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1、病原生物學(xué)教研室病原生物學(xué)教研室張瑩張瑩一、革蘭氏染色一、革蘭氏染色1 1、原理、原理G:肽聚糖層薄且缺五肽交聯(lián)橋,交聯(lián)度低,外:肽聚糖層薄且缺五肽交聯(lián)橋,交聯(lián)度低,外膜層含較多脂質(zhì),用乙醇等有機溶劑脫色時,外膜膜層含較多脂質(zhì),用乙醇等有機溶劑脫色時,外膜中類脂質(zhì)融解,添加了細胞的通透性,薄而松散的中類脂質(zhì)融解,添加了細胞的通透性,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻撓結(jié)晶紫和碘復(fù)合物溶出,菌體呈肽聚糖網(wǎng)不能阻撓結(jié)晶紫和碘復(fù)合物溶出,菌體呈現(xiàn)復(fù)染后的紅色?,F(xiàn)復(fù)染后的紅色。G:細胞壁厚肽聚糖網(wǎng)層多且交聯(lián)致密,用脫色:細胞壁厚肽聚糖網(wǎng)層多且交聯(lián)致密,用脫色劑處置時,肽聚糖層孔徑減少,且不含類脂,通透劑處置時,
2、肽聚糖層孔徑減少,且不含類脂,通透性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物結(jié)實結(jié)合在細胞壁上,性降低,結(jié)晶紫和碘復(fù)合物結(jié)實結(jié)合在細胞壁上,菌體呈現(xiàn)初染時的紫色。菌體呈現(xiàn)初染時的紫色。初染初染-媒染媒染-脫色脫色-復(fù)復(fù)染染2 2、步驟、步驟 1 1涂片涂片2 2枯燥枯燥3 3固定固定 取菌NS 初染:結(jié)晶紫初染:結(jié)晶紫1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;媒染:盧戈氏碘液媒染:盧戈氏碘液1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;脫色:脫色:95%95%酒精酒精3030秒鐘,水沖甩干;秒鐘,水沖甩干;復(fù)染:稀釋復(fù)紅復(fù)染:稀釋復(fù)紅1 1分鐘,水沖甩干;分鐘,水沖甩干;5 5濾紙吸干,油鏡察看濾紙吸干,油鏡察看4 4染色染色3 3、結(jié)果、結(jié)果檸檬色葡萄球菌:藍紫色檸檬色葡萄球菌:藍紫色G+ 變變 形形 桿桿 菌:菌: 紅色紅色G 變形桿菌革蘭染色革蘭染色 X1000 檸檬色葡萄球菌革蘭染色革蘭染色 X1000X10004、意義、意義鑒別細菌鑒別細菌指點臨床用藥指點臨床用藥研討細菌的致病性研討細菌的致病性G+G-G+:青霉素、頭孢類青霉素、頭孢類等等G-:鏈霉素、卡那霉素等G+:外毒素G-:內(nèi)毒素 變形桿菌鞭毛變形桿菌鞭毛 鞭毛染色鞭毛染色 X1000 炭疽桿菌芽胞 革蘭染色革蘭染色 X1000 炭疽桿菌莢膜 革蘭染色革蘭染色 X1000繪繪 圖圖
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