016 前 010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中003食品中胡蘿卜素的測定和988果汁測定方法 010相比,主要變化如下:標(biāo)準(zhǔn)名稱修改為“食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中胡蘿卜素的測定”;增加了普通食品的前處理方法;增加了需要區(qū)分修改了胡蘿卜素的結(jié)果表達(dá)。0161 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中胡蘿卜素的測定1 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了食品中胡蘿卜素的測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)色譜條件一適用于食品中譜條件二適用于食品中 原理試樣經(jīng)皂化使胡蘿卜素釋放為游離態(tài),用石油醚萃取二氯甲烷定容后,采用反相色譜法分離,外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除非另有說明,本方法所用試劑均為分析純,水為6682規(guī)定的一級(jí)水。活力 木瓜蛋白酶:酶活力5U/ 氫氧化鉀(水硫酸鈉(壞血酸(油醚:沸程3060。醇(色譜純。腈(色譜純。氯甲烷(色譜純?；宥』?色譜純。氯甲烷(色譜純。水乙醇(優(yōu)級(jí)純。己烷(色譜純。,615劑配制氫氧化鉀溶液:稱固體氫氧化鉀500g,加入500用前配制。40488純度95%,0162 準(zhǔn)物質(zhì)。40235純度95%,或經(jīng)國家認(rèn)證并授予標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)證書的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。00g/準(zhǔn)確稱取二氯甲烷溶解,轉(zhuǎn)移至100下避光儲(chǔ)存,使用期限不超過3個(gè)月。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用前需進(jìn)行標(biāo)定,具體操作見附錄A。00g/二氯甲烷定容至刻度。00g/準(zhǔn)確稱取二氯甲烷溶解,轉(zhuǎn)移至100下避光儲(chǔ)存,使用期限不超過3個(gè)月。標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液用前需進(jìn)行標(biāo)定,具體操作見附錄A。注:儲(chǔ)存過程中受到溫度、氧化等因素的影響,會(huì)出現(xiàn)部分全反式9Z)33Z)55Z)果采用色譜條件一進(jìn)行按照附錄計(jì)算全反式 00g/二氯甲烷定容至刻度。譜條件一用):二氯甲烷定容至刻度, 譜條件二用):二氯甲烷定容至刻度,0g/ 漿機(jī)。速粉碎機(jī)。溫振蕩水浴箱:控溫精度1。轉(zhuǎn)蒸發(fā)器。吹儀。外效液相色譜儀(帶紫外檢測器。5 分析步驟注:整個(gè)實(shí)驗(yàn)操作過程應(yīng)注意避光。0163 樣制備谷物、豆類、堅(jiān)果等試樣需粉碎、研磨、過篩(蔬菜、水果、蛋、藻類等試樣用勻質(zhì)器混勻;固體粉末狀試樣和液體試樣用前振搖或攪拌混勻。4冰箱可保存1周。處理蔬菜、水果、菌藻類、谷物、豆類、蛋類等普通食品試樣準(zhǔn)確稱取混合均勻的試樣1g5g(g(轉(zhuǎn)至250入15601水浴振蕩30果試樣中蛋白質(zhì)、淀粉含量較高(10%),先加入1550溫水、上瓶塞混勻后,置551恒溫水浴箱內(nèi)振蕩或超聲處理30加入75601水浴振蕩30化加入25上瓶塞。置于已預(yù)熱至532恒溫振蕩水浴箱中,皂化30出,靜置,冷卻到室溫。處理固體試樣:準(zhǔn)確稱取1g5g(置于250入15050溫水混勻。淀粉試樣可以不加蓋上瓶塞,置551恒溫水浴箱內(nèi)振蕩或超聲處理30體試樣:準(zhǔn)確稱取5g10g(置于250入1化取預(yù)處理后試樣,加入75勻,再加入25上瓶塞。置于已預(yù)熱至532恒溫振蕩水浴箱中,皂化30出,靜置,冷卻到室溫。注:如皂化不完全可適當(dāng)延長皂化時(shí)間至1h。樣萃取將皂化液轉(zhuǎn)入500入100輕搖動(dòng),排氣,蓋好瓶塞,室溫下振蕩10水相轉(zhuǎn)入另一分液漏斗中按上述方法進(jìn)行第二次提取。合并有機(jī)相,用水洗至近中性。棄水相,有機(jī)相通過無水硫酸鈉過濾脫水。濾液收入500旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上402減壓濃縮,近干。用氮?dú)獯蹈?上瓶塞,充分溶解提取物。出初始約1用。注:必要時(shí)可根據(jù)待測樣液中胡蘿卜素含量水平進(jìn)行濃縮或稀釋,使待測樣液中0g/0164 譜條件一(適用于食品中考色譜條件參考色譜條件列出如下:a) 色譜柱:長150徑5m,或等效柱;b) 流動(dòng)相:醇乙腈水=;基叔丁基醚;表1 梯度程序時(shí)間/005920200100B%04180801000c) 流速:d)檢測波長:450nm;e)柱溫:301;f)進(jìn)樣體積:20L。制算全反式根據(jù)保留時(shí)間定性,測定濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。反式反式P,計(jì)算方法見附錄B),按式(1)計(jì)算全反式F=P(1)式中:全反式位為峰面積毫升每微克(AUg);全反式位為峰面積(位為微克每毫升(g/全反式。樣測定在相同色譜條件下,將待測液注入液相色譜儀中,以保留時(shí)間定性,根據(jù)峰面積采用外標(biāo)法定量。 色譜條件二(適用食品中考色譜條件參考色譜條件列出如下:0165 a) 色譜柱:長250徑5m,或等效柱;b)流動(dòng)相:三氯甲烷乙腈甲醇=31285,c)流速:d)檢測波長:450nm;e)柱溫:351;f)進(jìn)樣體積:20L。準(zhǔn)曲線的制作將以保留時(shí)間定性,測定峰面積。以標(biāo)準(zhǔn)系列工作液濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,計(jì)算回歸方程。樣測定在相同色譜條件下,將待測試樣液分別注入液相色譜儀中,進(jìn)行保留時(shí)間定性,根據(jù)峰面積外標(biāo)法定量,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線回歸方程計(jì)算待測液中:本色譜條件適用于于總胡蘿卜素10%)的食品試樣中 譜條件一試樣中)計(jì)算:V100m(2)式中:試樣中位為微克每百克(g/100g);從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的待測液中位為微克每毫升(g/V試樣液定容體積,單位為毫升(100將結(jié)果表示為微克每百克(g/100g)的系數(shù);m試樣質(zhì)量,單位為克(g)。試樣中)計(jì)算:9Z+15ZV100RFm(3)式中:試樣中位為微克每百克(g/100g);試樣待測液中全反式位為峰面積(試樣待測液中9位為峰面積(試樣待測液中13位為峰面積(1315Z試樣待測液中15位為峰面積(15試樣待測液中其他順式位為峰面積(V試樣液定容體積,單位為毫升(100將結(jié)果表示為微克每百克(g/100g)的系數(shù);全反式位為峰面積毫升每微克(AUg);0166 m試樣質(zhì)量,單位為克(g)。注1:由于附錄D),所以在采用相對(duì)校正因子對(duì)結(jié)果進(jìn)行校正。注2:如果試樣中其他順式不進(jìn)行計(jì)算。試樣中總胡蘿卜素含量按式(4)計(jì)算:+(4)式中:試樣中總胡蘿卜素的含量,單位為微克每百克(g/100g);試樣中位為微克每百克(g/100g);試樣中位為微克每百克(g/100g)。注:必要時(shí),行表示。計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。譜條件二試樣中)計(jì)算:V100m(5)式中:試樣中位為微克每百克(g/100g);從標(biāo)準(zhǔn)曲線得到的待測液中位為微克每毫升(g/V試樣液定容體積,單位為毫升(100將結(jié)果表示為微克每百克(g/100g)的系數(shù);m試樣質(zhì)量,單位為克(g)。注:結(jié)果中包含全反式35他順式異構(gòu)體;不排除可能有部分算結(jié)果保留三位有效數(shù)字。7 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對(duì)差值不得超過算術(shù)平均值的10%。8 其他試樣稱樣量為500g,00g。0167 附 錄 度約為500g/0L,勻。比色杯厚度為1正己烷為空白,入射光波長為444定其吸光度值,平行測定3次,取均值。溶液濃度按式(算:X=1(中:X位為微克每毫升(g/A1測定過程中稀釋倍數(shù)的換算系數(shù)。度約為500g/0L,勻。比色杯厚度為1正己烷為空白,入射光波長為450定其吸光度值,平行測定3次,取均值。溶液濃度按式(算:X=1(中:X位為微克每毫升(g/A1測定過程中稀釋倍數(shù)的換算系數(shù)。0168 附 錄 用色譜條件一進(jìn)行要確定對(duì)劑碘溶液(。乙醇溶液():吸取5乙醇稀釋至50勻。構(gòu)化10入20勻后于日光下或距離40二氯甲烷稀釋至5000g/異構(gòu)化照色譜條件一注入據(jù)比及與全反式反式