山東省體外診斷試劑生產(chǎn)現(xiàn)場檢查指南目 錄一、適用范圍5二、體外診斷試劑基本知識5（一）產(chǎn)品概述51. 定義52. 分類63. 命名84. 主要原材料895. 基本生產(chǎn)設(shè)備及用途106. 質(zhì)量控制方法11（二）不同方法學(xué)產(chǎn)品簡介121. 臨床化學(xué)診斷類試劑122. 免疫學(xué)診斷類試劑15163. 血細(xì)胞分析用試劑264. 血凝類試劑295. 即時檢測類試劑336. 微生物學(xué)診斷類試劑437. 分子診斷類試劑518. 校準(zhǔn)品579. 質(zhì)控品63三、體外診斷試劑檢查要點及易出問題65（一）機構(gòu)和人員651. 檢查要點652. 易出問題67（二）廠房與設(shè)施、設(shè)備671. 檢查要點672. 易出問題71（三）文件管理731檢查要點732. 易出問題73（四）設(shè)計開發(fā)741. 檢查要點742. 易出問題75（五）采購751. 檢查要點752. 易出問題76（六）生產(chǎn)管理761. 檢查要點762. 易出問題78（七）質(zhì)量控制791. 檢查要點792. 易出問題80（八）銷售和售后服務(wù)811. 檢查要點812. 易出問題82（九）不合格品控制821. 檢查要點822. 易出問題82（十）不良事件監(jiān)測、分析和改進(jìn)831. 檢查要點832. 易出問題83四、其它需注意的問題83五、編寫依據(jù)及體外診斷試劑類產(chǎn)品通用標(biāo)準(zhǔn)84六、附錄85（一）體外診斷試劑按照檢驗用途分類舉例：85（二）潔凈室（區(qū)）空氣潔凈度級別86（三）清潔條件的基本要求86（四）注釋86為規(guī)范體外診斷試劑生產(chǎn)現(xiàn)場檢查行為，提高檢查員現(xiàn)場檢查能力，依據(jù)醫(yī)療器械監(jiān)督管理條例、醫(yī)療器械生產(chǎn)監(jiān)督管理辦法、醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范、醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范附錄體外診斷試劑、醫(yī)療器械生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范體外診斷試劑現(xiàn)場檢查指導(dǎo)原則及相關(guān)法規(guī)、規(guī)章、標(biāo)準(zhǔn)及規(guī)范性文件，制定本指南。當(dāng)國家相關(guān)法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)、檢查要求等發(fā)生變化時，應(yīng)當(dāng)及時修訂本指南以確保其持續(xù)符合要求。一、適用范圍本指南可用于指導(dǎo)山東省內(nèi)體外診斷試劑生產(chǎn)現(xiàn)場檢查工作,，旨在幫助醫(yī)療器械監(jiān)管人員加強對體外診斷試劑生產(chǎn)質(zhì)量管理體系的認(rèn)知和掌握，同時為體外診斷試劑生產(chǎn)企業(yè)開展生產(chǎn)管理活動提供參考。按照藥品管理的用于血源篩查的體外診斷試劑和采用放射性核素標(biāo)記的體外診斷試劑，不屬于本指南指導(dǎo)范圍。二、體外診斷試劑基本知識（一）產(chǎn)品概述1. 定義本指南所稱體外診斷試劑是指按照醫(yī)療器械管理的體外診斷試劑，包括在疾病的預(yù)防、診斷、治療監(jiān)測、預(yù)后觀察、健康狀態(tài)評價及遺傳性疾病的預(yù)測等過程中，用于人體樣本（各種體液、細(xì)胞、組織樣本等）體外檢測的試劑、試劑盒、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品等產(chǎn)品。可以單獨使用，也可以與儀器、器具、設(shè)備或者系統(tǒng)組合使用注1。其中，試劑指被制造商預(yù)期用作體外診斷醫(yī)療器械的化學(xué)、生物學(xué)或免疫學(xué)組分、溶液或制備物。校準(zhǔn)品為用于體外診斷儀器或系統(tǒng)校準(zhǔn)的測量標(biāo)準(zhǔn)，其具有明確量值和相關(guān)測量不確定度，用作參照的給定量定義的實現(xiàn)。質(zhì)控品為被其制造商預(yù)期用于驗證體外診斷醫(yī)療器械性能特征的物質(zhì)、材料或物品。試劑盒為用于完成一個特定的體外診斷檢驗包裝在一起的一組組成，試劑盒組成可包括試劑（如抗體、酶、緩沖液和稀釋液）、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品和其他物品和材料。本指南以下所述“試劑”均適用于“試劑”和“試劑盒”。2. 分類（1）管理分類體外診斷試劑的管理分類是基于產(chǎn)品風(fēng)險程度的分類。根據(jù)產(chǎn)品風(fēng)險程度由低到高，體外診斷試劑分為第一類、第二類、第三類產(chǎn)品。第一類產(chǎn)品：微生物培養(yǎng)基（不用于微生物鑒別和藥敏試驗）；樣本處理用產(chǎn)品，如溶血劑、稀釋液、染色液等。第三類產(chǎn)品：與致病性病原體抗原、抗體以及核酸等檢測相關(guān)的試劑；與血型、組織配型相關(guān)的試劑；與人類基因檢測相關(guān)的試劑；與遺傳性疾病相關(guān)的試劑；與麻醉藥品、精神藥品、醫(yī)療用毒性藥品檢測相關(guān)的試劑；與治療藥物作用靶點檢測相關(guān)的試劑;與腫瘤標(biāo)志物檢測相關(guān)的試劑;與變態(tài)反應(yīng)（過敏原）相關(guān)的試劑等。第二類產(chǎn)品：除已明確為第一類、第三類的產(chǎn)品，其他為第二類產(chǎn)品，主要包括：用于蛋白質(zhì)檢測的試劑；用于糖類檢測的試劑；用于激素檢測的試劑；用于酶類檢測的試劑；用于酯類檢測的試劑；用于維生素檢測的試劑；用于無機離子檢測的試劑；用于藥物及藥物代謝物檢測的試劑；用于自身抗體檢測的試劑；用于微生物鑒別或者藥敏試驗的試劑；用于其他生理、生化或者免疫功能指標(biāo)檢測的試劑等。第二類產(chǎn)品如用于腫瘤的診斷、輔助診斷、治療過程的監(jiān)測，或者用于遺傳性疾病的診斷、輔助診斷等，按第三類產(chǎn)品管理。用于藥物及藥物代謝物檢測的試劑，如該藥物屬于麻醉藥品、精神藥品或者醫(yī)療用毒性藥品范圍的，按第三類產(chǎn)品管理。與第一類體外診斷試劑配合使用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，按第二類產(chǎn)品管理；與第二類、第三類體外診斷試劑配合使用的校準(zhǔn)品、質(zhì)控品單獨申請注冊時，按與試劑相同的類別進(jìn)行注冊管理；多項校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，按其中的高類別進(jìn)行注冊管理。免疫組化、原位雜交、流式細(xì)胞儀配套試劑視具體產(chǎn)品分類。體外診斷試劑的管理分類基于產(chǎn)品風(fēng)險，考慮產(chǎn)品的預(yù)期用途，不區(qū)分被測物檢測方法。如C反應(yīng)蛋白檢測試劑無論其方法學(xué)為免疫比濁法、熒光免疫層析法或化學(xué)發(fā)光法，均按其確定的類別管理。現(xiàn)行體外診斷試劑分類目錄為6840 體外診斷試劑分類子目錄（2013版）。具體產(chǎn)品的分類應(yīng)以國家藥品監(jiān)督管理局實時發(fā)布的最新分類文件為準(zhǔn)。（2）按檢驗原理或檢測方法分類根據(jù)檢驗原理或檢驗方法，體外診斷試劑產(chǎn)品可以分為（但不限于）：臨床化學(xué)診斷試劑、免疫學(xué)診斷試劑、血細(xì)胞分析用試劑、血凝類檢測試劑、即時檢測（POCT）試劑、微生物學(xué)檢驗試劑、分子生物學(xué)診斷試劑等。3. 命名體外診斷試劑的產(chǎn)品名稱一般可以由三部分組成。第一部分：被測物質(zhì)的名稱；第二部分：用途，如診斷血清、測定試劑盒、質(zhì)控品等；第三部分：方法或者原理，如酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金法等，本部分應(yīng)當(dāng)在括號中列出，如圖1所示。圖1體外診斷試劑產(chǎn)品命名舉例 如果被測物組分較多或者有其他特殊情況，可以采用與產(chǎn)品相關(guān)的適應(yīng)癥名稱或者其他替代名稱，如乙肝五項檢測卡（膠體金法）、電解質(zhì)分析儀配套試劑（離子選擇電極法）。第一類產(chǎn)品和校準(zhǔn)品、質(zhì)控品，依據(jù)其預(yù)期用途進(jìn)行命名，如溶血劑、生化復(fù)合校準(zhǔn)品等。體外診斷試劑的名稱中不可出現(xiàn)“定性”“半定量”“定量”等表述。臨床化學(xué)診斷類試劑產(chǎn)品命名可參考YY/T 1227-2014 臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）命名的要求。4. 主要原材料不同種類的體外診斷試劑產(chǎn)品因其反應(yīng)原理、試劑或試劑盒結(jié)構(gòu)組成等多方面的差異，體外診斷試劑產(chǎn)品生產(chǎn)所用的原材料不盡相同。其原材料大體可以分為主要生物原料、生物輔料、化學(xué)原材料和其他原輔料。此處僅對不同種類原材料及其主要的質(zhì)量控制指標(biāo)和控制方法進(jìn)行介紹，不同原材料在試劑產(chǎn)品生產(chǎn)過程中的作用，將在不同方法學(xué)試劑產(chǎn)品內(nèi)容中詳細(xì)闡述。不同企業(yè)對原材料的質(zhì)量控制指標(biāo)和控制方法可能存在差異，常見的方法有對原料進(jìn)貨檢驗或核查供應(yīng)方檢驗報告等。（1）主要生物原料在體外診斷試劑產(chǎn)品生產(chǎn)中常用的主要生物原料有抗原、抗體、酶類等，原料質(zhì)量控制的指標(biāo)可包括外觀、分子量、純度、蛋白濃度、效價、活性等。功能性試驗也是試劑生產(chǎn)企業(yè)常用的原料控制方法。所謂功能性試驗，一般指檢驗用該原料試產(chǎn)的試劑產(chǎn)品的靈敏度、特異性和穩(wěn)定性等性能指標(biāo)是否符合要求。（2）生物輔料常見的生物輔料如?；蜓蜓?、牛血清白蛋白、煙酰胺腺嘌呤二核苷磷酸（NADP+）等，具體輔料的質(zhì)量控制指標(biāo)可能有：1）牛血清或羊血清：外觀、無菌、總蛋白含量、球蛋白含量等。2）牛血清白蛋白：外觀、溶解性、總蛋白含量、總蛋白中牛血清白蛋白（BSA）含量、BSA的凈含量等。3）酪蛋白：酸度等。4）標(biāo)記用辣根過氧化物酶：純度RZ值注2等。5）NADP+：純度、340nm處吸光度值等。對小牛血清或山羊血清、牛血清白蛋白以及酪蛋白等，還應(yīng)進(jìn)行功能性試驗，例如以其為原料配制一定濃度的稀釋液作為樣品，進(jìn)行測定，結(jié)果符合相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)要求。（3）化學(xué)原材料化學(xué)原材料包括無機物和有機物等化學(xué)制劑，通常對外觀、純度等方面進(jìn)行原材料質(zhì)量控制。若有特殊要求，還應(yīng)有相應(yīng)的檢測項目。（4）其他原輔料1）微孔板條、酶標(biāo)板：外觀、材質(zhì)、吸附能力和精密性等。2）硝酸纖維素膜：孔徑大小、毛細(xì)遷移速度、均一性等。3）玻璃纖維或聚酯纖維膜及濾紙：厚度、毛細(xì)遷移速度等。4）玻璃纖維膜：厚度、孔徑大小等。5）塑料襯片：厚度、硬度注3、尺寸、粘性注3等。5. 基本生產(chǎn)設(shè)備及用途體外診斷試劑生產(chǎn)所用的設(shè)備分為通用設(shè)備和特殊設(shè)備，其中特殊設(shè)備特指用于生產(chǎn)特定種類體外診斷試劑產(chǎn)品所用的設(shè)備。（1）通用設(shè)備制水設(shè)備生產(chǎn)工藝用水等的生產(chǎn)天平原料的稱量量筒、移液管或移液器原料的量取攪拌設(shè)備（加熱和/或磁力攪拌等）溶液的配制酸度計溶液pH值的調(diào)節(jié)電導(dǎo)率儀電導(dǎo)率的調(diào)節(jié)分裝設(shè)備（蠕動泵等）試劑的分裝標(biāo)簽打印設(shè)備（噴碼機、貼標(biāo)機等）標(biāo)簽打印冷藏箱、低溫冰箱活性原料儲存、留樣等離心機原料的富集等超聲機原料的分散等（2）特殊生產(chǎn)設(shè)備劃膜機、凍干機、切條機、壓卡機、封口機、包被機、洗板機、甩干機、除濕機、干燥箱、恒溫箱、超低溫冰箱、滅菌器等。6.質(zhì)量控制方法型式檢驗應(yīng)符合產(chǎn)品技術(shù)要求。產(chǎn)品技術(shù)要求必須符合強制性國家標(biāo)準(zhǔn)及強制性行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，可參考執(zhí)行推薦性國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)、產(chǎn)品的注冊審查指導(dǎo)原則等其他相關(guān)法規(guī)文件。企業(yè)應(yīng)該根據(jù)產(chǎn)品研究及驗證資料和產(chǎn)品技術(shù)要求，自行制定中間品或半成品注4檢驗規(guī)程、成品檢驗（出廠檢驗）規(guī)程并嚴(yán)格按照檢驗規(guī)程的要求進(jìn)行產(chǎn)品的質(zhì)量控制。根據(jù)體外診斷試劑產(chǎn)品的特點及其檢驗規(guī)程的要求，質(zhì)量控制部門應(yīng)配備微生物、理化等實驗室，常用的檢驗設(shè)備可包括：對生產(chǎn)工藝用水檢測的儀器：電導(dǎo)率儀、生化培養(yǎng)箱、化學(xué)滴定所用器具、微生物限度儀等。對生產(chǎn)車間環(huán)境進(jìn)行檢測的儀器：風(fēng)量儀、浮游菌采樣器、塵埃粒子計數(shù)器等。試劑適配的檢驗儀器（適用機型）：生化分析儀、酶標(biāo)儀、熒光免疫分析儀、化學(xué)發(fā)光免疫分析儀等。其他常用儀器：量筒、天平、酸度計、壓力蒸汽滅菌器、生化培養(yǎng)箱、冰箱、生物安全柜等。（二）不同方法學(xué)產(chǎn)品簡介按原理的不同，體外診斷試劑產(chǎn)品的組成、原材料及生產(chǎn)工藝差異較大。同一檢驗原理的不同檢驗項目、不同廠家同一原理的同一檢驗項目的產(chǎn)品也會存在差別。按照不同方法學(xué)試劑產(chǎn)品的工作原理、結(jié)構(gòu)組成、產(chǎn)品生產(chǎn)（主要原材料、主要生產(chǎn)設(shè)備、典型生產(chǎn)工藝）、產(chǎn)品檢驗（檢驗設(shè)備、使用方法或檢驗操作方法）等內(nèi)容進(jìn)行概述。不同方法學(xué)產(chǎn)品有關(guān)生產(chǎn)設(shè)備、過程檢驗、成品檢驗及檢驗設(shè)備內(nèi)容的介紹均以臨床化學(xué)診斷試劑類產(chǎn)品為基礎(chǔ)，其它方法學(xué)產(chǎn)品與之相同的內(nèi)容不再重復(fù)表述，僅對特殊設(shè)備和其他不同內(nèi)容給予重點描述。企業(yè)可根據(jù)具體產(chǎn)品特點、個別工藝規(guī)模、結(jié)合生產(chǎn)過程控制方法及質(zhì)量控制方法等生產(chǎn)質(zhì)量管理體系情況，自行定義生產(chǎn)過程中的關(guān)鍵工序和特殊過程，并根據(jù)體系要求進(jìn)行驗證和控制。1. 臨床化學(xué)診斷類試劑（1）工作原理臨床化學(xué)診斷試劑是基于分光光度法原理研發(fā)，適配手工、半自動和全自動生化分析儀等儀器檢測酶類、糖類、脂類、蛋白和非蛋白氮類、無機元素類等物質(zhì)的試劑。該類反應(yīng)為液相反應(yīng)。物質(zhì)與光作用具有選擇吸收的特性。利用物質(zhì)所特有的吸收光譜來鑒別物質(zhì)的存在（定性分析），或利用物質(zhì)對一定波長光的吸收程度來測定物質(zhì)含量（定量分析）的方法，稱為分光光度法。樣本中的被測物與臨床化學(xué)診斷試劑組分構(gòu)成反應(yīng)體系，反應(yīng)體系中某種物質(zhì)（可為反應(yīng)物、生成物或反應(yīng)中間體）對特定波長光的吸光度變化或變化率與該物質(zhì)濃度成比例，因該物質(zhì)濃度與樣本中被測物的濃度（或活性）存在相關(guān)性，監(jiān)測該物質(zhì)吸光度變化或者變化率，即可得到樣本中被測物的濃度（或活性）。該類試劑根據(jù)測定的目標(biāo)物、原材料和反應(yīng)原理不同，包括化學(xué)法、酶活性測定（測酶）法、酶（酶測）法、免疫比濁法等診斷試劑，例如，化學(xué)法包括總蛋白測定試劑盒（雙縮脲法）；酶活性測定法包括乳酸脫氫酶測定試劑盒（速率法）；酶法包括葡萄糖測定試劑盒（葡萄糖氧化酶法）；免疫比濁法包括脂蛋白a檢測試劑盒（免疫比濁法）等。（2）結(jié)構(gòu)組成該類試劑可為單獨的試劑或試劑與校準(zhǔn)品和/或質(zhì)控品的配套組合產(chǎn)品。如圖2，試劑部分可為單一試劑（R）或多組分試劑（R1、R2等）。校準(zhǔn)品和質(zhì)控品根據(jù)其濃度不同可為單水平校準(zhǔn)品、多水平校準(zhǔn)品（校準(zhǔn)品1、校準(zhǔn)品2等）和高值、中值、低值質(zhì)控品（質(zhì)控品1、質(zhì)控品2、質(zhì)控品3等）。試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品可為液體試劑或干粉試劑注5。若為干粉試劑，則試劑盒中可配有復(fù)溶液注5。 液體單試劑盒 液體雙試劑盒 圖2 臨床化學(xué)診斷類試劑盒組成示意圖（3）主要原材料基于化學(xué)法、酶活性測定法、酶法的臨床化學(xué)診斷試劑的原料一般有工藝用水、緩沖液、酶類、化學(xué)制劑、防腐劑、表面活性劑等。原料控制點可包括： 體外診斷試劑生產(chǎn)工藝用水：性狀、電導(dǎo)率、易氧化物、總有機碳、微生物總數(shù)等。 酶類：外觀、活性、純度、功能性試驗等。（4）主要生產(chǎn)設(shè)備制水設(shè)備、天平、量筒、移液管或移液器、攪拌設(shè)備（磁力攪拌器等）、酸度計、電導(dǎo)率儀、分裝類設(shè)備（蠕動泵等）、標(biāo)簽打印設(shè)備（噴碼機、貼標(biāo)機等）、冷藏箱、低溫冰箱、離心機、抽濾或超濾設(shè)備等。（5）典型生產(chǎn)工藝原料稱量溶解配制分裝（凍干干粉適用）（調(diào)試定值校準(zhǔn)品、質(zhì)控品適用）貼簽成品包裝入庫凍干過程較為復(fù)雜，需進(jìn)行驗證并獲得工藝參數(shù)。校準(zhǔn)品、質(zhì)控品的生產(chǎn)工藝中應(yīng)包括定值過程。企業(yè)根據(jù)產(chǎn)品的特點和性能要求，在溶解配制與分裝過程之間，有時會增加溶液的靜置和過濾工序。（6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可對分裝前的半成品進(jìn)行檢驗。過程檢驗和成品出廠檢驗項目由企業(yè)質(zhì)量控制程序規(guī)定，可參考醫(yī)療器械生產(chǎn)企業(yè)質(zhì)量控制與成品放行指南。臨床化學(xué)診斷試劑產(chǎn)品目前可參考執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)有GB/T 26124-2011臨床化學(xué)體外診斷試劑（盒）。檢驗設(shè)備可包括但不限于:量筒測量體積，檢驗液體試劑裝量天平測量重量，檢驗試劑裝量生化分析儀（分光光度計）檢測外觀、裝量以外的其他性能指標(biāo)，如空白吸光度、準(zhǔn)確度、精密度等試劑的使用方法（檢驗操作方法）以液體雙試劑在全自動生化分析儀日立7180上的測定過程為例：如圖3，樣品針吸取待測樣本加入反應(yīng)杯試劑針1吸取試劑1（R1）加入反應(yīng)杯（緩沖和排除干擾）試劑針2吸取試劑2（R2）加入反應(yīng)杯（進(jìn)行反應(yīng)，產(chǎn)生顏色或濁度變化）儀器計算得到被測物的濃度或活性。圖3日立7180結(jié)構(gòu)示意圖反應(yīng)發(fā)生濁度變化的臨床化學(xué)診斷試劑為免疫比濁法試劑，內(nèi)容見下文“免疫學(xué)診斷試劑類”的免疫比濁試劑內(nèi)容。2. 免疫學(xué)診斷類試劑免疫學(xué)診斷試劑是基于抗原-抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)原理研發(fā)，用于檢測藥物、激素、蛋白質(zhì)、微生物等物質(zhì)的試劑。該類試劑的反應(yīng)體系可大體分為液相和固相。從免疫分析技術(shù)的不同應(yīng)用方法角度，免疫學(xué)診斷試劑產(chǎn)品可分為標(biāo)記免疫類試劑和非標(biāo)記免疫類試劑。標(biāo)記免疫反應(yīng)的核心是采用示蹤物質(zhì)標(biāo)記抗體（或抗原）進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)生成免疫復(fù)合物，通過對免疫復(fù)合物中標(biāo)記物含量或活性的測定，間接測定待測抗原或抗體。常見的示蹤物包括酶、同位素、熒光素、化學(xué)發(fā)光物質(zhì)等。非標(biāo)記免疫分析方法有免疫擴散技術(shù)、免疫電泳技術(shù)等。 免疫學(xué)診斷類產(chǎn)品的原材料中一定包括抗原或抗體，從原料質(zhì)量控制的角度，抗原或抗體的檢驗可包括外觀、效價、純度、分子量、功能性試驗等。常見的免疫學(xué)診斷試劑產(chǎn)品有免疫比濁法試劑、酶聯(lián)免疫法試劑、化學(xué)發(fā)光法試劑、免疫層析法試劑、免疫印跡法試劑等。（1）免疫比濁法試劑1）工作原理免疫比濁法是抗原抗體結(jié)合動態(tài)測定方法，分為免疫透射比濁法和免疫散射比濁法。圖4散射比濁和透射比濁的區(qū)別示意圖試劑中的特異抗體與樣本中相應(yīng)的抗原結(jié)合形成抗原抗體免疫復(fù)合物，并形成微細(xì)顆粒，混懸于溶液介質(zhì)中，如圖4，當(dāng)光通過這種混濁介質(zhì)溶液時會被吸收或折射一部分，透過光強度與混濁顆粒的量負(fù)相關(guān)。在抗體量足夠的條件下，抗原越多，形成的抗原-抗體復(fù)合物越多，溶液越混濁，可檢測到的透射光越少，以此對樣本中的抗原進(jìn)行定量分析，這種方法稱為免疫透射比濁法。該方法以分光光度法為基礎(chǔ)，可在生化分析儀上檢測。當(dāng)光通過含抗原抗體復(fù)合物的混濁介質(zhì)溶液時會出現(xiàn)光散射作用，散射光強度與溶液中抗原抗體復(fù)合物的量成正比，這種測定光散射強度的方法稱為免疫散射比濁法。該方法的進(jìn)行，需要具備測定散射光的儀器如散射比濁儀、特定蛋白分析儀等。2）結(jié)構(gòu)組成、產(chǎn)品生產(chǎn)、產(chǎn)品檢驗免疫比濁法試劑盒組成部分、試劑狀態(tài)與臨床化學(xué)診斷試劑類似，生產(chǎn)設(shè)備、典型生產(chǎn)工藝流程、過程檢驗及成品檢驗、檢驗設(shè)備等內(nèi)容與臨床化學(xué)診斷試劑中介紹內(nèi)容基本相同，以下針對不同點進(jìn)行闡述。免疫比濁法試劑的原料通常有抗原/抗體、純化水、緩沖液、化學(xué)制劑、防腐劑、表面活性劑等。為提高抗原抗體復(fù)合物形成速度，縮短反應(yīng)時間，可以在反應(yīng)體系中增加增敏劑，如聚乙二醇（PEG）和膠乳等。以膠乳增強方法為例，采用膠乳增強免疫比濁法的試劑生產(chǎn)過程與其他試劑相比，增加了膠乳顆粒與抗體交聯(lián)獲得抗體膠乳復(fù)合物的生產(chǎn)過程，也可以直接采購抗體膠乳復(fù)合物作為原料投入生產(chǎn)。3）特殊原材料抗原或抗體、膠乳顆粒、交聯(lián)劑等。原料控制點可包括：抗原或抗體：外觀、效價、純度、分子量、功能性試驗等。4）典型生產(chǎn)工藝R1（緩沖液）：原料稱量溶解配制調(diào)試pH值分裝（凍干干粉適用）貼簽包裝入庫R2（抗體/抗原-膠乳顆粒懸濁液）：原料稱量交聯(lián)（洗滌超聲）分裝、貼簽包裝入庫生產(chǎn)工藝過程控制點：溶解配制、抗體/抗原與膠乳交聯(lián)。免疫透射比濁法試劑產(chǎn)品目前可參考執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)有YY/T 1255-2015 免疫比濁法檢測試劑（盒）（透射法）。（2）酶聯(lián)免疫類試劑盒1）工作原理酶聯(lián)免疫類試劑盒是以酶聯(lián)免疫吸附法為原理的體外診斷試劑。酶聯(lián)免疫吸附法是以酶作為標(biāo)記示蹤物，以抗原抗體反應(yīng)為基礎(chǔ)，通過色原呈色程度來進(jìn)行結(jié)果判斷的固相吸附測試方法，可用來定性或定量測定樣本中的抗原或抗體。以雙抗體夾心法酶聯(lián)免疫類試劑盒為例，抗體結(jié)合（或稱包被）到固相載體（如微孔板）表面，并保持其免疫活性，得到符合要求的酶標(biāo)板。另一種抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗體，制備成酶結(jié)合物，這種酶結(jié)合物既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測定時，樣本中的被測物（抗原）與酶標(biāo)板表面的包被抗體結(jié)合，再與之后加入的酶結(jié)合物結(jié)合形成免疫復(fù)合物。用洗滌液洗去未結(jié)合的物質(zhì)，最后結(jié)合在酶標(biāo)板上的酶量與樣本中被測物的量成一定的比例。加入顯色劑后，顯色劑被酶標(biāo)板上的酶催化為有色產(chǎn)物，有色產(chǎn)物的量與樣本中被測物的量直接相關(guān)。2）結(jié)構(gòu)組成根據(jù)工作原理，酶聯(lián)免疫類試劑盒中有三種必要的組分：包被有抗原或抗體的酶標(biāo)板、酶結(jié)合物和顯色劑。除此以外，定性檢測的酶聯(lián)免疫類試劑盒內(nèi)還包括陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、濃縮洗滌液、終止液、封板膜等，可適配酶標(biāo)分析儀使用，也可目測判斷檢測結(jié)果；定量檢測的酶聯(lián)免疫類試劑盒內(nèi)還包括不同濃度系列校準(zhǔn)品（或參考品）、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、濃縮洗滌液、終止液、封板膜等（圖5所示），需適配酶標(biāo)分析儀使用。圖5酶聯(lián)免疫檢測試劑盒組成示意圖3）主要原材料酶聯(lián)免疫類試劑盒主要原料包括主要生物原料、生物輔料、化學(xué)制劑、微孔板等。主要生物原料：天然抗原、重組抗原、單克隆抗體、多克隆抗體以及多肽類、激素類、酶類等。這類原料用于包被酶標(biāo)板，制備酶結(jié)合物、校準(zhǔn)品（參考品）、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）等。生物輔料：小牛血清、山羊血清、牛血清白蛋白和酪蛋白等。用于制備酶標(biāo)板的封閉液、校準(zhǔn)品（參考品）、質(zhì)控品、酶結(jié)合物等?；瘜W(xué)制劑：無機類（碳酸鈉、碳酸氫鈉、氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、硫酸等）、有機類（吐溫、三羥基氨基甲烷等），用作表面活性劑和制備緩沖液、濃縮洗滌液、終止液等。還有用來制備顯色劑的特殊化學(xué)制劑，如四甲基聯(lián)苯胺（TMB）等。微孔板：用作固相載體，常用聚苯乙烯等材質(zhì)。微孔板使用前需進(jìn)行篩選，應(yīng)滿足顯色均一、吸附性良好的要求。4）主要生產(chǎn)設(shè)備天平、量筒、移液槍、酸度計、攪拌裝置、干燥設(shè)備、分裝設(shè)備、貼標(biāo)設(shè)備等，特殊設(shè)備有包被機、洗板機、洗封一體機、冷藏箱、冰柜等。5）典型生產(chǎn)工藝圖6酶聯(lián)免疫類試劑盒生產(chǎn)工藝示意圖主要生產(chǎn)工藝根據(jù)試劑盒組成可分為酶標(biāo)板生產(chǎn)、酶結(jié)合物制備和其他液體試劑制備三個部分，試劑盒各部分生產(chǎn)完成后進(jìn)行包裝（圖6所示）。6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可對分裝前的液體半成品和包裝前的酶標(biāo)板進(jìn)行檢驗。成品檢驗時，除外觀、裝量以外的其他項目，需根據(jù)產(chǎn)品說明書要求進(jìn)行目測檢驗或使用酶標(biāo)分析儀檢驗。該類產(chǎn)品的目前可參考執(zhí)行的標(biāo)準(zhǔn)有YY/T 1183-2010酶聯(lián)免疫吸附法試劑（盒）。檢驗設(shè)備可包括:量筒測量體積，檢驗液體試劑裝量天平測量重量，檢驗試劑裝量酶標(biāo)分析儀和洗板機檢測外觀、裝量以外的其它性能指標(biāo)，如準(zhǔn)確度、最低檢出限等。產(chǎn)品的使用方法（檢驗操作方法）可簡單概括為：將校準(zhǔn)品、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、待測樣本加入酶標(biāo)板相應(yīng)孔位中加入酶結(jié)合物加入洗滌劑洗滌加入顯色劑加入終止液目測或酶標(biāo)分析儀讀取結(jié)果。（3）化學(xué)發(fā)光免疫分析類試劑化學(xué)發(fā)光免疫分析類試劑是將化學(xué)發(fā)光體系與免疫反應(yīng)相結(jié)合，用于檢測抗原或抗體的試劑產(chǎn)品。按照發(fā)光的方式，該類試劑可分為酶促化學(xué)發(fā)光、直接化學(xué)發(fā)光、電化學(xué)發(fā)光等。此處重點介紹酶促化學(xué)發(fā)光和直接化學(xué)發(fā)光類試劑產(chǎn)品。1）工作原理化學(xué)發(fā)光類試劑盒的反應(yīng)過程與酶聯(lián)免疫類試劑盒類似，但該類產(chǎn)品檢測的是反應(yīng)體系的發(fā)光值。以雙抗體夾心法原理為例：識別被測物的抗體結(jié)合（或稱包被）到固相載體（微孔板或磁微粒）表面獲得包被板或免疫磁珠；另一種抗體與某種標(biāo)記物（酶、發(fā)光劑等）連接形成標(biāo)記的結(jié)合物。在測定時，待測樣本中的被測物與發(fā)光板或磁珠表面的包被抗體結(jié)合，再與之后加入的結(jié)合物反應(yīng)形成帶有標(biāo)記物的抗原抗體免疫復(fù)合物。用洗滌的方法使發(fā)光板或磁珠上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在發(fā)光板或磁珠上的標(biāo)記物的量與樣本中被測物的量成一定的比例。加入能與標(biāo)記物反應(yīng)的底物或緩沖液，底物被催化或發(fā)光物受激發(fā)發(fā)光，發(fā)光值的大小與待測樣本中被測物的量直接相關(guān)。酶促化學(xué)發(fā)光和直接化學(xué)發(fā)光最主要的區(qū)別在于酶促化學(xué)發(fā)光的標(biāo)記物是酶，而直接化學(xué)發(fā)光的標(biāo)記物是某種發(fā)光劑。2）結(jié)構(gòu)組成化學(xué)發(fā)光類試劑盒的組成結(jié)構(gòu)、生產(chǎn)工藝與酶聯(lián)免疫分析類試劑類似，其中三種必要的組成部分為：固相載體（發(fā)光板或磁珠）、標(biāo)記結(jié)合物、發(fā)光底物。定性檢測的該類產(chǎn)品一般還包括陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、濃縮洗滌液等；定量分析的該類產(chǎn)品一般還包括系列校準(zhǔn)品（或存有相關(guān)參數(shù)、校準(zhǔn)曲線等信息的ID卡等）、濃縮洗滌液等?；瘜W(xué)發(fā)光類試劑盒根據(jù)包被固相載體（發(fā)光板或磁珠）的不同，從組成部分的呈現(xiàn)形式上分為板式化學(xué)發(fā)光和磁微?；瘜W(xué)發(fā)光。板式化學(xué)發(fā)光類試劑盒中抗體或抗原包被到微孔板上得到的是固相的發(fā)光板；磁微粒化學(xué)發(fā)光類產(chǎn)品中用來包被抗體或抗原的固相載體為磁珠，需要分散在某種磁微粒保存液中，故試劑盒的該組成部分為液相（圖7所示）。圖7 磁微?；瘜W(xué)發(fā)光類試劑盒組成示意圖3）主要原材料化學(xué)發(fā)光類試劑盒的主要原材料包括主要生物原料、生物輔料、化學(xué)制劑、微孔板或磁微粒等其他原輔料。主要生物原料：各種天然抗原、重組抗原、單克隆抗體或多克隆抗體以及酶等。這類原料可用于包被發(fā)光板或磁珠、制備標(biāo)記結(jié)合物、校準(zhǔn)品（參考品）、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）等。生物輔料：小牛血清、山羊血清、牛血清白蛋白和酪蛋白等。用于制備發(fā)光板的封閉液、磁微粒保存液、校準(zhǔn)品（參考品）、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、標(biāo)記結(jié)合物等?；瘜W(xué)制劑：主要有無機類（氯化鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、硫酸等）、有機類（吐溫、三羥基氨基甲烷等）等化學(xué)制劑。用作表面活性劑和制備緩沖液、濃縮洗滌液、終止液等。還有用來制備發(fā)光底物的魯米諾和/或用作發(fā)光劑的吖啶酯等。其他原輔材料：微孔板或磁微粒、芯片（或ID卡）等，用于制備反應(yīng)的固相載體和存儲必要的電子信息。板式化學(xué)發(fā)光試劑產(chǎn)品生產(chǎn)使用的微孔板與酶聯(lián)免疫分析法試劑的微孔板有明顯的差異，通常化學(xué)發(fā)光為不透明的微孔板，而酶聯(lián)免疫分析方法使用的是透明的微孔板。4）主要生產(chǎn)設(shè)備板式化學(xué)發(fā)光類試劑盒的生產(chǎn)設(shè)備、主要生產(chǎn)工藝與酶聯(lián)免疫類試劑產(chǎn)品類似。主要生產(chǎn)設(shè)備有天平、量筒、攪拌裝置、干燥設(shè)備、分裝設(shè)備、封口貼標(biāo)設(shè)備、包被機、洗板機、洗封一體機、冷藏箱、冰柜等。5）典型生產(chǎn)工藝主要生產(chǎn)工藝（以板式酶促發(fā)光產(chǎn)品為例，如圖8）：圖8 板式酶促發(fā)光產(chǎn)品生產(chǎn)工藝示意圖對于磁微?；瘜W(xué)發(fā)光類產(chǎn)品，固相載體制備過程為抗體或抗原與磁珠偶聯(lián)，如圖9，然后洗滌、濃縮，用特定的磁微粒保存液將上述偶聯(lián)物溶解。圖9 磁微?；瘜W(xué)發(fā)光產(chǎn)品中含磁微粒組分生產(chǎn)工藝示意圖6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可對分裝前的液體試劑半成品和包裝前的發(fā)光板或偶聯(lián)物進(jìn)行檢驗。成品檢驗時，除外觀、裝量以外的其他檢驗項目應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品說明書要求使用適用的化學(xué)發(fā)光分析儀進(jìn)行檢驗。該類產(chǎn)品目前無通用標(biāo)準(zhǔn)可供參考，僅個別檢測項目的產(chǎn)品有可參考的標(biāo)準(zhǔn)，如YY/T 1458-2016抗甲狀腺過氧化物酶抗體定量檢測試劑（盒）（化學(xué)發(fā)光免疫分析法）。檢驗設(shè)備可包括:量筒測量體積，檢驗液體試劑裝量天平測量重量，檢驗試劑裝量適用的化學(xué)發(fā)光分析儀檢測除外觀、裝量以外的其它性能指標(biāo)，如準(zhǔn)確度、最低檢出限等。板式化學(xué)發(fā)光試劑產(chǎn)品的使用方法（檢驗操作方法）與酶聯(lián)免疫類試劑產(chǎn)品類似，可簡單概括為：將校準(zhǔn)品、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、待測樣本加入發(fā)光板相應(yīng)孔位中加入標(biāo)記結(jié)合物加入洗滌劑洗滌加入發(fā)光底物測量發(fā)光值計算出樣本中待測物的含量。磁微?；瘜W(xué)發(fā)光試劑產(chǎn)品（檢驗操作方法）需要與適用的全自動化學(xué)發(fā)光分析儀配套使用。檢驗過程中，儀器系統(tǒng)執(zhí)行的步驟通常為：將校準(zhǔn)品、陰/陽性對照品（質(zhì)控品）、待測樣本加入相應(yīng)反應(yīng)杯加入磁微粒試劑加入標(biāo)記結(jié)合物加入洗滌劑洗滌加入發(fā)光底物檢測發(fā)光值計算出樣本中被測物的含量。免疫學(xué)診斷類試劑中的免疫層析法試劑、免疫印跡法試劑分別在下文的即時檢測類試劑部分介紹。3. 血細(xì)胞分析用試劑（1）工作原理血細(xì)胞分析可以采用顯微鏡檢查、血細(xì)胞分析儀檢測等檢測方法，利用不同種類血細(xì)胞的體積、形態(tài)、光散射性能、不良導(dǎo)體性能、染色特性等方面的不同，對血細(xì)胞進(jìn)行分析測定。通常臨床血液分析項目有紅細(xì)胞計數(shù)、血紅蛋白、血細(xì)胞比容、白細(xì)胞計數(shù)/分類、血小板計數(shù)等。血細(xì)胞分析儀用試劑一般包括稀釋液、溶血劑、染色液、校準(zhǔn)物、質(zhì)控物等。稀釋液：具有一定的pH、恰當(dāng)?shù)臐B透壓、電導(dǎo)率和電解質(zhì)的平衡液，與人體血細(xì)胞按一定比例稀釋，能使人體血細(xì)胞保持正常生理形態(tài)且分散不易團聚。用于稀釋血液樣本，穩(wěn)定血細(xì)胞，維持待分析細(xì)胞的形態(tài)，以便后續(xù)進(jìn)行血細(xì)胞分析測定。溶血劑：能夠完全溶解紅細(xì)胞，釋放血紅蛋白，并與之形成穩(wěn)定的化合物，在特定波長處測定吸光度值，從而得到血紅蛋白含量；維持待分析細(xì)胞的形態(tài)，用于進(jìn)行白細(xì)胞計數(shù)、白細(xì)胞分類。染色液：對特定血細(xì)胞進(jìn)行染色，增加血細(xì)胞群間差異，從而觀察特定血細(xì)胞形態(tài)與結(jié)構(gòu)或利用血細(xì)胞分析儀進(jìn)行特定血細(xì)胞計數(shù)、分類。血細(xì)胞分析儀用校準(zhǔn)物：以血液或類血液物質(zhì)為原料，加入細(xì)胞保存劑，按配方及工藝制成的血液學(xué)校準(zhǔn)物，該物質(zhì)與臨床血液標(biāo)本性質(zhì)十分接近，通過對校準(zhǔn)物的檢測來調(diào)整血細(xì)胞分析儀的相關(guān)參數(shù)，確保臨床血細(xì)胞分析測量結(jié)果的計量學(xué)溯源性。血細(xì)胞分析儀用質(zhì)控物：以血液或類血液物質(zhì)為原料，加入細(xì)胞保存劑，按配方及工藝制成的血液學(xué)質(zhì)控物，該物質(zhì)與臨床血液標(biāo)本性質(zhì)接近，用于監(jiān)控或評價血細(xì)胞分析儀的工作狀態(tài)。（2）結(jié)構(gòu)組成血細(xì)胞分析用試劑一般為液體瓶裝試劑。（3）主要原材料血細(xì)胞分析用試劑的主要原材料含有或部分含有血液制品、生產(chǎn)工藝用水、熒光染料、化學(xué)制劑等。原料控制點可包括： 生產(chǎn)工藝用水：電導(dǎo)率、總有機物（可氧化物）、微生物限度等。 化學(xué)制劑：純度、雜質(zhì)等。 血液制品：生物安全性、濃度等。（4）主要生產(chǎn)設(shè)備天平、量筒、配料罐、酸度計、過濾裝置、灌裝設(shè)備、封口貼標(biāo)設(shè)備等。（5）典型生產(chǎn)工藝原料稱量溶解配制（與血液制品混合）分裝（凍干干粉適用）貼簽包裝入庫校準(zhǔn)品、質(zhì)控品應(yīng)該有濃度調(diào)配或定值的過程。在溶解配制，企業(yè)根據(jù)產(chǎn)品的特點和性能要求，一般可進(jìn)行溶液的靜置和過濾。（6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可適當(dāng)安排在分裝前。成品檢驗時，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品說明書的要求使用適用的血細(xì)胞分析儀進(jìn)行檢驗。不同種類血細(xì)胞液分析用試劑的性能指標(biāo)存在差異，可參考相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)，如YY/T 0702-2008血細(xì)胞分析儀用質(zhì)控物(品)、YY/T 0701-2008血細(xì)胞分析儀用校準(zhǔn)物、YY/T 0456-2014血液分析儀用試劑系列標(biāo)準(zhǔn)。檢驗設(shè)備可包括:量筒測量體積，檢驗液體試劑裝量天平測量重量，檢驗試劑裝量酸度計檢測試劑的pH值電導(dǎo)率儀檢測稀釋液的電導(dǎo)率冰點滲透壓儀檢測稀釋液的滲透濃度粒子計數(shù)器檢測稀釋液的粒子計數(shù)分光光度計檢測溶血劑、染色劑的吸收峰波長、吸光度值HBsAg、HIV-1/HIV-2抗體、HCV抗體檢測試劑盒（酶聯(lián)免疫吸附法）檢測生物安全性適用的血細(xì)胞分析儀檢測均勻性、重復(fù)性、準(zhǔn)確度、空白計數(shù)等。4. 血凝類試劑（1）工作原理血液凝固即凝血，是指血液由流動的液體狀態(tài)變成不能流動的凝膠狀態(tài)的過程。血液凝固的實質(zhì)是血漿中的可溶性纖維蛋白原變成不可溶的纖維蛋白的過程，該過程中包含一系列的酶促反應(yīng)。血凝類試劑是基于血液中纖維蛋白原變?yōu)槔w維蛋白的過程研發(fā)，體外模擬凝血過程，從而測定血液樣本凝固特性的試劑，與凝血分析儀配套使用，部分項目也可手工測量，測定結(jié)果主要用來評判患者的凝血功能。常見的血凝類試劑有血漿凝血酶原（PT）測定試劑、活化部分凝血酶原時間（APTT）測定試劑、凝血酶時間（TT）測定試劑、纖維蛋白原測定試劑、凝血因子活性檢測試劑等。血凝類試劑反應(yīng)原理以凝固法為主，即模擬生理血液凝固條件，加入血凝試劑啟動血液凝集反應(yīng)，樣本中的纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為纖維蛋白，使樣本發(fā)生凝固。通過連續(xù)監(jiān)測此過程中反應(yīng)體系所發(fā)生的光學(xué)（如吸光度）、物理學(xué)（如黏度）或電學(xué)（如電流）特性變化確定反應(yīng)終點，并作為纖維蛋白原的轉(zhuǎn)化時間（凝固時間）。進(jìn)行手工測量時，將待測血漿按照試劑說明書操作方法與試劑混合后，手工記錄凝固時間；也可配套適用的凝血分析儀進(jìn)行測定。目前常見的凝血分析儀的工作原理有磁珠法、光散射法和光透射法三種。磁珠法凝血分析儀是用電磁傳感器監(jiān)測反應(yīng)杯內(nèi)去磁鋼珠往復(fù)運動幅度，隨著纖維蛋白的產(chǎn)生增多，血漿的粘稠度增加，鋼珠的運動振幅逐漸減弱，經(jīng)過計算處理確定血液凝固點。光散射法和光透射法凝血分析儀是根據(jù)血液凝固過程中濁度的變化來測定凝固時間的，散射法的原理：隨著待測血漿中纖維蛋白凝塊的形成，反應(yīng)體系的散射光強度逐步增加，儀器把這種光學(xué)變化描繪成凝固曲線，當(dāng)樣品完全凝固以后，散射光的強度不再變化，從而計算得到凝固時間。透射法的原理：隨著血液凝固的過程，反應(yīng)體系的吸光度逐漸增加，直到完全凝固后吸光度趨于恒定，儀器自動記錄吸光度的變化并繪制曲線，從而計算得到凝固時間。（2）結(jié)構(gòu)組成凝血類試劑一般為瓶裝干粉或液體試劑，干粉試劑可選配復(fù)溶液。部分產(chǎn)品配有校準(zhǔn)品和質(zhì)控品，如校準(zhǔn)血漿（或定標(biāo)血漿）、質(zhì)控血漿等（如圖10）。活化部分凝血酶原時間（APTT）測定試劑盒中含有APTT激活劑，且該試劑需與CaCl2溶液配合使用。CaCl2溶液可以作為二類體外診斷試劑單獨注冊，也可以與APTT激活劑共同組成一個注冊單元。 圖10 活化部分凝血活酶時間試劑盒（凝固法）組成示意圖（3）主要原材料酶、緩沖液、化學(xué)制劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、生產(chǎn)工藝用水等，校準(zhǔn)品和質(zhì)控品主要原材料還包括血液制品、抗凝劑等。酶：組織凝血活酶（如人腦、兔腦、胎盤或肺組織等制品的浸出液）、部分凝血活酶（如兔或人腦磷脂）、凝血酶（如牛凝血酶）、組織因子等，與其他成分（如Ca2+、白陶土）聯(lián)合以不同形式促使凝血過程的進(jìn)行。緩沖液：巴比妥緩沖液、咪唑緩沖液等?；瘜W(xué)制劑：主要指無機物，如氯化鈣、氯化鈉等。原料控制點可包括：酶：外觀、活性、純度、功能性試驗等。（4）主要生產(chǎn)設(shè)備天平、量筒、酸度計、過濾裝置、灌裝設(shè)備、凍干裝置、封口貼標(biāo)設(shè)備等。（5）典型生產(chǎn)工藝如圖11為液體工藝，凍干產(chǎn)品有凍干工序。圖11 纖維蛋白原測定試劑盒（凝固法）主要生產(chǎn)工藝主要生產(chǎn)工藝為：原料稱量溶解配制分裝（凍干干粉適用）（調(diào)試定值校準(zhǔn)品、質(zhì)控品適用）貼簽成品包裝入庫（6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可對分裝、凍干前的半成品進(jìn)行檢驗。成品檢驗時，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品說明書的要求使用適用的凝血分析儀進(jìn)行檢驗或進(jìn)行手工檢驗。不同廠家相同檢測項目的血凝類試劑的測試結(jié)果可能差異較大，應(yīng)嚴(yán)格按照各自的檢驗規(guī)程和質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行檢驗。目前暫無血凝類試劑的通用標(biāo)準(zhǔn)，個別項目有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)可參考，如YY/T 1156-2009凝血酶時間檢測試劑（盒）、YY/T 1157-2009活化部分凝血活酶時間檢測試劑（盒）、YY/T 1158-2009凝血酶原時間檢測試劑（盒）、YY/T 1159-2009纖維蛋白原檢測試劑（盒）。檢驗設(shè)備可包括:量筒測量體積，檢驗液體試劑裝量天平測量重量，檢驗試劑裝量酸度計檢測試劑的pH值秒表手工測量測定凝固時間適用的凝血分析儀檢測正常血漿測量值、重復(fù)性等試劑的使用方法（檢驗操作方法）應(yīng)嚴(yán)格按照試劑說明書操作，以液體雙試劑活化部分凝血酶原時間（APTT）測定試劑盒（凝固法）為例簡單概括為：待測血漿、質(zhì)控血漿反應(yīng)杯中分別加入試劑1（APTT激活劑）混勻溫育吸取試劑2（氯化鈣溶液）加入反應(yīng)杯啟動秒表（手工測量）或儀器檢測凝固前信號凝血結(jié)束秒表記錄凝固時間（手工測量）或儀器測量血液凝固后信號并轉(zhuǎn)換成凝固時間。血凝類試劑的檢測項目不同，檢測結(jié)果的報告方式也不完全相同，如血漿凝血酶原時間（PT）、活化部分凝血活酶時間（APTT）、凝血酶時間（TT）報告單位為秒（s），其中PT的測定結(jié)果還應(yīng)報告國際標(biāo)準(zhǔn)化比值（INR）；纖維蛋白原（FIB）的報告單位為g/L或mg/dL；凝血因子活性的報告單位為U/L或百分比（%）。5. 即時檢測類試劑即時檢測（POCT）指在采樣現(xiàn)場進(jìn)行的、利用便攜式分析儀器及配套試劑快速得到結(jié)果的檢測方式。這類檢測方式可由實驗室人員或非實驗室人員（如護(hù)士、醫(yī)生、病人及家屬等）完成，廣泛應(yīng)用于大型醫(yī)院、基層醫(yī)院、社區(qū)保健站、私人診所和海關(guān)、災(zāi)害醫(yī)學(xué)救援現(xiàn)場等。即時檢測類試劑的研制方法多樣，各種傳統(tǒng)實驗室技術(shù)經(jīng)適當(dāng)?shù)母倪M(jìn)均能用于POCT。從方法學(xué)出發(fā)，目前常見的有干式化學(xué)技術(shù)、免疫層析技術(shù)、生物傳感器技術(shù)及微流控芯片技術(shù)。（1）干化學(xué)類試劑1）工作原理以濾紙為載體，用各試劑組分（各檢測項目反應(yīng)底物工作液）浸漬后干燥，作為試劑層，固定在支持物（如PVC薄膜基底）上制備成干化學(xué)試紙條，加入血液、尿液等檢驗樣本后發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生顏色變化，部分檢測項目還需加入其他液體試劑組分（如顯色液等）使顏色反應(yīng)發(fā)生，通過肉眼觀察或配套儀器讀取顏色反應(yīng)結(jié)果進(jìn)行定性或半定量檢測，如尿液分析試紙條、陰道炎聯(lián)檢試劑盒等。2）結(jié)構(gòu)組成干化學(xué)類試劑產(chǎn)品一般為試紙條或卡，卡一般由試紙條外套卡殼制成。根據(jù)不同廠家對產(chǎn)品設(shè)計原理、性能要求或使用方法的不同，試劑的主要組成成分可浸漬干燥于試紙條上，部分產(chǎn)品會配有必要的液體試劑組分，如顯色液、終止液、稀釋液等。需要目測讀取檢測結(jié)果的產(chǎn)品，試劑盒內(nèi)、瓶簽或盒簽上一般會有比色卡用于目測比色。 圖12 尿液分析試紙條 圖13 陰道炎聯(lián)檢試劑盒3）主要原材料該類產(chǎn)品的主要原材料有不同基片（反應(yīng)膜材料、試紙支持材料等）、酶類、底物、顯色劑、穩(wěn)定劑、緩沖液、工藝用水、化學(xué)制劑、膠、防腐劑、干燥劑等。原料控制點可包括：酶的檢驗包括外觀、活性、純度、功能性試驗等。4）主要生產(chǎn)設(shè)備天平、量筒、干燥裝置、切條機、壓卡機、封口機等。5）典型生產(chǎn)工藝干化學(xué)試紙的主要生產(chǎn)工藝為：原料稱量溶解配制浸漬干燥單項裁切貼膠復(fù)合組裝分切裝瓶（筒）、貼簽包裝入庫。液體試劑主要生產(chǎn)工藝為：原料稱量溶解配制（靜置、過濾）分裝、貼簽包裝入庫6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可對分裝前的液體半成品、用于浸漬的底物工作液體、分切前的半成品大板條進(jìn)行檢驗。成品檢驗時，應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品說明書的要求使用適用儀器進(jìn)行檢驗或目測檢驗。目前該類產(chǎn)品個別項目有行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)可參考，如YY/T 0478-2011尿液分析試紙條等。檢驗設(shè)備可包括:量筒測量體積，檢驗液體試劑裝量天平測量重量，檢驗試劑裝量游標(biāo)卡尺手工測量膜條寬度、反應(yīng)色塊大小等適用儀器檢測陰/陽性符合率、重復(fù)性等適用儀器如尿液分析儀、陰道分泌物分析儀等。試劑的使用方法（檢驗操作方法）應(yīng)嚴(yán)格按照試劑說明書操作，可簡單概括為：待測樣本滴入反應(yīng)色塊或反應(yīng)孔位反應(yīng)一段時間（加入顯色液、終止液等）在規(guī)定的時間內(nèi)目測或儀器讀取反應(yīng)結(jié)果。尿液分析試紙條、陰道炎聯(lián)檢試劑盒類的干化學(xué)類試劑多項聯(lián)檢產(chǎn)品，其各個檢測項目之間為獨立的反應(yīng)位點，各反應(yīng)之間不存在干擾和影響，僅是將不同的反應(yīng)項目浸漬干燥得到的試劑濾紙物理地粘貼在共同的支持物上，并在空間上保持互不干擾。對于多項聯(lián)檢試劑盒不同的排列組合，原則上劃分為同一注冊單元。不同組合的情形僅限于各單項的檢測反應(yīng)體系之間相對獨立，不相混合的情況。但是單項檢測試劑盒因產(chǎn)品名稱無法與多項檢測試劑盒統(tǒng)一，不建議與多項聯(lián)檢試劑劃分為同一注冊單元。（2）免疫層析類試劑1）工作原理該技術(shù)以固定有檢測線和質(zhì)控線的條狀纖維層析材料為固定相，測試液為流動相，熒光物質(zhì)/膠體金等標(biāo)記抗體或抗原固定于結(jié)合墊，通過毛細(xì)管作用使待測物在層析條上移動。免疫層析類試劑從檢驗原理角度可分為夾心法和競爭法、間接法三類。其中夾心法又分為雙抗體夾心和雙抗原夾心兩種。對于帶有多個抗原決定簇的大分子抗原（蛋白、病毒、致病菌等），通常采用夾心免疫層析方法，待測物（抗原或抗體）在流動相作用下先與熒光物質(zhì)/膠體金標(biāo)記抗體或抗原結(jié)合，當(dāng)層析至檢測線時再與檢測線上包被的另一種抗體或抗原結(jié)合形成雙抗體或雙抗原夾心復(fù)合物，也稱為“三明治”型夾心復(fù)合物。對于只具有單一抗原表位的小分子抗原，待測小分子抗原與熒光物質(zhì)/膠體金等標(biāo)記抗體結(jié)合后，由于空間位阻作用難以再與檢測線上的包被抗原結(jié)合。具有單一抗原表位的小分子待測物多采用競爭免疫層析法檢測。采用競爭法的產(chǎn)品的檢測信號強度與樣本中被測物的濃度成反比。間接法主要用于血清中抗體的檢測，待測抗體在流動相作用下先與熒光物質(zhì)/膠體金標(biāo)記抗抗體結(jié)合，當(dāng)層析至檢測線時被檢測線上包被的特異性抗原結(jié)合形成復(fù)合物，通過對標(biāo)記物的檢測可以判定待測抗體的含量。免疫層析類試劑的主體部分（檢測條）采用熒光物質(zhì)/膠體金等標(biāo)記的抗體或抗原包被于玻璃纖維膜、聚酯膜等載體上制備結(jié)合墊，將相關(guān)抗原或抗體固相連接在包被膜（硝酸纖維素膜）的檢測區(qū)（T線）和質(zhì)控區(qū)（C線），如圖14。按照液體沿固體表面層析的方向，檢測條或者卡的結(jié)構(gòu)依次為樣品墊、結(jié)合墊、包被膜（硝酸纖維素膜）、吸收墊，各組成部分相互疊壓后粘貼在背襯材料上。根據(jù)廠家對產(chǎn)品的結(jié)構(gòu)設(shè)計和檢測條件的差異，有些產(chǎn)品的試劑盒內(nèi)除檢測條外還包括液體組分，液體組分可為樣本稀釋液或含有標(biāo)記抗體或抗原液體組分。如標(biāo)記抗體或抗原以液體試劑形式存在，檢測條結(jié)構(gòu)中可無結(jié)合墊。圖14 免疫層析類試劑檢測條的結(jié)構(gòu)示意圖每個檢測條上可完成一個或多個檢測項目，即單項檢測試劑和多項聯(lián)檢試劑。根據(jù)注冊單元劃分的要求，多項聯(lián)檢試劑的各測試項目間應(yīng)對特定適應(yīng)癥有協(xié)同診斷意義，且各檢測項目的檢驗原理相同。2）結(jié)構(gòu)組成該類產(chǎn)品一般由檢測條或卡或筆和必要的液體試劑組成，也可以沒有液體試劑。部分產(chǎn)品的試劑盒內(nèi)配有ID卡、芯片或二維碼，用于存儲標(biāo)準(zhǔn)曲線、批號等信息。3）主要原材料免疫層析類試劑產(chǎn)品的主要原材料包括主要生物原料、生物輔料、化學(xué)原料、其他原料等。其中：主要生物原料：天然抗原、重組抗原、單克隆抗體、多克隆抗體等。生物輔料：包括在生產(chǎn)過程中作為蛋白保護(hù)劑用途的生物原料，如牛血清白蛋白。化學(xué)原料：氯化鈉、磷酸鹽和磷酸氫鹽、膠體金、熒光物質(zhì)等。其他原料：玻璃纖維膜、聚酯膜、纖維素濾紙、無紡布、硝酸纖維素膜、濾紙、不干膠塑料等。4）主要生產(chǎn)設(shè)備天平、量筒、移液器、攪拌裝置、加熱裝置、冷藏箱、干燥箱、裁切設(shè)備、劃膜機、封口機等。5）典型生產(chǎn)工藝樣品墊處理樣品墊處理液體配制處理樣品墊結(jié)合墊制備熒光物質(zhì)/膠體金配液熒光物質(zhì)/膠體金標(biāo)記抗原或抗體涂布或噴涂結(jié)合墊包被包被膜檢測線工作液和質(zhì)控線工作液配制噴線檢測條/卡組成貼膜切割（裝卡）裝袋、貼簽液體試劑制備（稀釋液等）液體試劑原料稱量溶解配制分裝、貼簽成品組裝入庫該類定量產(chǎn)品的校準(zhǔn)曲線信息一般存儲在試劑配套的ID卡、芯片或二維碼中，且校準(zhǔn)曲線具有批特異的特點。產(chǎn)品中如果配有ID卡、芯片或二維碼等，生產(chǎn)工藝中需要有該組件的生產(chǎn)工序，通常為批號的錄入、校準(zhǔn)曲線的繪制及存儲。6）產(chǎn)品檢驗過程檢驗可對分裝前的液體半成品、液體工作液、組裝前的各檢測條組件、包裝前的半成品進(jìn)行檢驗。成品檢驗時，需根據(jù)產(chǎn)品說明書要求進(jìn)行目測檢驗或使用適用儀器進(jìn)行檢驗。目前該類產(chǎn)品個別項目有國家標(biāo)準(zhǔn)或行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)可參考，如GB/T 18990-2008促黃體生成素檢測試紙（膠體金免疫層析法）、YY/T 1423-2016幽門螺桿菌抗體檢測試劑盒（膠體金法）等。對于沒有國家標(biāo)準(zhǔn)品