016食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并(a)016 前 言本標(biāo)準(zhǔn)代替G B / T 5 0 0 9 2 0 0 3 食品中苯并( a )芘的測定 、 G B / T 2 2 5 0 9 2 0 0 8 動(dòng)植物油脂 苯并( a )芘的測定 反相高效液相色譜法 、 S C / T 3 0 4 1 2 0 0 8 水產(chǎn)品中苯并( a )芘的測定 高效液相色譜法和N Y / T 1 6 6 6 2 0 0 8 肉制品中苯并( a )芘的測定 高效液相色譜法 。本標(biāo)準(zhǔn)與G B / T 5 0 0 9 2 0 0 3 、 G B / T 2 2 5 0 9 2 0 0 8 、 S C / T 3 0 4 1 2 0 0 8和N Y / T 1 6 6 6 2 0 0 8相比,主要變化如下: 標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中苯并( a )芘的測定” ; 修改了方法的適用范圍; 修改了樣品前處理方法; 刪除了熒光分光光度法與目測比色法。0161 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中苯并(a)芘的測定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中苯并( a )芘的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于谷物及其制品(稻谷、糙米、大米、小麥、小麥粉、玉米、玉米面、玉米渣、玉米片) 、肉及肉制品(熏、燒、烤肉類) 、水產(chǎn)動(dòng)物及其制品(熏、烤水產(chǎn)品) 、油脂及其制品中苯并( a )芘的測定。2 原理試樣經(jīng)過有機(jī)溶劑提取,中性氧化鋁或分子印跡小柱凈化,濃縮至干,乙腈溶解,反相液相色譜分離,熒光檢測器檢測,根據(jù)色譜峰的保留時(shí)間定性,外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為G B / T 6 6 8 2規(guī)定的一級(jí)水。苯( C 7 H 8 ) :色譜純。腈( C H 3 C N ) :色譜純。己烷( C 6 H 1 4 ) :色譜純。氯甲烷( C H 2 C l 2 ) :色譜純。準(zhǔn)品苯并( a )芘標(biāo)準(zhǔn)品( C 2 0 H 1 2 , C A 5 0 - 3 2 - 8 ) :純度 9 9 ,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。警告苯并(a)芘是一種已知的致癌物質(zhì),測定時(shí)應(yīng)特別注意安全防護(hù)!測定應(yīng)在通風(fēng)柜中進(jìn)行并戴手套,盡量減少暴露。如已污染了皮膚,應(yīng)采用10%次氯酸鈉水溶液浸泡和洗刷,在紫外光下觀察皮膚上有無藍(lán)紫色斑點(diǎn),一直洗到藍(lán)色斑點(diǎn)消失為止。并( a )芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液( 1 0 0 g / m L ) :準(zhǔn)確稱取苯并( a )芘1 m g (精確到0 m g )于1 0 m 甲苯溶解,定容。避光保存在0 5 的冰箱中,保存期1年。并( a )芘標(biāo)準(zhǔn)中間液( 1 g / m L ) :吸取0 m a )芘標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液( 1 0 0 g / m L ) ,用乙腈定容到1 0 m L 。避光保存在0 5 的冰箱中,保存期1個(gè)月。并( a )芘標(biāo)準(zhǔn)工作液:把苯并( a )芘標(biāo)準(zhǔn)中間液( 1 g / m L )用乙腈稀釋得到0 .5 n g / m L 、 1 .0 n g /m L 、 5 .0 n g / m L 、 1 0 .0 n g / m L 、 2 0 .0 n g / m 用現(xiàn)配。0162 性氧化鋁柱:填料粒徑7 5 m 1 5 0 m , 2 2 g , 6 0 m L 。注:空氣中水分對(duì)其性能影響很大,打開柱子包裝后應(yīng)立即使用或密閉避光保存。由于不同品牌氧化鋁活性存在差異,建議對(duì)質(zhì)控樣品進(jìn)行測試,或做加標(biāo)回收試驗(yàn),以驗(yàn)證氧化鋁活性是否滿足回收率要求。并( a )芘分子印跡柱: 5 0 0 m g , 6 m L 。注:由于不同品牌分子印跡柱質(zhì)量存在差異,建議對(duì)質(zhì)控樣品進(jìn)行測試,或做加標(biāo)回收試驗(yàn),以驗(yàn)證是否滿足要求?？诪V膜: 0 m 。4 相色譜儀:配有熒光檢測器。析天平:感量為0 m m g 。碎機(jī)?？梽驖{機(jī)。心機(jī):轉(zhuǎn)速 4 0 0 0 r / m i n 。旋振蕩器。聲波振蕩器。轉(zhuǎn)蒸發(fā)器或氮?dú)獯蹈裳b置。相萃取裝置。5 樣制備、物及其制品預(yù)處理:去除雜質(zhì),磨碎成均勻的樣品,儲(chǔ)于潔凈的樣品瓶中,并標(biāo)明標(biāo)記,于室溫下或按產(chǎn)品包裝要求的保存條件保存?zhèn)溆?。提?稱取1 g (精確到0 1 g )試樣,加入5 m 渦混合0 .5 m i n , 4 0 下超聲提取1 0 m i n , 4 0 0 0 r / m i m i n ,轉(zhuǎn)移出上清液。再加入5 m 并上清液,用下列2種凈化方法之一進(jìn)行凈化。凈化方法1 :采用中性氧化鋁柱,用3 0 m 液面降至柱床時(shí),關(guān)閉底部旋塞。將待凈化液轉(zhuǎn)移進(jìn)柱子,打開旋塞,以1 m L / m i 轉(zhuǎn)入5 0 m 續(xù)收集凈化液。將凈化液在4 0 下旋轉(zhuǎn)蒸至約1 m L ,轉(zhuǎn)移至色譜儀進(jìn)樣小瓶,在4 0 氮?dú)饬飨聺饪s至近干。用1 m 洗滌液再次轉(zhuǎn)移至色譜儀進(jìn)樣小瓶并濃縮至干。準(zhǔn)確吸取1 m 旋復(fù)溶0 .5 m i n ,過微孔濾膜后供液相色譜測定。凈化方法2 :采用苯并( a )芘分子印跡柱,依次用5 m m 待凈化液轉(zhuǎn)移進(jìn)柱子,待液面降至柱床時(shí),用6 m 去流出液。用6 m 凈化液在4 0 下氮?dú)獯蹈?準(zhǔn)確吸取1 m 5 m i n ,過微孔濾膜后供液相色譜測定。、燒、烤肉類及熏、烤水產(chǎn)品預(yù)處理:肉去骨、魚去刺、貝去殼,把可食部分絞碎均勻,儲(chǔ)于潔凈的樣品瓶中,并標(biāo)明標(biāo)記,0163 - 1 6 - 1 8 冰箱中保存?zhèn)溆?。提?同5 1中提取部分。凈化方法1 :除了正己烷洗脫液體積為7 0 m 余操作同5 1中凈化方法1 。凈化方法2 :操作同5 1中凈化方法2 。脂及其制品提取:稱取0 .4 g (精確到0 1 g )試樣,加入5 m 渦混合0 .5 m i n ,待凈化。注:若樣品為人造黃油等含水油脂制品,則會(huì)出現(xiàn)乳化現(xiàn)象,需要4 0 0 0 r / m i m i n ,轉(zhuǎn)移出正己烷層待凈化。凈化方法1 :除了最后用0 .4 m 余操作同5 1中的凈化方法1 。凈化方法2 :除了最后用0 .4 m 余操作同5 1中的凈化方法2 。試樣制備時(shí),不同試樣的前處理需要同時(shí)做試樣空白試驗(yàn)。器參考條件a ) 色譜柱: C 1 8 ,柱長2 5 0 m m ,內(nèi)徑4 .6 m m ,粒徑5 m ,或性能相當(dāng)者;b )流動(dòng)相:乙腈+水= 8 8 + 1 2 ;c )流速: 1 .0 m L / m i n ;d )熒光檢測器:激發(fā)波長3 8 4 n m ,發(fā)射波長4 0 6 n m ;e )柱溫: 3 5 ;f )進(jìn)樣量: 2 0 L 。準(zhǔn)曲線的制作將標(biāo)準(zhǔn)系列工作液分別注入液相色譜中,測定相應(yīng)的色譜峰,以標(biāo)準(zhǔn)系列工作液的濃度為橫坐標(biāo),以峰面積為縱坐標(biāo),得到標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程。苯并( a )芘標(biāo)準(zhǔn)溶液的液相色譜圖見圖A 樣溶液的測定將待測液進(jìn)樣測定,得到苯并( a )芘色譜峰面積。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算試樣溶液中苯并( a )芘的濃度。6 分析結(jié)果的表述試樣中苯并( a )芘的含量按式( 1 )計(jì)算:X= 0 0 01 0 0 0 ( 1 )式中:X 試樣中苯并( a )芘含量,單位為微克每千克( g / k g ) ; 由標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的樣品凈化溶液濃度,單位為納克每毫升( n g / m L ) ;V 試樣最終定容體積,單位為毫升( m L ) ;m 試樣質(zhì)量,單位為克( g ) ;1 0 0 0 由n g / g /