1、大黃中蒽醌類成分的提取、大黃中蒽醌類成分的提取、分離和鑒定分離和鑒定中藥化學(xué)與分析教研室中藥化學(xué)與分析教研室實實 驗驗 目目 的的n掌握掌握蒽醌苷元的提取方法蒽醌苷元的提取方法酸水解法酸水解法n掌握掌握PH梯度萃取法的原理和操作技術(shù)梯度萃取法的原理和操作技術(shù)n掌握掌握緩沖紙色譜的原理和基本操作技術(shù)緩沖紙色譜的原理和基本操作技術(shù)n通過大黃酚、大黃素甲醚的分離實驗，通過大黃酚、大黃素甲醚的分離實驗，熟悉熟悉柱層析的操作技術(shù)柱層析的操作技術(shù)n熟悉熟悉蒽醌類化合物的鑒定方法蒽醌類化合物的鑒定方法實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容容n總蒽醌苷元的提取總蒽醌苷元的提取n蒽醌苷元的分離和精制蒽醌苷元的分離和精制n蒽醌類成

2、分的鑒定蒽醌類成分的鑒定實實 驗驗 原原 理理n提取：提?。狠祯蛰祯?苷元苷元(溶于熱氯仿溶于熱氯仿) 總蒽醌苷元總蒽醌苷元氯仿提取氯仿提取酸酸水水解解實實 驗驗 原原 理理n分離：分離：OHR1R2OHO OA大黃酚（大黃酚（chrysophanol） R1=H R2= CH3B大黃素（大黃素（emodin） R1= OH R2= CH3C大黃素甲醚（大黃素甲醚（physcion） R1=OCH3 R2= CH3D蘆薈大黃素（蘆薈大黃素（aloe-emodin） R1=H R2=CH2OHE大黃酸（大黃酸（rhein） R1=H R2=COOH由于各羥基蒽醌結(jié)構(gòu)上的不同所由于各羥基蒽醌結(jié)

3、構(gòu)上的不同所表現(xiàn)的酸性不同，用表現(xiàn)的酸性不同，用pH梯度萃取梯度萃取法法分離他們；大黃酚和大黃素甲分離他們；大黃酚和大黃素甲醚酸性相近，利用其極性的差異醚酸性相近，利用其極性的差異，用，用柱色譜柱色譜分離之。分離之。 酸性酸性EBDACn總蒽醌苷元的提取總蒽醌苷元的提取 大黃粗粉大黃粗粉100g +20%硫酸硫酸200mL，濕潤，濕潤 +氯仿氯仿1瓶，加熱回流瓶，加熱回流2h 稍冷，過濾稍冷，過濾 藥渣（棄）藥渣（棄） 氯仿提取液氯仿提取液實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（一）容（一）n蒽醌苷元的分離和精制（蒽醌苷元的分離和精制（1） 蒽醌類成分的緩沖紙色譜蒽醌類成分的緩沖紙色譜 層析材料：層析材料：31

4、2濾紙濾紙 樣樣 品：大黃氯仿提取液品：大黃氯仿提取液 展展 開開 劑：氯仿（水飽和）劑：氯仿（水飽和） 顯顯 色：自然光下觀察色：自然光下觀察實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（二）容（二）pH3pH8PH9.95%Na2CO3:5%NaOH(9:1)3%NaOHpH8n蒽醌苷元的分離和精制（蒽醌苷元的分離和精制（2） 大黃氯仿提取液大黃氯仿提取液 +PH8.0緩沖液緩沖液150mL，振搖，振搖 堿水層堿水層 氯仿層氯仿層 +20%HCl調(diào)調(diào)PH3.0 +PH9.9緩沖液緩沖液300mL，振搖，振搖 靜置，抽濾靜置，抽濾(*) 沉淀沉淀1 堿水層堿水層 氯仿層氯仿層 冰醋酸精制冰醋酸精制 同同* +5%N

5、a2CO3: 大黃酸大黃酸 沉淀沉淀2 5%NaOH(9:1)540mL 丙酮精制丙酮精制 大黃素大黃素 堿水層堿水層 氯仿層氯仿層 同同* +3%NaOH300mL 沉淀沉淀3 乙酸乙酯精制乙酸乙酯精制 堿水層堿水層 氯仿層氯仿層 蘆薈大黃素蘆薈大黃素 同同* 沉淀沉淀4實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（二）容（二）n蒽醌苷元的分離和精制（蒽醌苷元的分離和精制（3） 柱層析法分離大黃酚、大黃素甲醚柱層析法分離大黃酚、大黃素甲醚 裝柱（濕法裝柱）裝柱（濕法裝柱） 上樣（干法上樣）上樣（干法上樣） 洗脫劑洗脫劑1 石油醚石油醚-乙酸乙酯（乙酸乙酯（98：2） 洗脫洗脫 洗脫劑洗脫劑2 石油醚石油醚-乙酸乙酯

6、（乙酸乙酯（95：5） 流份檢查（合并相同流份）流份檢查（合并相同流份）實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（二）容（二）n大黃蒽醌類成分的鑒定大黃蒽醌類成分的鑒定 （1）化學(xué)鑒定）化學(xué)鑒定 （2）色譜鑒識）色譜鑒識實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（三）容（三）n大黃蒽醌類成分的鑒定（大黃蒽醌類成分的鑒定（1） 化學(xué)鑒定化學(xué)鑒定 堿液試驗：堿液試驗： 樣品樣品2%NaOH 顏色變化顏色變化 醋酸鎂試驗：醋酸鎂試驗： 樣品（乙醇溶解）樣品（乙醇溶解）0.5醋酸鎂醋酸鎂 顏色變化顏色變化實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（三）容（三）n大黃蒽醌類成分的鑒定（大黃蒽醌類成分的鑒定（2） 色譜鑒識色譜鑒識 薄層板：硅膠薄層板：硅膠G板板 點點 樣：提取的大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素樣：提取的大黃酸、大黃素、蘆薈大黃素 、大黃酚、大黃素甲醚及其對照品、大黃酚、大黃素甲醚及其對照品 展開劑：正己烷乙酸乙酯甲酸（展開劑：正己烷乙酸乙酯甲酸（30：10 ：0.5） 展開方式：上行展開展開方式：上行展開 顯顯 色：可見光觀察，濃氨水熏或色：可見光觀察，濃氨水熏或5醋酸鎂醋酸鎂 顯色后再觀察顯色后再觀察實實 驗驗 內(nèi)內(nèi) 容（三）容（三）思考題思考題