1、潔凈室空氣的塵埃粒子檢驗-新版GMP環(huán)境監(jiān)測解讀（一）微粒，特別是塵粒的存在直接影響藥品質(zhì)量，危及人們的生命安全。大量臨床資料表明，如藥品被0.72um的塵粒污染，尤其是靜脈注射用藥，可以導致熱源反應、肺動脈炎、微血栓或異物肉芽腫等，嚴重的會致人死命。粒子進入血管系統(tǒng)對人體的危害，與粒子數(shù)量、粒徑及理化性質(zhì)有關(guān)。另外，微生物的污染是生產(chǎn)環(huán)境最重要的因素，它與最終的產(chǎn)品微生物負載控制相關(guān)。研究表明，單一微生物本身并不能獨立存活在空氣當中，他們要么以菌團形式存在，要么必須附著于無活性的塵埃粒子(尤其是直徑大于0.5m的粒子)之上。這也就將空氣中微生物水平同塵埃粒子水平聯(lián)系在了一起。潔凈室的各種硬件

2、系統(tǒng)控制了空氣中懸浮粒子的數(shù)目，從而也就降低了空氣中微生物的污染。因此GMP規(guī)定應對潔凈區(qū)的塵埃粒子進行有效的監(jiān)測。    空氣潔凈度是指潔凈環(huán)境中空氣含塵（微粒）多少的程度。含塵濃度高則潔凈度低，含塵濃度低則潔凈度高。新版GMP將無菌藥品生產(chǎn)所需的潔凈區(qū)分為4個級別，生產(chǎn)企業(yè)不僅要對潔凈室的級別進行確認，還要對潔凈區(qū)進行監(jiān)測。塵埃粒子測試狀態(tài)有靜態(tài)和動態(tài)兩種，靜態(tài)測試是在空氣凈化系統(tǒng)處于正常運行狀態(tài)，工藝設備已安裝，且潔凈室內(nèi)無生產(chǎn)操作人員情況下進行。動態(tài)測試是在潔凈室處于正常生產(chǎn)狀態(tài)下進行。中國GMP對于各級別空氣懸浮粒子的標準規(guī)定如下表： 

3、0;潔凈度級別懸浮粒子最大允許數(shù)/立方米靜態(tài)動態(tài)0.5m5.0m0.5m5.0mA級352020352020B級3520293520002900C級3520002900352000029000D級352000029000不作規(guī)定不作規(guī)定目前，用于潔凈環(huán)境中空氣塵埃粒子監(jiān)測的儀器多為光散射粒子計數(shù)器，其工作原理是，當取樣氣流中的塵埃顆粒通過計數(shù)器散射腔的光敏感區(qū)時，光遇到粒子時發(fā)生散射，這些光脈沖信號經(jīng)光電二極管轉(zhuǎn)換成電脈沖信號，電脈沖次數(shù)反映粒子數(shù)，脈沖幅值反映粒子的粒徑。一臺儀器可同時測定多個粒徑通道的粒子。 潔凈室空氣的塵埃粒子檢驗-新版GMP環(huán)境監(jiān)測解讀（二）取樣點和取樣頻率塵

4、埃粒子的采樣點數(shù)目及其布置應根據(jù)產(chǎn)品的生產(chǎn)及工藝關(guān)鍵操作區(qū)設置，對于取樣點的選擇還要注意以下幾點：1、任何潔凈區(qū)內(nèi)不得少于兩個取樣點；2、  除受潔凈區(qū)的設備限制外，取樣點應在整個潔凈區(qū)均勻布置；3、全面進行風險分析評估，對污染風險高的區(qū)域應考慮增加取樣點和取樣次數(shù)，如可能與產(chǎn)品直接接觸的空氣和設備附近、人員活動頻繁區(qū)域等。4、在一個區(qū)域內(nèi)應最少取樣五次，每個取樣點的取樣次數(shù)應多于一次，而不同取樣點的取樣次數(shù)可以不同，并且每次取樣量不得低于2.83 升；為了確定A 級區(qū)的級別，每個采樣點的采樣量不得少于1 立方米。5、  在

5、A級區(qū)域進行取樣時，應盡量避免取樣設備對環(huán)境的影響，可考慮使用遠程采樣系統(tǒng)，但其采樣管不宜超過2米，避免較長的采樣管中5.0um 塵粒的沉降。6、取樣點一般布置在距離地面0.81.5 米之間或操作平臺的高度，即接近人手操作的高度。7、盡量避免在回風口附近取樣，而且測試人員應站在取樣口的下風側(cè)。 限度設定可以根據(jù)歷史數(shù)據(jù)，結(jié)合不同潔凈區(qū)域的標準制訂。對新廠房而言，可根據(jù)以前的類似設施或工藝來制定這些限度，并且要進行為期幾周的環(huán)境監(jiān)測，根據(jù)監(jiān)測數(shù)據(jù)來評價事先確立的警戒限度是否合適，并做出相應調(diào)整。限度設定以后，應定期回顧評價，如每個季度或年度。如果歷史性數(shù)據(jù)表明環(huán)境有

6、所改善，則限度也應作相應調(diào)整以反映出實際的環(huán)境狀況。 注意事項1.嚴格按照儀器生產(chǎn)商要求操作和使用設備2.事先確認潔凈區(qū)通風系統(tǒng)運行平穩(wěn)后，方可進行取樣。3.監(jiān)測單項流時，將計數(shù)器取樣口正向?qū)χ鴼饬鞣较?；監(jiān)測紊流時，宜將取樣口垂直朝上。在單向流系統(tǒng)中，應采用等動力學的取樣頭。4.在確認級別時，應盡量使用采樣管較短的便攜式塵埃粒子計數(shù)器，以避免在遠程采樣系統(tǒng)長的采樣管中5.0um 塵粒的沉降。5.監(jiān)測系統(tǒng)的選擇還應考慮生產(chǎn)操作中物料（例如有活的生物體或放射性藥品的操作）帶來的風險。 除了要求控制環(huán)境中的粒子水平外，我們還要注重潔凈環(huán)境中的微生物水平。潔凈室的各種硬件

7、系統(tǒng)控制了空氣中懸浮粒子的數(shù)目，從而也就降低了空氣中微生物的污染。GMP規(guī)定為評估無菌生產(chǎn)的微生物狀況，應對微生物進行動態(tài)監(jiān)測，監(jiān)測方法有沉降菌法、定量空氣浮游菌采樣法和表面取樣法（如：棉簽擦拭法和接觸碟法）等。沉降菌法：用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的活生物性粒子，然后加以培養(yǎng)、繁殖后加以計數(shù)得到。定量空氣浮游菌采樣法：通過收集懸浮在空氣中的生物性微粒，通過專門的培養(yǎng)基，在適應的生長條件下，讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)從而判定潔凈環(huán)境中單位體積空氣中菌落數(shù)的多少。表面取樣法：用來監(jiān)測生產(chǎn)區(qū)域表面以及設備和與產(chǎn)品接觸表面的微生物量?；镜谋O(jiān)測方法包括：1、接觸碟法：適用于對平整的規(guī)則性表面進行取樣

8、監(jiān)測，2、擦拭法：用于對不規(guī)則表面（尤其是設備表面）進行取樣3、表面沖洗法：用于監(jiān)測大面積區(qū)域內(nèi)表面的微生物含菌量，包括設備軌道、儲水罐等。用定量的無菌水沖洗表面，收集淋洗水，用膜過濾法來計算微生物數(shù)量。  潔凈室微生物監(jiān)測的限度要求中國GMP規(guī)定：潔凈區(qū)微生物監(jiān)測的動態(tài)標準(1)如下： 潔凈度級別 浮游菌cfu/m3沉降菌（90mm）cfu /4小時(2)表面微生物接觸（55mm）cfu /碟5指手套cfu /手套A級1？111B級10555C級1005025-D級20010050-注：（1）表中各數(shù)值均為平均值。（2）單個沉降碟的暴露時間可以少于4小

9、時，同一位置可使用多個沉降碟連續(xù)進行監(jiān)測并累積計數(shù)。 潔凈室微生物監(jiān)測取樣點和取樣頻率為了建立常規(guī)的取樣位點，必須考慮產(chǎn)品與其接觸或暴露環(huán)境的程度。對反映產(chǎn)品的微生物含菌量有代表性的取樣點必須取樣和進行環(huán)境監(jiān)測。與產(chǎn)品接觸的來源可能包括壓縮氣體，房間空氣，生產(chǎn)設備，工具，關(guān)鍵表面，儲存容器，傳送帶，手套、人員以及水。不與產(chǎn)品直接接觸的來源可能包括：墻，地，天花板，門，長凳，椅子，測試儀器和緩沖間。建立常規(guī)的取樣位點時還應考慮環(huán)境監(jiān)測是否會增加產(chǎn)品的污染。建立一個合適的取樣點需要考慮很多因素，比如廠方設施，生產(chǎn)線的設定，驗證數(shù)據(jù)，生產(chǎn)過程，歷史數(shù)據(jù)，測試方法等。潔凈區(qū)（室）監(jiān)測中的取樣點和取樣量可以比潔凈級別確認時的取樣點和取樣量少，但應該通過正式的風險分析研究和對監(jiān)測結(jié)果的分析（至少要有6 個月以上的運行數(shù)據(jù)作為分析基礎）來確定監(jiān)測頻次和限度。同時，監(jiān)測頻次和限度的確定也要考慮到生產(chǎn)工藝因素，監(jiān)測限度及取樣點應該定期進行回顧驗證，以保證監(jiān)測行為的有效性。以下是國標GB/T 1629216294-1896 “醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法中規(guī)定的最少取樣點數(shù)。潔凈區(qū)空氣懸浮粒子、浮游菌及沉降菌