1、土壤銨態(tài)氮測(cè)定方法原理 :用 2mol/L KCl 溶液浸提土壤，把吸附在土壤膠體上的 NH +4及水溶性 NH+4 浸提出來。土壤浸出液中的銨態(tài)氮在強(qiáng)堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯酚作用，生 成水溶性染料靛酚藍(lán)，溶液的顏色很穩(wěn)定。在含氮 0.050.5mg/L 的范圍內(nèi)，吸 光度與銨態(tài)氮含量成正比，可用比色法測(cè)定。實(shí)驗(yàn)步驟：（1） 稱取10.00g新鮮土樣（精確到0.01g）,置于200ml三角瓶中，加入KCI 溶液100ml，在搖床里振蕩30min，取出靜置后，取上清液過濾；（2）吸取浸提液5ml放入50ml容量瓶中，后加入KCI溶液10ml、苯酚溶液 5ml、次氯酸鈉堿性溶液5ml,搖勻；（3

2、） 在25C左右室溫下放置1小時(shí)后，加入掩蔽劑1ml，然后用水定容至刻度， 在 625nm 波長(zhǎng)處進(jìn)行比色。工作曲線繪制：分別取 0.00 ， 0.50 ， 1.00 ， 2.00 ， 3.00 ， 4.00 ， 5.00ml 銨態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)溶 液于 50ml 容量瓶中，各加入 10ml KCl 溶液,然后同（2） （3）步驟進(jìn)行。試劑配制：【2mol/L KCl溶液】：稱取149.1g KCl（分析純）溶入水中，稀釋至1L?！颈椒尤芤骸浚悍Q取苯酚（分析純） 10g、 NaOH （分析純） 5g 和消極鐵氰 化鈉（分析純）0.1g稀釋至1L。（此試劑不穩(wěn)定，須貯于棕色瓶中，在冰箱中 4°

3、C 保存，使用時(shí)用酸調(diào)節(jié) PH 酸性）【次氯酸鈉堿性溶液】：稱取NaOH （分析純）10g、磷酸氫二鈉（分析純） 7.06g、磷酸鈉（分析純）31.8g和52.5g/L次氯酸鈉（分析純，即含 5%有效氯 的漂白粉溶液）10mL溶于水中，稀釋至1L.（貯于棕色瓶中，在冰箱中4C保存， 使用時(shí)放置至室溫 ）【掩蔽劑】 ： 將 400g/L 的酒石酸鉀鈉（分析純）與 100g/L 的 EDTA 二鈉鹽溶液等體積混合。每100ml混合液中加入10mol/L NaOH溶液0.5ml?！句@態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)溶液】：稱取0.4717g于105C烘2小時(shí)的（NH4）2SO4（分析純）溶于水，定容至1L。（使用時(shí)將標(biāo)準(zhǔn)液

4、稀釋20倍即p（ N） =5ug/mL ）土壤銨態(tài)氮的測(cè)定 一、方法原理土壤銨態(tài)氮是土壤速效氮的重要組成部分， 測(cè)定土壤 NH4+-N 的方法主要有 直接蒸餾法和浸提法兩類， 直接蒸餾法是在氧化鎂的存在下直接蒸餾土壤， 但此 法在弱堿性蒸餾時(shí)仍可能使一些簡(jiǎn)單的有機(jī)氮微弱水解有 NH3 蒸出，易使結(jié)果 偏高，同時(shí)該法操作復(fù)雜，不適合大批量分析。故在 ASI 法中采用氯化鉀溶液 提取土壤中的NH4+，提取液中的NH4+用靛酚藍(lán)比色法，靛酚藍(lán)比色法的靈敏 度高，準(zhǔn)確度也較高，適合于大批量樣品的自動(dòng)化分析。靛酚藍(lán)比色法的基本原理是：土壤膠體上的 NH4+被K+交換下來后，在強(qiáng) 堿性介質(zhì)中與次氯酸鹽和苯

5、酚反應(yīng)， 生成水溶性染料靛酚藍(lán)， 其深淺與溶液中的 NH4+-N含量呈正比，線性范圍為 0.050.5mg/L之間。二、試劑配制1. NaOH 溶液將6.75g NaOH、0.75g EDTA二鈉、1.25g醋酸鈉溶解于250ml水中，儲(chǔ)存于250ml 的容量瓶中。其中EDTA二鈉作為金屬離子的掩蔽劑，防止干擾。醋酸鈉可增強(qiáng) 顏色的穩(wěn)定性。2. 90%苯酚溶液將45g苯酚溶解于50ml水中，注意苯酚易結(jié)塊，可加熱到 60-70C。3. 堿性苯酚溶液測(cè)定當(dāng)天，將 36ml 90%苯酚溶液加到 250ml 溶液中，搖勻。4. 次氯酸鈉溶液在400ml的水中加入100ml的NaCIO溶液即可。5.

6、NH4+-N 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制 (改進(jìn)的地方 )稱取1.9105g NH4Cl (65C烘4h)，于500ml的容量瓶中，加水定容至刻度。 該溶液的濃度為 1000mg/L.用移液管吸取 1ml 于 100ml 的容量瓶中，用蒸餾水定容至刻度，搖勻，此時(shí) 容量瓶中溶液濃度為10mg/ml。再對(duì)該溶液分別取0, 0.5, 1, 2, 4, 8ml于25ml 的比色皿中，對(duì)應(yīng)的濃度為 0.0，0.2， 0.4, 0.8, 1.6， 3.2 ppm(mg/L).6. 浸提劑 KCl 溶液的配制稱取 74.5g KCl 溶解于 500ml 水中，并加 0.25g 聚丙烯酰胺至 1000ml 容量 瓶中。

7、為 1mol/L 的溶液。三、操作步驟1. 樣品的處理：用電子分析天平稱取約為 2.000g 土樣于錐形瓶中，加入 40ml 的KCl溶液，放于振蕩機(jī)上，振蕩1h,將其過濾于50ml的容量瓶中，同時(shí)做 空白試驗(yàn)。2. 向有一定量的NH4+-N溶液中加入4ml堿性苯酚溶液，再用加液器加入 10ml 次氯酸鈉溶液，用KCl滴至刻度線，搖勻，放置1h后，用分光光度計(jì)在630nm 處比色，讀取吸光度 A。3. 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：從濃度為0.0, 5.0, 10.0, 20.0, 40.0 ppm(ug/mL)的NH4+-N 標(biāo)準(zhǔn)溶液中各取 1.0ml 的溶液于 25ml 的比色管中，補(bǔ)加 KCl 溶液至

8、 10.0ml,然后按步驟2進(jìn)行操作。四、比色條件：（1）堿性介質(zhì)中反應(yīng)，要求 pH 。（2）顯色和穩(wěn)定時(shí)間：在室溫下（20 C） 一般顯色時(shí)間約為1小時(shí)，但要完全顯色約需2-3小時(shí), 所以加入試劑后靜置 1 小時(shí)即可比色。穩(wěn)定時(shí)間為24小時(shí)，或24小時(shí)以上。為加速顯色，也可在40 C下加熱, 半小時(shí)即可顯色。（ 3）干擾離子： 因在堿性下顯色，很多金屬離子都有干擾，可用 EDTA 等螯合劑來掩蔽。（ 4）測(cè)定范圍： ；（ 5）比色波長(zhǎng)： 625nm。五、評(píng)價(jià) 優(yōu)點(diǎn)：蘭色穩(wěn)定，比色液為真溶液，靈敏度高；準(zhǔn)確度、精密度高；干擾離子可 用 EDTA 掩蔽。缺點(diǎn)：試劑不穩(wěn)定，須冷藏，或當(dāng)天配制；試劑

9、有毒；顯色時(shí)間稍長(zhǎng)。土壤硝態(tài)氮的測(cè)定A 紫外分光光度法1、方法提要土壤浸出液中的N03-，在紫外分光光度計(jì)波長(zhǎng) 210nm處有較高吸光度， 而浸出液中的其它物質(zhì)，除 OH-、CO32-、HC03-、NO2-®有機(jī)質(zhì)等外，吸光度均 很小。將浸出液加酸中和酸化，即可消除 OH-、CO32-、HC03-的干擾。N02-般 含量極少，也很容易消除。因此，用校正因數(shù)法消除有機(jī)質(zhì)的干擾后，即可用紫 外分光光度法直接測(cè)定NO3-的含量。待測(cè)液酸化后，分別在210nm和275nm處測(cè)定吸光度。A210是NO3-和以 有機(jī)質(zhì)為主的雜質(zhì)的吸光度；A275只是有機(jī)質(zhì)的吸光度，因?yàn)?”。3-在275nm處

10、已無吸收。但有機(jī)質(zhì)在275nm處的吸光度比在210nm處的吸光度要小R倍，故 將A275校正為有機(jī)質(zhì)在210nm處應(yīng)有的吸光度后，從 A210中減去，即得NO3- 在 210nm 處的吸光度 (A)。2、適用范圍本方法適用于各類土壤硝態(tài)氮含量的測(cè)定。3、主要儀器設(shè)備3.1 紫外可見分光光度計(jì)；3.2 石英比色皿；3.3 往復(fù)式或旋轉(zhuǎn)式振蕩機(jī)，滿足 180r/min±20r/min 的振蕩頻率或達(dá)到相 同效果；3.4塑料瓶： 200mL。4、試劑4.1H2SO4溶液(1： 9):取10mL濃硫酸緩緩加入 90mL水中。4.2 氯化鈣浸提劑c(CaCl2)=0.01mol - L-1:稱

11、取 2.2g 氯化鈣(CaCl2 - 6H2O, 化學(xué)純)溶于水中，稀釋至 1L。4.3硝態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)貯備液p (N)=100mg -L-1:準(zhǔn)確稱取0.7217g經(jīng)105110°C 烘2h的硝酸鉀(KNO3，優(yōu)級(jí)純)溶于水，定容至1L，存放于冰箱中。4.4硝態(tài)氮標(biāo)準(zhǔn)溶液p (N)=10mg - L-1:測(cè)定當(dāng)天吸到10.00mL硝態(tài)氮標(biāo) 準(zhǔn)貯備液于 100mL 容量瓶中用水定容。5、操作步驟稱取10.00g 土壤樣品放入200mL塑料瓶中，加入50mL氯化鈣浸提劑， 蓋嚴(yán)瓶蓋，搖勻，在振蕩機(jī)上于20C 25C振蕩30min(180r/min ± 20r/min)，干過 濾。吸

12、取25.00mL待測(cè)液于50mL三角瓶中，加1.00mL1: 9 H2SO4溶液酸化， 搖勻。用滴管將此液裝入1cm光徑的石英比色槽中，分別在 210nm和275nm處 測(cè)讀吸光值(A210和A275)，以酸化的浸提劑調(diào)節(jié)儀器零點(diǎn)。以 NO3-的吸光值( A)通過標(biāo)準(zhǔn)曲線求得測(cè)定液中硝態(tài)氮含量。 空白測(cè)定除不加試樣外，其余均同樣 品測(cè)定?！?。3-的吸光值( A)可由下式求得： A= A 210- A275X R式中 R 為校正因數(shù)，是土壤浸出液中雜質(zhì) (主要是有機(jī)質(zhì) )在 210nm 和 275nm處的吸光度的比值。其確定方法為：A210是波長(zhǎng)210nm處浸出液中NO3-的吸收值(A210硝)

13、與雜質(zhì)(主要是有機(jī)質(zhì)) 的吸收值(A210雜)的總和，即 A210= A210硝+ A210雜，得出A210雜=A 210- A210硝。選取 部分土樣用酚二磺酸法測(cè)得 N03一N的含量后，根據(jù)土液比和紫外法的工作曲 線，即可計(jì)算各浸出液應(yīng)有的 A210硝值，即可得出A210雜。A275是浸出液中雜質(zhì)（主要是有機(jī)質(zhì)）在275門口處的吸收值（因?yàn)镹03-在該波 長(zhǎng)處已無吸收），它比A210雜小R倍，即A210雜=R A275，得出校正因數(shù)R=A21O雜 / A275。各不同區(qū)域可根據(jù)多個(gè)土壤測(cè)定R值的統(tǒng)計(jì)平均值，作為其他土壤測(cè)試N03- N的校正因數(shù)，其可靠性依從于被測(cè)土壤的多少，測(cè)定的土壤越多

14、，可靠性越大。標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別吸取10mg L-1N03- N標(biāo)準(zhǔn)溶液0、1.00、2.00、 4.00、6.00、8.00mL,用氯化鈣浸提劑定容至 50mL，即為 0、0.2、0.4、0.8、1.2、 1.6mg/L的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液。各取25.00mL于50mL三角瓶中，分別加1mL1 :9 H2SO4 溶液搖勻后測(cè)A210，計(jì)算A210對(duì)NO3-N濃度的回歸方程，或者繪制工作曲線。6、計(jì)算結(jié)果（N） V D土壤硝態(tài)氮，mg kg-1 =m式中：p （N）查標(biāo)準(zhǔn)曲線或求回歸方程而得測(cè)定液中NO3-N的質(zhì)量濃度，mg L-1;V 浸提劑體積，mL（50mL）;D 浸出液稀釋倍數(shù)，或不稀釋則

15、 D=1 ; m土壤質(zhì)量，g。7、注釋土壤硝態(tài)氮含量一般用新鮮樣品測(cè)定，如需以硝態(tài)氮加銨態(tài)氮反映無機(jī) 氮含量，則可用風(fēng)干樣品測(cè)定。一般土壤中NO2-含量很低，不會(huì)干擾NO3-的測(cè)定。如果NO2-含量高時(shí)， 可用氨基磺酸消除（HNO2+NH2SO3H=N2+H2SO4+H2O）,它在210nm處無吸收， 不干擾NO3-測(cè)定。浸出液的鹽濃度較高，操作時(shí)最好用滴管吸取注入槽中，盡量避免溶液 溢出槽外，污染槽外壁，影響其透光性。大批樣品測(cè)定時(shí)，可先測(cè)完各液（包括浸出液和標(biāo)準(zhǔn)系列溶液）的A210值, 再測(cè)A275值，以避免逐次改變波長(zhǎng)所產(chǎn)生的儀器誤差。如需同時(shí)測(cè)定土壤NH4+N，可選用2 mol L-1

16、KCI或1 mol L-1NaCI 溶液制備待測(cè)液。但2 mol L-1KCl溶液本身在210nm處吸光度較高，因此同時(shí) 測(cè)定土壤NH4+N和NO3- N時(shí)，可選用吸光度較小的1 mol L-1NaCl溶液為 浸提劑。如果吸光度很高（A > 1時(shí)），可從比色槽中吸出一半待測(cè)液，再加一半水 稀釋，重新測(cè)讀吸光度，如此稀釋直至吸光度小于 0.8。再按稀釋倍數(shù)，用氯化 鈣浸提劑將浸出液準(zhǔn)確稀釋測(cè)定。根據(jù)北京和河北石灰性15個(gè)土壤樣品的測(cè)定結(jié)果，校正因素（R）的平均 值為3.6，不同土類的R值略有差異，各地可根據(jù)主要土壤情況進(jìn)行校驗(yàn)，求出 當(dāng)?shù)赝寥赖腞值。TOC的測(cè)定1 試劑配制1.1重鉻酸鉀標(biāo)

17、準(zhǔn)溶液c(1/6K2Cr2O7)= 0.8000mol?_-1:重鉻酸鉀放入干燥箱中120C烘干2h后，放入干燥器中冷卻至室溫后稱取 39.2245g( K2C2O7,分 析純)加入400mL水，加熱溶解，冷卻后用水定容至1L。重鉻酸鉀放入干 燥箱前簡(jiǎn)單稱量下其質(zhì)量，使質(zhì)量大于39.2245g,經(jīng)驗(yàn)，稱取42g以上即可。 用完后多余的藥品可以放回去。1.2 硫酸(H2SO4,尸1.84g?cm-3)1.3有機(jī)碳標(biāo)準(zhǔn)溶液pC)=5g?L-1:稱取葡萄糖1.375g溶入水，定容至100mL。2 操作步驟TOC采用水合重鉻酸鉀比色法測(cè)定。用35目篩稱取0.05g風(fēng)干堆肥樣品置于50mL比色管中，加3

18、mL蒸餾水并充分搖勻，加入10mL的0.8000molL-1重鉻 酸鉀溶液，然后加入10mL濃硫酸溶液并不斷搖勻，放置 20分鐘后，加10mL 水并搖勻。靜至過夜，吸取上清液 7.5mL，置于50mL比色管中，加水至25ml 處并充分搖勻(或者吸取上清液 15mL，置于50mL比色管中，加水至刻線并充 分搖勻)。15分鐘后，用1cm比色皿在590nm處以空白為參比測(cè)定其吸光度， 在工作曲線上查出TOC的mg數(shù)。rocx%)=叫 v嚴(yán) x 1 oo堆肥過程中TOC的含量按下式計(jì)算：川小小式中：m1 由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出的堆肥樣品含碳量，mg；1.32-氧化校準(zhǔn)系數(shù)；m 風(fēng)干堆肥樣品的質(zhì)量，g。1. T

19、KN的測(cè)定1 試劑配制1.1混合催化劑：硫酸鉀(K2SO4) 100g，硫酸銅(CuSO4)10g，硒(Se) 1g， 分別研磨成粉，再混合均勻。1.2 硫酸(H2SO4，p=1.84g?cm-3)。1.3 NaOH溶液：200g氫氧化鈉放入500ml的燒杯中，加入500ml的蒸餾水。 溶解冷卻后，存入塑料瓶中。1.4混合指示劑：容積0.099g的溴甲酚綠和0.066g的甲基紅于100ml的乙醇 (95%)。1.5硼酸指示劑溶液：溶解20g硼酸于950ml的熱蒸餾水中，冷卻后，加入20ml 的混指示劑，充分混合后，小心滴加氫氧化鈉溶液，直到溶液呈紅紫色，pH 約為4.5,定容1L。1.6 硫酸

20、標(biāo)準(zhǔn)液：先配制 C (H2SO4) =0.08367mol?L-1 溶液，2.23ml 的濃 H2SO4 (p=1.84g?sm-3)溶入400ml的蒸餾水中，然后定容至 500ml。2 操作步驟總氮采用凱氏消煮法。35目篩稱取0.05g風(fēng)干堆肥樣品，放入50mL凱氏瓶 中，并加入1.1g混合催化劑，注入3mL濃硫酸并搖勻，蓋上小漏斗，放入電爐 上加熱，開始用小火徐徐加熱，待泡沫消失后，再提高溫度(溫度也不宜太高)，微沸消煮，待消煮液呈灰白色時(shí)，繼續(xù)加大溫度，直至消煮液呈現(xiàn)微綠色，繼續(xù) 消煮1h。加熱完畢后，取下開氏瓶，冷卻。將凱氏瓶中的消煮液轉(zhuǎn)入半微量定氮蒸餾器中，并用蒸餾水沖洗數(shù)次使消煮液

21、完全轉(zhuǎn)移至蒸餾器中。另取有標(biāo)線的三角瓶，內(nèi)加硼酸指示劑5mL,將三角瓶置于冷凝器的承接管下，管口插入硼酸溶液中。向蒸餾器中加入 10moL.L-1氫 氧化鈉溶液20mL，立即關(guān)閉蒸餾室進(jìn)行蒸餾。待餾出液達(dá)到 30 40mL時(shí)，停 止蒸餾。取下三角瓶，用-1的硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定至溶液呈紫紅色。總氮的含量按下式計(jì)算:同時(shí)做空白實(shí)驗(yàn)，以校準(zhǔn)試劑和滴定誤差式中：c硫酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mol.L-1 ； V樣品測(cè)定時(shí)消耗硫酸溶液的體積， V0空白測(cè)定時(shí)消耗的硫酸溶液的體積, M 氮的摩爾質(zhì)量(M=14g.mol-1) 10-3 將mL換算成L的系數(shù)mL; mL;m堆肥產(chǎn)品樣品質(zhì)量，g火焰原子吸收分光光度法

22、測(cè)定土壤中有效鉀的含量一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?、學(xué)習(xí)土壤中有效鉀的浸提方法。2、學(xué)習(xí)原子吸收光譜法的原理及儀器操作方法。二、儀器和試劑1、儀器：100 mL容量瓶、移液管、玻璃棒、10 mL容量管、錐形瓶、漏斗THZ 92B 型臺(tái)式恒溫振蕩器、 ML 204/02 型電子天平、 novAA -400 原子吸收光譜儀2、試劑：（1）2 mol L HNO3浸提劑：取濃硝酸（HNO3,約 16 mol/L , p 1.42 g -1,mL 分析純）125 mL，加水稀釋至1 L。（2） 10 g/L的氯化鈉：稱2.5 g NaCl，加水溶解，定容至100 ml。（3） 氯化鉀標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱0.1912 g

23、KCl，加水溶解，定容至100 mL，配制 成1 g/L的濃溶液。再移取10 mL濃溶液，加水稀釋至100 mL，配制 成 100 mg/L 的鉀貯備液， 分別移取一定體積的貯備液加水稀釋至 100 mL，得到一系列不同濃度的鉀標(biāo)準(zhǔn)工作液。三、方法原理以冷的2 mol L-1 HNO3作為浸提劑與土壤混合（水土比為 20:1），振蕩0.5 h 以后，立即過濾， 溶液中鉀用原子吸收分光光度法測(cè)定。 本法所提的鉀量大于速 效鉀，它包括速效鉀和緩效鉀中的有效部分，故稱為土壤有效性鉀。四、操作方法1、土壤樣品的處理將土樣自然風(fēng)干后， 用研缽把風(fēng)干的土樣研碎， 然后再用 100目的篩子（孔 徑約149卩m進(jìn)行篩分，取適量過篩的土樣進(jìn)行裝袋保存，用于有效鉀的測(cè)定。2、 有效鉀的浸提：稱取通過149卩m篩孔的風(fēng)干土樣三份，質(zhì)量約2.500 g 于干250 mL錐形瓶中，加入2 mol L-1 HNO 3 50 mL，室溫下于振蕩器往返振蕩 0.5 h,靜止30 min后用定量濾紙過濾，濾液轉(zhuǎn)移到 50 mL離心管中。3、測(cè)定步驟（ 1 ）儀器操作條件設(shè)置：在工作站上設(shè)置分析條件參數(shù)：分析線波長(zhǎng)（324.8 nm）、狹縫（0.8 nm）、 空心陰極燈工作電流（4.0 mA、燃燒頭高度（8 mm）氣體壓力（乙炔為0.1-0.15 Mpa空氣為0.5 M