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.,1,艾滋病(AIDS),.,2,實(shí)驗(yàn)室檢查,.,3,免疫學(xué)檢測(cè),流式細(xì)胞儀測(cè)定,.,4,血清學(xué)檢測(cè)(),HIV抗體的初篩試驗(yàn)ELISA(酶聯(lián)免疫試驗(yàn)),.,5,血清學(xué)檢測(cè)(),HIV抗體的確證試驗(yàn)Westernblot(免疫印跡試驗(yàn)),.,6,血清學(xué)檢測(cè)(),HIV抗原檢測(cè)ELISA夾心法,測(cè)定p24抗原敏感性很高(710pg/ml)特異性稍差(可有假陽(yáng)性),.,7,分子生物學(xué)檢測(cè)(1),HIVRNA檢測(cè)RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)),PCR:高溫變性(94)低溫退火(55)適溫延伸(72);經(jīng)2530個(gè)循環(huán),成倍數(shù)擴(kuò)增熒光定量PCR:比常規(guī)PCR多一個(gè)寡聚核苷酸探針(帶一個(gè)熒光發(fā)光分子和一個(gè)熒光淬滅分子)應(yīng)用:PCR查PBMCs前病毒DNA;RT-PCR查血漿中的病毒RNA,.,8,分子生物學(xué)檢測(cè)(2),淋巴細(xì)胞HIVRNA檢測(cè)Northern印跡雜交(Northernblot),原理:RNA片段經(jīng)電泳分離,從凝膠中轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜,再用探針雜交,.,9,分子生物學(xué)檢測(cè)(3),HIV變異株檢測(cè)Sanger測(cè)序法,原理:核酸擴(kuò)增時(shí),核苷酸在某一固定點(diǎn)開始,隨機(jī)在某一特定的堿基處終止,產(chǎn)生A、T、C、G四組不同長(zhǎng)度的一系列核苷酸,通過在尿素變性的PAGE膠上電泳,獲得DNA序列,.,10,病毒檢測(cè),血漿、單核細(xì)胞、腦脊液可分離出HIV操作復(fù)雜,主要用于科研,.,11,診斷,.,12,診斷原則,流行病學(xué)史:有靜脈注射毒品史;多個(gè)性伴和不潔性生活史;輸入未經(jīng)HIV抗體檢測(cè)的血液和血制品史;HIV抗體陽(yáng)性所生的子女;其它(如職業(yè)暴露或醫(yī)源性感染史)。臨床表現(xiàn):高危對(duì)象出現(xiàn)上感樣及單核細(xì)胞增多癥樣表現(xiàn),頸、腋及枕部淋巴結(jié)腫大,肝脾腫大,可考慮急性HIV感染。無(wú)癥狀期、艾滋病期臨床表現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)室檢查:HIV抗體陽(yáng)性,并經(jīng)確證試驗(yàn)確認(rèn)。CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)明顯減少。HIVRNA和P24抗原的檢測(cè)有助于早期診斷新生兒的HIV感染。,.,13,診斷標(biāo)準(zhǔn),急性期流行病學(xué)史、臨床表現(xiàn)、HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體由陰性轉(zhuǎn)為陽(yáng)性無(wú)癥狀期流行病學(xué)史、HIV抗體陽(yáng)性僅實(shí)驗(yàn)室檢查HIV抗體陽(yáng)性,.,14,診斷標(biāo)準(zhǔn),艾滋病期流行病學(xué)史,HIV抗體陽(yáng)性,臨床表現(xiàn)有下列一項(xiàng)或以上:1.短期(6個(gè)月內(nèi))體重下降10以上;2.咳嗽或腹瀉超過4周;3.持續(xù)或間歇發(fā)熱超過4周;4.全身淋巴結(jié)腫大;5.反復(fù)帶狀皰疹或慢性播散性HSV感染;6.口咽念珠菌??;7.全身搔癢性皮炎;8.反復(fù)發(fā)生的敗血癥;9.深部真菌感染,馬爾尼非青霉菌;10.肺孢子蟲肺炎;11.活動(dòng)性巨細(xì)胞病毒感染;12.弓形蟲腦病。13.反復(fù)發(fā)生、難治性肺部感染或進(jìn)展迅速的活動(dòng)性結(jié)核?。?4.中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損、占位性病變或中、青年癡呆癥;15.卡波西肉瘤或淋巴瘤。,.,15,診斷標(biāo)準(zhǔn),HIV抗體陽(yáng)性CD4+T淋巴細(xì)胞數(shù)200/mm3無(wú)上述表現(xiàn)或癥狀,.,16,鑒別診斷,原發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少癥無(wú)HIV感染流行病學(xué)資料,HIV-1和HIV-2病原學(xué)檢測(cè)陰性。繼發(fā)性CD4+淋巴細(xì)胞減少腫瘤和自生免疫性疾?。╝utoimmunedisease)化療或免疫抑制治療后。,.,17,預(yù)后,.,18,影響預(yù)后的因素,感染的HIV型別及亞型:HIV-1較HIV-2臨床進(jìn)展快并發(fā)的機(jī)會(huì)性感染:同時(shí)合并卡波濟(jì)肉瘤及肺孢菌肺炎者病死率最高;合并丙型肝炎者預(yù)后差抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療:治療改變了艾滋病進(jìn)程,.,19,HIV感染未治療者的結(jié)局,典型(70%80%):510年進(jìn)
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