中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)010中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部發(fā)布 2010布 2010施食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中維生素 C 的測(cè)定 of in 010 I 前 言 本標(biāo)準(zhǔn)代替 幼兒配方食品和乳粉 維生素 本標(biāo)準(zhǔn)與 要變化如下： 明確了酶的活力單位； 改變了鄰苯二胺溶液濃度； 含淀粉試樣處理進(jìn)行了改變； 增加了加入硼酸乙酸鈉溶液后的反應(yīng)時(shí)間； 增加了加入鄰苯二胺溶液后的反應(yīng)時(shí)間。 本標(biāo)準(zhǔn)所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為： 413 010 1 食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 嬰幼兒食品和乳品中維生素 C 的測(cè)定 1 范圍 本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了嬰幼兒食品和乳品中維生素 C 的測(cè)定方法。 本標(biāo)準(zhǔn)適用于嬰幼兒食品和乳品中維生素 C 的測(cè)定。本標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定的是還原型維生素 C 和氧化型維生素 C 的總量。 2 規(guī)范性引用文件 本標(biāo)準(zhǔn)中引用的文件對(duì)于本標(biāo)準(zhǔn)的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，僅所注日期的版本適用于本標(biāo)準(zhǔn)。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本標(biāo)準(zhǔn)。 3 原理 維生素 C（抗壞血酸）在活性炭存在下氧化成脫氫抗壞血酸，它與鄰苯二胺反應(yīng)生成熒光物質(zhì)，用熒光分光光度計(jì)測(cè)定其熒光強(qiáng)度，其熒光強(qiáng)度與維生素 C 的濃度成正比，以外標(biāo)法定量。 4 試劑和材料 除非另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為 6682 規(guī)定的三級(jí)水。 粉酶：酶活力 ，根據(jù)活力單位大小調(diào)整用量。 磷酸乙酸溶液 A：稱取 15 g 偏磷酸及 40 酸（ 36 %）于 200 中，溶解后稀釋至 500 用。 磷酸 乙酸溶液 B：稱取 15 g 偏磷酸及 40 酸（ 36 %）于 100 中，溶解后稀釋至 250 用。 性活性炭：稱取粉狀活性炭（化學(xué)純， 80 目 200 目）約 200 g，加入 1 L 體積分?jǐn)?shù)為 10 的鹽酸，加熱至沸騰，真空過濾，取下結(jié)塊于一個(gè)大燒杯中，用水清洗至濾液中無(wú)鐵離子為止，在 110120 烘箱（ 干燥約 10 h 后使用。 檢驗(yàn)鐵離子的方法：普魯士藍(lán)反應(yīng)。將 20 g/ %的鹽酸等量混合，將上述洗出濾液滴入，如有鐵離子則產(chǎn)生藍(lán)色沉淀。 酸鈉溶液：用水溶解 500 g 三水乙酸鈉，并稀釋至 1 L。 酸 乙酸鈉溶液：稱取 3.0 g 硼酸，用乙酸鈉溶液（ 解并稀釋至 100 用前配制。 苯二胺溶液（ 400 ）：稱取 40 苯二胺，用水溶解并稀釋至 100 用前配制。 010 2 生素 C 標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 100 g/稱取 g 維生素 C 標(biāo)準(zhǔn)品，用偏磷酸 乙酸溶液 A（ 解并定容至 50 準(zhǔn)確吸取 10.0 溶液用偏磷酸 乙酸溶液 A（ 釋并定容至 100 用前配制。 5 儀器和設(shè)備 光分光光度計(jì)。 平：感量為 0.1 箱：溫度可調(diào)。 養(yǎng)箱： 45 1 。 6 分析步驟 樣處理 淀粉的試樣：稱取約 5 g（精確至 g）混合均勻的固體試樣或約 20 g（精確至 g）液體試樣（含維生素 C 約 2 150 角瓶中，加入 0.1 g 淀粉酶（ 固體試樣加入 50 5 50 的蒸餾水， 液體試樣加入 305 50 的蒸餾水， 混合均勻后， 用氮?dú)馀懦恐锌諝猓w上瓶塞，置于 45 1 培養(yǎng)箱（ 30 出冷卻至室溫，用偏磷酸 乙酸溶液 B（ 至 100 量瓶中定容。 含淀粉的試樣：稱取混合均勻的固體試樣約 5 g（精確至 g），用偏磷酸 乙酸溶液 A（ 解，定容至 100 稱取混合均勻的液體試樣約 50 g（精確至 g），用偏磷酸 乙酸溶液 B（ 解，定容至 100 測(cè)液的制備 上述試樣（ 維生素 C 標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 至放有約 2 g 酸性活性炭（ 250 角瓶中，劇烈振動(dòng)，過濾（棄去約 5 初濾液），即為試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液。然后準(zhǔn)確吸取 5.0 樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液分別置于 25 50 有 5.0 酸 乙酸鈉溶液（ 容量瓶中，靜置 30 ，用蒸餾水定容。以此作為試樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的空白溶液。 此 30 ， 再準(zhǔn)確吸取 5.0 樣及標(biāo)準(zhǔn)溶液的濾液于另外的 25 50 有 5.0 約 15 的容量瓶中，用水稀釋至刻度。以此作為試樣溶液及標(biāo)準(zhǔn)溶液。 樣待測(cè)液：分別準(zhǔn)確吸取 2.0 樣溶液（ 試樣的空白溶液( 10.0 管中，向每支試管中準(zhǔn)確加入 5.0 苯二胺溶液（ 搖勻，在避光條件下放置 60 待測(cè)。 準(zhǔn)系列待測(cè)液：準(zhǔn)確吸取上述標(biāo)準(zhǔn)溶液（ 0.5 1.0 1.5 2.0 別置于 10 管中，再用水補(bǔ)充至 2.0 時(shí)準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液的空白溶液（ 2.0 10 每支試管中準(zhǔn)確加入 5.0 苯二胺溶液（ 搖勻，在避光條件下放置 60 待測(cè)。 定 準(zhǔn)曲線的繪制 將標(biāo)準(zhǔn)系列待測(cè)液（ 刻移入熒光分光光度計(jì)的石英杯中，于激發(fā)波長(zhǎng) 350 射波長(zhǎng)430 件下測(cè)定其熒光值。以標(biāo)準(zhǔn)系列熒光值分別減去標(biāo)準(zhǔn)空白熒光值為縱坐標(biāo)，對(duì)應(yīng)的維生素 制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 樣待測(cè)液的測(cè)定 010 3 將試樣待測(cè)液（ （ 方法分別測(cè)其熒光值，試樣溶液熒光值減去試樣空白溶液熒光值后在標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得對(duì)應(yīng)的維生素 C 質(zhì)量濃度。 7 分析結(jié)果的表述 試樣中維生素 C 的含量按式( 1)計(jì)算： 1000100=( 1) 式中： X試樣中維生素 C 的含量，單位為毫克每百克（ 00 g） ； V試樣的定容體積，單位為毫升（ c由標(biāo)準(zhǔn)曲線查得的試樣測(cè)定液中維生素 C 的質(zhì)量濃度，單位為微克每毫升（ g/ m試樣的質(zhì)量，單位為克（ g）；