G 中華人民共和國 國 家標(biāo)準(zhǔn)  9708 2013 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)  動(dòng)物性食品中 五氯酚鈉 殘留 量的測(cè)定   氣相色譜 in  2013布  2014施  中華人民共和國農(nóng)業(yè)部  中華人民共和國國家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)  發(fā)布  I 目   次  目   次  . I 前   言  . 物性食品中五氯酚鈉殘留量的測(cè)定  氣相色譜 .  1 范圍  .  2 規(guī)范性引用文件  .  3 原理  .  4  試劑和材料  .  5  儀器和設(shè)備  .  6 試料的制備與保存  .  料的制備  .  料的保存  .  7  測(cè)定步驟  .  準(zhǔn)曲線的制備  .  取  .  衍生化  .  測(cè)定  .  空白試驗(yàn)  .  8  結(jié)果計(jì)算與表述  .  9 檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度  .  敏度  .  確度  .  密度  .  附錄 A .     言  本標(biāo)準(zhǔn)的附錄 A 為資料性附錄。  本標(biāo)準(zhǔn)系國內(nèi)首次發(fā)布的國家標(biāo)準(zhǔn)。    動(dòng)物性食品中五氯酚鈉殘留量的測(cè)定  氣相色譜 1 范圍  本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了動(dòng)物性食品中五氯酚鈉殘留 量 檢測(cè)的制樣和氣相色譜質(zhì)譜法。  本標(biāo)準(zhǔn)適用于豬的肌肉、肝臟和腎臟及雞的肌肉和肝臟 組織 中五 氯酚鈉殘留量的檢測(cè)。  2 規(guī)范性引用文件  下列文件中的條款通過本標(biāo)準(zhǔn)的引用而成為本標(biāo)準(zhǔn)的條款。凡是注日期的引用文件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標(biāo)準(zhǔn)，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最 新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。   準(zhǔn)化工作導(dǎo)則  第 1 部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則   6682  分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法  3 原理  試料中殘留的五氯酚鈉，用三氯乙酸沉淀蛋白， 環(huán)己烷 乙酸酐 生 ，氣相色譜 標(biāo)法定量。  4  試劑和材料  以下所用的試劑，除特別注明外均為分析純?cè)噭?；水為符? 6682 規(guī)定的一級(jí)水。  五氯酚鈉 標(biāo)準(zhǔn)品 ： 含量   碳酸鉀  正己烷  環(huán)己烷  乙酸乙酯  乙酸酐  吡啶    三氯乙酸  濃鹽酸  5三氯乙酸溶液： 取氯乙酸溶液 5 g， 用 水 溶解并 稀釋至 100  2.4  鹽酸溶液： 取濃鹽酸 20 用 水 溶解并 稀釋至 100  環(huán)己烷 取乙酸乙酯 10 加環(huán)己烷 40 勻。  乙酸酐 取乙酸酐 10 加 吡啶 10 勻，現(xiàn)配現(xiàn)用。  0.2  碳酸鉀溶液： 取碳酸鉀 27.6 g， 用水溶解 并稀釋 至 1 000  1 mg/氯酚鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液： 精密 稱取五氯酚鈉標(biāo)準(zhǔn)品 10 于 10 瓶中， 用水溶解并 稀釋至刻度 ，配制成 濃度為 1 mg/ 五氯酚鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液 。 以下保存，有效期為 3 個(gè)月。  2 g/氯酚鈉 標(biāo)準(zhǔn) 工作液： 精密 量取 1 mg/氯酚鈉標(biāo)準(zhǔn)貯備液 200 L， 于 100 瓶中， 用水稀釋 至刻度 ，配制 成濃度 為 2 g/ 五氯酚鈉 標(biāo)準(zhǔn)工作液，現(xiàn)配現(xiàn)用。  5  儀器和設(shè)備  氣相色譜質(zhì)譜儀 ：配 。  分析天平： 感量 1 g。  天平： 感量 g。  高速離心機(jī)  振蕩器  旋渦混合器  組織勻漿機(jī)   氮吹儀   旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀  離心管： 50  6 試料的制備與保存  料的制備  取適量新鮮或解凍的空白或供試組織，絞碎 ， 并使均質(zhì)。  取均質(zhì)的供試樣品，作為供試試料。    取均質(zhì)的空白樣品，作為空白試料。  取均質(zhì)的空白樣品，添加適宜濃度的 標(biāo)準(zhǔn) 工作液，作為空白添加試料。  料的保存  以下貯存?zhèn)?用。  7  測(cè)定步驟  質(zhì)匹配 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備  準(zhǔn)確量取 2 g/氯酚鈉標(biāo)準(zhǔn)工作液 適量 ，用水配制成濃度為 2、 5、 10、 20、 50、 100 g/L 的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液，各取 1.0 別溶解經(jīng)提取、 蒸 吹干后的 6 份 空白試料 殘余物， 混勻， 用 2.4 鹽酸 溶液調(diào) 小于  環(huán)己烷  渦混合， 8 000 r/心 10取有機(jī)層，再 加 環(huán)己烷  渦混合， 8 000 r/心 10 合并兩次有機(jī)層， 于45 旋轉(zhuǎn)蒸干 。 按衍生化步 驟操作， 供氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定。以特征離子質(zhì)量色譜峰面積為縱坐標(biāo)，對(duì)照溶液 濃度為橫坐 標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 求回歸方程和相關(guān)系數(shù) 。  取  稱取 試料（ 5g， 于 50 心管中，加水 10 渦混勻， 8 000 r/心 10上清液，加 5%三氯乙酸 5 渦混勻， 8 000 r/心 10 上清液， 用 2.4  鹽酸 溶液調(diào) 小于  環(huán)己烷  渦混合， 8 000 r/心 10 取 有機(jī)層，再 加 環(huán)己烷  渦混合， 8 000 r/心 10 合并兩次 有機(jī)層 ， 于 45 旋轉(zhuǎn)蒸干 。  衍生化  殘余物 中加 環(huán)己烷 .0  無水硫酸鈉 少量 ，加 乙酸酐 00 L，密封， 于60 反應(yīng) 15 冷卻 ，加碳酸鉀溶液 0.5 分混勻， 靜置分層 ，取有機(jī)相 ， 供氣相色譜質(zhì)譜測(cè)定。    測(cè)定  色譜條件  色譜柱： %苯基甲基聚硅氧烷 （ 30 m膜厚 m），或相當(dāng)者 ；  進(jìn)樣口 溫度 ： 250 ；  進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣 ；  進(jìn) 樣體積： 2 L；  柱溫： 初溫 140 ，保留 2  10 /溫至 200 ，以 15 /溫至 280 ，保持 3.0  載氣：氦氣， 1.0 mL/流）  質(zhì)譜條件：  ： 70  溶劑延遲： 3  S 傳輸線溫度： 280 ；  選擇離子檢測(cè)方式，檢測(cè)離子 )： 266， 308， 237， 165， 130；  定量離子： 266。  定法  通過 試樣 色譜圖的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)溶液的保留時(shí)間、色譜峰的特征離子與相應(yīng)濃度標(biāo)準(zhǔn)品各色譜峰的特征離子 相對(duì)照定性。 試樣 溶液中的離子相對(duì)豐度與基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液中的離子相對(duì)豐度相比，符合表 1的要求。基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)溶液和添加試液中特征離子的質(zhì)量色譜圖分別見附錄 A。  表 1 試料溶液中離子相對(duì)豐度的允許偏差范圍  相對(duì)豐度  % 允許偏差  % 50 20 20 50 25 10 20 30 10 50 空白試驗(yàn)  取空白試料采用完全相同的測(cè)定步驟進(jìn)行平行操作 。    8  結(jié)果計(jì)算與表述  單點(diǎn)校準(zhǔn)：  或基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)：由 b，  求得 a和 b，則  試料中五氯酚鈉的殘留量 （ g/： 按下式計(jì)算   式中：  X供試試料 中五氯酚鈉的殘留量 ， g/    標(biāo)準(zhǔn)溶液中五氯酚鈉濃度 ， ng/                  C供試試料 溶液中五氯酚鈉濃度 ， ng/                          標(biāo)準(zhǔn)溶液中五氯酚鈉的衍生物的峰面積；  A供試試料溶液中五氯酚鈉的衍生物的峰 面積；                             V殘余物定容體積 ，               m 供試試料質(zhì)量 ， g。      注：計(jì)算結(jié)果需扣除空白值，測(cè)定結(jié)果用平行測(cè)定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。  9 檢測(cè)方法靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度  敏度  本方法的檢測(cè)限 為 g/ 本方法的 定量限， 肌肉 組織 中為 g/臟 和 腎臟 組織 中為 1 g/ 確度  本方法在肌肉 組織 2 g/ 肝臟 和 腎臟 組織 1 4 g/加濃度水平上的 回收率范