1、阿托品與乙酰膽堿對(duì)豚鼠腸道的拮抗作用與阿托品與乙酰膽堿對(duì)豚鼠腸道的拮抗作用與pA2值的測(cè)定值的測(cè)定 小組成員小組成員 06藥學(xué)藥學(xué)蘇鶴桂蘇鶴桂 譚柏森譚柏森 鐘潤(rùn)桃鐘潤(rùn)桃 彭冠彭冠 王衍棟王衍棟v促胃腸動(dòng)力藥包括很多種類, 這類藥物有著不同受體類型和化學(xué)構(gòu)造以及作用機(jī)制, 對(duì)從食管到結(jié)腸的胃腸道的不同部位有著不同程度的促動(dòng)力作用.這類藥物對(duì)胃腸道作用機(jī)制的研討包括: 膽堿能機(jī)制、腎上腺能機(jī)制、抗多巴胺和抗膽堿脂酶機(jī)制、神經(jīng)體液機(jī)制等. v而膽堿能受體藥物臨床上廣泛運(yùn)用于慢性胃炎、反流性食管炎 (GERD)、胃癱、功能性消化不良 (FD) 等疾病的治療.該類藥物的作用機(jī)制還沒(méi)有完全明確，研討其對(duì)

2、胃腸動(dòng)力的作用機(jī)制及臨床運(yùn)用有艱苦的臨床意義。阿托品與乙酰膽堿的對(duì)腸道的藥理學(xué)作用阿托品與乙酰膽堿的對(duì)腸道的藥理學(xué)作用阿托品阿托品v阿托品為阻斷阿托品為阻斷M膽堿受體膽堿受體的抗膽堿藥，能解除平滑的抗膽堿藥，能解除平滑肌的痙攣肌的痙攣(包括解除血管痙包括解除血管痙攣，改善微血管循環(huán)攣，改善微血管循環(huán))。乙酰膽堿乙酰膽堿vAch可明顯興奮胃腸道，可明顯興奮胃腸道，使其收縮幅度、張力添加，使其收縮幅度、張力添加，胃、腸平滑肌蠕動(dòng)添加，胃、腸平滑肌蠕動(dòng)添加，并可促進(jìn)胃、腸分泌，導(dǎo)并可促進(jìn)胃、腸分泌，導(dǎo)致惡心、噯氣、嘔吐、腹致惡心、噯氣、嘔吐、腹痛及排便等病癥痛及排便等病癥 pA2pA2與與pD2pD

3、2值的定義值的定義pA2vPA2是拮抗參數(shù)，當(dāng)有是拮抗參數(shù)，當(dāng)有一定濃度的拮抗藥存在時(shí)，一定濃度的拮抗藥存在時(shí)，激動(dòng)劑添加激動(dòng)劑添加2倍時(shí)才干到倍時(shí)才干到達(dá)原來(lái)效應(yīng)，此時(shí)拮抗藥達(dá)原來(lái)效應(yīng)，此時(shí)拮抗藥的負(fù)對(duì)數(shù)即拮抗參數(shù)，的負(fù)對(duì)數(shù)即拮抗參數(shù)， pA2 = -logI = -logKI 。PA2的值越大闡明拮抗劑的值越大闡明拮抗劑的作用越強(qiáng)的作用越強(qiáng) pD2vPD2：是激動(dòng)劑與受體親：是激動(dòng)劑與受體親和力的定量表示。和力的定量表示。PD2是是產(chǎn)生產(chǎn)生50最大效應(yīng)最大效應(yīng)(E=12Emax)的摩爾濃度的負(fù)對(duì)的摩爾濃度的負(fù)對(duì)數(shù)數(shù)(-logD)。PD2值越大，值越大，闡明藥物和受體的親和力闡明藥物和受體的

4、親和力越大，藥效越強(qiáng)。計(jì)算方越大，藥效越強(qiáng)。計(jì)算方法與法與PA2類似類似 實(shí)驗(yàn)方法概述與目的實(shí)驗(yàn)方法概述與目的v本實(shí)驗(yàn)擬用豚鼠的離體腸道并佐以乙酰膽堿與阿托品分別作為腸道激動(dòng)劑與拮抗劑進(jìn)展實(shí)驗(yàn)。察看其對(duì)腸道的競(jìng)爭(zhēng)性拮抗作用，同時(shí)掌握pA2值的測(cè)定方法。實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材離體器官浴池及恒溫離體器官浴池及恒溫安裝安裝 PowerLab系統(tǒng)系統(tǒng) 加液器加液器 培育皿培育皿 縫針縫針 線線 眼科鑷子眼科鑷子 剪刀剪刀 試藥試藥阿托品阿托品mol/L： 310-7 乙酰膽堿乙酰膽堿mol/L：10-6、10-5、10-4、10-3、10-2 臺(tái)氏液臺(tái)氏液混合氣體混合氣體95O25CO2負(fù)荷負(fù)荷500 mg

5、實(shí)驗(yàn)器材與試劑實(shí)驗(yàn)器材與試劑 實(shí)驗(yàn)道路實(shí)驗(yàn)道路實(shí)驗(yàn)安裝實(shí)驗(yàn)安裝累積劑量效應(yīng)曲線累積劑量效應(yīng)曲線離體腸制備離體腸制備猛擊豚鼠頭部至昏，猛擊豚鼠頭部至昏，立刻剖開腹腔，自幽立刻剖開腹腔，自幽門下門下5cm剪取空腸和剪取空腸和回腸上段，迅速置于回腸上段，迅速置于臺(tái)氏液液中。小心修臺(tái)氏液液中。小心修去腸系膜，用吸管汲去腸系膜，用吸管汲取臺(tái)氏液液緩慢沖洗取臺(tái)氏液液緩慢沖洗腸內(nèi)容物；將空腸段腸內(nèi)容物；將空腸段分割成分割成2 cm的小段備的小段備用。用。制成的標(biāo)本一端固定制成的標(biāo)本一端固定于通氣鉤上，另一端于通氣鉤上，另一端銜接于肌力換能器并銜接于肌力換能器并接入接入PowerLab系統(tǒng)系統(tǒng)的橋式放大器上，

6、浴的橋式放大器上，浴池內(nèi)放池內(nèi)放20ml 臺(tái)氏液液臺(tái)氏液液，加，加500mg負(fù)荷，恒負(fù)荷，恒溫溫371C，浴池內(nèi)，浴池內(nèi)繼續(xù)通入繼續(xù)通入95O2與與5CO2的混合氣體。的混合氣體。實(shí)驗(yàn)安裝終了以后，實(shí)驗(yàn)安裝終了以后，翻開翻開PowerLab系統(tǒng)系統(tǒng)，設(shè)置參數(shù)，設(shè)置參數(shù) 。描記腸。描記腸肌收縮曲線，待收縮肌收縮曲線，待收縮基線平穩(wěn)后，按次序基線平穩(wěn)后，按次序在浴池中參與預(yù)先配在浴池中參與預(yù)先配好的不同克分子濃度好的不同克分子濃度的乙酰膽堿。當(dāng)反響的乙酰膽堿。當(dāng)反響到一定頂峰，再遞增到一定頂峰，再遞增劑量，效應(yīng)不再添加劑量，效應(yīng)不再添加，此時(shí)的效應(yīng)為最大，此時(shí)的效應(yīng)為最大效應(yīng)。效應(yīng)。阿托品拮抗乙酰

7、膽阿托品拮抗乙酰膽堿的劑量效應(yīng)堿的劑量效應(yīng)曲線的制造曲線的制造 放去浴池中的液體放去浴池中的液體，用臺(tái)氏液液沖洗，用臺(tái)氏液液沖洗三次，以后每隔三次，以后每隔10min沖洗一次，沖洗一次，共沖洗三次，再參共沖洗三次，再參與臺(tái)氏液液至與臺(tái)氏液液至20ml。待收縮基。待收縮基線平穩(wěn)后，參與阿線平穩(wěn)后，參與阿托品托品107 mol/L 0.6ml實(shí)踐濃度實(shí)踐濃度310-9 mol/L，培育培育15min。再按前法依次參與再按前法依次參與不同濃度的乙酰膽不同濃度的乙酰膽堿，便可得到有拮堿，便可得到有拮抗劑時(shí)乙酰膽堿的抗劑時(shí)乙酰膽堿的累積劑量效應(yīng)曲線累積劑量效應(yīng)曲線，此時(shí)拮抗劑阿，此時(shí)拮抗劑阿托品摩爾濃度

8、的托品摩爾濃度的負(fù)對(duì)數(shù)即負(fù)對(duì)數(shù)即pAx。累積劑量法加藥順序累加次序藥液濃度（mol/L）藥液的毫升數(shù)（ml）每L中累積劑量（mol）110-60.20.01210-60.40.03310-50.140.1410-50.40.3510-40.141610-40.43710-30.1410810-30.430910-20.141001010-20.4300附加藥順序表附加藥順序表為了正確求得為了正確求得各參數(shù)，必需各參數(shù)，必需將曲線直線化將曲線直線化?？砂础？砂碊/R式使式使劑量效應(yīng)曲線劑量效應(yīng)曲線直線化。直線化。 以腸肌收縮幅以腸肌收縮幅度作為縱坐標(biāo)，度作為縱坐標(biāo)，以藥物對(duì)數(shù)濃以藥物對(duì)數(shù)濃度為橫

9、坐標(biāo)，度為橫坐標(biāo)，繪制量效曲線。繪制量效曲線。藥物的最大效藥物的最大效應(yīng)即曲線的高應(yīng)即曲線的高度。度。繪制累積繪制累積劑量效應(yīng)劑量效應(yīng)曲線曲線 直線回歸直線回歸計(jì)算參數(shù)計(jì)算參數(shù) 公式公式1maxmaxDEEKEDD式中：式中：D為藥物劑量濃度，為藥物劑量濃度，E為某一劑量的效應(yīng)，為某一劑量的效應(yīng)，KD為藥物的解離為藥物的解離常數(shù)，常數(shù)，Emax為藥物的最大效應(yīng)。以為藥物的最大效應(yīng)。以D/E為縱坐標(biāo)，為縱坐標(biāo)，D為橫坐標(biāo)進(jìn)展為橫坐標(biāo)進(jìn)展直線回歸。根據(jù)公式直線回歸。根據(jù)公式pA2 = pAx + log (x-1)，式中，式中pAx為拮抗劑摩爾濃為拮抗劑摩爾濃度的負(fù)對(duì)數(shù)，度的負(fù)對(duì)數(shù)，x為用拮抗劑后與用拮抗劑前為用拮抗劑后與用拮抗劑前KD之比。之比。2021.11.2-2021.11.20 制定實(shí)驗(yàn)方案，制定實(shí)驗(yàn)方案，并對(duì)方案進(jìn)展并對(duì)方案進(jìn)展陳說(shuō)陳說(shuō) 2021.11.30-2021.12.4 實(shí)驗(yàn)階段 2021.12.7-2021.12.18 實(shí)驗(yàn)總結(jié)階段實(shí)驗(yàn)總結(jié)階段