1、基因工程 、選擇題（每小題1.5分，共15分）1 基因工程的創(chuàng)始人是（）。A A. Kornberg B W. Gilbert C P. Berg D S. Cohen2 關于宿主控制的限制修飾現象的本質，下列描述中只有（） 不太恰當。A由作用于同一 DNA序列的兩種酶構成 B這一系統(tǒng)中的核酸酶都是H類限制性內切核酸酶C這一系統(tǒng)中的修飾酶主要是通過甲基化作用對DNA進行修飾D不同的宿主系統(tǒng)具有不同的限制-修飾系統(tǒng)3 .在DNA勺3' -5 '鏈上，基因的起始密碼子是 （）A ATG （或 GTG B AGT C TAG D TGA4.11限制性內切核酸酶可以特異性地識別（）A雙

2、鏈DNA的特定堿基對B雙鏈DNA的特定堿基序列C特定的三聯密碼D以上都正確5.末端轉移酶是合成酶類，具有(） 活性。A3'>5' DNA聚合酶B5'>3' DNA聚合酶C5' >3' DNA內切酶D 5' >3' DNA外切酶6 .下面關于松弛型質粒（relaxed plasmid）性質的描述中，（） 是不正確的。A質粒的復制只受本身的遺傳結構的控制，因而有較多的拷貝數。B可以在氯霉素作用下進行擴增。C 通常帶有抗藥性標記。D 同嚴緊型質粒融合后，雜合質粒優(yōu)先使用松弛型質粒的復制子。7 .關于cDNA的最正

3、確的說法是（）。同mRN短補的雙鏈DNA以上都正確A同mRN短補的單鏈DNABC以mRN的模板合成的雙鏈 DNA D8 .關于T4 DNA Ligase，下列說法中哪一項不正確 ？（）A是最常用的DNA連接酶。B不但能連接粘性末端，還能連接齊平末端。C不但能連接粘性末端。D最適溫度37 °C9 下列關于建立 cDNA文庫的敘述中，（）是錯誤的？A從特定組織或細胞中提取 DNA或 RNA B用反轉錄酶合成mRNA勺對應單鏈DNAC以新合成的單鏈 DNA為模板合成雙鏈 DNAD新合成的雙鏈DNA克隆到載體上，并導入受體細胞10 用下列方法進行重組體的篩選，只有（）說明外源基因進行了表達。

4、A Southem blot B Northem blot C Western印跡 D原位菌落雜交、填空題（每空1分，共25分）1 .限制性內切核酸酶分為三類，基因工程中應用的是 。2 .為了防止 DNA的自身環(huán)化，可用 去雙鏈DNA3. 切口平移（nick translation） 法標記DNA探針時應用的酶是_ _。4 基因工程中的3種主要類型的載體是 、。5野生型的M13不適合用作基因工程載體，主要原因是 、和。6 .黏粒（cosmid） 是雜合載體。7 引物在基因工程中至少有4個方面的用途：（1）、 （3） 址 8. Northern印跡和Southern印跡有兩點根本的區(qū)別：（1）、

5、，（2） PCF反應中常用的酶是 一。-2 -DNA三個部分9. 感受態(tài)的大腸桿菌細胞在溫度為 時吸附DNA,時攝人外源10. 用堿法分離質粒 DNA時，染色體DNA之所以可以被除去，是因為 。11. 除具有較低的分子量外，一個理想的質粒載體必需包括 、_12. 轉基因植物操作中常用的載體是 。13. pcDNA3.1 用于。三、名詞解釋（每小題 4分，共20分）1 目的基因：2 .基因工程：3 .載體：4. Western 印跡：5 .核酸分子雜交：四、簡答題（每小題10分，共20分）1. 基因工程的基本操作程序 ？怎樣制備目的基因？-3 -基因工程評分標準與參考答案一、 選擇題：每小題1.

6、5分，共15分；多選不得分。1d; 2b; 3a; 4b; 5b; 6c; 7c; 8c; 9a; 10c二、填空題：每空1分，共25分1 . II類酶。2 堿性磷酸酶；5'端的磷酸基團2. DNA聚合酶 I。4 .質粒DNA病毒DNA質粒和病毒 DNA雜合體5 沒有合適的限制性內切核酸酶識另U位點；選擇標記6 .質粒和噬菌體7 合成探針；合成cDNA用于PCR反應；進行序列分析8 .印跡的對象不同：Northern是RNA Southern是DNA ）電泳條件不同，前者是變性條件，后者是非變性電泳9. Tag DNA聚合酶10. 0 C； 42 C11染色體變性后來不及復性12 .復

7、制起點；選擇標記；克隆位點13. Ti質粒14 .外源基因導入哺乳動物細胞三、名詞解釋（每小題 4分，共20分）1 .在基因工程中被操作的DNA序列；又稱外源基因（foreign gene/exogenous gene），主要是指編碼蛋白質的結構基因（structuralgene）；它們可以從自然界中已有的物種基因組（genome）中分離出來，也可以用人工的方法合成。2 按照人們的意愿，進行嚴密的設計，通過體外DNA重組和轉基因等技術，有目的地改造生物種性，生產生物活性物質，甚至創(chuàng)造新物種的技術。3 攜帶外源基因進入受體細胞的DNA分子。3. Western印跡是將蛋白質經電泳分離后從凝膠中轉移到固相支持物上；然后用特異性的抗體進行檢測；可說明基因是否進行了 表達。4. 用標記的探針檢測出 DNA或 RNA同源序列的技術；原理是堿基互補；常用的有Southern blot 、Northern blot 和原位雜交。四、簡答題（20分）1 .目的基因的制備；目的基因與載體連接；目的基因導入受體細胞；目的基因的表達與檢測。或者：轉、接、切、增、檢（加以 解釋）。2 .直接分離法、構建基因文庫分離法、PCR擴增法、人工合成法等。（加以解釋）五、實驗與論述題（20分） 由于基因已被測序，可通過RT-PCR方法克隆該基因； 也或通過基因文庫分