表示如下：,.,78,化學(xué)分析法,方法學(xué) 物理性狀 組合形式 操作方式,液體型自配試劑,液體多劑型試劑,手工法多步操作,酶法分析,干粉片型試劑,液體單劑型試劑,流動離心式分析儀,免疫學(xué)法,液體型商品試劑,液體雙劑型試劑,任選分立式分析儀,干化學(xué)法,干式多層膠片型試劑,單劑型干片式試劑,干片式分析儀,.,79,（一）液體型試劑 優(yōu)點是液體型試劑的試劑組分高度均一，瓶間差異小，測定重復(fù)性好和使用方便；它也無需加入任何輔助試劑及蒸餾水，避免了外源性水質(zhì)對試劑的影響，性能較穩(wěn)定，測定結(jié)果較為準確。 缺點是液體型試劑（尤其是酶試劑）保存時間較短，

29、不便于運輸。,一、液體型試劑和粉（片）劑型試劑,.,80,所謂液體單試劑就是將某種生化檢驗項目所用到的試劑科學(xué)地混合在一起，組成為一種試劑。應(yīng)用時，只須將標本和試劑按一定比例混合，即可進行相應(yīng)的生化反應(yīng)，然后用適當?shù)姆椒z測結(jié)果。,1液體單試劑,.,81,內(nèi)源性甘油給甘油三酯測定的干擾。 內(nèi)外源性NH4+對尿素酶法測定的干擾。 內(nèi)源性丙酮酸對ALT、AST測定的干擾等。 維生素C和膽紅素對Trinder反應(yīng)的干擾。,單試劑存在抗干擾能力差的缺點，給測定結(jié)果帶來相當大的分析誤差。例如：,.,82,所謂液體雙試劑就是將某些生化檢測項目所用到的試劑，按用途科學(xué)地分成兩類，分別配成兩種試劑，通常第一試

30、劑加入后可起到全部或部分消除某些內(nèi)源性干擾的作用，第二試劑為啟動被檢測物質(zhì)反應(yīng)的試劑，兩種試劑混合后才共同完成被檢項目的生化反應(yīng)。然后用適當?shù)姆椒z測結(jié)果。,2液體雙試劑,.,83,所謂粉劑型及片劑型試劑，即是將試劑的各組分用球磨技術(shù)粉碎成粉劑或混合后壓成片劑，使用前再加入指定的溶液復(fù)溶成液體試劑。,（二）粉（片）劑型試劑,.,84,用固體原料研磨后制成粉劑或片劑，則存在許多問題： 要使試劑各組分混合得非常均勻，技術(shù)難度很大； 分裝過程中的稱量誤差及復(fù)溶時加水量的準確性影響試劑的瓶間差； 水質(zhì)優(yōu)劣對試劑的穩(wěn)定性和測定的可靠性有相當大的影響。,.,85,（一）檢查包裝是否完整 （二）試劑質(zhì)量初評

31、 （三）試劑性能特征的評估,二、試劑盒的選擇和評價,.,86,（一）檢查包裝是否完整,商品試劑盒不僅應(yīng)具有優(yōu)質(zhì)的試劑內(nèi)容，而且應(yīng)有完整牢固的包裝和詳盡明確的說明書。,1、外包裝 外包裝應(yīng)完整牢固，封口嚴密。,2、內(nèi)包裝 內(nèi)包裝應(yīng)有清晰完整的標簽，牢固貼于容器表面。,3、說明書 內(nèi)容包括試劑名稱、用途、測定原理和技術(shù)要求、標本要求、衛(wèi)生部批準的文號等。,.,87,一、說明書審查 說明書是用戶了解和正確使用試劑盒的指南。審查內(nèi)容包括： 試劑名稱； 用途； 測定原理和技術(shù)要求； 試劑盒內(nèi)的包裝內(nèi)容； 適用儀器；,.,88,一、說明書審查 標本要求； 測定步驟及注意事項； 貯存的條件及有效期； 性能特征，包括準確度、精確度、特異性、 受干擾的程度、線性范圍、參考范圍； 生產(chǎn)單位名稱、地址、郵編及電話。,.,89,（二）試劑質(zhì)量初評,通過觀察試劑的顏色、性狀及溶解度等對試劑質(zhì)量進行初步評價。 粉劑型應(yīng)均勻無凝塊，不粘附瓶壁； 液體型試劑應(yīng)無沉淀，無混濁，無滲漏。,.,90,（三）試劑性能特征的評估,（一）準確度