1、痢疾桿菌的分離與鑒定濮陽市疾病預(yù)防控制中心許銀懷第一節(jié) 概述志賀菌屬（ShigellQ 細(xì)菌又稱痢疾桿菌，引起人類及靈長類動物 細(xì)菌性痢疾。 1899年由日本人志賀首先發(fā)現(xiàn)。全球每年感染人次約為1.65億，死亡110萬，發(fā)病率、死亡率居感 染性腹瀉之首位。發(fā)展中國家發(fā)病率較高，如阿根廷990.6 / 10萬、印度972.3 / 10 萬；發(fā)達(dá)國家相對較低，如美國612/10萬、德國2.7/10萬、 法國0.3 / 10萬；我國上世紀(jì)5080年代發(fā)病率在46.371018.93 / 10萬之間。近20年痢疾發(fā)病率在法定傳染病中由第一位降至第三位，但在衛(wèi)生 狀況不良的地區(qū)，發(fā)病率仍居高不下。人群對

2、細(xì)菌性痢疾普遍易感，各年齡組均可受到感染，5歲以下兒童 發(fā)病率最高。據(jù)估計，在臨床就診的腹瀉病人中的5%15%是志賀菌引起的，而 因腹瀉死亡病例中有75%是志賀菌感染造成的。發(fā)展中國家福氏志賀菌最常見，發(fā)達(dá)國家以宋內(nèi)志賀菌為主。美國宋內(nèi)志賀菌75%,但在男-男性行為人群仍以福氏志賀菌常見。鮑氏志賀菌最先在印度發(fā)現(xiàn)，除印度次大陸地區(qū)較為常見外，其它 地區(qū)較為少見。細(xì)菌性痢疾發(fā)病有明顯的季節(jié)性，發(fā)病高峰為夏秋季，通常在79 月份。細(xì)菌性痢疾防治仍需探索、研究內(nèi)容:細(xì)菌性痢疾在不同地區(qū)、不同人群的發(fā)病強(qiáng)度、分布特征、病原學(xué) 特點缺乏全面、準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)；缺乏快速、簡便的病原學(xué)診斷方法，細(xì)菌性痢疾漏診和誤

3、診現(xiàn)象普 遍；志賀菌耐藥性譜的不斷擴(kuò)大，細(xì)菌性痢疾抗菌治療難度加大；洗手、母乳喂養(yǎng)、安全飲水、糞便無害化處理等行之有效的干預(yù)措 施的落實需要強(qiáng)化；目前所用痢疾菌苗免疫保護(hù)效果仍需進(jìn)一步評價。第二節(jié) 病原學(xué)一、抗原分類志賀菌屬細(xì)菌有菌體（O）抗原，某些新分離菌株有表面（K）抗原。（一）菌體（O）抗原1 .型特異性抗原：多糖，光滑型菌株主要抗原；分A、B、C、D4個群及 35個抗原型。2 .群特異性抗原：光滑型菌株次要抗原，主要存在于B群，籍此將菌型分為多種亞型。（二）表面（K）抗原>常在新分離的A、C、D群各血清型及B群的2a型、6型細(xì)菌中出 現(xiàn)。> K抗原存在時，可阻止菌體抗原與相

4、應(yīng)免疫血清發(fā)生凝集；需經(jīng) 10030分鐘加熱破壞后露出菌體抗原，與相應(yīng)的免疫血清發(fā)生凝 集。二、血清分群（一）A群（志賀痢疾桿菌）:有12個血清型;具有K抗原菌株可阻礙O抗原的 凝集;在我國常見的為2型（又稱司密斯桿菌），1型較少見，其余各型更為 罕見。（二）B群（福氏痢疾桿菌）具有型、群抗原；型抗原存在于同型菌株中；群抗原有多種，存在 于B群各菌型中。 近年 1C （1:7）、2b （ H:3,4;7）、3c （111:6）、4c （IV:7,8）及 4 型（IV:-） 等新型菌株出現(xiàn)。目前有6個血清型，（14個亞型及2個變種）。（三）C群（鮑氏痢疾桿菌）:18個血清型。（四）D群（宋內(nèi)痢疾

5、桿菌丫僅一個血清型（I、II相）；I相（光滑型菌落）多從急 性期感染病人標(biāo)本中分離;II相亦稱R型（粗糙型菌落）常從慢性患者或帶菌 者檢出。三、屬間抗原關(guān)系志賀菌屬與埃希菌屬的0抗原關(guān)系非常密切，有近半數(shù)的菌型與大腸埃 希氏菌的某些O抗原完全相同；相同抗原菌屬間存在血清交叉凝集反應(yīng)。表1志賀菌屬與大腸埃希菌的O抗原關(guān)系O抗原完全相同O抗原部分相同志賀菌屬大腸埃希菌志賀菌屬大腸埃希菌志賀菌屬大腸埃希菌A2112acA11,120C12,(50)A3124A2149C287ab,96A43588-51A3164C385A558A488,159C4149A12152A6130C676B2b147ab

6、A7121C9102B3a5444-80A838,23C10105acB4b135A9144C127B5129All29C1328ac,98C1149A123C1583C453B群12,13,16,1719,C1647C5796269,733438-51C17124C74838-69C1829,可能C8143C11105abC1432C15112ab注：D群宋內(nèi)菌與類志賀鄰單胞菌017抗原相同。四、菌群分布與變遷菌群分布與變遷因國家、地區(qū)、年份不同而異。 40年代前A群是優(yōu)勢流行菌,60年代初幾乎銷聲匿跡，但1969-1970 年突然在中美地區(qū)暴發(fā)，1972-1978年又在南亞的孟加拉國連年發(fā)

7、生 流行，繼之印度、斯里蘭卡、馬爾代夫、尼泊爾、不丹、緬甸、泰 國等地區(qū)和國家受到侵襲。 D群從60年代起在許多工業(yè)發(fā)達(dá)國家躍居首位。國內(nèi)過去流行菌型為2a為主;近年來4、4c、5b、la等菌型呈上升趨 勢；城市D群為上升態(tài)勢。我國個別地區(qū)發(fā)現(xiàn)A1型和C18型局部暴發(fā)流行。五、溶原性噬菌體對相應(yīng)的細(xì)菌具有特異性裂解作用，溫和噬菌體DNA侵入宿 主細(xì)胞后，整合于宿主細(xì)胞的染色體DNA上，稱為前噬菌體；前噬菌體與宿主細(xì)胞的染色體同時復(fù)制，這個過程稱為溶原化；被感染的細(xì)菌稱為溶原性細(xì)菌。溶原性細(xì)菌對于相同的噬菌體具有免疫力，并獲得一些新的性狀， 稱為溶原性轉(zhuǎn)換。該轉(zhuǎn)換可導(dǎo)致福氏志賀菌型抗原和群抗原發(fā)

8、生廣泛的變異。六、變異性（一）S-R變異志賀菌屬菌落可由光滑型變異成為粗糙型（S-R變異），并常伴有生化 反應(yīng)、抗原構(gòu)造和致病性的變異。在慢性痢疾病人或恢復(fù)期病人體內(nèi)，菌株可變異成為不典型菌株。 部分變異菌株可通過10%的膽汁肉湯培養(yǎng)發(fā)生返祖，成為典型菌株。 因而在分離這類細(xì)菌時注意要反復(fù)多次地檢查。（二）抗原變異（溶原性轉(zhuǎn)換）根據(jù)溶原性轉(zhuǎn)換變種和細(xì)胞壁多糖免疫化學(xué)分析，福氏志賀菌除 6型菌外其它型、亞型以及變種都是由一個種所產(chǎn)生的許多溶原性的 變種。 y變種是非溶原性的前體型，當(dāng)被六種不同的噬菌體溶原化后， 可以變?yōu)楦餍透Ｊ暇腶亞型或x變種，這是第一次溶原化； 一次溶原化的培養(yǎng)物，還可以發(fā)

9、生第二次溶原化，變?yōu)楦餍透?氏菌的b亞型。福氏型特異性抗原I、II、IV、V和群7,8抗原，均以y變種群 3,4抗原多糖為前體型，經(jīng)溫和噬菌體溶原性轉(zhuǎn)換而來。噬菌體（中）7,8溶原化的結(jié)果是使群7,8抗原變?yōu)閤變種，同時群3,4抗原成為隱蔽狀態(tài)；前體型經(jīng)中n、v、I、N溶原化結(jié)果，則是相應(yīng)型抗 原的產(chǎn)生，分別變?yōu)?a、5a、la、4a等型。其中x變種、2a型和5a 型還可以經(jīng)第二次的溶原化，變?yōu)?b型和5b型。群6抗原是群4抗原乙?；?11,6溶原性轉(zhuǎn)換）所致；型III 抗原為群3,4復(fù)合抗原乙酰化的結(jié)果。福氏la型和4a型的群4抗原 乙?；蟪霈F(xiàn)群6抗原，變?yōu)?b型和4b型，但此時型III

10、抗原成為 隱蔽狀態(tài)，僅當(dāng)型抗原I、IV消失時顯現(xiàn)。宋內(nèi)志賀菌I相抗原受控于一個140Mda大質(zhì)粒，若質(zhì)粒丟失，I相抗原不能合成，菌則從I相轉(zhuǎn)變?yōu)镮I相。（三）毒力變異志賀菌的2型腸毒素（ShET-2）、粘附性、侵襲力、胞內(nèi)繁殖、細(xì) 胞間擴(kuò)散等活性編碼基因均存在于一個140Mda的質(zhì)粒上，其表達(dá)受 染色體上多個基因的調(diào)控。該調(diào)控基因的變異或大質(zhì)粒的丟失，均 可造成毒菌株的毒力減弱或消失。七、致病性（一）侵襲力：菌毛有利于菌粘附至腸粘膜（二）毒素：/ 通透性增加內(nèi)毒素 一 局部f作用于腸壁、粘膜炎癥、潰瘍?nèi)硪?內(nèi)毒素血癥外毒素（A群1型）與內(nèi)毒素協(xié)同作用加重局部和全身癥狀志賀菌具有抗酸性，能順利

11、通過胃酸屏障進(jìn)入腸道，侵襲于結(jié)腸粘 膜上皮細(xì)胞，引起炎癥反應(yīng)。有研究表明最小感染劑量為10個CFU。產(chǎn)生的SHET1腸毒素是染色體編碼毒素，主要見于福氏志賀菌； SHET2是質(zhì)粒編碼毒素，志賀菌和侵襲性大腸桿菌均能產(chǎn)生。痢疾志賀菌可產(chǎn)生志賀毒素（ST）,為染色體編碼，由1個A亞單位 和5個B亞單位構(gòu)成，具有腸毒性、細(xì)胞毒性和神經(jīng)毒性。第三節(jié)實驗室分離一、標(biāo)本的采集和運(yùn)送（一）標(biāo)本的采集腹瀉病人糞便標(biāo)本：監(jiān)測點人員發(fā)現(xiàn)疑似病人和腹瀉病人后，立即發(fā)給病人潔凈塑料袋, 要求其接取自然排出的可疑糞便部分立即送檢；A嬰幼、兒童則讓其父母協(xié)助其坐排于罩有干凈塑料袋的痰盂內(nèi)（要求 勿混入尿液）。用2個棉拭子

12、分別在大便中可疑部分多點蘸取并旋轉(zhuǎn)棉拭子使全部 蘸滿大便（約1-2克）。將綿拭子插入裝有Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基的采樣管中（注意培養(yǎng)基應(yīng) 埋住糞便拭子），手接觸的棉簽尾部在管口處折斷丟棄。編號后將采樣管置4冰箱或冷臧包中保存。認(rèn)真填寫腹瀉病人糞便采樣表。志賀毒素（ShT）ShbB%27 / 25AShT-8與第胞表面浦脂受體Gb3結(jié)合ShT毒素受體介導(dǎo)胞吞進(jìn)入 細(xì)胞在溶的體作用下融解胞吞裂解，ShT毒素在弗林彳 蛋白的作用下釋放出A1片段，川具N精昔脂函的活性，1J28SRNA 公保守結(jié)構(gòu)區(qū)4324的秣定版釉脫落器 ri rirnn r-iE抑制蛋白質(zhì)合成細(xì)胞死亡監(jiān)測點/村醫(yī)需配備和更換

13、的監(jiān)測材料:腹瀉病人糞便采樣登記表。消毒棉簽。裝有Cary-Blair運(yùn)送培養(yǎng)基的采樣管（4保存可備用半年）。采便塑料袋。冷藏包（應(yīng)每日更換冰排）。（二）標(biāo)本的運(yùn)送采集標(biāo)本后應(yīng)立即通知監(jiān)測點運(yùn)送標(biāo)本人員，或每天分中午、下午 兩次送交實驗室。如當(dāng)天晚上采集，最長保存時間最好是48小時內(nèi)。二、實驗室分離技術(shù)(一)選擇分離培養(yǎng)基直接劃線分離于麥康凱(MAC)及木糖賴氨酸去氧膽酸鈉(XLD), 也可選志賀-沙門菌瓊脂(SS)、去氧膽酸鈉硫化氫乳糖瓊脂(DHL)、 去氧膽酸鈉檸檬酸鹽瓊脂(DCA)或?？祟D腸道瓊脂(HE)。但慎用SS,其可抑制志賀菌1型生長常造成漏檢。表2.志賀菌及大腸菌在選擇培養(yǎng)基上菌

14、落生長特征選擇培養(yǎng)MACXLDDCAHESS志賀菌大腸埃希菌菌落顏色、形態(tài)菌落 大小菌落顏色、形態(tài)菌落 大小無色、透明、光滑、濕潤、23 nnn a, b粉紅或紅色、混濁、凸起、3 mm邊緣整齊、圓形濕潤、邊緣整齊或不規(guī)則4 nn粉紅或無色、透明、光滑、1 mm2 mm a.黃色、混濁、凸起、濕潤、2 MD濕潤、邊緣整齊、圓形c邊緣整齊或不規(guī)則3 no無色、透明、光滑、濕潤、2 nBn粉紅色、混濁、凸起、濕3 mm3 mm a潤、邊緣整齊或不規(guī)則4 nn綠色、透明、光滑、濕潤、2 imn黃色、混濁、凸起、濕潤、3 mm邊緣整齊、圓形3 mm a邊緣整齊或不規(guī)則4 nn無色、透明、光滑、濕潤、1

15、 nnn粉紅色、混濁、凸起、濕2 mm邊緣整齊、圓形2 mm d潤、邊緣整齊或不規(guī)則3 nn注：a：志賀痢疾菌1型菌落生長較?。籦：不含結(jié)晶紫的市售培養(yǎng)基干粉不適 于志賀菌屬的選擇分離；c：志賀痢疾菌1型在XLD上生長菌落非常細(xì)小；d：志賀痢疾菌1型常被抑制生長。木糖賴氨酸去氧膽酸鈉瓊脂（XLD）：木糖；賴氨酸5g；乳糖7.5g；蔗糖7.5g；去氧膽酸鈉2.5g；硫代硫酸鈉6.8g；檸檬酸鐵鏤；酚紅。去氧膽酸鈉檸檬酸鹽瓊脂（DCA）:乳糖10g；去氧膽酸鈉1g；檸檬酸 鐵1g；中性紅0.03g。（二）病原分離用接種環(huán)多點沾取糞便標(biāo)本中可疑部分,或用采樣拭子涂種，直接劃 線分離選擇瓊脂平板各一塊

16、（見示意圖4）； 36培養(yǎng)1824小時。如無菌生長或接種過密應(yīng)重新分離平板（可 取菌苔處）（合格的分離平板菌落數(shù)150個）。采樣拭子涂釉首次分離二次分離圖4采樣拭子接種平板及劃線分離方法示意圖（三）菌落生長特性志賀菌屬是需氧或兼性厭氧桿菌。經(jīng)37培養(yǎng)1824小時，形成圓形、稍凸起、邊緣整齊、表面光滑、 濕潤、無色、半透明、直徑約2mm的較小菌落；相對宋內(nèi)菌的生長菌落較大、扁平，較不透明，易出現(xiàn)粗糙型菌落。志賀痢疾桿菌，型的營養(yǎng)需求比較高，必須補(bǔ)給15種氨基酸方能生 長。（四）生化初篩1 .可疑菌落的觀察和挑選：許多細(xì)菌在選擇性培養(yǎng)基上被抑制，既不發(fā)育也未死亡，有的能長 出肉眼看不見的小菌落。因

17、而在觀察、挑取可疑菌落時應(yīng)用接種針挑取菌落中心，避免接觸 培養(yǎng)基表面以造成污染。2 .接種生化反應(yīng)管：從選擇培養(yǎng)平板上挑取可疑菌落3-5個，用接種針挑取菌落中心，分 別接種KIA和MIU；先接種KIA（將接種針在其斜面上劃直線，隨之插入底層，取出后再在 斜面上劃密集的橫線），不經(jīng)火焰直接穿刺接種MIU培養(yǎng)基；置36±1培養(yǎng)1620小時后觀察結(jié)果。3 .生化反應(yīng)鑒別： KIA：斜面一黃（分解乳糖產(chǎn)酸）/紅（不分解乳糖）；底部一紅（產(chǎn)堿，非發(fā)酵菌）/黃（分解葡萄糖或乳糖）/產(chǎn)氣/產(chǎn)H2S；> MIU：動力（M）一沿接種線周圍向外擴(kuò)散生長呈現(xiàn)混濁者為陽性（用未接種MIU管對比觀察）。

18、I跺一培養(yǎng)基變紅為陽性。尿素（U） 一加0.5mlKovac火試劑，數(shù)分鐘內(nèi)表層試劑變深紅色為陽性。表3.用克氏雙糖（KIA）和動力咧睬尿素（MIU）生化反應(yīng)初步鑒別痢疾志賀菌與其它腸道菌菌種名稱斜面底層H2S動力尿素氧化酶痢疾志賀菌（A群） 福氏痢疾菌（B群） 鮑氏痢疾菌（C群）+W宋內(nèi)痢疾菌（D群） 傷寒沙門菌 大腸堿性殊異株 普羅菲登斯菌 摩根變形桿菌 雷極變形桿菌 小腸結(jié)腸炎耶氏菌 氣單胞菌屬 鄰單胞菌屬 弧菌屬愛德華氏菌屬K+-哈夫尼亞菌屬DA+注：K堿性反應(yīng)（紅色）；A產(chǎn)酸（黃色）；產(chǎn)酸（黃色）+產(chǎn)氣;D不定（K或A）； W=弱或遲緩 反應(yīng)；火某些福氏6型產(chǎn)氣； 大大鮑氏痢疾菌血清

19、13和14型產(chǎn)氣；* 火*侵襲性大腸菌無動力。4 .注意事項：> KIA管最好用棉花塞，若用螺旋帽或硅膠塞，將蓋子擰松一些,使有足 夠的氧氣促進(jìn)反應(yīng)；> MIU需用橡皮膠塞蓋緊，因尿素酶反應(yīng)需避開氧氣。經(jīng)46小時培 養(yǎng)可先觀察MIU管尿素酶反應(yīng)，若為紅色多為變形桿菌；再經(jīng)36 ±1過夜培養(yǎng)后觀察反應(yīng)結(jié)果。> 當(dāng)KIA出現(xiàn)A/A反應(yīng)時，應(yīng)檢查KIA管是否塞得過緊，若太緊應(yīng) 將塞子松一下后，放2-3小時再觀察一次。> 初篩中KIA底層不產(chǎn)氣不一定分解葡萄糖不產(chǎn)氣，應(yīng)用帶倒管的單 糖管復(fù)核。> KIA斜面不產(chǎn)酸不一定是乳糖陰性，應(yīng)用單糖管觀察14天才能確定 陰

20、性或遲發(fā)酵。> ONPG（半乳糖汴酶）試驗陽性是迅速判定乳糖遲發(fā)酵的可靠方法；乳 糖陰性的菌株，除耶氏菌ONPG為陽性外，其余均為陰性。> 若KIA斜面為黃色（酸性），則不宜做氧化酶試驗（因氧化酶可被酸性 pH所抑制，出現(xiàn)假陰性反應(yīng)），此種情況應(yīng)將培養(yǎng)物轉(zhuǎn)種至不含糖的 培養(yǎng)基上,待生長后再做氧化酶試驗。>有時MIU培養(yǎng)基表層呈紅色，應(yīng)檢查穿刺線是否插到底，若已穿刺 到底，培養(yǎng)基一半以上變紅則判陽性。若穿刺到底僅表層變紅，可 能是細(xì)菌在有氧條件下分解蛋白陳產(chǎn)堿變色，暫不能判為陽性，應(yīng) 繼續(xù)培養(yǎng)觀察。五、血清鑒定用生化初篩符合志賀菌反應(yīng)的KIA管斜面菌苔，做志賀菌玻片凝集 血清凝

21、集;陽性者在營養(yǎng)瓊脂平板上分純，挑單個菌落穿刺保存到半固體保存詳細(xì)記錄試驗結(jié)果并填寫菌種登記表。（一）方法與步驟:L挑取KIA生化反應(yīng)符合痢疾菌的培養(yǎng)物，首先用四種多價血清做玻片凝集反應(yīng)（4種多價包括：A群1、2型；B群和D群）。凝集者則用B群多價、D群和Al、A2、血清分別凝集，陽性者再選用相應(yīng)的群多價或單價因子 血清做凝集。若多價血清不凝集，可能為C群或A群的312型，應(yīng)進(jìn)行C群的四種多價和A群另三種多價血清做玻片凝集。2.福氏多價血清凝集的菌株，可先用群3,4、6和7三種因子血清檢查，根據(jù)因子血清凝集反應(yīng)再依次選用可能的型因子血清做凝集。3, 467可能的血清型+,la, 2a, 2b,

22、+lb, 3b, 4b+,+2b,+3a,+,3c,+1c, 2b, 4c,:在群因子血清中凝集反應(yīng)4a, 5a, 6, y5b, x-4, 63 .最近幾年出現(xiàn)的新的血清型抗原式，目前世界上并沒有統(tǒng)一；分離 較多的國家多沿用此抗原式。部分我們國家近年出現(xiàn)的。血清型44c3clc2b抗原式IV:-IV:7m：61:7n ：3,4； 74 .若四種多價血清凝集，與相應(yīng)的群血清均不凝集，且菌落較粗糙，應(yīng) 考慮宋內(nèi)n相（R相）菌?？捎盟蝺?nèi)菌n相（粗糙型）血清做凝集反應(yīng)。5 .每次均需要做鹽水凝集對照試驗；尤其當(dāng)發(fā)現(xiàn)較脆或較粘稠的菌落 時，鹽水對照可排除自凝菌。6 .屬于本地區(qū)未報道或極少見的志賀菌型

23、，應(yīng)慎重報告并送上一級實 驗室或國家級實驗室復(fù)核確認(rèn)。（二）特別處理：一般通過血清學(xué)試驗，可鑒定到群、型或亞型，但遇到不典型志賀 菌（與相應(yīng)的血清不凝集或凝集不完全）時，可做如下處理：取可疑菌劃線接種于營養(yǎng)瓊脂平板,3618小時培育后,挑取數(shù) 個菌落做玻片凝集，如不凝繼續(xù)傳代，也可用瓊脂斜面與肉湯替 換傳代，一般經(jīng)510代后，有些菌恢復(fù)其凝集力，否則可排除志賀菌。有些新鮮分離的培養(yǎng)物（A、C、D群各血清型及B群的2a型、6 型）生化符合志賀菌反應(yīng)，但與志賀菌屬診斷血清不發(fā)生凝集，應(yīng)考 慮可能存在K抗原而阻止分型血清與菌體O抗原發(fā)生凝集，處理方 法如下：取待檢菌純培養(yǎng)菌一滿接種環(huán)于0.51ml生

24、理鹽水中制成濃厚 菌液，置于100C水浴中煮沸30分鐘，冷至室溫后再用診斷血 清進(jìn)行玻片凝集。（三）交叉凝集反應(yīng)：1. A3與動力+/-、產(chǎn)氣量少大腸菌存在交叉凝集；2. Fl、Flc、F4、F4b與動力+/-、產(chǎn)氣量少的大腸菌存在交叉凝集;3. F4a與深紅沙雷菌存在交叉凝集；4. F4c、x變種與蜂房哈夫尼亞菌屬存在交叉凝集；5. C17與克雷伯菌屬存在交叉凝集；6. 宋內(nèi)I相菌株與類志賀鄰單胞菌存在交叉凝集，注意用氧化酶試 驗加以鑒別。表6福氏志賀菌型和亞型的型抗原和群抗原鑒別表型和亞型型抗原群因子血清凝集3, 467, 8laI+1bI+1cI+2an+2bn-(+)+3ain+十3b

25、m+3cm-+4IV-4aIV+4bIV+4cIV-+5av+5bV-十6VI(+)X變種+y變種- +注：+凝集；一不凝集；()個別菌株系陰性反應(yīng)。六、鑒別試驗雖然經(jīng)血清學(xué)證實、初步生化鑒定符合可基本定為志賀菌，但因 部分志賀菌型與EIEC部分血清型有密切的抗原關(guān)系，而且 EIEC同樣具有侵襲力(可使豚鼠角膜試驗陽性)，因此需做相關(guān) 鑒別試驗。表7志賀菌屬與具有相關(guān)抗原的EIEC生化鑒別表鑒別菌型/鑒別試驗甘 露 糖咧躲蔗 糖乳糖EIEC O112ac:K66*+/+志賀2型(A2).+鮑氏1型(C1)+鮑氏15型(C15)*+:鑒別前型/鑒別試驗甘 露 糖咧躲醋 酸 鹽產(chǎn)氣動力EIEC O

26、124:K72+(+)+/-志賀3型(A3).,鮑氏17型(C17)+¥鑒別菌型/鑒別試驗甘 露 糖吧躲鳥 氨 酸產(chǎn) 氣動力EIEC O136:K78+/.+/.,志賀3型(A3),鮑氏1型(C1)+,鑒別菌型/鑒別試驗甘糖咧躲粘 液酸產(chǎn)氣動力EIEC O152:K+*+/志賀12型(A12).鑒別菌型/鑒別試驗甘 露 糖咧躲醋 酸 鹽檸 檬 酸 鹽動力EIEC O164:K+(+)(+)志賀3型(A3).七、系統(tǒng)生化鑒定> 一般實驗室可做下列生化試驗：醋酸鹽、丙二酸鈉、西蒙檸檬 酸鹽、V-P、苯丙氨酸脫氨酶、賴氨酸脫竣酶、氧化鉀生長、水 楊甘發(fā)酵等試驗，志賀菌屬均為陰性反應(yīng)。>生化反應(yīng)與血清學(xué)鑒定相不符合的菌株，不能診斷為志賀菌屬 細(xì)菌。>有條件的實驗室可選用符合國內(nèi)或國際質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的市售生化反 應(yīng)板或鑒定卡做進(jìn)一步的鑒定試驗：>API20E生化鑒定系統(tǒng)：采用手工21項生化試驗，分RapiD 20E(4小時快速報告結(jié)果)和API 20E(24小時報告結(jié)果)兩種板, 不需做補(bǔ)充生化試驗。該方法操作簡