G 中華人民共和國 國 家標準 9683 2013 食品安全國家標準 動物 性 食品 中對乙酰氨基酚殘留 量的測定 高效液相色譜法 in 電子版本僅供參考，以標準正式出 版物為準） 2013布 2014施 中華人民共和國農(nóng)業(yè)部 中華人民共和國 國家衛(wèi)生和計劃生育委員會 發(fā)布 I 目 次 目 次 . I 前 言 . 物性食品中對乙酰氨基酚殘留量的測定 高效液相色譜法 . 1 范圍 . 2 規(guī)范性引用文件 . 3 原理 . 4 試劑和材料 . 5 儀器和設(shè)備 . 6 試料的制備與保存 . 料的制備 . 品的保存 . 7 測定步驟 . 取 . 化 . 準曲線的制備 . 定 . 白試驗 . 8 結(jié)果計算和表述 . 9 檢測方法的靈敏度、準確度、精密度 . 敏度 . 確度 . 密度 . 附 錄 A . 言 本標準的附錄 A 為資料性附錄。 本標準系國內(nèi)首次發(fā)布的國家標準。 動物性 食品 中對乙酰氨基酚殘留量的測定 高效液相色譜法 1 范圍 本標準規(guī)定了動物 性食品 中對乙酰氨基酚殘留量檢測的制樣和高效液相色譜測定方法。 本標準適用于豬、牛 和 羊 的 肌肉、肝臟和腎臟組織中對乙酰氨基酚殘留量 的 檢測。 2 規(guī)范性引用文件 下列文件中的條款通過本標準的引用而成為本標準的條款。凡是注日期的引用文件， 其 隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本標準，然而，鼓勵根據(jù)本標準達成協(xié)議的各方研究是否可使用這些 文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本標準。 準化工作導(dǎo)則 第 1 部分：標準的結(jié)構(gòu)和編寫規(guī)則 6682 分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法 3 原理 試料中殘留的乙酰氨基酚， 用乙酸乙酯提取， 凈化，甲醇洗脫，氮氣吹干，流動相溶解，高效液相色譜測定，外標法定量。 4 試劑和材料 以下 所用試劑，除特別注明者外均為分析純；水為符合 6682 規(guī)定的一級水。 乙酰氨基酚標準品 ： 含量 99%。 醇 ： 色譜純 。 酸乙酯 己烷 相萃取柱 ： 60 相當者 。 5%甲醇水溶液 ： 取 甲醇 5 水 溶解并稀釋 至 100 乙酸銨溶液 ： 取乙酸銨 g，用水溶解并稀釋 至 1 000 濾膜 過濾。 1 mg/乙酰氨基酚標準貯備液 ： 精密 稱取對乙酰氨基酚 10 于 10 瓶中， 用甲醇溶解 并稀釋至刻度 ， 配制 成 濃度為 1 mg/ 對 乙酰氨基酚 標準貯備液 。 以下 保存，有效期 3 個月。 0 g/乙酰氨基酚標準工作液 ： 精密量取 1 mg/ 乙酰氨基酚 標準貯備液 1.0 于 100 瓶中， 用流動相 溶解并 稀 釋 至刻度，配制 成濃度 為 10 g/ 對乙酰氨基酚 標準工作液 。 現(xiàn)配現(xiàn)用。 5 儀器和設(shè)備 效液相色譜儀 ： 配紫外檢測器 。 析天平 ： 感量 1 g。 平 ： 感量 g。 凍高速離心機 漿機 渦混合器 環(huán)水真空泵 塞離心管： 50 膜： m。 6 試料的制備與保存 料 的制備 取新鮮或冷凍 的 空白 或 供試組織，去除筋膜，絞碎，并使均質(zhì)。 取 均質(zhì)后的供試樣品 ，作為供試 試料 。 取 均質(zhì)后的 空白樣品，作為空白 試 料。 取均質(zhì)后的空白樣品，添加適宜濃度的標準 工作 液，作為空白添加試料。 料 的保存 以下保存 。 7 測定步驟 取 稱取試料（ 5g， 于具塞離心管中，加乙酸乙酯 20 渦 2 6 000 r/心 15 上清液 ， 于 另一 離心管中， 殘渣中 加乙酸乙酯 10 重復(fù)提取一次 ， 合并 兩次 上清液， 6 000 r/ 10 上清液 ， 于 45 水浴 蒸發(fā) 至干， 用 甲醇 3 解 殘余物 ， 加 正己烷 5 勻 ， 靜置分層， 棄 正己烷層 液 ， 取 下 層 液 ， 于 45 水浴氮氣吹干， 用 水 6 解 殘余物 ， 10 000 r/心10 上清液，備用。 化 依次 用甲醇 3 水 3 化， 取 備用液過柱，控制流速小于 2 mL/用 水 3 5甲醇 3 洗，甲醇 4 脫，收集洗脫液 ，于 40 45 水浴 氮氣吹干， 用 流動相 1.0 解殘余物 ， 10 000 r/心 5 上清 液 ， 供高效液相色譜 測定 。 準曲線的制備 精密量取 10 g/乙酰氨基酚標準工作液適量，用流動相 稀釋 ，配制 成濃度 為 10、 25、 50、100、 200、 400、 800 和 1 600 g/L 的 系列 標準 溶液 ，供高效液相色譜 測定 。 以 測 得 峰面積為縱坐標，對應(yīng)的標準溶液 濃度為橫坐標，繪制標準曲線。 求回歸方程和相關(guān)系數(shù)。 定 相色譜條件 色譜柱： 250 .6 徑 5 m） ， 或相當者 。 流動相：甲醇 + 乙酸銨溶液 （ 20+80， v/v）。 流速： 1.0 mL/ 紫外檢測波長： 250 進樣量： 50 L。 柱溫： 30 。 定法 取試樣溶液和相應(yīng)的 標準 溶液，作單點或多點校準，按外標法以峰面積計算 。 標準 溶液及試樣溶液中對乙酰氨基酚響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測的線性范圍之內(nèi)。在上述色譜條件下， 標準 溶液 空白 添加 試樣溶液 的高效液相色譜圖分別見附錄 A。 白試驗 除不加試料外，采用完全相同的步驟進行平行操作。 8 結(jié)果計算和表述 試料中對乙酰氨基酚 藥物 的殘留量（ g/按 下式 計算 式中： X 供試 試料中對 乙酰氨基酚 藥物殘留量 ， g/ A 試樣溶液中對 乙酰氨基酚 的峰面積； 標準工作液中對 乙酰氨基酚 的峰面積； 標準工作液中對 乙酰氨基酚 的濃度 ， g/L； V 溶解殘余物所 用流動相 體積 ， m 供試試料 質(zhì)量 ， g。 注：計算結(jié)果需扣除空白值，測定結(jié)果用平行測定的算術(shù)平均值表示，保留三位有效數(shù)字。 9 檢測方法的靈敏度、準確度、精密度 敏度 本方法的 檢測限為 3 g /定量限為 10 g / 確度 本方法在 10 100 g/加 濃度 水平上的 回收率為 70% 110%。 密度 本方法批內(nèi) 相對標準偏差 15%， 批間 相對標準偏差 15%。 附 錄 A (資料性附錄 ) 10 00 10 20 30 4分鐘2 4 6 8 1 0 1 2 圖 乙酰氨基酚標準 溶 液 色譜圖