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文檔簡介
1、物鏡的分類 物鏡根據(jù)使用條件的不同可分為枯燥物鏡和浸液物鏡; 其中浸液物鏡又可分為水浸物鏡和油 浸物鏡常用放大倍數(shù)為 90 100 倍。根據(jù)放大倍數(shù)的不同可分為低倍物鏡 10 倍以下、中倍物鏡 20 倍左右高倍物鏡 40 65 倍。根據(jù)像差矯正情況, 分為消色差物鏡 常用, 能矯正光譜中兩種色光的色差的物鏡和復(fù)消 色差物鏡能矯正光譜中三種色光的色差的物鏡,價格貴,使用少 。物鏡 objective 是顯微鏡最重要的光學(xué)部件,利用光線使被檢物體第一次成像,因而直接 關(guān)系和影響成像的質(zhì)量和各項(xiàng)光學(xué)技術(shù)參數(shù),是衡量一臺顯微鏡質(zhì)量的首要標(biāo)準(zhǔn)。物鏡的結(jié)構(gòu)復(fù)雜, 制作精密, 由于對象差的校正, 金屬的物鏡
2、筒內(nèi)由相隔一定距離并被固定 的透鏡組組合而成。 物鏡的要求是齊焦合軸。 齊焦即在鏡檢時, 當(dāng)用某一倍率的物鏡觀察圖 像清晰后, 在轉(zhuǎn)換另一倍率的物鏡時,其成像亦應(yīng)根本清晰。 和軸即上述操作中, 像的中心 偏離也應(yīng)該在一定的范圍內(nèi)。 齊焦性能的優(yōu)劣和合軸程度的上下是顯微鏡質(zhì)量的一個重要標(biāo) 志,它與物鏡本身的質(zhì)量和物鏡轉(zhuǎn)換器的精度有關(guān)。傳統(tǒng)物鏡的種類很多,可從不同的角度分類?,F(xiàn)在分類介紹。一、按象差校正程度分類物鏡的種類及象差校正程度1 消色差物鏡紅、藍(lán)波區(qū)校正,黃、綠波區(qū)校正2 復(fù)消色差物鏡紅、綠、藍(lán)波區(qū)校正,紅、藍(lán)波區(qū)校正3 半復(fù)消色差物鏡紅、藍(lán)波區(qū)校正,紅、藍(lán)波區(qū)校正4 平場物鏡存在存在已校
3、正5 平場消色差物鏡紅、藍(lán)波區(qū)校正黃、綠波區(qū)校正已校正6 平場復(fù)消色差物鏡紅、綠、藍(lán)波區(qū)校正紅、藍(lán)波區(qū)校正已校正1消色差物鏡 Achromatic objective :常見物鏡,盡管各廠家的標(biāo)志不完全一樣,但外殼 上一般標(biāo)有“ ACH字樣。這類物鏡僅能校正軸上點(diǎn)紅藍(lán)光的色差和黃綠光的球差,以及消 除近軸點(diǎn)慧差。不能校正其他光的色差和球差,且場曲很大。2復(fù)消色差物鏡 Apochromatic objective :復(fù)消色差物鏡的結(jié)構(gòu)復(fù)雜,透鏡采用特種玻璃或螢石等材料制作而成,物鏡的外殼上標(biāo)有“APO字樣。這種物鏡不僅能校正紅綠藍(lán)三色光的色差,同時能校正紅藍(lán)二色光的球差。實(shí)際上,復(fù)消色差物鏡不僅
4、能校正紅、綠、藍(lán)三色光的色差,而且在同一焦點(diǎn)平面上成像, 到達(dá)消除“剩余色差 又稱二級色譜的效果,所以色差的校正實(shí)際上等于可見光的全部 波區(qū), 但二級色譜的放大率色差仍然存在。 當(dāng)其與簡單組合目鏡配用時, 這些殘存的色差會 使影像邊緣略帶色彩。 因此, 需要與補(bǔ)償型目鏡配合使用。 復(fù)消色差物鏡對于光源無任何限 制,白光照明也可得到良好的效果。假設(shè)參加藍(lán)色或黃色濾光片效果更佳。由于對各種象差的校正極為完善, 比相應(yīng)倍率的消色差物鏡有更大的數(shù)值孔徑, 因此不僅分 辨率高、圖像質(zhì)量好,而且有更高的有效放大率。 復(fù)消色差物鏡的性能很高,適用于高級研 究鏡檢和顯微照相。它的景深要比其他物鏡小,價格昂貴。
5、3半復(fù)消色差物鏡 Semi Apochromatic objective :又稱氟石物鏡, 物鏡的外殼上標(biāo)有 “FL 字樣。 在結(jié)構(gòu)上透鏡的數(shù)目比消色差物鏡多、 比復(fù)消色差物鏡少。 成像質(zhì)量上,遠(yuǎn)比消色差 物鏡好,接近于復(fù)消色差物鏡。 能校正紅藍(lán)二色光的色差和球差。 可用于熒光觀察,是比擬 高級的物鏡。就象差校正程度而言, 半復(fù)消色差物鏡介于消色差與復(fù)消色差物鏡之間, 但其他光學(xué)性質(zhì)都 與復(fù)消色差物鏡接近。 其售價較低, 常用來替代復(fù)消色差物鏡, 使用時最好與補(bǔ)償型目鏡相 配合。4平場物鏡Plan objective:平場物鏡一般標(biāo)有“ PLAN'字樣。在物鏡的透鏡系統(tǒng)中增加了 一塊半
6、月形的厚透鏡, 以到達(dá)校正場曲的目的。 平場物鏡的視場平坦, 更適于鏡檢和顯微照 相。5. 平場消色差物鏡Plan Achromatic objective:平場消色差物鏡常標(biāo)有“ A-PLAN'字樣。是 在紅藍(lán)色差校正的根底上, 對場曲作了進(jìn)一步校正, 因此圖像平直, 使視野邊緣與中心能同 時清晰成像。消色差物鏡、 平場消色差物鏡的色差校正為紅藍(lán)兩個波區(qū), 球差校正僅為黃綠兩個波區(qū), 仍 然存在其他波區(qū)的色差和球差。 但一般低倍放大時影響不大。 鑒于其黃綠波區(qū)校正較佳, 宜 使用黃綠光作為照明光源,或加紅色濾光片。6. 平場復(fù)消色差物鏡 Plan Apochromatic objec
7、tive :平場復(fù)消色差物鏡除進(jìn)一步做場曲的校 正外,其他象差校正程度與復(fù)消色物鏡相同。 使用復(fù)消色差物鏡成像的平坦程度不如消色差 物鏡,而平場復(fù)消色差物鏡可使映像清晰、平坦、進(jìn)一步提高成像質(zhì)量。另外,還有平場半復(fù)消色差物鏡 Plan Semi Apochromatic objective 、超平場物鏡外殼標(biāo) 有“ S PLAN、超平場復(fù)消色差物鏡外殼標(biāo)有“ S PLAN APO、消象散物鏡An astigmatic objective 等。按功能分類1. 相差物鏡Phase Contrast objective: 一般帶有“ PH"標(biāo)志,字體用綠色。這種物鏡是相 差相襯 鏡檢術(shù)的專
8、用物鏡, 其特點(diǎn)是在物鏡的后焦平面處裝有相位板。 用來觀察無色透 明的標(biāo)本或活細(xì)胞,倒置顯微鏡上使用廣泛。2. DIC物鏡:一般要求半復(fù)消色差或復(fù)消色差物鏡,用于DIC鏡檢觀察無色樣品或細(xì)胞,圖像呈現(xiàn)立體感。3. HMC物鏡:標(biāo)有“ HMC標(biāo)志,一種類似于相差物鏡的物鏡。觀察效果有立體感。用于霍 夫曼觀察,但不能用于熒光觀察。4偏光物鏡:一般標(biāo)有“ POL'字樣,這種物鏡裝配了克服應(yīng)力設(shè)備,是專做偏光觀察的物 鏡。5. 熒光物鏡:這種物鏡的熒光透過率非常高,物鏡用于對離子位移進(jìn)行定性和定量的分析以 及用于特別關(guān)鍵的熒光技術(shù)如人類染色體的研究以及細(xì)胞遺傳學(xué) 。這類物鏡的突出特點(diǎn) 是它們對
9、 340nm 起的波長有特別高的數(shù)值孔徑和高傳輸率 340nm 時約為 70%!。視場平 直足可以使用CCD照相。6. TIRF專用物鏡:要求數(shù)值孔徑大,NA 般為。如尼康公司的 APO TIRF 60X /100 X物鏡。7多功能物鏡:有的廠家生產(chǎn)一些多功能物鏡, 可以同時做相差、DIC熒光等觀察。例如奧 林巴斯的UPLANFL萬能平場半復(fù)消色差 物鏡和蔡司的 EC PLAN - NEOFLUA高襯度平 場新熒光系列物鏡。特殊物鏡分類特殊物鏡主要有以下幾種:1. 帶校正環(huán)物鏡 Correction Collar objective:在物鏡中部裝有環(huán)狀的調(diào)節(jié)環(huán), 當(dāng)轉(zhuǎn)動調(diào)節(jié)環(huán) 時,可調(diào)節(jié)物鏡內(nèi)
10、透鏡組之間的距離, 從而校正由蓋玻片厚度不標(biāo)準(zhǔn)引起的覆蓋差。 物鏡外 殼的調(diào)節(jié)環(huán)上標(biāo)有數(shù)字“ 1123,說明可校正蓋玻片厚度之間的誤差。2. 帶虹彩光闌的物鏡 Iris Diaphragm objective :在物鏡鏡筒內(nèi)的上部裝有虹彩光闌, 外方也 有可旋轉(zhuǎn)的調(diào)節(jié)環(huán), 轉(zhuǎn)動時可調(diào)節(jié)光闌孔徑的大小。 這種結(jié)構(gòu)的物鏡是高級的油浸物鏡, 常 用于暗視野觀察, 在暗視野鏡檢時, 往往由于某些原因而使照明光線進(jìn)入物鏡, 使視場背景 不夠黑暗,造成鏡檢質(zhì)量的下降。這時調(diào)節(jié)光闌的大小,使背景變黑、被檢物體更明亮,增 強(qiáng)鏡檢效果。3. 無罩物鏡No Cover objective:有些被檢物體,如涂抹制片
11、等,上面不能加用蓋玻片,在鏡檢時應(yīng)使用無罩物鏡。 否那么圖像質(zhì)量將明顯下降, 特別是在高倍鏡檢時更為明顯。 這種物 鏡的外殼上常標(biāo)刻 “NC,同時在標(biāo)記蓋玻片厚度的位置上沒有“的字樣,而標(biāo)刻著“0。其他分類方法1. 按工作距離分類1普通物鏡:工作距離小,可以觀察切片,但不能觀察培養(yǎng)皿。2長工作距離物鏡Long Working Distanee objective: 一般有"LD"標(biāo)志,是倒置顯微鏡 的專用物鏡, 它是為了滿足組織培養(yǎng)、 懸浮液等材料的鏡檢而設(shè)計制造的。 由于這類被檢物 體都是放置在培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶中, 必須要求物鏡的工作距離長才能到達(dá)鏡檢的要求。 工作距 離高
12、至,并可以進(jìn)行光學(xué)修正,適用于 02mm 厚度的玻璃,通常由修正環(huán)或特殊的玻璃蓋 帽完成修正。例如奧林巴斯的LUCPLFLN-PH物鏡和蔡司的LD-A-PLAN PH物鏡。n=1為介質(zhì)。這類物鏡最為2. 按物鏡前透鏡與蓋玻片之間的介質(zhì)分類 1枯燥系物鏡:鏡檢時,物鏡前透鏡與蓋玻片之間以空氣常用,如40 X以下的物鏡,數(shù)值孔徑均小于1。2水浸系物鏡:一般有“ W標(biāo)志,這些水浸系物鏡同正立顯微鏡一起主要應(yīng)用于生理 學(xué),如腦片等較厚樣品的觀察。 鏡檢時, 物鏡前透鏡與蓋玻片之間是以水為介質(zhì)的,宜用蒸 餾水或生理鹽水。3油浸系物鏡:即油鏡頭,其放大率為 40X 100X。鏡檢時,物鏡前透鏡與蓋玻片之間 常以香柏油、無熒光油左右為介質(zhì)。有時也用甘油 、石蠟油為介質(zhì)。該類物鏡 的外殼上常標(biāo)刻有“ OIL'或“ HI字樣,國產(chǎn)物鏡刻以“油或漢語拼音字頭“Y'。上述水浸與油浸物鏡所應(yīng)用的介質(zhì)均為液體物質(zhì),所以又稱為“浸液系物鏡",數(shù)值孔徑大于 1。3. 按放大倍數(shù)分類1極低倍物鏡:這類物鏡的倍率不是放大而是縮小,是為了觀察較大
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