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文檔簡介
1、第一章 緒論六、論述題1、什么叫細胞生物學(xué)?試論述細胞生物學(xué)研究的主要內(nèi)容。答:細胞生物學(xué)是研究細胞基本生命活動規(guī)律的科學(xué),它是在三個水平(顯微、亞顯微與分子水平)上,以研究細胞的結(jié)構(gòu)與功能、細胞增殖、細胞分化、細胞衰老與凋亡、細胞信號傳遞、真核細胞基因表達與調(diào)控、細胞起源與進化等為主要內(nèi)容的一門科學(xué)。細胞生物學(xué)的主要研究內(nèi)容主要包括兩個大方面:細胞結(jié)構(gòu)與功能、細胞重要生命活動。涵蓋九個方面的內(nèi)容:細胞核、染色體以及基因表達的研究;生物膜與細胞器的研究;細胞骨架體系的研究;細胞增殖及其調(diào)控;細胞分化及其調(diào)控;細胞的衰老與凋亡;細胞的起源與進化;細胞工程;細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)。第二章 細胞的統(tǒng)一性與多樣
2、性一、名詞解釋1、細胞;由膜轉(zhuǎn)圍成的、能進行獨立繁殖的最小原生質(zhì)團,是生物體電基本的開礦結(jié)構(gòu)和生理功能單位。其基本結(jié)構(gòu)包括:細胞膜、細胞質(zhì)、細胞核(擬核)。 2、原核細胞;沒有由膜圍成的明確的細胞核、體積小、結(jié)構(gòu)簡單、進化地位原始的細胞。 8、原核細胞和真核細胞核糖體的沉降系數(shù)分別為70S和 80S 。9、細菌細胞表面主要是指細胞壁和細胞膜及其特化結(jié)構(gòu)間體,莢膜和鞭毛等。10、真核細胞亞顯微水平的三大基本結(jié)構(gòu)體系是生物膜結(jié)構(gòu)系統(tǒng)、遺傳信息表達系統(tǒng),和細胞骨架系統(tǒng)。三、選擇題1、大腸桿菌的核糖體的沉降系數(shù)為( B )A、80S B、70S C、 60S D、50S3、在病毒與細胞起源的關(guān)系上,下
3、面的( C )觀戰(zhàn)越來越有說服力。A、生物大分子病毒細胞 B、生物大分子細胞和病毒C、生物大分子細胞病毒 D、都不對8、原核細胞的呼吸酶定位在( B )。A、細胞質(zhì)中 B、質(zhì)膜上 C、線粒體內(nèi)膜上 D、類核區(qū)內(nèi)7、細菌核糖體的沉降系數(shù)為70S,由50S大亞基和30S小亞基組成。( )五、簡答題1、為什么說支原體是目前發(fā)現(xiàn)的最小、最簡單的能獨立生活的細胞生物?答:支原體的的結(jié)構(gòu)和機能極為簡單:細胞膜、遺傳信息載體DNA與RNA、進行蛋白質(zhì)合成的一定數(shù)量的核糖體以及催化主要酶促反應(yīng)所需要的酶。這些結(jié)構(gòu)及其功能活動所需空間不可能小于100nm。因此作為比支原體更小、更簡單的細胞,又要維持細胞生命活動
4、的基本要求,似乎是不可能存在的,所以說支原體是最小、最簡單的細胞。六、論述題1、如何理解“細胞是生命活動的基本單位”。答:細胞是構(gòu)成有機體的基本單位。一切有機體均由細胞構(gòu)成,只有病毒是非細胞形態(tài)的生命體。細胞具有獨立的、有序的自控代謝體系,細胞是代謝與功能的基本單位細胞是有機體生長與發(fā)育的基礎(chǔ)細胞是遺傳的基本單位,細胞具有遺傳的全能性細胞是生命起源和進化的基本單位。沒有細胞就沒有完整的生命2、試論述原核細胞與真核細胞最根本的區(qū)別。答:原核細胞與真核細胞最根本的區(qū)別在于:生物膜系統(tǒng)的分化與演變:真核細胞以生物膜分化為基礎(chǔ),分化為結(jié)構(gòu)更精細、功能更專一的基本單位細胞器,使細胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)與職能的分工是
5、真核細胞區(qū)別于原核細胞的重要標志;遺傳信息量與遺傳裝置的擴增與復(fù)雜化:由于真核細胞結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)雜化,遺傳信息量相應(yīng)擴增,即編碼結(jié)構(gòu)蛋白與功能蛋白的基因數(shù)首先大大增多;遺傳信息重復(fù)序列與染色體多倍性的出現(xiàn)是真核細胞區(qū)別于原核細胞的一個重大標志。遺傳信息的復(fù)制、轉(zhuǎn)錄與翻譯的裝置和程序也相應(yīng)復(fù)雜化,真核細胞內(nèi)遺傳信息的轉(zhuǎn)錄與翻譯有嚴格的階段性與區(qū)域性,而在原核細胞內(nèi)轉(zhuǎn)錄與翻譯可同時進行。第三章 細胞生物學(xué)研究方法一、名詞解釋 1、原代細胞培養(yǎng);直接從有機體取出組織,通過組織塊長出單層細胞,或者用酶消化或機械方法將組織分散成單個細胞,在體外進行培養(yǎng),在首次傳代前的培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。 2、傳代細胞培養(yǎng)
6、;原代培養(yǎng)形成的單層培養(yǎng)細胞匯合以后,需要進行分離培養(yǎng),否則細胞會因生存空間不足或由于細胞密度過大引起營養(yǎng)枯竭,將影響細胞的生長,這一分離培養(yǎng)稱為傳代細胞培養(yǎng)3、細胞融合;兩個或多個細胞融合成一個雙核細胞或多核細胞的現(xiàn)象。一般通過滅活的病毒或化學(xué)物質(zhì)介導(dǎo),也可通過電刺激融合。4、單克隆抗體;通過克隆單個分泌抗體的B淋巴細胞,獲得的只針對某一抗原決定簇的抗體,具有專一性強、能大規(guī)模生產(chǎn)的特點。二、填空題1、熒光顯微鏡是以紫外光為光源,電子顯微鏡則是以電子束為光源。3、細胞組分的分級分離方法有超速離心法,層析法和電泳法。4、電子顯微鏡使用的是電磁透鏡,而光學(xué)顯微鏡使用的是玻璃透鏡。5、雜交瘤是通過
7、(小鼠骨髓)瘤細胞細胞和B淋巴細胞種細胞的融合實現(xiàn)的,由此所分泌的抗體稱為單克隆抗體。6、觀察活細胞的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可選用相差顯微鏡顯微鏡,觀察觀察細胞的形態(tài)和運動可選用暗視野顯微鏡顯微鏡,觀察生物膜的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可采用冰凍蝕刻法。7、體外培養(yǎng)的細胞,不論是原代細胞還是傳代細胞,一般不保持體內(nèi)原有的細胞形態(tài),而呈現(xiàn)出兩種基本形態(tài)即成纖維樣細胞和上皮樣細胞。三、選擇題1、由小鼠骨髓瘤細胞與某一B細胞融合后形成的細胞克隆所產(chǎn)生的抗體稱( A )。A、單克隆抗體 B、多克隆抗體 C、單鏈抗體 D、嵌合抗體2、適于觀察培養(yǎng)瓶中活細胞的顯微鏡是( C )A、熒光顯微鏡 B、相差顯微鏡 C、倒置顯微鏡 D、掃描電鏡
8、 3、冰凍蝕刻技術(shù)主要用于( A )A、電子顯微鏡 B、光學(xué)顯微鏡 C、微分干涉顯微鏡 D、掃描隧道顯微鏡4、分離細胞內(nèi)不同細胞器的主要技術(shù)是( A )A、超速離心技術(shù) B、電泳技術(shù) C、層析技術(shù) D、光鏡技術(shù)5、Feulgen反應(yīng)是一種經(jīng)典的細胞化學(xué)染色方法,常用于細胞內(nèi)( C )A、蛋白質(zhì)的分布與定位 B、脂肪的分布與定位 C、DNA的分布與定位 D、RNA的分布與定位6、流式細胞術(shù)可用于測定( D )A、細胞的大小和特定細胞類群的數(shù)量 B、分選出特定的細胞類群C、細胞中DNA、RNA或某種蛋白的含量 D、以上三種功能都有11、動物細胞在體外培養(yǎng)條件下生長情況是( C )。A、能無限增殖
9、B、不能增殖分裂很快死亡 C、經(jīng)過有限增殖后死亡 D、一般進行有限增殖后死亡,但少數(shù)情況下某些細胞發(fā)生了遺傳突變,獲得無限增殖能力13、在雜交瘤技術(shù)中,篩選融合細胞時常選用的方法是( C )。A、密度梯度離心法 B、熒光標記的抗體和流式細胞術(shù)C、采用在選擇培養(yǎng)劑中不能存活的缺陷型瘤系細胞來制作融合細胞D、讓未融合的細胞在培養(yǎng)過程中自然死亡五、簡答題1、超薄切片的樣品制片過程包括哪些步驟?答案要點:固定,包埋,切片,染色。3、比較差速離心與密度梯度離心的異同。答案要點:二者都是依靠離心力對細胞勻漿懸浮扔中的顆粒進行分離的技術(shù)。差速離心是一種較為簡便的分離法,常用于細胞核和細胞器的分離。因為在密度
10、均一的介質(zhì)中,顆粒越大沉降越快,反之則沉降較慢。這種離心方法只能將那些大小有顯著差異的組分分開,而且所獲得的分離組分往往不很純;而密度梯度離心則是較為精細的分離手段,這種方法的關(guān)鍵是先在離心管中制備出蔗糖或氯化銫等介質(zhì)的濃度梯度并將細胞勻漿裝在最上層,密度梯度的介質(zhì)可以穩(wěn)定沉淀成分,防止對流混合,在此條件下離心,細胞不同組分將以不同速率沉降并形成不同沉降帶。六、論述題1、試比較電子顯微鏡與光學(xué)顯微鏡的區(qū)別。答案要點:光學(xué)顯微鏡是以可見光為照明源,將微小的物體形成放大影像的光學(xué)儀器;而電子顯微鏡則是以電子束為照明源,通過電子流對樣品的透射或反射及電磁透鏡的多級放大后在熒光屏上成像的大型儀器。它們
11、的不同在于:照明源不同:光鏡的照明源是可見光,電鏡的照明源是電子束;由于電子束的波長遠短于光波波長,因而電鏡的放大率及分辨率顯著高于光鏡。透鏡不同:光鏡為玻璃透鏡;電鏡為電磁透鏡。分辨率及有效放大本領(lǐng)不同:光鏡的分辨率為0.2m左右,放大倍數(shù)為1000倍;電鏡的分辨率可達0.2nm,放大倍數(shù)106倍。真空要求不同:光鏡不要求真空;電鏡要求真空。成像原理不同:光鏡是利用樣品對光的吸收形成明暗反差和顏色變化成像;而電鏡則是利用樣品對電子的散射和透射形成明暗反差成像。生物樣品制備技術(shù)不同:光鏡樣品制片技術(shù)較簡單,通常有組織切片、細胞涂片、組強壓片和細胞滴片等;而電鏡樣品的制備較復(fù)雜,技術(shù)難度和費用都
12、較高,在取材、固定、脫水和包埋等環(huán)節(jié)上需要特殊的試劑和操作,還需要制備超薄切片 第四章 細胞膜與細胞表面 一、名詞解釋 2、脂質(zhì)體;是根據(jù)磷脂分子可在水相中形成穩(wěn)定的脂雙層膜的而制備的人工膜。 3、內(nèi)在蛋白;分布于磷脂雙分子層之間,以疏水氨基酸與磷脂分子的疏水尾部結(jié)合,結(jié)合力較強。只有用去垢劑處理,使膜崩解后,才能將它們分離出來。 4、外周蛋白 ;為水溶性蛋白,靠離子鍵或其它弱鍵與膜表面的蛋白質(zhì)分子或脂分子極性頭部非共價結(jié)合,易分離。四、簡答題1、簡述細胞膜的基本功能。答案要點:(1)限定細胞的范圍,維持細胞的形狀。(2)具有高度的選擇性,(為半透膜)并能進行主動運輸使細胞內(nèi)外形成不同的離子濃
13、度并保持細胞內(nèi)物質(zhì)和外界環(huán)境之間的必要差別。(3)是接受外界信號的傳感器,使細胞對外界環(huán)境的變化產(chǎn)生適當?shù)姆磻?yīng)。(4)與細胞新陳代謝、生長繁殖、分化及癌變等重要生命活動密切相關(guān)。第五章 物質(zhì)的跨膜運輸?shù)诎苏?細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)一、名詞解釋1、載體蛋白 :是一類膜內(nèi)在蛋白,幾乎所有類型的生物膜上存在的多次跨膜的蛋白質(zhì)分子。通過與特定溶質(zhì)分子的結(jié)合,引起一系列構(gòu)象改變以介導(dǎo)溶質(zhì)分子的跨膜轉(zhuǎn)運。 2、細胞通訊 一個細胞發(fā)出的信息通過介質(zhì)傳遞到另一個細胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng)。對于多細胞生物體的發(fā)生和組織的構(gòu)建,協(xié)調(diào)細胞的功能,控制細胞的生長、分裂、分化和凋亡是必須的。 3、通道蛋白 由幾個蛋白亞基在膜上形成的孔道
14、,能使適宜大小的分子及帶電荷的溶質(zhì)通過簡單的自由擴散運動從膜的一側(cè)到另一側(cè)。 4、分子開關(guān) 細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中,通過結(jié)合GTP與水解GTP,或者通過蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化而開啟或關(guān)閉蛋白質(zhì)的活性。 5、鈉鉀泵(Na+K+ pump)又稱Na+ - K+ ATPase,能水解ATP,使a亞基帶上磷酸集團或去磷酸化,將Na+泵出細胞,而將K+泵入細胞的膜裝運載體蛋白。 6質(zhì)子泵 質(zhì)子泵是位于細胞膜或細胞內(nèi)膜上的一種能主動轉(zhuǎn)運質(zhì)子(H+)的特殊蛋白質(zhì).7、胞吞作用 細胞攝取大分子和顆粒性物質(zhì)時,細胞膜向內(nèi)凹陷形成囊泡,將物質(zhì)裹進并輸入細胞的過程。 8、胞吐作用 攜帶有內(nèi)容物的膜泡與質(zhì)膜融合,將內(nèi)容物
15、釋放到胞外的過程。 9、胞飲作用 細胞對液體物質(zhì)或細微顆粒物質(zhì)的攝入和消化過程。10、信號分子 生物體內(nèi)的某些化學(xué)分子,如激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長因子等,在細胞間和細胞內(nèi)傳遞信息,特稱為信號分子。11、受體 一種能夠識別和選擇性地結(jié)合某種配體(信號分子)的大分子,當與配體結(jié)合后,通過信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用將胞外信號轉(zhuǎn)導(dǎo)為胞內(nèi)化學(xué)或物理的信號,以啟動一系列過程,最終表現(xiàn)為生物學(xué)效應(yīng)。12、第一信使 :一般將胞外信號分子稱為第一信使。 13、第二信使:細胞表面受體接受胞外信號后最早在胞內(nèi)產(chǎn)生的信號分子。細胞內(nèi)重要的第二信使有:cAMP、cGMP、DAG、IP3等。15、G蛋白 由GTP控制活性的蛋白,當與GTP
16、結(jié)合時具有活性,當與GDP結(jié)合時沒有活性。既有單體形式(ras蛋白),也有三聚體形式(Gs蛋白)。在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中起著分子開關(guān)的作用。16、G蛋白耦聯(lián)受體 是指配體受體復(fù)合物與靶蛋白的作用要通過與G蛋白的偶聯(lián),在細胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號跨膜傳遞到胞內(nèi)影響細胞的行為。 17、組成型胞吐作用 所有真核細胞都有的、從高爾基體反面管網(wǎng)區(qū)分泌的囊泡向質(zhì)膜流動并與質(zhì)膜融合、將分泌小泡的內(nèi)含物釋放到細胞外的過程。此過程不需要任何信號的觸發(fā),除了給細胞外提供酶、生長因子和細胞外基質(zhì)成分外,還為細胞膜提供膜整合蛋白和膜脂。18、調(diào)節(jié)型胞吐作用 某些特化的細胞(如分泌細胞)產(chǎn)生的分泌物(如激素、粘液或消
17、化酶)儲存在分泌泡內(nèi),當細胞受到胞外信號刺激時,分泌泡與質(zhì)膜融合并將內(nèi)含物釋放出去的過程。三、選擇題1、下列不屬于第二信使的是(D )。A、cAMP B、cGMP C、DG D、NO2、Na+-K+泵由、兩個亞基組成,當亞基上的( C )磷酸化才可能引起亞基構(gòu)象變化,而將Na+泵出細胞外。A、蘇氨酸 B、酪氨酸 C、天冬氨酸 D、半胱氨酸3、真核細胞的胞質(zhì)中,Na+和K+平時相對胞外,保持( C )。A、濃度相等 B、Na+高,K+低C、Na+低,K+高 D、Na+ 是K+的3倍4、生長因子是細胞內(nèi)的( C )。A、結(jié)構(gòu)物質(zhì) B、能源物質(zhì) C、信息分子 D、酶5、腎上腺素可誘導(dǎo)一些酶將儲藏在肝
18、細胞和肌細胞中的糖原水解,第一個被激活的酶是( D )。A、蛋白激酶A B、糖原合成酶 C、糖原磷酸化酶 D、腺苷酸環(huán)化酶6、Ras基因的哪一種突變有可能引起細胞的癌變( A )A、突變后的Ras蛋白不能水解GTP B、突變后的Ras蛋白不能結(jié)合GTPC、突變后的Ras蛋白不能結(jié)合Grb2或Sos D、突變后的Ras蛋白不能結(jié)合Raf7、( D )不是細胞表面受體。A、離子通道 B、酶連受體 C、G蛋白偶聯(lián)受體 D、核受體8、動物細胞中cAMP的主要生物學(xué)功能是活化( A )。A、蛋白激酶C B、蛋白激酶A C、蛋白激酶K D、Ca2+激酶9、在G蛋白中,亞基的活性狀態(tài)是( A )。A、與GT
19、P結(jié)合,與分離 B、與GTP結(jié)合,與聚合C、 與GDP結(jié)合,與分離 D、 與GTP結(jié)合,與聚合五、簡答題1、簡述細胞信號分子的類型及特點?答案要點:細胞信號分子包括:短肽、蛋白質(zhì)、氣體分子(NO、CO)以及氨基酸、核苷酸、脂類的膽固醇衍生物等,其共同特點是:特異性,只能與特定的受體結(jié)合;高效性,幾個分子即可發(fā)生明顯的生物學(xué)效應(yīng),這一特性有賴于細胞的信號逐級放大系統(tǒng);可被滅活,完成信息傳遞后可被降解或修飾而失去活性,保證信息傳遞的完整性和細胞免于疲勞。2、 簡要說明由G蛋白偶聯(lián)的受體介導(dǎo)的信號的特點。答案要點:G蛋白偶聯(lián)的受體是細胞質(zhì)膜上最多,也是最重要的倍轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),具有兩個重要特點:信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系
20、統(tǒng)由三部分構(gòu)成:G蛋白偶聯(lián)的受體,是細胞表面由單條多肽鏈經(jīng)7次跨膜形成的受體;G蛋白能與GTP結(jié)合被活化,可進一步激活其效應(yīng)底物;效應(yīng)物:通常是腺苷酸環(huán)化酶,被激活后可提高細胞內(nèi)環(huán)腺苷酸(cAMP)的濃度,可激活cAMP依賴的蛋白激酶,引發(fā)一系列生物學(xué)效應(yīng)。產(chǎn)生第二信使。配體受體復(fù)合物結(jié)合后,通過與G蛋白的偶聯(lián),在細胞內(nèi)產(chǎn)生第二信使,從而將胞外信號跨膜傳遞到胞內(nèi),影響細胞的行為。根據(jù)產(chǎn)生的第二信使的不同,又可分為cAMP信號通路和磷酯酰肌醇信號通路。cAMP信號通路的主要效應(yīng)是激活靶酶和開啟基因表達,這是通過蛋白激酶完成的。該信號途徑涉及的反應(yīng)鏈可表示為:激素G蛋白偶聯(lián)受體G蛋白腺苷酸環(huán)化化酶
21、cAMP cAMP依賴的蛋白激酶A基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄。磷酯酰肌醇信號通路的最大特點是胞外信號被膜受體接受后,同時產(chǎn)生兩個胞內(nèi)信使,分別啟動兩個信號傳遞途徑即IP3Ca2+和DGPKC途徑,實現(xiàn)細胞對外界信號的應(yīng)答,因此,把這一信號系統(tǒng)又稱為“雙信使系統(tǒng)”。6、 論述題1、試論述Na+-K+泵的結(jié)構(gòu)及作用機理。答案要點:1、結(jié)構(gòu):由兩個亞單位構(gòu)成:一個大的多次跨膜的催化亞單位(亞基)和一個小的單次跨膜具組織特異性的糖蛋白(亞基)。前者對Na+和ATP的結(jié)合位點在細胞質(zhì)面,對K+的結(jié)合位點在膜的外表面。2、機制:在細胞內(nèi)側(cè),亞基與Na+相結(jié)合促進ATP水解,亞基上的一個天門冬氨酸殘基磷酸化引起亞
22、基的構(gòu)象發(fā)生變化,將Na+泵出細胞外,同時將細胞外的K+與亞基的另一個位點結(jié)合,使其去磷酸化,亞基構(gòu)象再度發(fā)生變化將K+泵進細胞,完成整個循環(huán)。Na+依賴的磷酸化和K+依賴的去磷酸化引起構(gòu)象變化有序交替發(fā)生。每個循環(huán)消耗一個ATP分子,泵出3個Na+和泵進2個K+。2、cAMP信號系統(tǒng)的組成及其信號途徑?答案要點:1、組成:主要包括:Rs和Gs;Ri和Gi;腺苷酸不化酶;PKA;環(huán)腺苷酸磷酸二酯酶。2、信號途徑主要有兩種調(diào)節(jié)模型:Gs調(diào)節(jié)模型,當激素信號與Rs結(jié)合后,導(dǎo)致Rs構(gòu)象改變,暴露出與Gs結(jié)合的位點,使激素-受體復(fù)合物與Gs結(jié)合,Gs的構(gòu)象發(fā)生改變從而結(jié)合GTP而活化,導(dǎo)致腺苷酸環(huán)化酶
23、活化,將ATP轉(zhuǎn)化為cAMP,而GTP水解導(dǎo)致G蛋白構(gòu)象恢復(fù),終止了腺苷酸環(huán)化酶的作用。該信號途徑為:激素識別并與G蛋白偶聯(lián)受體結(jié)合激活G蛋白活化腺苷酸環(huán)化酶胞內(nèi)的cAMP濃度升高激活PKA基因調(diào)控蛋白基因轉(zhuǎn)錄。Gi調(diào)節(jié)模型,Gi對腺苷酸環(huán)化酶的抑制作用通過兩個途徑:一是通過亞基與腺苷酸環(huán)化酶結(jié)合,直接抑制酶的活性;一是通過和亞基復(fù)合物與游離的Gs的亞基結(jié)合,阻斷Gs的亞基對腺苷酸酶的活化作用。第七章 細胞質(zhì)基質(zhì)與細胞內(nèi)膜系統(tǒng)一、名詞解釋1、細胞質(zhì)基質(zhì):真核細胞的細胞質(zhì)中除去細胞器和內(nèi)含物以外的、較為均質(zhì)半透明的液態(tài)膠狀物稱為細胞質(zhì)基質(zhì)或胞質(zhì)溶膠。2、微粒體:為了研究ER的功能,常需要分離ER
24、膜,用離心分離的方法將組織或細胞勻漿,經(jīng)低速離心去除核及線粒體后,再經(jīng)超速離心,破碎ER的片段又封合為許多小囊泡(直徑約為100nm),這就是微粒體。3、糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng):細胞質(zhì)內(nèi)有一些形狀大小略不相同的小管、小囊連接成網(wǎng)狀,集中在胞質(zhì)中,故稱為內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的外表面附有核糖體顆粒,則為糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),為蛋白質(zhì)合成的部位。核糖體附著的膜系多為扁囊單位成分,普遍存在于分泌蛋白質(zhì)的細胞中,其數(shù)量隨細胞而異,越是分泌旺盛的細胞中越多。6、溶酶體:溶酶體幾乎存在于所有的動物細胞中,是由單層膜圍繞、內(nèi)含多種酸性水解酶類、形態(tài)不一、執(zhí)行不同生理功能的囊泡狀細胞器,主要功能是進行細胞內(nèi)的消化作用,在維持細胞正常代謝
25、活動及防御方面起重要作用。8、蛋白質(zhì)分選:細胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開始合成,隨后或在細胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后,通過不同途徑轉(zhuǎn)運到細胞的特定部位并裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合體,參與細胞的生命活動的過程。又稱定向轉(zhuǎn)運。9、信號假說:1975年G.Blobel和D.Sabatini等根據(jù)進一步實驗依據(jù)提出,蛋白合成的位置是由其N端氨基酸序列決定的。他們認為:分泌蛋白在N端含有一信號序列,稱信號肽,由它指導(dǎo)在細胞質(zhì)基質(zhì)開始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜;多肽邊合成邊通過ER膜上的水通道進入ER腔。這就是“信號假說”。12、信號肽:分泌蛋白的N端序列,指導(dǎo)分泌性蛋白
26、到內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上合成,在蛋白合成結(jié)束前信號肽被切除。三、選擇題1、屬于溶酶體病的是( A )。A、臺薩氏病 B、克山病 C、白血病 D、貧血病2、真核細胞中,酸性水解酶多存在于( D )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、高爾基體 C、中心體 D、溶酶體3、真核細胞中合成脂類分子的場所主要是( A )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、高爾基體 C、核糖體 D、溶酶體4、被稱為細胞內(nèi)大分子運輸交通樞紐大細胞器是( B )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、高爾基體 C、中心體 D、溶酶體5、下列哪組蛋白質(zhì)的合成開始于胞液中,在糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成( C )。A、膜蛋白、核定位蛋白 B、分泌蛋白、細胞骨架C、膜蛋白、分泌蛋白 D、核定位蛋白、細胞骨架6、細
27、胞內(nèi)鈣的儲備庫是( B )。A、細胞質(zhì) B、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) C、高爾基體 D、溶酶體7、質(zhì)子膜存在于( C )。A、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上 B、高爾基體膜上 C、溶酶體膜上 D、過氧化物酶體膜上8、細胞核內(nèi)的蛋白質(zhì)主要通過( B )完成。A、跨膜運輸 B、門控運輸 C、膜泡運輸 D、由核膜上的核糖體合成五、簡答題1、信號假說的主要內(nèi)容是什么?答:分泌蛋白在N端含有一信號序列,稱信號肽,由它指導(dǎo)在細胞質(zhì)基質(zhì)開始合成的多肽和核糖體轉(zhuǎn)移到ER膜;多肽邊合成邊通過ER膜上的水通道進入ER腔,在蛋白合成結(jié)束前信號肽被切除。指導(dǎo)分泌性蛋白到糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上合成的決定因素是N端的信號肽,信號識別顆粒(SRP)和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜上的信號識別
28、顆粒受體(又稱停泊蛋白docking protein, DP)等因子協(xié)助完成這一過程。2、比較粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的形態(tài)結(jié)構(gòu)與功能?4、簡述細胞質(zhì)基質(zhì)的功能。:物質(zhì)中間代謝的重要場所;有細胞骨架的功能;蛋白質(zhì)的合成、修飾、降解和折疊。56、蛋白質(zhì)糖基化的基本類型、特征及生物學(xué)意義?7、已知的膜泡運輸有哪幾種類型?各自主要功能如何?六、論述題1、何為蛋白質(zhì)分選?細胞內(nèi)蛋白質(zhì)分選的基本途徑、分選類型是怎樣的?答案要點:蛋白質(zhì)的分選:細胞中絕大多數(shù)蛋白質(zhì)均在細胞質(zhì)基質(zhì)中的核糖體上開始合成,隨后或在細胞質(zhì)基質(zhì)中或轉(zhuǎn)至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上繼續(xù)合成,然后,通過不同途徑轉(zhuǎn)運到細胞的特定部位并裝配成結(jié)構(gòu)與功能的復(fù)合
29、體,參與細胞的生命活動的過程。又稱定向轉(zhuǎn)運。細胞中蛋白質(zhì)都是在核糖體上合成的,并都是起始于細胞質(zhì)基質(zhì)中?;就緩剑阂粭l是在細胞質(zhì)基質(zhì)中完成多肽鏈的合成,然后轉(zhuǎn)運至膜圍繞的細胞器,如線粒體、葉綠體、過氧化物酶體、細胞核及細胞質(zhì)基質(zhì)的特定部位,有些還可轉(zhuǎn)運至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中;另一條途徑是蛋白質(zhì)合成起始后轉(zhuǎn)移至糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),新生肽邊合成邊轉(zhuǎn)入糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔中,隨后經(jīng)高爾基體轉(zhuǎn)運至溶酶體、細胞膜或分泌到細胞外,內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體本身的蛋白成分的分選也是通過這一途徑完成的。蛋白質(zhì)分選的四種基本類型:1、蛋白質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運:主要指在細胞質(zhì)基質(zhì)合成的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運至內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體、葉綠體和過氧化物酶體等細胞器。2、膜泡運輸:蛋
30、白質(zhì)通過不同類型的轉(zhuǎn)運小泡從其糙面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成部位轉(zhuǎn)運至高爾基體進而分選運至細胞不同的部位。3、選擇性的門控轉(zhuǎn)運:指在細胞質(zhì)基質(zhì)中合成的蛋白質(zhì)通過核孔復(fù)合體選擇性地完成核輸入或從細胞核返回細胞質(zhì)。4、細胞質(zhì)基質(zhì)中的蛋白質(zhì)的轉(zhuǎn)運第九章 細胞骨架一、名詞解釋1、細胞骨架:由微管、微絲和中間絲組成的蛋白網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),具有為細胞提供結(jié)構(gòu)支架、維持細胞形態(tài)、負責細胞內(nèi)物質(zhì)和細胞器轉(zhuǎn)運和細胞運動等功能。3、微管;在真核細胞質(zhì)中,由微管蛋白構(gòu)成的,可形成紡錘體、中心體及細胞特化結(jié)構(gòu)鞭毛和纖毛的結(jié)構(gòu)。4、微絲;在真核細胞的細胞質(zhì)中,由肌動蛋白和肌球蛋白構(gòu)成的,可在細胞形態(tài)的支持及細胞肌性收縮和非肌性運動等方面起重要
31、作用的結(jié)構(gòu)。5、中間纖維;存在于真核細胞質(zhì)中的,由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,其直徑介于微管和微絲之間,在支持細胞形態(tài)、參與物質(zhì)運輸?shù)确矫嫫鹬匾饔玫睦w維狀結(jié)構(gòu)。6、微管組織中心(MTOC);存在于真核細胞質(zhì)中的,由蛋白質(zhì)構(gòu)成的,其直徑介于微管和微絲之間,在支持細胞形態(tài)、參與物質(zhì)運輸?shù)确矫嫫鹬匾饔玫睦w維狀結(jié)構(gòu)。7、肌球蛋白;依賴于維絲的分子馬達。8、分子馬達;主要是指依賴于圍觀的驅(qū)動蛋白、動力蛋白和依賴于維斯的肌球蛋白。三、選擇題1、細胞骨架是由哪幾種物質(zhì)構(gòu)成的(D )。A、糖類 B、脂類 C、核酸 D、蛋白質(zhì) E.以上物質(zhì)都包括2.下列哪種結(jié)構(gòu)不是由細胞中的微管組成( D )。A、鞭毛 B、纖毛 C、中
32、心粒 D、內(nèi)質(zhì)網(wǎng) E、以上都不是3.關(guān)于微管的組裝,哪種說法是錯誤的( E )。A、微管可隨細胞的生命活動不斷的組裝與去組裝 B、微管的組裝分步進行C.微管的極性對微管的增長有重要意義D、微管蛋白的聚合和解聚是可逆的自體組裝過程 E、微管兩端的組裝速度是相同的4.在電鏡下可見中心粒的每個短筒狀小體( C )。A、由9組二聯(lián)微管環(huán)狀斜向排列 B、由9組單管微管環(huán)狀斜向排列C、由9組三聯(lián)微管環(huán)狀斜向排列 D、由9組外圍微管和一個中央微管排列E、由9組外圍微管和二個中央微管排列5、組成微絲最主要的化學(xué)成分是( A )。A、球狀肌動蛋白 B、纖維狀肌動蛋白 C、原肌球蛋白 D、肌鈣蛋白 E、錨定蛋白6
33、、能夠?qū)R灰种莆⒔z組裝的物質(zhì)是( B )。A、秋水仙素 B、細胞松弛素B C、長春花堿 D、鬼筆環(huán)肽 E、Mg+7.在非肌細胞中,微絲與哪種運動無關(guān)( C )。A、支持作用 B、吞噬作用 C、主動運輸 D、變形運動 E、變皺膜運動8、在微絲的組成成分中,起調(diào)節(jié)作用的是( A )。A、原肌球蛋白 B、肌球蛋白 C、肌動蛋白 D、絲狀蛋白 E、組帶蛋白五、簡答題1、微絲的化學(xué)組成及在細胞中的功能。微絲的化學(xué)組成:主要成分為肌動蛋白和肌球蛋白,肌球蛋白起控制微絲的形成、連接、蓋帽、切斷的作用,也可影響微絲的功能。其他成分為調(diào)節(jié)蛋白、連接蛋白、交聯(lián)蛋白。微絲的功能:(1)與微管共同組成細胞的骨架,維持
34、細胞的形狀。(2)具有非肌性運動功能,與細胞質(zhì)運動、細胞的變形運動、胞吐作用、細胞器與分子運動、細胞分裂時的膜縊縮有關(guān)。(3)具有肌性收縮作用(4)與其他細胞器相連,關(guān)系密切。(5)參與細胞內(nèi)信號傳遞和物質(zhì)運輸。2、 什么是微管組織中心,它與微管有何關(guān)系。答:微管組織中心是指微管裝配的發(fā)生處。它可以調(diào)節(jié)微管蛋白的聚合和解聚,使微管增長或縮短。而微管是由微管蛋白組成的一個結(jié)構(gòu)。二者有很大的不同,但又有十分密切的關(guān)系。微管組織中心可以指揮微管的組裝與去組裝,它可以根據(jù)細胞的生理需要,調(diào)節(jié)微管的活動。如在細胞有絲分裂前期,根據(jù)染色體平均分配的需要,從微管組織中心:中心粒和染色體著絲粒處進行微管的裝配
35、形成紡錘體,到分裂末期,紡錘體解聚成微管蛋白。所以說,微管組織中心是微管活動的指揮3、 簡述中間纖維的結(jié)構(gòu)及功能。答:中間纖維的直徑約712nm的中空管狀結(jié)構(gòu),由4或8個亞絲組成。單獨或成束存在于細胞中。中間纖維具有一個較穩(wěn)定的310個氨基酸的螺旋組成的桿狀中心區(qū),桿狀區(qū)兩端為非螺旋的頭部區(qū)(N端)和尾部區(qū)(C端)。頭部區(qū)和尾部區(qū)由不同的氨基酸構(gòu)成,為高度可變區(qū)域。功能:(1)支持和固定作用:支持細胞形態(tài),固定細胞核。(2)物質(zhì)運輸和信息傳遞作用:在細胞質(zhì)中與微管、微絲共同完成物質(zhì)的運輸,在細胞核內(nèi),與DNA的復(fù)制和轉(zhuǎn)錄有關(guān)。(3)細胞分裂時,對紡錘體和染色體起空間支架作用,負責子細胞內(nèi)細胞器
36、的分配與定位。(4)在細胞癌變過程中起調(diào)控作用。六、論述題1、比較微管、微絲和中間纖維的異同。答:微管、微絲和中間纖維的相同點:(1)在化學(xué)組成上均由蛋白質(zhì)構(gòu)成。(2)在結(jié)構(gòu)上都是纖維狀,共同組成細胞骨架。(30在功能都可支持細胞的形狀;都參與細胞內(nèi)物質(zhì)運輸和信息的傳遞;都能在細胞運動和細胞分裂上發(fā)揮重要作用。微管、微絲和中間纖維的不同點:(1)在化學(xué)組成上均由蛋白質(zhì)構(gòu)成,但三者的蛋白質(zhì)的種類不同,而且中等纖維在不同種類細胞中的基本成分也不同。(2)在結(jié)構(gòu)上,微管和中間纖維是中空的纖維狀,微絲是實心的纖維狀。微管的結(jié)構(gòu)是均一的,而中等纖維結(jié)構(gòu)是為中央為桿狀部,兩側(cè)為頭部或尾部。(3)功能不同:
37、微管可構(gòu)成中心粒、鞭毛或纖毛等重要的細胞器和附屬結(jié)構(gòu),在細胞運動時或細胞分裂時發(fā)揮作用:微絲在細胞的肌性收縮或非肌性收縮中發(fā)揮作用,使細胞更好的執(zhí)行生理功能;中等纖維具有固定細胞核作用,行使子細胞中的細胞器分配與定位的功能,還可能與DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄有關(guān)。總之,微管、微絲和中間纖維是真核細胞內(nèi)重要的非膜相結(jié)構(gòu),共同擔負維持細胞形態(tài),細胞器位置的固定及物質(zhì)和信息傳遞重要功能。2、試述微管的化學(xué)組成、類型和功能。答;微管的化學(xué)組成:主要化學(xué)成分為微管蛋白,為酸性蛋白。其他化學(xué)成分為微管結(jié)合蛋白包括為微管相關(guān)蛋白、微管修飾蛋白、達因蛋白。微管的類型:單微管、二聯(lián)管、三聯(lián)管。微管的功能:(1)構(gòu)成細胞
38、的網(wǎng)狀支架,維持細胞的形態(tài)。(2)參與細胞器的分布與運動,固定支持細胞器的位置(3)參與細胞收縮和偽足運動,是鞭毛纖毛等細胞運動器官的基本組成成分。(4)參與細胞分裂時染色體的分離和位移。(5)參與細胞物質(zhì)運輸和傳遞。 第 十章 細胞核與染色體一、名詞解釋1、染色體 ;是細胞在有絲分裂或減數(shù)分裂過程中,由染色質(zhì)聚縮而成的棒狀結(jié)構(gòu),是細胞分裂期遺傳物質(zhì)存在的特定形式。2、染色質(zhì);指間期細胞核內(nèi)能被堿性物質(zhì)染色的,由DNA、組蛋白、非組蛋白及少量RNA組成的線性復(fù)合結(jié)構(gòu),是間期細胞遺傳物質(zhì)的存在形式。常伸展為非光鏡所能看到的網(wǎng)狀細纖絲。3、常染色質(zhì) ;間期核內(nèi)染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低,處于伸展狀態(tài)
39、,用堿性染料染色時著色淺的染色質(zhì)組分。4、異染色質(zhì);間期核內(nèi)染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高,處于聚縮狀態(tài),用堿性染料染色時著色深的染色質(zhì)組分5、核小體 ;染色體的基本結(jié)構(gòu)單位,是由組蛋白和200個堿基對的DNA雙螺旋組成的球形小體,其核心由四種組蛋白(H2A、H2B、H3、H4)各兩分子共8分子組成的八聚體,核心的外面纏繞了1.75圈的DNA雙螺旋,其進出端結(jié)合有H1組蛋白分子。6、核型 ;即細胞分裂中期染色體特征的總和。包括染色體的數(shù)目、大小和形態(tài)特征等方面 7、核型分析 ;8、核定位信號 ;親核蛋白一般都含有特殊的氨基酸序列,這些內(nèi)含的特殊短肽保證了整個蛋白質(zhì)能夠通過核孔復(fù)合體被轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi)。
40、這段具有“定向”“定位”作用的序列被命名為核定位序列或核定位信號(親核蛋白的特殊氨基酸序列,具有定向、定位的作用,保證蛋白質(zhì)能夠通過核孔復(fù)合體轉(zhuǎn)運到細胞核內(nèi))。9、端粒;位于每條染色體端部,為染色體端部的異染色質(zhì)結(jié)構(gòu),由高度重復(fù)的DNA序列構(gòu)成,高度保守。主要功能是維持染色體穩(wěn)定,防止末端粘連和重組,并能錨定染色體于細胞核內(nèi),輔助線性DNA復(fù)制等,與染色體在核內(nèi)的空間排布及減數(shù)分裂時同源染色體配對有關(guān);起著細胞計時器的作用.三、選擇題1、真核細胞間期核中最顯著的結(jié)構(gòu)是( C )。A、染色體 B、染色質(zhì) C、核仁 D、核纖層3、每個核小體基本單位包括多少個堿基是(B )。A 、100bp B、
41、200bp C、300bp D、 400bp2、從氨基酸序列的同源比較上看,核纖層蛋白屬于( C )。A、微管 B、微絲 C、中間纖維 D、核蛋白骨架3、細胞核被膜常常與胞質(zhì)中的( B )相連通。A、光面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) B、粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng) C、高爾基體 D、溶酶體4、下面有關(guān)核仁的描述錯誤的是( D )。A、核仁的主要功能之一是參與核糖體的生物合成 B、rDNA定位于核仁區(qū)內(nèi)C、細胞在M期末和S期重新組織核仁 D、細胞在G2期,核仁消5、下列( A )組蛋白在進化上最不保守。A、H1 B、H2A C、H3 D、H46、構(gòu)成染色體的基本單位是( B )。A、DNA B、核小體 C、螺線管 D、超螺線管7、染
42、色體骨架的主要成分是( B )。A、組蛋白 B、非組蛋白 C、DNA D、RNA8、異染色質(zhì)是( B )。A、高度凝集和轉(zhuǎn)錄活躍的 B、高度凝集和轉(zhuǎn)錄不活躍的C、松散和轉(zhuǎn)錄活躍的 D、松散和轉(zhuǎn)錄不活躍的五、簡答題1、簡述細胞核的基本結(jié)構(gòu)及其主要功能。、細胞核是真核細胞內(nèi)最大、最重要的細胞器,主要由核被膜、染色質(zhì)、核仁及由非組蛋白質(zhì)組成的網(wǎng)絡(luò)狀的核基質(zhì)組成,是遺傳信息的貯存場所,是細胞內(nèi)基因復(fù)制和RNA轉(zhuǎn)錄的中心,是細胞生命活動的調(diào)控中心2、簡述染色質(zhì)的類型及其特征。間期染色質(zhì)按其形態(tài)特征和染色性能區(qū)分為兩種類型:常染色質(zhì)和染色質(zhì)染色質(zhì)。常染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度低,處于伸展狀態(tài),用堿性染料染色時
43、著色淺。構(gòu)成常染色質(zhì)的DNA主要是單一序列DNA和中度重復(fù)序列DNA。異染色質(zhì)纖維折疊壓縮程度高, 處于聚縮狀態(tài),用堿性染料染色時著色較深,又分結(jié)構(gòu)異染色質(zhì)或組成型異染色質(zhì)和兼性異染色質(zhì)。3、簡述核仁的結(jié)構(gòu)及其功能。在光學(xué)顯微鏡下,核仁通常是勻質(zhì)的球形小體,一般有1-2個,但也有多個。主要含蛋白質(zhì),是真核細胞間期核中最明顯的結(jié)構(gòu),在電鏡下顯示出的核仁超微結(jié)構(gòu)與胞質(zhì)中大多數(shù)細胞器不同,在核仁周圍沒有界膜包圍,可識別出3個特征性區(qū)域:纖維中心、致密纖維組分、顆粒組分。功能是進行核蛋白體的生物發(fā)生的重要場所,即核仁是進行rRNA的合成、加工和核蛋白體亞單位的裝配的重要場所。5、組蛋白如何參與表觀遺傳
44、調(diào)控?組蛋白修飾主要包括甲基化、乙?;?、磷酸化等。其參與調(diào)控的方式主要包括:1,改變空間結(jié)構(gòu),因為基因平時是以染色體形式存在的,在轉(zhuǎn)錄時需要通過組蛋白的改變打開,放轉(zhuǎn)錄因子進入。2,作用于特定轉(zhuǎn)錄元件。3,和DNA甲基化進行相互作用,來調(diào)控表達變化。六、論述題1、試述核孔復(fù)合體的結(jié)構(gòu)及其功能。核孔復(fù)合體主要有下列結(jié)構(gòu)組分:、胞質(zhì)環(huán)位于核孔邊緣的胞質(zhì)面一側(cè),又稱外環(huán),環(huán)上有8條短纖維對稱分布伸向胞質(zhì);、核質(zhì)環(huán)位于核孔邊緣的核質(zhì)面(又稱內(nèi)環(huán)),環(huán)上8條纖維伸向核內(nèi),并且在纖維末端形成一個小環(huán),使核質(zhì)環(huán)形成類似“捕魚籠”(fish-trap)的核籃(nuclear basket)結(jié)構(gòu);、輻由核孔邊緣
45、伸向核孔中央,呈輻射狀八重對稱,該結(jié)構(gòu)連接內(nèi)、外環(huán)并在發(fā)揮支撐及形成核質(zhì)間物質(zhì)交換通道等方面起作用;它的結(jié)構(gòu)比較復(fù)雜,可進一步分為三個結(jié)構(gòu)域:柱狀亞單位:主要的區(qū)域,位于核孔邊緣,連接內(nèi)、外環(huán),起支撐作用;腔內(nèi)亞單位:柱狀亞單位以外,接觸核膜部分的區(qū)域,穿過核膜伸入雙層核膜的膜間腔;環(huán)帶亞單位:在柱狀亞單位之內(nèi),靠近核孔復(fù)合體中心的部分,由8個顆粒狀結(jié)構(gòu)環(huán)繞形成核孔復(fù)合體核質(zhì)交換的通道。、中央栓位于核孔的中心,呈顆粒狀或棒狀,又稱為中央顆粒,由于推測它在核質(zhì)交換中起一定的作用,所以又把它稱做轉(zhuǎn)運器(transporter)核孔復(fù)合體是一種特殊的跨膜運輸?shù)鞍讖?fù)合體,并且是一個雙功能、雙向性的親水
46、性核質(zhì)交換通道,雙功能表現(xiàn)在它有兩種運輸方式:被動擴散與主動運輸;雙向性表現(xiàn)在既介導(dǎo)蛋白質(zhì)的入核轉(zhuǎn)運,又介導(dǎo)RNA、核糖核蛋白顆粒(RNP)的出核轉(zhuǎn)運。2、試述核小體的結(jié)構(gòu)要點及其實驗證據(jù)。結(jié)構(gòu)要點:每個核小體單位包括200bp左右的DNA超螺旋和一個組蛋白八聚體及一個分子H1。、組蛋白八聚體構(gòu)成核小體的盤狀核心結(jié)構(gòu),由4個異二聚體組成,包括兩個H2A-H2B和兩個H3-H4。兩個H3-H4形成4聚體位于核心顆粒中央,兩個H2A-H2B二聚體分別位于4聚體兩側(cè)。每個異二聚體通過離子鍵和氫鍵結(jié)合約30bp DNA。、146bp的DNA分子超螺旋盤繞組蛋白八聚體1.75圈, 組蛋白H1在核心顆粒外
47、結(jié)合額外20bp DNA,鎖住核小體DNA的進出端,起穩(wěn)定核小體的作用。包括組蛋白H1和166bp DNA的核小體結(jié)構(gòu)又稱染色質(zhì)小體。、兩個相鄰核小體之間以連接DNA 相連,典型長度60bp,不同物種變化值為080bp。實驗證據(jù):a、用溫和的方法裂解細胞核,鋪展染色質(zhì),電鏡觀察未經(jīng)處理的染色質(zhì)自然結(jié)構(gòu)為30nm的纖絲,經(jīng)鹽溶液處理后解聚的染色質(zhì)呈現(xiàn)10nm串珠狀結(jié)構(gòu)。b、用非特異性微球菌核酸酶消化染色質(zhì),經(jīng)過蔗糖梯度離心及瓊脂糖凝膠電泳分析,發(fā)現(xiàn)絕大多數(shù)DNA被降解成約200bp的片段;部分酶解,則得到的片段是以200bp不單位的單體、二體(400bp)、三體(600bp)等等。如果用同樣的方
48、法處理裸露的DNA,則產(chǎn)生隨機大小的片段群體,由此顯示染色體DNA除某些周期性位點之外,均受到某種結(jié)構(gòu)的保護,避免酶的接近。c、應(yīng)用X射線衍射、中子散射和電鏡三維重建技術(shù)研究,發(fā)現(xiàn)核小體顆粒是直徑為11nm、高6.0nm的扁園柱體,具有二分對稱性,核心組蛋白的構(gòu)成是先形成(H3)2(H4)2四聚體,然后再與兩個H2AH2B異二聚體結(jié)合形成八聚體。d、SV40微小染色體(minichromosome)分析與電鏡觀察:用SV40病毒感染細胞,病毒DNA進入細胞后,與宿主的組蛋白結(jié)合,形成串珠狀微小染色體,電鏡觀察到SV40DNA為環(huán)狀,周長為1500nm,約含5.0kb。若200bp相當于一個核小
49、體,則可形成25個核小體,實際觀察到23個,與推斷基本一致。3、試述從DNA到染色體的包裝過程(多級螺旋模型)。、 a、由DNA與組蛋白包裝成核小體,在組蛋白H1的介導(dǎo)下核小體彼此連接形成直徑約10nm的核小體串珠結(jié)構(gòu),這是染色質(zhì)包裝的一級結(jié)構(gòu);b、在有組蛋白H1存在的情況下,由直徑10nm的核小體串珠結(jié)構(gòu)螺旋盤繞,每圈6個核小體,形成外徑30nm,內(nèi)徑10nm,螺距11nm的螺線管。螺線管是染色質(zhì)包裝的二級結(jié)構(gòu)。C、螺線管進一步螺旋化形成直徑為0.4um的圓筒狀結(jié)構(gòu),稱為超螺線管,這是染色質(zhì)包裝的三級結(jié)構(gòu)。d、超螺線管進一步折疊、壓縮,形成長2-10um的染色單體,即四級結(jié)構(gòu)。 壓縮7倍 b
50、 壓縮6倍 壓縮40倍 壓縮5倍DNA 核小體 螺線管 超螺線管 染色單體(200bp長約70nm) (直徑約10nm) (直徑30nm,螺距11nm) (直徑400nm長1160um)(長210um)第十二章 細胞增殖及其調(diào)控一、名詞解釋 1、細胞周期:連續(xù)分裂的細胞,從上一次有絲分裂結(jié)束開始到下一次有絲分裂結(jié)束所經(jīng)歷的整個過程。在這個過程中,細胞遺傳物質(zhì)復(fù)制,各組分加倍,平均分配到兩個子細胞中。2、細胞周期檢驗點:在細胞內(nèi)存在一系列的監(jiān)控機制,可以鑒別細胞周期進程中的錯誤,并誘導(dǎo)產(chǎn)生特異的抑制因子,阻止細胞周期的進行,這些監(jiān)控機制稱為檢驗點。不僅存在于G1期,也存在于細胞周期的其他時期。3
51、、細胞同步化:在自然過程中發(fā)生的或因研究工作的需要,為得到具有分裂能力且細胞時相一致的細胞群體的方法。 4、染色體的早期凝集:將細胞同步化在細胞周期的不同時期,通過細胞融合,將M期細胞與其他間期細胞融合后培養(yǎng)一段時間,與M期細胞融合的間期細胞發(fā)生了形態(tài)各異的染色體凝集現(xiàn)象。5、MPF(細胞促分裂因子):又稱促成熟因子或M期促進因子,是指存在于成熟卵細胞的細胞質(zhì)中,可以誘導(dǎo)卵細胞成熟的一種活性物質(zhì)。已經(jīng)證明,MPF是一種蛋白激酶,包括兩個亞基即Cdc2蛋白和周期蛋白,當二者結(jié)合后表現(xiàn)出蛋白激酶活性,可以使多種蛋白質(zhì)底物磷酸化;MPF是一種普遍存在的、進化上較保守的G2/M轉(zhuǎn)換調(diào)控者。6、周期中細
52、胞:又稱周期細胞或連續(xù)分裂的細胞,是指在細胞周期中連續(xù)運轉(zhuǎn)不斷分裂,保持分裂能力的細胞。7、靜止期細胞:又稱G0期細胞或靜止期細胞,是指暫時脫離細胞周期不進行增殖,但在適當?shù)拇碳は?,可重新進入細胞周期的細胞。8、細胞周期蛋白:與細胞周期調(diào)控有關(guān)的、其含量隨細胞周期進程變化而變化的特殊蛋白質(zhì)。最初在海膽卵中發(fā)現(xiàn),一般在細胞間期內(nèi)積累,在細胞分裂期內(nèi)消失,在下一個細胞周期又重復(fù)這一消長現(xiàn)象,即在每一輪間期合成,G2/M時達到高峰,M期結(jié)束時被水解,下一輪周期又重新合成積累。已經(jīng)證明周期蛋白廣泛存在于各種真核生物中,是誘導(dǎo)細胞進入M期必需的,說明周期蛋白是細胞周期的調(diào)控者,可能參與了MPF功能的調(diào)節(jié)
53、,是MPF的一部分。 13、細胞分裂周期基因:是指與細胞分裂和細胞周期有關(guān)的基因,稱為cdc基因。 10、CDK抑制因子(CKI):是細胞內(nèi)存在的一些對CDK激酶活性起負調(diào)作用的蛋白質(zhì)。它是能與CDK激酶結(jié)合并抑制其活性的一類蛋白質(zhì),具有確保細胞周期高度時序性的功能,在細胞周期的負調(diào)控過程中起著重要作用。11、周期蛋白依賴性激酶(CDK):是與細胞周期進程相對應(yīng)的一套Ser/Thr激酶系統(tǒng)。各種CDK沿細胞周期時相交替活化,磷酸化相應(yīng)底物,使細胞周期事件有條不紊地進行下去。12、DNA合成阻斷法:通過使用DNA合成抑制劑,特異性地抑制DNA的合成,將細胞阻斷在G1/S交界處的細胞同步化方法。1
54、3、中期阻斷法:經(jīng)過藥物處理,抑制微管的形成,從而抑制有絲分裂器的形成,將細胞阻斷在細胞分裂中期的同步化方法。16、 轉(zhuǎn)錄因子E2F 它調(diào)控的基因有周期蛋白E和A,它們與CDK2結(jié)合復(fù)合物是使細胞從G1進入S期轉(zhuǎn)變所必須的。 17、 p53:腫瘤抑制基因,在DNA受到損傷時,它通過激活和抑制基因的轉(zhuǎn)錄,而起著阻斷細胞周期和誘導(dǎo)細胞凋亡的作用。8、細胞周期中重要的檢驗點包括 R點 、 G1/S 、 G2/M 和 中期/后期 。三、選擇題1、在細胞分裂中期與紡錘體的動粒微管相連,保證染色體平均分配到兩個子細胞中的結(jié)構(gòu)是( D )。A、復(fù)制源 B、著絲粒 C、端粒 D、動粒2、關(guān)于細胞周期限制點的表述,錯誤的是( A )。A、限制點對正常細胞周期運轉(zhuǎn)并不是必需的B、它的作用是細胞遇到環(huán)境壓力或DNA受到損傷時使細胞周期停止的剎車作用,對細胞進入下一期之前進行“檢查”。C、細胞周期有四個限制
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