1、課題1 菊花的組織培養(yǎng),通過(guò)必修課的學(xué)習(xí)，我們已經(jīng)了解到大多綠色開(kāi)花植物都是靠種子來(lái)繁殖的。那么，有沒(méi)有不用種子來(lái)培育植物的方法呢？,組織培養(yǎng),扦插,嫁接,壓條,植物組織培養(yǎng)是二十世紀(jì)發(fā)展起來(lái)的新技術(shù)，近三十年來(lái)由于組織培養(yǎng)基礎(chǔ)理論研究的深入，發(fā)展極為迅速，發(fā)表的文獻(xiàn)浩如煙海，幾乎以植物為研究對(duì)象的各個(gè)分支學(xué)科都在廣泛進(jìn)行組織培養(yǎng)。,植物組織培養(yǎng)簡(jiǎn)介,發(fā)展簡(jiǎn)史,1838-1839年，德國(guó)科學(xué)家Schleide 和Schwann發(fā)表了細(xì)胞學(xué)說(shuō)，奠定了組織培養(yǎng)的理論基礎(chǔ)。1902年，德國(guó)植物學(xué)家Haberlandt 根據(jù)細(xì)胞學(xué)說(shuō)，提出單個(gè)細(xì)胞的植物細(xì)胞全能性（totipotency）理論。1904

2、年，Hanning 最先成功地培養(yǎng)了蘿卜和辣根菜的胚。1922年，Knudson 采用胚培養(yǎng)法獲得大量蘭花幼苗。1934年，White 用番茄根尖建立起第一個(gè)活躍生長(zhǎng)的無(wú)性繁殖系，從而使非胚器官的培養(yǎng)首先獲得成功。1958年，英國(guó)科學(xué)家Steward 等用胡蘿卜根的愈傷組織細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)，成功誘導(dǎo)出胚狀體并分化為完整的小植株，不但使細(xì)胞全能性理論得到證實(shí)，而且為組織培養(yǎng)的技術(shù)程序奠定了基礎(chǔ)。 1962年，Murashinge 和Skoog 在煙草培養(yǎng)中篩選出至今仍被廣泛使用的MS培養(yǎng)基。1964-1966年，印度科學(xué)家Guha 和Maheswari 在曼陀羅花藥培養(yǎng)中首次由花粉誘導(dǎo)得到了單倍

3、體植株。1972年，Carlson 通過(guò)兩個(gè)種的煙草原生質(zhì)體融合培養(yǎng)，獲得了第一個(gè)體細(xì)胞雜交的雜種植株。,外植體滅菌與接種操作,是指在人工培養(yǎng)基上，離體培養(yǎng)植物的器官、組織、細(xì)胞和原生質(zhì)體，并使其生長(zhǎng)、增殖、分化以及再生植株的技術(shù)。,組織培養(yǎng),1、植物組織培養(yǎng)的原理是什么？,植物細(xì)胞具有全能性，即生物體的細(xì)胞，具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的能力。,思考：,（一）植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程,植物組織培養(yǎng)過(guò)程示意圖,2、上面的示意圖中還有什么地方不夠完善的？,沒(méi)有進(jìn)行滅菌處理，試管也沒(méi)有做密封等。,3、結(jié)合錄像外植體滅菌與接種操作，談?wù)劷M織培養(yǎng)污染的主要途徑及怎樣預(yù)防污染？,污染的預(yù)防措施,（一）防止外

4、植體帶菌 （二）保證培養(yǎng)基及接種器具徹底滅菌 （三）操作人員嚴(yán)格遵守?zé)o菌操作規(guī)程 （四）保證接種與培養(yǎng)環(huán)境清潔,離體的植物器官、組織、細(xì)胞,脫分化,愈傷組織,再分化,根 芽,植物體,植物組織培養(yǎng)的基本過(guò)程,愈傷組織,（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素,植物組織培養(yǎng)條件,含有全部營(yíng)養(yǎng)成分的培養(yǎng)基、一定的溫度、空氣、無(wú)菌環(huán)境、適合的PH、適時(shí)光照等。,MS固體培養(yǎng)基成分及比例,微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營(yíng)養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)，無(wú)機(jī)鹽混合物包括植物生長(zhǎng)必須的大量元素和微量元素兩大類。,閱讀課文，思考以下問(wèn)題,1. 同微生物培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？,2、你

5、認(rèn)為組織培養(yǎng)過(guò)程中，成功的關(guān)鍵有哪些？這些步驟的適宜條件是什么？,組織的脫分化及愈傷組織的再分化。,植物組織培養(yǎng)過(guò)程中，影響植物細(xì)胞脫分化、再分化的最重要因素是植物激素，細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素之間的濃度比可以調(diào)控植株組培過(guò)程中芽和根的形成。,激素配比對(duì)組織培養(yǎng)的影響,生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例決定著發(fā)育的方向，是愈傷組織、長(zhǎng)根還是長(zhǎng)芽。如為了促進(jìn)芽器官的分化，應(yīng)除去或降低生長(zhǎng)素的濃度，或者調(diào)整培養(yǎng)基中生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素的比例。 高 利于根和愈傷組織的形成 生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素 適中 利于根芽的分化 低 利于芽的形成,同常規(guī)的無(wú)性繁殖方法相比，組織培養(yǎng)快速繁殖法主要具有以下優(yōu)點(diǎn)： （1）快速。 采用常規(guī)

6、的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株，但用組織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬(wàn)甚至數(shù)百萬(wàn)的小植株。 （2）周年生產(chǎn)。花卉組織培養(yǎng)快速繁殖是在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，因條件可控，所以不受季節(jié)限制，可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無(wú)性繁殖則受季節(jié)限制，只能在花卉生長(zhǎng)季節(jié)進(jìn)行繁殖。 （3）經(jīng)濟(jì)效益高?；ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖所需要的空間小，在一個(gè)200平方米的培養(yǎng)室內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬(wàn)株。如按每株1元計(jì)算，每年產(chǎn)值上百萬(wàn)元。 （4）以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因。所以使用這項(xiàng)技術(shù)可讓優(yōu)良的品種不斷地延續(xù)。,組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點(diǎn)眾多,試評(píng)價(jià)下列操作正確與否,本課題內(nèi)容小結(jié),菊花組織培養(yǎng),基礎(chǔ)知識(shí),實(shí)驗(yàn)操作,植物體的組織培養(yǎng),影響組織培養(yǎng)的因素,細(xì)胞分化 細(xì)胞全能性 組織培養(yǎng)過(guò)程,營(yíng)養(yǎng) 激素 環(huán)境條件,MS