臨床實驗室的環(huán)境與安全防護上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院目的意義N確保工作任務(wù)的完成以人為本,和諧社會相關(guān)重要文件N實驗室生物安全通用要求N中華人民共和國國家標準NGB194892004N實驗室生物安全手冊N（WHO）N年出版N年月再版N微生物和生物醫(yī)學實驗室生物安全通用準則N2002年編寫第一節(jié)臨床實驗室的環(huán)境與安全管理ENVIRONMENTN范疇N非生物環(huán)境（空氣、土壤、水流）N生物環(huán)境（植物、動物、微生物）N要求N無害（無醫(yī)源性污染）N肅靜（允許噪聲）N整潔（整齊清潔）N美觀（擺設(shè)綠化）一、臨床實驗室對環(huán)境的要求N1、空間分配合理N2、運行設(shè)計有效N3、采樣設(shè)施保證隱私、合理N4、設(shè)計與環(huán)境適合所從事的工作N5、特殊的檢測、控制系統(tǒng)建立N6、進出人員、路徑控制N7、區(qū)域整潔、個人防護規(guī)章制度N8、儲存空間與條件設(shè)計圖示廢棄物的處理N要求專門設(shè)置（達標、合理、通暢）N廢棄物包括N污水（先處理后排放）N污物（分類、處理、丟棄）N廢氣（通風、排風）N放射性廢物（埋藏、稀釋、衰變）實驗室的溫濕度N溫度N夏季（1828）N冬季（1620）N濕度N夏季（30）N冬季（70）N精密儀器溫度（夏26，冬20）N濕度（夏冬50）布局N門窗（朝向）N電源（載量、插座、接線板）N儀器（防震、潮、腐蝕、避光）N墻面N地面N天花板N實驗臺N儲物櫥（架）BSL2實驗室BSL3實驗室二、臨床實驗室主要的危害源N（一）生物源危害N（二）化學源危害N（三）物理源危害（一）生物源危害N1、定義N是指對人類和動物有危害或潛在危害的N傳染源。N2、來源N臨床實驗室中處理的病人標本（細菌N病毒、真菌、寄生蟲）（二）化學源危害N1、含義N臨床實驗室內(nèi)的部分化學品具有易燃、N可燃、刺激、腐蝕性或劇毒性等危害。N2、易燃、可燃及自燃等區(qū)別N3、來源易燃、可燃及自燃N1、按照液體的閃點分級N級（28）N級（2845）N級（46120）N級（120）N2、屬于、級易燃液體（酒精）N屬于、級可燃液體（潤滑油）閃點閃燃的最低溫度，閃點越低危險性越大。N閃燃（自燃）N易、可燃物質(zhì)在常溫下自發(fā)熱或沒有N外界熱源的直接作用，由于散熱受到N阻礙使得溫度上升，達到一定溫度便N自發(fā)出現(xiàn)燃燒現(xiàn)象。N對策N限存量、放置通風（水池下）、加強安N意識全（三）物理源危害N一、來源N1、噪音N2、輻射N3、紫外線N4、電磁場N5、其他三、臨床實驗室的安全與防護N（一）電氣設(shè)備N（二）防火N（三）水災(zāi)和其他自然災(zāi)害半自動化學發(fā)光免疫分析儀ECLIAM系列電氣設(shè)備全自動化學發(fā)光免疫分析儀ECLIAA系列用電安全N1、購買電器設(shè)備有準入制N2、安裝、使用、維修（資質(zhì)、操作手冊、N培訓(xùn)、考核與監(jiān)督）N3、電器插座（有地線的雙聯(lián)插座）N4、電器插座（間距）N5、保險絲插座板（編號、就近）N6、定期檢查記錄制度防火N現(xiàn)場配備N滅火設(shè)備N報警裝置N疏散路徑N通道標識N規(guī)章制度N安全實施N責任人、培訓(xùn)常用滅火器的類型與用途N1、二氧化碳滅火器N二氧化碳壓縮于小鋼瓶，啟閥門噴射N最適撲救易燃液體，600V以下帶點N設(shè)備及宜用水、泡沫或干N粉滅火而損壞的N2、泡沫式滅火器N最適撲救非水溶性易染液體（油等）N和固體（木材、橡膠、纖維）N水溶性可、易燃（醇、醚、有機酸）和帶電設(shè)N備、儀器等不能用泡沫式滅火器撲救N3、1211滅火器（鹵化物二氟一氯一溴甲烷）N最適撲救油類、精密儀器設(shè)備、文物、圖書等其他災(zāi)害第二節(jié)臨床實驗室生物污染與生物安全概述N生物安全防護（BIOSAFETYCONTAINMENT）N（定義）指在實驗室環(huán)境下處理和N保存感染性物質(zhì)的過程中采用N的一系列的防護措施，包括一N級防（PRIMARYCONTAINMENT）N和二級防護（SECONDARYNCONTAINMENT）。N概述N生物安全防護（BIOSAFETYCONTAINMENT）N（目的）是減低或消除潛在危險因子N對實驗人員、實驗室內(nèi)外環(huán)境的N污染。N（要素）1、實驗室操作和技術(shù)N2、實驗室安全設(shè)備N3、實驗室設(shè)施設(shè)計N其中一級防護與二級防護有別一級防護與二級防護的區(qū)別N一級防護N包括規(guī)范操作技術(shù)與規(guī)程，配置適當N的安全設(shè)備，保護操作人員和室內(nèi)直N接環(huán)境免遭感染性物質(zhì)的污染。N二級防護N包括合理的實驗室設(shè)施設(shè)計和嚴格規(guī)N范的操作流程，用以保護實驗室外環(huán)N境免受感染性物質(zhì)污染。一、臨床實驗室生物污染的原因及種類N原因致病因子，包括細菌、病毒、真菌N寄生蟲及其他。N種類空氣污染、水的污染、人體污染、N物體表面的污染。N空氣污染N內(nèi)N平面布局、氣流方向合理N死角區(qū)域縮小N外N直接外排或擴散高效過濾N密閉或壓力差水、人體、物體表面污染N實驗過程中產(chǎn)生的大量污水特殊處理后排放N工作人員實驗室感染（接觸、吸入）專門防護規(guī)程N物體表面污染（濺出、溢出、穿用錯誤等）正確實施二、臨床實驗室的生物安全防護N概述N1、目的P234兩個確保N2、內(nèi)容根據(jù)實驗室級別N3、評估實驗對象對人或環(huán)境的危害性（一）實驗室的分類、分級及適用范圍N分類一般生物N脊椎動物一級（BSL1）N分級二級（BSL2）N三級（BSL3）N四級（BSL4）N適用范圍級別不同N要求不同N適用范圍不同NBIOLOGICALSAFETYLABOLATORY,BSL分級原則據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度N（BSL1無致病作用的微生物。N（BSL2）具有中等潛在危害的微生物。N（BSL3呼吸傳播，使人傳染嚴重甚至是致病N微生物及其毒素，傳播途徑明，目前N已有疫苗。NBSL4高度危險性，通過氣溶膠傳播或傳播途N徑不明，目前尚無疫苗或治療方法的致N病微生物及其毒素。不同級實驗室的適用范圍和設(shè)置一級生物安全防護實驗室N1、適用于N用于教學的普通微生物實驗室N2、要求N無須使用生物安全柜二級生物安全防護實驗室（BSL2）1、適用于1含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測2溶液、固定或用其他方法處理滅活的病毒和/或無傳染性病毒基因片段3）常規(guī)的細菌和毒素檢測4）能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理5）臨床樣品的包裝、分裝6）離心管和離心機轉(zhuǎn)頭的封閉與開啟二級生物安全防護實驗室（BSL2）2、特殊情況（1）致病微生物氣溶膠或濺出的操作（2）處理高濃度或大容量感染性材料3、要求在生物安全柜或物理抑制設(shè)備中進行，并使用個體防護設(shè)備。三級生物安全防護實驗室（BSL3）或相當于P3實驗室1、適用于主要通過呼吸途徑使人傳染上嚴重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素（如禽流感），通常已（可）有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究（血清學實驗除外）2、要求在三級生物安全防護實驗室中進行。BSL2（P2）BSL3（P3）BSL4戲稱為魔鬼實驗室分五個區(qū)有10道門潔凈臺/生物安全柜BSCS潔凈工作臺N1、環(huán)境空氣工作臺過濾樣本直接N吹向操作者排入室內(nèi)N2、保護產(chǎn)品，不保護操作人員及操作環(huán)境N3、通過樣本的空氣過濾對直徑大于03微N米的顆粒，過濾效率999無醫(yī)院藥房N或無菌設(shè)備的組裝。生物安全柜N1、環(huán)境空氣進入工作臺過濾樣本N高效過濾排入室內(nèi)或室外N2、經(jīng)過樣本的空氣及排放出的空氣均經(jīng)過N濾，對直徑大于03微米的顆粒，超高N效過濾器的過濾效率為99999。N3、采用負壓裝置，形成氣幕防護屏障，保N護操作人員安全應(yīng)用于有一定生物危險N的操作。潔凈工作臺生物安全柜N1、環(huán)境空氣（流動/排出方式）N2、使用目的（產(chǎn)品、操作人、環(huán)境）N3、空氣濾過能力N4、氣幕屏障N5、應(yīng)用生物安全柜工作原理NN1物理屏障N2高效過濾N3空氣屏障N4定向?qū)恿魃锇踩竦姆中蚇CLASS級生物安全柜NCLASS級生物安全柜N1、CLASSTAPYA型N2、CLASSTAPYB1型N3、CLASSTAPYB2型N4、CLASSTAPYB3型NCLASS級生物安全柜I級生物安全柜N保護操作者和操作環(huán)境。N樣品沒有得到保護。N通過樣品區(qū)的空氣，經(jīng)高效過濾器的過濾之后，100地排放到實驗室環(huán)境中。II級生物安全柜A型B330外排進入環(huán)境30外界空氣補充70經(jīng)過濾后循環(huán)使用II級生物安全柜B1型70外排進入環(huán)境70外界空氣補充30過濾后循環(huán)使用II級生物安全柜B2型N100外排進入環(huán)境N100外界空氣補充N無循環(huán)使用的氣流III級生物安全柜N樣品、操作者、操作環(huán)境都得到保護（操作時戴全密封手套）N100外排進入環(huán)境N100外界空氣補充N無循環(huán)使用的氣流N二實驗室生物安全的個人防護一級生物安全防護實驗室N無須使用生物安全柜和專用特殊設(shè)備等。N應(yīng)穿工作服，手上有皮膚破損戴手套。N操作中可能有危險物濺出應(yīng)有適當防護。二級生物安全防護實驗室N（1）可能產(chǎn)生病菌氣溶膠、濺出的用生物安全柜N（2）當操作不能在安全柜內(nèi)進行，必須外部操作N時，必須使用面部保護（護目鏡、面罩、個體呼N吸保護用品或其他防濺出保護設(shè)備）。N（3）應(yīng)穿工作服或罩衫，離開時，不得穿著外N出，應(yīng)先在實驗室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。N（4）當手可能接觸感染材料，應(yīng)戴手套。如可能N發(fā)生溢出或濺出，應(yīng)戴兩副手套，一次性手套不N得清洗和再次使用。三級生物安全防護實驗室N（1）必須安裝級或以上生物安全柜，感N染性材料的操作應(yīng)在生物安全柜中進行。N（2）當操作不得不在柜外進行時，必須個N體防護與使用物理抑制設(shè)備綜合防護措施N（3）在進行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生N感染性氣溶膠的操作時，必須使用個體防N護設(shè)備（如呼吸保護裝置等）。N（4）入室工作前/后有專用更衣室，室內(nèi)有必備品（消毒劑、沖洗液、藥品等）。四級生物安全防護實驗室N1、在級生物安全柜中進行操作。N2、入室必須換上全套實驗室服裝。N3、實驗室必備的配套裝置與裝備。三實驗室設(shè)計和建造的特殊要求N（1）選址N（2）選材N（3）布局設(shè)計N（4）內(nèi)部設(shè)施（1）選址NBSL1有門能與外界隔開NBSL2應(yīng)遠離公共場所NBSL3單獨隔離區(qū)域或獨立建筑NBSL4特殊工程（2）選材N1、使用堅固器材N2、便于清洗，防滑，無縫隙，防水、耐N熱、耐消毒劑及相應(yīng)的化學用品等。N3、密封性能好。（3）布局設(shè)計N1、合理N2、大型設(shè)備固定、有空間N3、生物安全柜安裝無礙實驗室的通、排風N4、有光線，避免反光、閃光等（4）內(nèi)部設(shè)施NBSL1洗手池（近出口），移液器。NBSL2洗手池（肘動），消毒設(shè)施，生N物安全柜。NBSL3還需設(shè)置緩沖區(qū)，密封，獨立的N管道化排氣系統(tǒng)，“潔”至“污”的氣N流流向，級生物安全柜（套）。NBSL4專門設(shè)施四臨床實驗室安全操作規(guī)程N1、每個實驗室必須制定N2、不同等級，不同要求NBSL1采用標準的微生物操作規(guī)程NBSL2還需特殊安全操作規(guī)程NBSL3同上有進一步要求NBSL4略標準的微生物操作規(guī)程N1、準入制N2、工作區(qū)禁止事項（飲、吸、化妝等）N3、手N4、禁止口吸N5、實驗室的整潔與消毒（臺、地面等）N6、培養(yǎng)、儲存及廢棄物的指定處置N7、銳器使用的安全性N8、意外事故緊急預(yù)案N9、標志醒目N10、控制昆蟲、嚙齒類動物的措施特殊安全操作規(guī)程N1、實驗室門、窗N2、實驗室負責人的最終責任確認N3、入室人員的限制、培訓(xùn)、體檢與預(yù)防N4、對污染銳器的使用規(guī)定N5、實驗產(chǎn)生污染性廢棄物處置規(guī)定N6、器材、設(shè)備污染處理，維修維護N7、偶然事件的應(yīng)急預(yù)案N8、監(jiān)測系統(tǒng)的運作三、微生物實驗室生物安全防護N1、臨床微生物實驗室中引起實驗室獲得性N感染的微生物種類N細菌布魯菌、銅綠、結(jié)核、腸道致病菌等N病毒經(jīng)血、呼吸道傳播的病毒，其他病毒N真菌二相真菌、孢子菌等N其他衣原體、鉤端螺旋體等N寄生蟲弓形體、瘧原蟲、血吸蟲等三、微生物實驗室生物安全防護N2、引起微生物實驗室中工作人員發(fā)生實驗N室獲得性感染的途徑N經(jīng)空氣傳播吸入（氣溶膠、實驗物）N經(jīng)口傳播“手口”，食入N直接接種針刺、劃傷或咬傷N黏膜接觸（眼結(jié)膜）N節(jié)肢動物媒介蚊、蜱、跳蚤等三、微生物實驗室生物安全防護N3、臨床微生物實驗室中引起微生物感染機N體的方式N接觸損傷皮膚和黏膜N吸入N食入N接觸感染動物（見教材P250）三、微生物實驗室生物安全防護N4、微生物實驗室中病原微生物危險度評價N依據(jù)N對人或動物毒性的強弱N特定病原體是否存在國內(nèi)N引發(fā)臨床癥狀輕重、病程長短、預(yù)后情況N潛伏、慢性、不典型難診斷，無法預(yù)防三、微生物實驗室生物安全防護N5、微生物實驗室中病原微生物危險度分類N標準N級危險個體/群體極大危害N級危險個體極大危害/群體極小N級危險個體中度危害/群體較小N級危險個體/群體沒有或極小三、微生物實驗室生物安全防護N6、微生物實驗室操作的生物安全保障措施N工作人員的培訓(xùn)與教育N工作人員的安全教育N微生物實驗室操作流程的指定與實施N（樣本收集、運輸，接種，混勻，研磨，移液，N開封，離心，注射，搬運，銳利器材使用等）三、微生物實驗室生物安全防護N7、微生物實驗室消毒措施N功能區(qū)域劃分不同，采用措施不同。消毒區(qū)域（空氣、地面、物體表面、手等）消毒方式（照射、消毒劑、洗滌等）意外事件三、微生物實驗室生物安全防護N8、微生物實驗室廢棄物及處理措施N屬于感染性廢棄物被廢棄的各種標本被標本污染的物品和容器實驗畢的所有消耗品處置方法滅菌和焚燒實施注意點回收物應(yīng)先消毒后清洗三、微生物實驗室生物安全防護N9、應(yīng)急措施N常備藥品，特殊備用藥品等N10、微生物實驗室的“常規(guī)預(yù)防措施”N11、微生物實驗室的菌種分類與保存N菌種引發(fā)實驗室感染的機會、嚴重性等分四類N菌種保存必須規(guī)范（責任制）四、臨床實驗室的消毒與滅菌N消毒滅菌方法熱力滅菌N物理輻射消毒N超聲消毒N濾過除菌N干燥或低溫抑菌N化學消毒N防腐N手衛(wèi)生N目的N控制醫(yī)院性感染的最重要N最簡便易行的措施N之一。N（包括保護個人自己）手衛(wèi)生N依據(jù)N常居菌的存在（大部分人體皮膚上能N分離到的，如凝固酶陰性葡萄球菌、棒狀N桿菌類、不動桿菌屬、丙酸菌屬及某些腸N道細菌族成員等），固有，不易被機械性N的摩擦清除。手衛(wèi)生N暫居