1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱課程名稱：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn) 課程編號(hào)：030042英文名稱：Biochemistry Experiment 實(shí)驗(yàn)類(lèi)別：專業(yè)基礎(chǔ)課實(shí)驗(yàn)面向?qū)I(yè)：生物科學(xué)、生物技術(shù)、 實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)：40 實(shí)驗(yàn)學(xué)分：2 一、實(shí)驗(yàn)教學(xué)的指導(dǎo)思想和教學(xué)目的1、生物化學(xué)是一門(mén)實(shí)驗(yàn)科學(xué),它應(yīng)用化學(xué)的方法和手段來(lái)研究生物有機(jī)體的物質(zhì)組成及變化。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,各種先進(jìn)的手段愈來(lái)愈被廣泛地應(yīng)用于生物化學(xué)研究中。 2、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是生物化學(xué)教學(xué)中不可缺少的實(shí)踐環(huán)節(jié)，其作用是給予學(xué)生以生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的基本方法與技術(shù)的初步訓(xùn)練,從而進(jìn)一步理解理論課所學(xué)內(nèi)容。 3、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)的教學(xué)要求:使學(xué)生掌握一般生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)中

2、最常用的分離分析方法以及相應(yīng)儀器的使用,了解實(shí)驗(yàn)原理和操作方法，使學(xué)生受到生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技能訓(xùn)練。 4、結(jié)合理論課所學(xué)內(nèi)容相應(yīng)地安排實(shí)驗(yàn)課,力求實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與理論教學(xué)內(nèi)容相協(xié)調(diào)。二、實(shí)驗(yàn)教學(xué)的基本要求生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)以學(xué)生在實(shí)驗(yàn)室實(shí)踐為主,發(fā)揮學(xué)生的主體作用，教師只作必要的實(shí)驗(yàn)原理和注意事項(xiàng)的講解,并注意引導(dǎo)學(xué)生拓展所學(xué)的內(nèi)容，通過(guò)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的學(xué)習(xí)了解生物化學(xué)技術(shù)的原理和操作要點(diǎn)，并注意培養(yǎng)學(xué)生的實(shí)踐能力和創(chuàng)新能力。1遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則，愛(ài)護(hù)實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備。2實(shí)驗(yàn)前要充分預(yù)習(xí)實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)，做好實(shí)驗(yàn)記錄，認(rèn)真完成實(shí)驗(yàn)報(bào)告。3實(shí)驗(yàn)操作要細(xì)心謹(jǐn)慎，嚴(yán)格遵守操作規(guī)則，注意安全。4實(shí)驗(yàn)完畢，注意關(guān)閉燈、電、火、窗三、實(shí)驗(yàn)

3、教材生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)簡(jiǎn)明教程 河北科技大學(xué)校內(nèi)自編講議 王金宇 張華峰 魏弟 李敏生物化學(xué)實(shí)驗(yàn) 科學(xué)出版社 陳鈞輝 陶力 李俊等四、實(shí)驗(yàn)考核實(shí)驗(yàn)總成績(jī)：實(shí)驗(yàn)過(guò)程表現(xiàn)成績(jī)、實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)，各占50%。實(shí)驗(yàn)過(guò)程表現(xiàn)成績(jī)：包括學(xué)習(xí)態(tài)度是否認(rèn)真、實(shí)驗(yàn)操作是否正確規(guī)范、實(shí)驗(yàn)結(jié)果是否正確、是否具有創(chuàng)新意識(shí)、打掃衛(wèi)生等方面。成績(jī)分為：優(yōu)秀、良好、一般、差三級(jí). 相當(dāng)于百分制90分以上、7590分、6075分、60分以下。實(shí)驗(yàn)報(bào)告成績(jī)：包括實(shí)驗(yàn)報(bào)告的格式是否正確、原理是否論述清楚、實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析討論是否符合邏輯，報(bào)告字跡是否清楚等方面。成績(jī)分為： A A B B C C。相當(dāng)于百分制95100分、9094分以上、

4、8089分、7089分、6069分、60分以下。 五、主要儀器設(shè)備與器材控溫消煮爐 自動(dòng)凱氏定氮儀 電泳儀 垂直板電泳槽 平板電泳槽 冰柜分光光度計(jì) 紫外分光光度計(jì) 微波爐 電冰箱 磁力攪拌器 電動(dòng)攪拌機(jī) 電磁爐 電子分析天平 恒溫水浴鍋 電熱鼓風(fēng)干燥箱 核酸蛋白質(zhì)檢測(cè)儀 層析缸 部分收集器 蠕動(dòng)泵等。六、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目表序號(hào)實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目學(xué)時(shí)實(shí)驗(yàn)要求實(shí)驗(yàn)類(lèi)型每組人數(shù)課外實(shí)習(xí)糖類(lèi)1血液中葡萄糖的測(cè)定3掌握鄰甲苯胺法測(cè)定血糖的原理和方法一般實(shí)驗(yàn)22總糖和還原糖含量的測(cè)定4掌握樣品中還原糖和總糖的提取和測(cè)定方法一般實(shí)驗(yàn)2脂類(lèi)1卵磷脂的提取和鑒定3了解用乙醇作為溶劑提取卵磷脂的原理和方法一般實(shí)驗(yàn)2蛋白質(zhì)1蛋白質(zhì)

5、濃度的測(cè)定微量克氏定氮法；雙縮脲法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度；福林（Folin）酚試劑法測(cè)定蛋白質(zhì)的濃度；紫外吸收法測(cè)定蛋白質(zhì)的含量；考馬斯亮藍(lán)結(jié)合法測(cè)定蛋白質(zhì)濃度36熟悉并掌握一種測(cè)定蛋白質(zhì)濃度的原理和方法一般實(shí)驗(yàn)22氨基酸分離氨基酸紙層析法；離子交換柱層析法分離氨基酸；5掌握分配層析的原理；掌握氨基酸紙上層析法的操作技術(shù)(包括點(diǎn)樣、平衡、展層、顯色、鑒定；掌握離子交換柱層析法分離氨基酸的原理；能夠?qū)W會(huì)操作方法。一般實(shí)驗(yàn)33層析法分離純化蛋白質(zhì)離子交換層析分離純化蛋白質(zhì)；凝膠層析分離純化蛋白質(zhì)；親和層析分離純化蛋白質(zhì)；46掌握一種或兩層析法分離純化蛋白質(zhì)的原理和操作方法； 一般實(shí)驗(yàn)44電泳法分離蛋白質(zhì)醋

6、酸纖維素薄膜電泳法聚丙烯酰胺凝膠電泳法58掌握電泳法分離蛋白質(zhì)的原理及用途，學(xué)會(huì)一種或兩種電泳法分離蛋白質(zhì)的方法。一般實(shí)驗(yàn)1,45蛋白質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量的測(cè)定SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳法；凝膠層析法；8在給定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡那疤嵯?，使學(xué)生能夠自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)，掌握一種測(cè)定未知蛋白質(zhì)的分子量的方法；學(xué)會(huì)獨(dú)立設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)策略、摸索和設(shè)計(jì)樣品處理等操作細(xì)節(jié)，并通過(guò)獨(dú)立思考分析結(jié)果。設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)4酶1酶特性實(shí)驗(yàn)酶的專一性；激活劑和抑制劑、溫度、pH對(duì)酶促反應(yīng)速度的影響。4本實(shí)驗(yàn)涵蓋了酶（蛋白質(zhì)）的提取、酶活性的影響因素等內(nèi)容，在給定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡那疤嵯?，使學(xué)生能夠自行設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn).可鍛煉學(xué)生綜合運(yùn)用所學(xué)生物學(xué)、儀器分析、化學(xué)等專業(yè)

7、知識(shí)的能力。綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)22酶的提純及動(dòng)力學(xué)研究酵母醇脫氫酶；過(guò)氧化氫酶；溶菌酶；蔗糖酶；堿性磷酸酶；胰蛋白酶；414學(xué)會(huì)一種酶的提取、純化方法；了解酶動(dòng)力學(xué)及酶性質(zhì)測(cè)定的一般原理和方法；學(xué)會(huì)計(jì)算酶的活力及比活力；掌握測(cè)定米氏常數(shù)Km及Vmax的方法。本實(shí)驗(yàn)可鍛煉不生綜合運(yùn)用生物學(xué)、化學(xué)、數(shù)學(xué)等專業(yè)知識(shí)的能力，使學(xué)生掌握酶的提純、活力測(cè)定、米氏方程計(jì)算、動(dòng)力學(xué)測(cè)定等實(shí)驗(yàn)操作或知識(shí)內(nèi)容。綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)43谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測(cè)定肝臟谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測(cè)定；血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力測(cè)定；4了解轉(zhuǎn)氨酶的性質(zhì)，掌握谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力的測(cè)定方法一般實(shí)驗(yàn)2核酸1核酸的定量測(cè)定RNA的定量測(cè)定3掌握一種或兩種核酸定量測(cè)定的方法一般實(shí)驗(yàn)22核酸的提取及檢測(cè)動(dòng)物肝臟中DNA的提取質(zhì)粒DNA的提取；酵母RNA的提取；瓊脂糖凝膠電泳810學(xué)習(xí)和掌握核酸提取的原理和方法在給定實(shí)驗(yàn)?zāi)康牡那疤嵯?，使學(xué)生學(xué)習(xí)根據(jù)核酸或蛋白質(zhì)樣品設(shè)計(jì)電泳實(shí)驗(yàn)方案，分析制膠、染色等操作中的常見(jiàn)問(wèn)題并設(shè)計(jì)方案加以解決。另外，使學(xué)生學(xué)會(huì)分析瓊脂糖電泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果。綜合設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)4七、說(shuō)明：生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)共40學(xué)時(shí)，每學(xué)期實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目的開(kāi)出是根據(jù)專業(yè)要求、實(shí)驗(yàn)課時(shí)、實(shí)驗(yàn)條件將以上列出的項(xiàng)目進(jìn)行合理組合后開(kāi)出。八、主要參考資料1生物化學(xué) 高教出版社 沈 同2生物化學(xué) 高教出版社 古練權(quán)3生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)講義 沈陽(yáng)農(nóng)業(yè)大學(xué)4生命的化學(xué)期