1、 第一節(jié) 紅細胞生理第二節(jié) 紅細胞計數(shù)第三節(jié) 血紅蛋白測定第四節(jié) 紅細胞計數(shù)和血紅蛋白測定的臨床意義第五節(jié) 網(wǎng)織紅細胞概述第三章 紅細胞檢驗 第六節(jié) 紅細胞比容測定第七節(jié) 紅細胞直徑測定第八節(jié) 計算紅細胞平均數(shù)第九節(jié) 紅細胞形態(tài)檢驗第十節(jié) 點彩紅細胞檢驗第三章 紅細胞檢驗 學(xué)習(xí)目標學(xué)習(xí)目標 1. 1.概述紅細胞的生成、形態(tài)與功能以及血紅概述紅細胞的生成、形態(tài)與功能以及血紅蛋白的結(jié)構(gòu)和吸收光譜。蛋白的結(jié)構(gòu)和吸收光譜。 2.2.敘述紅細胞顯微鏡計數(shù)原理、試劑、操作敘述紅細胞顯微鏡計數(shù)原理、試劑、操作、計算、注意事項。、計算、注意事項。 3.3.比較紅細胞計數(shù)和白細胞計數(shù)的異同。比較紅細胞計數(shù)和白細

2、胞計數(shù)的異同。 4.4.概述紅細胞計數(shù)的計數(shù)誤差及質(zhì)量控制。概述紅細胞計數(shù)的計數(shù)誤差及質(zhì)量控制。一、紅細胞的發(fā)育過程二、紅細胞形態(tài)與功能三、血紅蛋白結(jié)構(gòu)與吸收光譜第一節(jié) 紅細胞生理 造血干細胞造血干細胞 早幼紅細胞早幼紅細胞中幼紅細胞中幼紅細胞晚幼紅細胞晚幼紅細胞網(wǎng)織紅細胞網(wǎng)織紅細胞成熟紅細胞成熟紅細胞EPO紅系祖細胞紅系祖細胞原始紅細胞原始紅細胞一、紅細胞的發(fā)育過程成熟紅細胞成熟紅細胞120120天天鐵鐵 鐵代謝鐵代謝原卟啉原卟啉 膽色素代謝膽色素代謝珠蛋白珠蛋白 蛋白質(zhì)代謝蛋白質(zhì)代謝衰老紅細胞衰老紅細胞形態(tài)：雙凹圓盤狀；形態(tài)：雙凹圓盤狀；直徑：直徑：6 6mm，平均，平均7.27.2；厚度

3、：厚度：邊緣部分約邊緣部分約22，中央約，中央約側(cè)面觀呈啞鈴形。側(cè)面觀呈啞鈴形。二、紅細胞的形態(tài)與功能紅細胞皺縮，邊緣呈鋸齒狀；紅細胞皺縮，邊緣呈鋸齒狀；在高滲溶液中：紅細胞腫漲紅細胞腫漲甚至破裂，血紅甚至破裂，血紅蛋白逸出后形成蛋白逸出后形成影細胞。影細胞。在低滲溶液中：血涂片經(jīng)瑞特血涂片經(jīng)瑞特染色后，細胞呈粉染色后，細胞呈粉紅色，中央著色較紅色，中央著色較淡，有明顯的中央淡，有明顯的中央淡染區(qū)，淡染區(qū)的淡染區(qū)，淡染區(qū)的直徑約占紅細胞直直徑約占紅細胞直徑的徑的1/31/32/52/5。血紅蛋白和血紅蛋白和水（水（64647070），其余成分為），其余成分為蛋白質(zhì)、磷脂、蛋白質(zhì)、磷脂、無機鹽和

4、酶。無機鹽和酶。 水水血紅蛋白血紅蛋白其余成分其余成分功能：1.1.運輸運輸O O2 2和和COCO2 22.2.調(diào)節(jié)酸堿平衡調(diào)節(jié)酸堿平衡3.3.免疫粘附免疫粘附 血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu)血紅蛋白的四級結(jié)構(gòu)三、血紅蛋白結(jié)構(gòu)與吸收光譜 Hb的結(jié)構(gòu)： HbHb-A-A：2222，占，占95959898。HbHb-A: 22-A: 22，占，占2 23 3。 HbHb-F-F：2222，占，占1 1。珠蛋白珠蛋白4 4個亞鐵血紅素個亞鐵血紅素原卟啉原卟啉 鐵鐵HbHb的分子量：的分子量：6445864458。1 1分子分子HbHb：4 4個亞鐵血紅素，個亞鐵血紅素，4 4個個FeFe， 可結(jié)合可結(jié)合4 4

5、個個O O2 2。 1mol1molHbHb：4 4mol mol FeFe，可結(jié)合，可結(jié)合4 4mol Omol O2 2。1 1克克HbHb：含：含3.47mg Fe , 3.47mg Fe , 結(jié)合結(jié)合1.39ml O1.39ml O2 2。在正常情況下，外周血中的血紅蛋白主要有：在正常情況下，外周血中的血紅蛋白主要有：氧合血紅蛋白（氧合血紅蛋白（HbOHbO2 2）還原血紅蛋白（還原血紅蛋白（HbredHbred）碳氧血紅蛋白（碳氧血紅蛋白（HbCOHbCO）高鐵血紅蛋白（高鐵血紅蛋白（HiHi或或MHbMHb）。）。及其衍生物吸收光譜及其衍生物吸收光譜Hb氧合血紅蛋白氧合血紅蛋白(H

6、bO(HbO2 2）：呈鮮紅色，在）：呈鮮紅色，在578nm578nm（黃色（黃色光）和光）和540nm540nm（綠色光）處有兩條吸收光帶。（綠色光）處有兩條吸收光帶。還原血紅蛋白（還原血紅蛋白（HbredHbred）：呈暗紅色，在）：呈暗紅色，在556nm556nm（黃（黃、綠色光之間）處有一條吸收光帶。、綠色光之間）處有一條吸收光帶。碳氧血紅蛋白（碳氧血紅蛋白（HbCOHbCO）：呈櫻紅色，在）：呈櫻紅色，在572nm572nm（黃（黃色光）和色光）和535nm535nm（綠色光）處有兩條吸收光帶。（綠色光）處有兩條吸收光帶。高鐵血紅蛋白（高鐵血紅蛋白（HiHi）：呈紅褐色，在）：呈紅褐

7、色，在634nm634nm、578nm578nm、540nm540nm和和500nm500nm處有條吸收光帶。處有條吸收光帶。吸收光譜特征：第二節(jié) 紅細胞計數(shù)原理等滲稀釋液稀釋定量全血充入計數(shù)板計數(shù)一定體積內(nèi)的紅細胞數(shù)求得每升血液中的紅細胞數(shù)量。同同WBCWBC計數(shù)計數(shù) 想一想：想一想： WBCWBC計數(shù)用到了計數(shù)用到了哪些器材？哪些器材？ 第二節(jié) 紅細胞計數(shù)器材稀釋液 甲醛枸櫞酸鹽稀釋液甲醛枸櫞酸鹽稀釋液 HayemHayem稀釋液稀釋液稀釋液 1. 1.甲醛枸櫞酸鹽稀釋液甲醛枸櫞酸鹽稀釋液成分成分 功能功能枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉 抗凝、維持滲透壓抗凝、維持滲透壓36%36%甲醛液甲醛液 防腐并固

8、定紅細胞防腐并固定紅細胞氯化鈉氯化鈉 維持滲透壓維持滲透壓蒸餾水蒸餾水稀釋液2.Hayem2.Hayem稀釋液稀釋液成分成分 功能功能氯化鈉氯化鈉 調(diào)節(jié)滲透壓調(diào)節(jié)滲透壓硫酸鈉硫酸鈉 提高相對密度，防止細胞粘連提高相對密度，防止細胞粘連氯化高汞氯化高汞 防腐劑防腐劑蒸餾水蒸餾水操作加稀釋液：加稀釋液：2.0ml2.0ml 采血：采血：10l10l 混勻混勻 充液充液 靜置：靜置：2 23min3min操作 計數(shù)：高倍鏡下中央大方格計數(shù)：高倍鏡下中央大方格 五個中方格的五個中方格的RBCRBC 計算：計算： RBC/L =RBC/L =五個中方格的五個中方格的 RBC RBC 5 51010200

9、20010106 6 報告：報告：RBCRBC：. . 10101212/L/L取稀釋液取稀釋液1.99ml,1.99ml,加血加血1010l l，計數(shù)中央大，計數(shù)中央大格內(nèi)五個中方格紅細胞為格內(nèi)五個中方格紅細胞為500500個，請報告結(jié)果個，請報告結(jié)果? ? 答案答案： RBC=500RBC=5005 5101020020010106 6 =5.00=5.0010101212/L/L請您練習(xí) 取稀釋液取稀釋液2.0ml,2.0ml,加血加血2020l l，計數(shù)中央，計數(shù)中央大格內(nèi)大格內(nèi)1010個中方格紅細胞為個中方格紅細胞為800800個，請報告結(jié)個，請報告結(jié)果果? ? 答案：答案：RBC=

10、800/10RBC=800/1025251010(2000+20)/20(2000+20)/2010106 6 =2.02 =2.0210101212/L/L壓線紅細胞的計數(shù)方法：1. 1. 血量要準確。血量要準確。2. 2. 稀釋液要過濾。稀釋液要過濾。3. 3. 紅細胞計數(shù)池內(nèi)要分布均勻。紅細胞計數(shù)池內(nèi)要分布均勻。注意事項4. 4. 實驗器材應(yīng)清潔干燥。實驗器材應(yīng)清潔干燥。5. 5. 自身凝集素增高者，宜用不含甲醛的枸櫞酸鹽稀釋自身凝集素增高者，宜用不含甲醛的枸櫞酸鹽稀釋 液。液。6.6.同時做白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定，同時做白細胞計數(shù)、紅細胞計數(shù)、血紅蛋白測定，應(yīng)先取紅細胞計

11、數(shù)用血。應(yīng)先取紅細胞計數(shù)用血。7. 7. 如實記錄實驗結(jié)果，每次簽發(fā)報告前應(yīng)仔細核對。如實記錄實驗結(jié)果，每次簽發(fā)報告前應(yīng)仔細核對。注意事項計數(shù)誤差1.1.技術(shù)誤差技術(shù)誤差 同白細胞計數(shù)同白細胞計數(shù) 白細胞數(shù)過高時應(yīng)進行校正。白細胞數(shù)過高時應(yīng)進行校正。2.2.固有誤差固有誤差 嚴重貧血的標本，應(yīng)縮小稀釋倍數(shù)或擴大計數(shù)嚴重貧血的標本，應(yīng)縮小稀釋倍數(shù)或擴大計數(shù) 范圍范圍 。質(zhì)量控制1.1.兩差比值評價法兩差比值評價法 D DR R= = DR2DR2，合格，合格DR 2DR 2，不合格，不合格X1+X2X1+X2|X1-X2 |X1-X2 | |質(zhì)量控制2.2.變異系數(shù)評價法變異系數(shù)評價法 |Xm|

12、Xm-X |-X | V = V = 100 100 Xm Xm 質(zhì)量得分質(zhì)量得分=100-=100-（2 2 V V）請您思考請您思考 紅細胞計數(shù)與白細胞計數(shù)方法上有哪紅細胞計數(shù)與白細胞計數(shù)方法上有哪些不同？些不同？目標形成性檢測與校正（1 1）紅細胞稀釋液是等滲溶液而白細胞稀）紅細胞稀釋液是等滲溶液而白細胞稀釋液是低滲溶液。釋液是低滲溶液。pHpH也不相同。也不相同。（2 2）紅細胞稀釋液不破壞細胞。）紅細胞稀釋液不破壞細胞。（3 3）稀釋倍數(shù)不同。）稀釋倍數(shù)不同。（4 4）選用計數(shù)池區(qū)域不同。）選用計數(shù)池區(qū)域不同。（5 5）計數(shù)域誤差大小不同。）計數(shù)域誤差大小不同。答案思考題： 1. 1

13、.試著比較顯微鏡紅細胞計數(shù)、白細胞試著比較顯微鏡紅細胞計數(shù)、白細胞計數(shù)、嗜酸性粒細胞計數(shù)的異同。計數(shù)、嗜酸性粒細胞計數(shù)的異同。 2.2.常用紅細胞稀釋液由哪些成分配成，常用紅細胞稀釋液由哪些成分配成，各有何作用？為什么有的患者可致渾濁？該各有何作用？為什么有的患者可致渾濁？該怎樣處理？怎樣處理？ 1.1.測知一測知一HbHb含鐵量是含鐵量是416mg/L416mg/L，氧結(jié)合，氧結(jié)合量是量是16.68%16.68%，問含血紅蛋白多少？，問含血紅蛋白多少？ 2.2.取紅細胞稀釋液取紅細胞稀釋液1.98ml1.98ml，加外周血，加外周血20l20l，混勻后充入計數(shù)池，計數(shù)中央大方，混勻后充入計數(shù)

14、池，計數(shù)中央大方格中格中5 5個中方格，平均每個中方格的紅細胞個中方格，平均每個中方格的紅細胞為為8080個，試報告該標本的個，試報告該標本的RBCRBC計數(shù)結(jié)果。計數(shù)結(jié)果。 作業(yè)胡建新第三節(jié) 血紅蛋白測定一、氰化高鐵血紅蛋白測定二、其他測定方法學(xué)習(xí)目標敘述血紅蛋白敘述血紅蛋白HiCN法的原理、操作、法的原理、操作、注意事項。注意事項。說出說出HiCN轉(zhuǎn)化液的成分及作用。轉(zhuǎn)化液的成分及作用。概述十二烷基硫酸鈉概述十二烷基硫酸鈉.堿羥高鐵血紅素堿羥高鐵血紅素血紅蛋白測定方法。血紅蛋白測定方法。 HiCN的吸收光譜與的吸收光譜與Hi、HbO2、HbCO、Hbred等的吸收光譜有何不同等的吸收光譜有

15、何不同？答案答案：（1 1）顏色不同）顏色不同（2 2）吸收峰波長不同）吸收峰波長不同（3 3）穩(wěn)定性不同）穩(wěn)定性不同復(fù)習(xí)舊課第三節(jié) 血紅蛋白測定【定義【定義】 Hb測定包括濃度測定和質(zhì)量測定。本測定包括濃度測定和質(zhì)量測定。本單元是指測定血液中各種血紅蛋白的總濃單元是指測定血液中各種血紅蛋白的總濃度，用表示。度，用表示。 第三節(jié) 血紅蛋白測定【方法【方法】比密法比密法 氰化高鐵血紅蛋白測定法氰化高鐵血紅蛋白測定法比色法比色法 十二烷基硫酸鈉法十二烷基硫酸鈉法 堿羥高鐵血紅素法堿羥高鐵血紅素法 血氧結(jié)合力法血氧結(jié)合力法 全血鐵法全血鐵法 一、氰化高鐵血紅蛋白測定法 HiCN法：法：ICSH推薦推

16、薦 WHO確認的參考方法確認的參考方法 我國推薦為首選方法我國推薦為首選方法原 理表面活性劑溶解紅細胞膜，釋放血紅蛋白。血紅蛋白被高鐵氰化鉀氧化為高鐵血紅蛋白（），在一定的值下，與氰離子（）結(jié)合生成穩(wěn)定棕紅色氰化高鐵血紅蛋白（iC）。 i在540處有一吸收峰，測定其吸光度，可求得血紅蛋白濃度（ ）。 一、氰化高鐵血紅蛋白測定法一、氰化高鐵血紅蛋白測定法RBC表面活性劑表面活性劑HbK3Fe(CN)6HiCN-HiCN540nm比色比色吸光度吸光度AHb(g/L)計算計算一、氰化高鐵血紅蛋白測定法試劑試劑文齊血紅蛋白轉(zhuǎn)化液文齊血紅蛋白轉(zhuǎn)化液 氰化鉀氰化鉀 提供提供CN離子離子高鐵氰化鉀高鐵氰化鉀

17、 氧化劑氧化劑無水磷酸二氫鉀無水磷酸二氫鉀 調(diào)節(jié)調(diào)節(jié)pHTriton X-100（非離子表面活性劑）加速溶血、防止渾濁（非離子表面活性劑）加速溶血、防止渾濁蒸餾水蒸餾水 配成后用濾紙過濾，置配成后用濾紙過濾，置棕色玻瓶棕色玻瓶中（不能中（不能用塑料瓶?。?，塞緊后保存于冷暗處，用塑料瓶?。?，塞緊后保存于冷暗處，勿使結(jié)冰勿使結(jié)冰，可保存數(shù)月?？杀４鏀?shù)月。 此液應(yīng)呈透明、淡黃色，在此液應(yīng)呈透明、淡黃色，在.0.4之之間，以蒸餾水作空白，用間，以蒸餾水作空白，用540nm比色，吸光度應(yīng)比色，吸光度應(yīng)0.001。若。若變渾、變綠或發(fā)生混濁變渾、變綠或發(fā)生混濁則應(yīng)廢棄。則應(yīng)廢棄。一、氰化高鐵血紅蛋白測定法

18、一、氰化高鐵血紅蛋白測定法操作 取指血20l，加入5ml轉(zhuǎn)化液中，充分混勻，靜置5min。 用分光光度計（帶寬應(yīng)小于8 m）比色。波長540nm，光徑（比色杯內(nèi)徑）1.000cm，以轉(zhuǎn)化液或蒸餾水為空白，測定其吸光度“”。 一、氰化高鐵血紅蛋白測定法 操 作加轉(zhuǎn)化液: 5ml 采血: 20l 靜置：混勻后放置5min 比色： =540 nm，比色杯1.000cm,轉(zhuǎn)化液 （蒸餾水）為空白，測A值 一、氰化高鐵血紅蛋白測定法計算：分光光度計符合國際標準式中： 64458是目前國際公認的血紅蛋白平均分子量。 44000是 1965年國際血液學(xué)標準化委員會（ICSH）公布的血紅蛋白摩爾吸光度。 25

19、1是稀釋倍數(shù)。7 .3672514400064458)/(ALgHb測定管吸光度在實際工作中，通常沒有在實際工作中，通常沒有符合標準的分光光度計。符合標準的分光光度計。所得吸光度不是偏高就所得吸光度不是偏高就是偏低，因此不能用分光是偏低，因此不能用分光光度法直接引用消光系數(shù)光度法直接引用消光系數(shù)計算。計算。一、氰化高鐵血紅蛋白測定法 分光光度計不符合國際標準時，結(jié)果不能直接計算得出，可采用的方法為： 標準曲線法 K值法一、氰化高鐵血紅蛋白測定法 i標準曲線制備用HICN標準液在所用的分光光度計或光電比色計上，分別測定其吸光度（A），以為縱坐標，血紅蛋白標準溶液的參考值為橫坐標，繪制標準曲線，或

20、求出K值，以后根據(jù)測定管吸光度即可在標準曲線上查出Hb濃度值。 一、氰化高鐵血紅蛋白測定法 標準曲線法 一、氰化高鐵血紅蛋白測定法 K值法專用血紅蛋白儀測定法 依據(jù)氰化高鐵血紅蛋白比色法的專用血紅蛋白儀，采用交流蠕動泵自動進液排液，流動比色池微量比色，半導(dǎo)體冷光源及光電轉(zhuǎn)換器件，電子線路采用模擬橋式光電轉(zhuǎn)換。信號經(jīng)處理放大，送至模/數(shù)轉(zhuǎn)換液晶顯示器，直接顯示出所測血紅蛋白濃度值（/）。測試速度快，操作簡便，更適合于臨床。一、氰化高鐵血紅蛋白測定法操作按說明調(diào)試好儀器。取全血20u，加入5ml HICN轉(zhuǎn)換液中，混勻，靜置5min，吸入儀器測定，待顯示屏上的數(shù)字穩(wěn)定不跳動時，此讀數(shù)即為該血樣的值

21、。專用血紅蛋白儀測定法方法學(xué)評價主要優(yōu)點：主要優(yōu)點：1操作簡便。操作簡便。2試劑較穩(wěn)定，易保存，測定結(jié)果穩(wěn)定。試劑較穩(wěn)定，易保存，測定結(jié)果穩(wěn)定。3血標本中的血紅蛋白（除血標本中的血紅蛋白（除SHb外）在轉(zhuǎn)化液外）在轉(zhuǎn)化液的作用下能迅速被轉(zhuǎn)化為的作用下能迅速被轉(zhuǎn)化為HiCN，且，且HiCN穩(wěn)定穩(wěn)定便于測定。便于測定。4HiCN參考品可長期保存，便于質(zhì)控。參考品可長期保存，便于質(zhì)控。方法學(xué)評價缺點與不足：缺點與不足：1試劑含劇毒品氰化鉀，使用、處理不當(dāng)可能試劑含劇毒品氰化鉀，使用、處理不當(dāng)可能污染環(huán)境，引起公害。污染環(huán)境，引起公害。2對碳氧血紅蛋白（對碳氧血紅蛋白（HbCO）轉(zhuǎn)化太慢。）轉(zhuǎn)化太慢。

22、3不能轉(zhuǎn)化硫化血紅蛋白（不能轉(zhuǎn)化硫化血紅蛋白（SHb）。）。4遇高白細胞和高球蛋白血癥的血標本會出現(xiàn)遇高白細胞和高球蛋白血癥的血標本會出現(xiàn)渾濁，標本或試劑應(yīng)經(jīng)處理后才能比色。渾濁，標本或試劑應(yīng)經(jīng)處理后才能比色。 1可由指血直接測定，耳血結(jié)果偏高。可由指血直接測定，耳血結(jié)果偏高。靜脈血可按每毫升血靜脈血可按每毫升血 1.5mgEDTA二鈉的比二鈉的比例抗凝，不可用肝素抗凝（可致混濁）。例抗凝，不可用肝素抗凝（可致混濁）。注意事項 有條件的單位應(yīng)校正分光光度計的有條件的單位應(yīng)校正分光光度計的波長準確性、波長重復(fù)性、譜帶半寬度波長準確性、波長重復(fù)性、譜帶半寬度（狹縫）。雜散光、光度線性和比色杯光（狹

23、縫）。雜散光、光度線性和比色杯光徑。徑。注意事項 專用血紅蛋白儀、標準曲線或值專用血紅蛋白儀、標準曲線或值應(yīng)定期檢查、校正。專用血紅蛋白儀零點應(yīng)定期檢查、校正。專用血紅蛋白儀零點漂移絕對值超過漂移絕對值超過 2/，需重新調(diào)零。分，需重新調(diào)零。分光光度計必須有良好的線性才可用光光度計必須有良好的線性才可用 值法。值法。注意事項 轉(zhuǎn)化液（文齊氏液）轉(zhuǎn)化液（文齊氏液）p應(yīng)穩(wěn)定應(yīng)穩(wěn)定7.20.2，放置在，放置在棕色硼硅有塞玻璃瓶中，棕色硼硅有塞玻璃瓶中，20室溫保存，冰箱保存穩(wěn)定時間更長，室溫保存，冰箱保存穩(wěn)定時間更長，但勿使結(jié)冰，不然會使但勿使結(jié)冰，不然會使Fe（CN）6失效。失效。放白色瓶、塑料瓶

24、和強光照射會使放白色瓶、塑料瓶和強光照射會使CN-下下降，結(jié)果偏低。降，結(jié)果偏低。注意事項 轉(zhuǎn)化液中轉(zhuǎn)化液中KCN是劇毒藥品，極不安是劇毒藥品，極不安全，也污染環(huán)境。這是全，也污染環(huán)境。這是iC法的缺點。法的缺點。KCN必須按劇毒藥品管理規(guī)定保存，在配必須按劇毒藥品管理規(guī)定保存，在配制和保存過程中應(yīng)提高警惕，防止污染。制和保存過程中應(yīng)提高警惕，防止污染。用后廢液應(yīng)分散稀釋處理，或按每升加次用后廢液應(yīng)分散稀釋處理，或按每升加次氯酸鈉液氯酸鈉液35混勻后敞開過夜，使混勻后敞開過夜，使CN一一氧化成氧化成CO2和和2。揮發(fā)后，再排入下水道。揮發(fā)后，再排入下水道。 注意事項 高丙種球蛋白血癥、變性血紅

25、蛋白血高丙種球蛋白血癥、變性血紅蛋白血癥和白細胞特高的病例都可出現(xiàn)混濁，可于癥和白細胞特高的病例都可出現(xiàn)混濁，可于每升試劑中加氯化鈉每升試劑中加氯化鈉15g甚至甚至50g防止混濁。防止混濁。 但高濃度有核紅細胞所致混濁尚不能防止。但高濃度有核紅細胞所致混濁尚不能防止。 注意事項質(zhì)量控制1.氰化高鐵血紅蛋白參考液的純度檢查：氰化高鐵血紅蛋白參考液的純度檢查： 1）波峰）波峰540 nm, 波谷波谷504nm； 2) A540/A504：1.591.63； 3）A710800 Fe+ E.HbO2 可轉(zhuǎn)化為HiCN目標形成性檢測與校正 13.對于HiCN的描述,有錯的是: A.為Hb衍生物 B.呈

26、棕紅色 C.吸收峰在540nm D.穩(wěn)定性較差 E.只有一較寬的吸收光帶 目標形成性檢測與校正 14.下列哪種試劑可用于紅細胞稀釋液: A.碳酸銨 B.碳酸氫鈉 C.氯化汞 D.鐵氰化鉀 E.以上都不行目標形成性檢測與校正 15.采用HiCN參考標準液是因為: A.儀器的差異 B.技術(shù)誤差 C.操作方便 D.快速 E.以上均不對 目標形成性檢測與校正 16.對Hb的描述,除哪一條件,均正確: A.由4條多肽鏈組成 B.為結(jié)合蛋白質(zhì) C.含有4個Fe+原子 D.每克含鐵3.47mg E.每克結(jié)合氧1.39ml 目標形成性檢測與校正 17.對于轉(zhuǎn)化液的要求,有錯的是: A.淡黃透明 B.貯存于棕色

27、瓶 C.不能偏堿 D.不宜用塑料瓶裝 E.變深后不宜再用目標形成性檢測與校正 18.下述哪種試劑不能用于HiCN轉(zhuǎn)化液: A.亞鐵氰化鉀 B.氰化鉀 C.磷酸二氫鉀 D.Triton X-100 E.O-P乳化劑目標形成性檢測與校正 19.關(guān)于RBC正確的是: A.只需將血液稀釋 B.通常稀釋20倍 C.在鏡下計數(shù)四角大格 D.報告: .1012/L E.計數(shù)域誤差較WBC大目標形成性檢測與校正 20.血細胞計數(shù)池充液后,數(shù)RBC用的中方格體積是: A. 0.4l B. 0.1l C. 0.04l D. 0.01l E. 0.004l目標形成性檢測與校正 21.RBC液(顯微鏡計數(shù)法)中最主要

28、成分: A.氯化鈉 B.硫酸鈉 C.氯化汞 D.氯化低汞 E.碳酸鈉目標形成性檢測與校正 22.除哪一條件,均可使RBC的結(jié)果偏高: A.混入酵母菌 B.白細胞過高 C.管尖外血液未擦凈 D.稀釋液蒸發(fā) E.血液凝固目標形成性檢測與校正 23.HiCN正確的是: A. 高濃度有核紅細胞混濁可加NaCl防止 B. OP乳化劑可代替TritonX-100 C. 轉(zhuǎn)化液不能偏鹼 D. 轉(zhuǎn)化液用棕色瓶保存胡建新第五節(jié) 網(wǎng)織紅細胞計數(shù) 一、網(wǎng)織紅細胞概述 二、網(wǎng)織紅細胞顯微鏡計數(shù)1.描述網(wǎng)織紅細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)描述網(wǎng)織紅細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)2.敘述網(wǎng)織紅細胞的計數(shù)方法和注意事敘述網(wǎng)織紅細胞的計數(shù)方法和注意事項項3

29、.闡述網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的臨床意義闡述網(wǎng)織紅細胞計數(shù)的臨床意義學(xué)習(xí)目標 一、網(wǎng)織紅細胞概述 （一）概念 網(wǎng)織紅細胞：是介于晚幼紅細胞和成熟紅細胞之間尚未完全成熟的紅細胞，因其胞質(zhì)中殘存的核糖核酸經(jīng)堿性染料活體染色后呈現(xiàn)藍色點狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)。 活體染色：是指細胞未經(jīng)固定，在保持細胞生物活性的情況下加染料進行染色的方法。（二）分型及形態(tài)特征 型：絲球型，無核紅細胞中央的嗜堿性物質(zhì)交織成密集的絲團狀。（二）分型及形態(tài)特征 型：網(wǎng)型，無核紅細胞中央的絲團狀結(jié)構(gòu)開始松散，呈疏松網(wǎng)眼狀結(jié)構(gòu)排列。（二）分型及形態(tài)特征 型：破網(wǎng)型，網(wǎng)織狀結(jié)構(gòu)開始減少，形成殘破不全的網(wǎng)狀。（二）分型及形態(tài)特征 型：點粒型，只有少數(shù)藍

30、色點狀顆粒（兩個以上），或極小的網(wǎng)狀殘余，散布于胞質(zhì)一側(cè)。網(wǎng)織紅細胞 I型型 絲球型絲球型型型 網(wǎng)型網(wǎng)型 型型 破網(wǎng)型破網(wǎng)型IV型型 顆粒型顆粒型經(jīng)瑞特染色復(fù)染的經(jīng)瑞特染色復(fù)染的網(wǎng)織紅細胞網(wǎng)織紅細胞形態(tài)形態(tài)二、網(wǎng)織紅細胞顯微鏡計數(shù)原理煌焦油藍、新亞甲藍和天青等染料都是雜蒽的衍生物，雖然取代基不同，但都含有氨基，在水溶液中呈弱堿性，帶陽電荷，可與酸性基團發(fā)生電偶合，特別是與核酸分子中的磷酸基結(jié)合，使膠體的電位發(fā)生變化，分子間排斥力下降，膠體分散力降 低而凝集成藍色顆粒。二、網(wǎng)織紅細胞顯微鏡計數(shù)試劑1.10g/L新亞甲藍（或煌焦油藍）生理鹽水溶液2.10g/L新亞甲藍ACD溶液3.新亞甲藍染液 試

31、劑試劑 新亞甲藍溶液 新亞甲藍 1 枸椽酸鹽生理鹽水（30g/枸椽酸鈉溶液份，9/ 氯化鈉溶液份，混合而成） 100 待染料溶解后過濾備用。試劑 .天青溶液 將新亞甲藍1改為天青 1， 其余與新亞甲藍溶液配制相同。二、網(wǎng)織紅細胞顯微鏡計數(shù) 操作 加試劑：2滴 外周血：2滴 染色：混勻，371520min 制薄血片：取1滴制片，干燥后鏡檢操作 .試管法 （）于小試管中加煌焦油藍溶液2滴3滴，加外周血2滴3滴，混勻，塞緊管口，室溫置15min。 （）取上述混勻的細胞懸液1滴，推制薄血片。操作 （）低倍鏡選擇細胞分布均勻、著色清晰的部位，于目鏡內(nèi)加一圓形硬紙，中央開一約方孔，油鏡計數(shù)1000個紅細胞

32、（包括網(wǎng)織紅細胞）中網(wǎng)織紅細胞數(shù)，除以1000，即得網(wǎng)織紅細胞分數(shù)數(shù)（103）。二、網(wǎng)織紅細胞顯微鏡計數(shù)%10010001000胞個紅細胞中的網(wǎng)織紅細計數(shù)網(wǎng)織紅細胞1.直接計數(shù)法油鏡下計數(shù)1000個紅細胞中的網(wǎng)織紅細胞計算:2.米勒窺盤法窺盤為一直徑19mm，厚1mm的圓形玻片，玻片上用微細刻線劃出大小兩個正方形格子，圖中大方格B的面積是小方格A的9倍。 將iller窺盤置于目鏡內(nèi)，油鏡計數(shù)大方格內(nèi)的網(wǎng)織紅細胞數(shù)，同時計數(shù)小方格內(nèi)的紅細胞數(shù)。然后移動視野進行同樣的觀察計數(shù)。 對壓線的紅細胞采取統(tǒng)一的計數(shù)原則：凡壓小方格下線、右線及右下角的一律不計數(shù)；凡壓上線、左線及左上角的一律計數(shù)。凡壓大方格

33、下線、右線及右下角的網(wǎng)織紅細胞一律不計數(shù)；凡壓上線、左線及左上角的一律計數(shù)。5個大方格內(nèi)紅細胞數(shù)均值5個小方格內(nèi)紅細胞數(shù)均值9注意 由于本法是用1/9面積推斷整個大方格內(nèi)的紅細胞數(shù)，所以細胞分布必須很均勻，否則會得出錯誤的結(jié)果。判斷方法及標準如下：2.米勒窺盤法%1009小方格內(nèi)紅細胞數(shù)大方格內(nèi)網(wǎng)織紅細胞數(shù)網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)當(dāng)小方格內(nèi)計數(shù)的紅細胞達到111時，即相當(dāng)于至少觀察了1000個紅細胞，計錄在此過程中計數(shù)到的所有網(wǎng)織紅細胞數(shù)。計數(shù)10個視野小方格中紅細胞數(shù)是120個，同時計數(shù)大方格中網(wǎng)織紅細胞總數(shù)為16個，如何報告結(jié)果？解： 網(wǎng)織紅細胞%16/（1209）100 1.5%請您練習(xí)請您練習(xí)

34、計數(shù)10個視野小方格中紅細胞數(shù)是102個，同時計數(shù)大方格中網(wǎng)織紅細胞總數(shù)為15個，請報告網(wǎng)紅結(jié)果？答案： 網(wǎng)織紅細胞%15/（1029）100 1.63% 1.網(wǎng)織紅細胞相對值：百分率或分數(shù)數(shù)。網(wǎng)織紅細胞相對值：百分率或分數(shù)數(shù)。 2.網(wǎng)織紅細胞絕對值網(wǎng)織紅細胞絕對值: 紅細胞濃度數(shù)紅細胞濃度數(shù)(1012/L)網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)網(wǎng)織紅細胞百分數(shù) 3.網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)（網(wǎng)織紅細胞生成指數(shù)（RPI）: 45. 02患者紅細胞比容網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)RPI _紅細胞比容（紅細胞比容（L/L） 網(wǎng)紅成熟時間（天）網(wǎng)紅成熟時間（天） - 0.45 1 0.35 1.5 0.25 2 0.15 2.5 -網(wǎng)織紅

35、細胞成熟時間與紅細胞比積的關(guān)系 己知一患者網(wǎng)紅分數(shù)數(shù)為己知一患者網(wǎng)紅分數(shù)數(shù)為0.045，紅細胞比積，紅細胞比積為為0.35，求網(wǎng)紅生成指數(shù)是多少？，求網(wǎng)紅生成指數(shù)是多少？ 解：查表得紅細胞比積為解：查表得紅細胞比積為0.35時，網(wǎng)紅成熟時時，網(wǎng)紅成熟時間為間為1.5天，代入公式天，代入公式 答案答案： RPI=0.045/1.50.35/0.45 =0.023請您練習(xí)注意事項 1.靜脈血標本在4小時內(nèi)完成計數(shù)。 2.需活體染色。 3.血液與染液的比1：1。注意事項 4.染色時間要充足，溫度應(yīng)控制在37。 5.涂片應(yīng)薄而均勻。 6.網(wǎng)織紅細胞偏低時可增加計數(shù)至20003000個。 7.瑞特染液復(fù)

36、染或二甲苯擦血膜可使結(jié)果偏低。臨床意義 .正常參考值正常參考值 網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)：網(wǎng)織紅細胞百分數(shù)： 成成 人：人：0.0050.015 新生兒：新生兒：0.030.06 兒兒 童：童：0.0050.015 網(wǎng)織紅細胞絕對值：網(wǎng)織紅細胞絕對值： 成人：（成人：（2484）109/L臨床意義 2. 臨床應(yīng)用臨床應(yīng)用 （1）判斷骨髓紅細胞系增生情況）判斷骨髓紅細胞系增生情況 網(wǎng)織紅細胞計數(shù)增加：增生性貧血。網(wǎng)織紅細胞計數(shù)增加：增生性貧血。 網(wǎng)織紅細胞減少：網(wǎng)織紅細胞減少： 再障、白血病等。再障、白血病等。 （2）觀察貧血療效的指標）觀察貧血療效的指標 （3）監(jiān)測骨髓移植術(shù)后造血功能）監(jiān)測骨髓移植術(shù)

37、后造血功能 （4）監(jiān)測腫瘤放、化療后骨髓抑制及其恢復(fù)）監(jiān)測腫瘤放、化療后骨髓抑制及其恢復(fù)情況情況 網(wǎng)織紅細胞計數(shù)增加 表示骨髓紅細胞系統(tǒng)增生旺盛，多見于各種增生性貧血。急性溶血性貧血時，網(wǎng)織紅細胞顯著升高，其數(shù)值可達20或更高。急性失血性貧血也較明顯增高，缺鐵性貧血和巨幼細胞性貧血常僅輕度增高。骨髓受白血病、癌腫等浸潤時也呈不規(guī)則輕度增加，此系病理刺激所致，并不反映骨髓造血機能。網(wǎng)織紅細胞減少表示骨髓造血機能減退，常見于再生障礙性貧血，某些溶血性貧血發(fā)生再生障礙危象時可一過性明顯減少。觀察貧血療效缺鐵性貧血和巨幼細胞性貧血用鐵劑及維生素12、葉酸治療后，網(wǎng)紅迅速增加，周左右達到高峰。由于網(wǎng)紅增

38、加先于紅細胞和血紅蛋白增加，可用于療效評價。作為骨髓造血功能恢復(fù)的敏感指標 骨髓移植和造血系統(tǒng)惡性腫瘤化療后，血小板、中性粒細胞、白細胞和網(wǎng)紅計數(shù)項指標在移植后恢復(fù)的天數(shù)以網(wǎng)紅計數(shù)出現(xiàn)的最早（13.7天），可作為造血功能恢復(fù)的早期指標。 紅細胞中殘存的紅細胞中殘存的嗜堿性物質(zhì)，在瑞特嗜堿性物質(zhì)，在瑞特染色血片中，呈均勻分染色血片中，呈均勻分布，染灰藍、紅藍等，布，染灰藍、紅藍等，稱為嗜多色性紅細胞稱為嗜多色性紅細胞。 如因職業(yè)中毒如因職業(yè)中毒NANA變性，呈散在的顆粒，變性，呈散在的顆粒，染淡藍色染淡藍色, , 稱為點彩紅稱為點彩紅細胞。細胞。嗜多色性紅細胞 二、儀器計數(shù)法 .流式細胞儀（FC

39、M）進行網(wǎng)織紅細胞計數(shù)FCM是高檔次的血細胞分析儀，是一種快速的單細胞定量分析儀器，F(xiàn)CM同CT一樣，被認為是現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中重要的診斷和科研工具。它可以測量細胞的生化成分，如DNA、RNA、蛋白質(zhì)、各種股成分及各種酶活性等。FCM測定網(wǎng)織紅細胞基本原理 某些染料（如Y啶橙）與網(wǎng)織紅細胞中的RNA結(jié)合，在FCM測定時發(fā)出特定顏色的熒光，進行單參數(shù)定量。 不同階段的網(wǎng)織紅細胞RNA的含量不同，通過FCM可以精確的測定網(wǎng)織紅細胞的百分率。自動網(wǎng)織紅細胞計數(shù)儀 測定原理 血液標本計數(shù)前不經(jīng)固定和染色，標本直接吸入儀器內(nèi)計數(shù)，以氫激光束為光源，堿性槐黃為染料與網(wǎng)織紅細胞內(nèi)的RNA結(jié)合，應(yīng)用鞘流原理使網(wǎng)織紅細

40、胞呈單行排列通過波長488nm的激光束，測量散射光強度判斷細胞體積的大小，測量熒光強度顯示細胞內(nèi)RNA多少。 將儀器轉(zhuǎn)換到網(wǎng)紅計數(shù)將儀器轉(zhuǎn)換到網(wǎng)紅計數(shù)的操作程序，即可得到網(wǎng)紅的操作程序，即可得到網(wǎng)紅絕對值、百分比、平均體積、絕對值、百分比、平均體積、體積分布寬度、血紅蛋白濃體積分布寬度、血紅蛋白濃度、平均血紅蛋白濃度、血度、平均血紅蛋白濃度、血紅蛋白分布寬度及網(wǎng)紅分類紅蛋白分布寬度及網(wǎng)紅分類等多項參數(shù)。等多項參數(shù)。.血細胞分析儀檢測網(wǎng)織紅細胞 總結(jié) 網(wǎng)織紅細胞是尚未完全成熟的紅細胞，分為四型。正常人外周血中大多是型（點粒型）。 傳統(tǒng)的網(wǎng)紅檢查方法是根據(jù)其胞質(zhì)內(nèi)殘存核糖體、核糖核酸等嗜堿性物質(zhì)，

41、經(jīng)新亞甲藍、煌焦油藍活體染色后而顯示出來?？偨Y(jié) 檢查網(wǎng)紅的目的是了解骨髓紅細胞系統(tǒng)的增生情況。以判斷貪血類型，觀察貧血療效。因其數(shù)量變化十分敏感，可作為骨髓造血功能恢復(fù)的敏感指標。 正常成人參考值為0.0050.015想一想 說出HiCN法測定Hb的優(yōu)點和不足。 說出紅細胞及血紅蛋白病理性減少的原因。 什么是網(wǎng)織紅細胞？可分為幾型？ 有何臨床應(yīng)用？第六節(jié) 血細胞比容測定 一、溫氏管法 二、毛細管法 三、臨床意義說出紅細胞比容的測定原理、方法和臨床意義。概括紅細胞直徑測定方法和直徑曲線變化的臨床意義。能夠計算紅細胞平均值并分析臨床意義。學(xué)習(xí)目標定義與方法紅細胞比容紅細胞比容(Hct(Hct、PC

42、V) PCV) ：紅細胞在血液中所占：紅細胞在血液中所占容積的比值。容積的比值。 手工離心法：毛細管法、溫氏法手工離心法：毛細管法、溫氏法測定方法測定方法 血細胞分析儀法血細胞分析儀法一、溫氏管法 原理原理 定量抗凝血定量抗凝血溫氏管溫氏管離心離心觀察壓觀察壓實紅細胞實紅細胞高度高度求得求得紅細胞的容積紅細胞的容積/ /血液容積：血液容積：即為即為HctHct。1. 1. 溫氏紅細胞比容管溫氏紅細胞比容管2. 2. 長毛細滴管長毛細滴管 3. 3. 水平式離心機水平式離心機 4. 4. 干燥抗凝管干燥抗凝管 器材和試劑操 作 采血：靜脈血采血：靜脈血2ml2ml，EDTA-KEDTA-K2 2

43、或肝素鈉抗凝或肝素鈉抗凝 加樣：加樣：用細長毛細滴管將抗凝血加至比容用細長毛細滴管將抗凝血加至比容管刻度管刻度“10”10”處處 操 作 離心：離心：RCFRCF為為2264g2264g，時間為，時間為30 min30 min。 讀數(shù)：紅細胞層高度讀數(shù)：紅細胞層高度 操 作 再離心：同樣RCF，10min 讀數(shù)：紅細胞層柱高度 計算：Hct值離心后的血液分五層 血漿層血漿層 血小板層血小板層 有核細胞層有核細胞層 還原紅細胞層還原紅細胞層 帶氧紅細胞層帶氧紅細胞層注意事項1.器材清潔干燥。2.抗凝劑應(yīng)對紅細胞體積無影響且溶解迅速。 3.血漿若有黃疸、溶血現(xiàn)象應(yīng)注明。4.離心條件必須恒定。本試驗

44、要求的相對離心力是2264g，離心時間為30分鐘。注意事項 相對離心力（RCF）g 1.11810-5有效離心半徑（cm） 每分鐘轉(zhuǎn)速的平方（n2）有效離心半徑是指由離心機軸心至水平位置時管底的距離（）。例：有效離心半徑為22.5cm，要求RCF為2264g時，每分鐘離心速度是：練習(xí) 亦可由相對亦可由相對離心力計算圖查出離心力計算圖查出所需離心速度。所需離心速度。 在左側(cè)找出離心在左側(cè)找出離心半徑，右側(cè)找出每半徑，右側(cè)找出每分鐘轉(zhuǎn)速，將兩點分鐘轉(zhuǎn)速，將兩點連成一條直線，與連成一條直線，與中間相交的一點為中間相交的一點為相對離心力。相對離心力。 二、毛細管法 原理 定量的抗凝血特制的毛細管高速離

45、心機離心沉淀觀察壓實的紅細胞層的高度求得每升血液中紅細胞與全血的容積比：即為Hct。二、毛細管法 器材和試劑 1.專用高速離心機 2.一次性使用的專用毛細管 3.毛細管密封膠 4.刻度讀數(shù)器 5.抗凝劑：肝素或EDTA-K2二、毛細管法 準備：抗凝劑處理毛細管準備：抗凝劑處理毛細管 吸血：血液吸入毛細管內(nèi)吸血：血液吸入毛細管內(nèi) 606065mm 65mm 處處 混勻混勻 封口封口二、毛細管法 操作 編號 離心：12000r/min，5 min。 讀數(shù)：用刻度讀數(shù)器測量紅細胞比容的讀數(shù) 計算刻度讀數(shù)器測量紅細胞比容刻度讀數(shù)器測量紅細胞比容 注意事項 1.末梢血采血應(yīng)防止混入組織液。 2.靜脈血標

46、本收集后擱置時間不可超過6小時。 3.同一標本的兩次測量結(jié)果之差不可大于0.015。 4.毛細管不能用燒熔的方法密封。 5.嚴格控制離心條件。 6.讀數(shù)應(yīng)盡量避免視差，不能將白細胞和血小板層的高度算入 正常參考值 成年男性0.3800.508L/L 成年女性0.3350.450L/L 兒童0.350.49L/L 新生兒0.490.54L/L 微量法較溫氏法平均低12三、臨床意義臨床意義1.紅細胞比容增高 生理性增高：見于紅細胞生理性增多的情況。 病理性增高：見于真性紅細胞增多癥、血液濃縮。臨床意義2.紅細胞比容減低 見于各種貧血時。3.紅細胞比容可作為計算靜脈補液量的指標。4.紅細胞比容可用于

47、紅細胞平均值中的計算。5. 紅細胞比容可作為判斷全血粘度的指標。臨床意義通過比容測定可決定是否需要靜脈輸液及輸液量。例：一男性腹瀉病人測得HCT為0.62L/L（62%），問每升血容量應(yīng)補液多少升？解：由0.620.49（1X）得 補液量0.620.491 0.26（升）總 結(jié) 1.紅細胞比容測定，是將定量的抗凝血置于比積管中，用一定速度（相對離心力2246g）和時間（30min）離心沉淀，由此獲得壓實紅細胞和上層血漿體積的比值的測定方法。 2.所用抗凝劑不能影響和改變紅細胞體積。總 結(jié) 3.離心條件要恒定。離心半徑不同的離心機轉(zhuǎn)速應(yīng)測算確定。 4.讀取紅細胞層的柱高以還原紅細胞層表面為準，其

48、毫米數(shù)乘以0.01，即為每升血液中紅細胞體積的升數(shù)，以L/L為單位報告結(jié)果?？?結(jié) 5.HCT參考值隨性別和年齡有一定變化幅度。 6.HCT主要用于診斷貧血和判斷貧血類型，了解血液粘度，輸液時確定劑量等。第七節(jié) 紅細胞直徑測量 一、測微計的校正 二、紅細胞直徑的測量方法 三、臨床意義 （一）測微計的組成一、測微計的校正1.目鏡測微計 為一個直徑1820mm，圓形玻璃片，中央刻有精確等距離的平行線刻度，一般有50或100等分格。2.鏡臺測微計是一種特制的載玻片，正中有一圓形蓋片封有標準尺，總長為1mm，被劃分為100等分，每一小格長為10m。（二）目鏡測微計的校正1. 將目鏡測微計有刻度一面向下

49、裝入目鏡筒。2. 將鏡臺測微計有刻度一面朝上放在載物臺上夾好，使標準尺位于視野中央。（二）目鏡測微計的校正3.換用測量被測物所用的物鏡頭。4. 使兩種測微計的刻度平行，先使左邊的“0”刻度重合，然后由左向右找出尋找另一次重合的刻度。5.記錄兩刻度的讀數(shù)，并根據(jù)比值計算出在此條件下目鏡測微計每小格所相當(dāng)?shù)拈L度（）。 目鏡測微計的校正目鏡測微計的校正（二）目鏡測微計的校正二、紅細胞直徑測量方法 紅細胞直徑測量：即在顯微鏡下用專用的測微計測量一定數(shù)量的紅細胞直徑。根據(jù)測得直徑數(shù)據(jù)，可計算出紅細胞平均直徑，繪制紅細胞直徑分布曲線（Price-Jones曲線），從而了解紅細胞大小的變化，可判斷紅細胞形態(tài)

50、有無改變，從而對貧血類型的鑒別有一定的意義。原理 用已經(jīng)校正目鏡測微計，在顯微鏡下測量一定數(shù)量紅細胞的直徑。求出紅細胞的平均直徑（MCD），并繪制紅細胞直徑曲線?！静僮鳌恐苽浔⊙苽浔⊙x擇合適區(qū)域選擇合適區(qū)域測量紅細胞直徑：測量紅細胞直徑：200200500500個個 計算平均直徑計算平均直徑繪制繪制P-JP-J曲線曲線P-J曲線注意事項 1.血片要求厚薄均勻，較白細胞分類血片略薄，紅細胞無重疊和皺縮變形。 2. 應(yīng)依次測量紅細胞直徑，不可任意取舍，對異形紅細胞，應(yīng)測量其長.短徑，取其平均值。 3.目鏡測微計一經(jīng)校正，就不得更換物鏡。 4. 鏡臺測微計的標準尺因油鏡放大而成粗線，目鏡測微

51、計放大倍數(shù)較小而呈細線，細線重合在粗線上的位置應(yīng)前后一致。三、臨床意義 1.正常人及正常細胞性貧血紅細胞直徑曲線特征 紅細胞直徑范圍在6.09.0之間，平均直徑7.2左右；曲線頂峰在78之間，基底部窄，呈尖峰狀。三、臨床意義 2.大細胞性貧血紅細胞直徑曲線特征 紅細胞直徑增大，MCD 7.49.6，曲線頂峰右移，基底部明顯增寬，多見于巨幼細胞性貧血等。三、臨床意義 3.小細胞素性貧血紅細胞直徑曲線特征 紅細胞直徑減少，MCD 6.26.7，曲線頂峰左移，基底部增寬。見于缺鐵性貧血和單純小細胞性貧血等。第八節(jié) 計算紅細胞平均值 一、平均紅細胞體積 二、平均紅細胞血紅蛋白含量 三、平均紅細胞血紅蛋

52、白濃度 四、臨床意義 flflMCV個每升血液紅細胞數(shù)每升血液中紅細胞比容1510一、平均紅細胞體積平均紅細胞體積（MCV）：是指每個紅細胞的平均體積。以飛升（fl）為單位，1L=1015 fl。 pgpggMCH個每升血液紅細胞數(shù)濃度每升血液中的血紅蛋白1210二、平均紅細胞血紅蛋白含量平均紅細胞血紅蛋白含量（MCH）：是指每個紅細胞內(nèi)所含血紅蛋白的平均量。以皮克（pg）為單位，1g1012 pg三、平均紅細胞血紅蛋白濃度平均紅細胞血紅蛋白濃度（MCHC）：是指平均每升紅細胞中所含血紅蛋白濃度（g/L）。LgLgMCHC/每升血液紅細胞比容克數(shù)每升血液中的血紅蛋白四、臨床意義 貧血類型 MC

53、V (fl) MCH (pg) MCHC(g/L) 正常細胞性貧血 正常 正常 正常 大細胞性貧血 正常 正常 正常 單純小細胞性 貧血 正常 正常 正常 小細胞低色素 性貧血 正常 正常 正常例題紅細胞3.61012，紅細胞比積0.393/L，求MCV并判斷是否正常。解： MCV0.39210153.61012 109（fL）答：由于結(jié)果92fL，不正常。 例題 紅細胞 3.61012。血紅蛋白136g。求MCH并判斷結(jié)果正常與否？ 解： 13610123.61012 38pg 答：計算結(jié)果31pg，不在正常范圍內(nèi)例題血紅蛋白136g/L，紅細胞比積0.392L/L，求MCHC并判斷結(jié)果是否

54、正常？解： MCHC1360.392 347g/L答：計算結(jié)果在正常范圍內(nèi)。綜合練習(xí)己知一患者的紅細胞為4.11012/L；血紅蛋白為128g/L；紅細胞比積為0.39L/L，求紅細胞的三個平均值是多少？答案：MCV0.3910154.11012 95fLMCH12810124.11012 31.22pgMCHC1280.39 328g/L注意在正常細胞性貧血時，其紅細胞平均直徑及其曲線圖形與正常相同。想一想比較紅細胞比容測定的兩種方法？如何校正目鏡測微計？如何根據(jù)紅細胞數(shù)、血紅蛋白量和紅細胞比容計算紅細胞平均值？如何根據(jù)紅細胞平均值判斷貧血的類型？大細胞性、正常細胞性、單純大細胞性、正常細胞

55、性、單純小細胞性和小細胞低色素性小細胞性和小細胞低色素性目標形成性檢測與校正 1.紅細胞的三個平均值（MCV、MCH、MCHC）是依據(jù)RBC、Hb、HCT數(shù)據(jù)按一定方式計算出來的。根據(jù)三個平均值可將貧血按形態(tài)學(xué)改變分成（ ）四種類型。目標形成性檢測與校正 2.MCV2.MCV通過（通過（ ）計算）計算單位是（單位是（ ）參考值是（）參考值是（ ），增大示紅細胞（），增大示紅細胞（ ）。）。HCT和和RBC飛升飛升82-92 fL體積變大體積變大目標形成性檢測與校正 3.MCH通過（ ）計算，單位是（ ），參考值是（ ），增加示紅細胞中（ ），常與平均值中的（ ）變化相同。Hb和和RBC皮克皮克

56、2731Pg血紅蛋白增多血紅蛋白增多MCV目標形成性檢測與校正4.MCHC通過（ ）計算，單位是（ ），參考值為（ ）。減小示紅細胞呈（ ）。Hb和和HCT克克/升升320360g/l低色素性變化低色素性變化潑潑-瓊氏曲線瓊氏曲線直徑微米數(shù)直徑微米數(shù)7um-8um右移右移變寬變寬目標形成性檢測與校正5.由紅細胞直徑測定數(shù)據(jù)繪制的曲線叫（ ）。橫軸是紅細胞的（ ），縱軸是紅細胞的百分率。正常人曲線頂峰在（ ）之間。巨幼紅細胞性貧血時，曲線頂峰將（ ），基底部明顯（ ）。第九節(jié) 紅細胞形態(tài)檢驗一、紅細胞大小異常二、紅細胞形態(tài)異常三、紅細胞染色異常四、紅細胞結(jié)構(gòu)異常學(xué)習(xí)目標1.描述異常紅細胞的形態(tài)特

57、點2.描述點彩紅細胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)3.概述異常紅細胞的主要臨床意義 正常成熟紅細胞正常成熟紅細胞為兩面微凹的圓盤形，為兩面微凹的圓盤形，平均直徑平均直徑7.27.2，厚約，厚約2 2m m，無核，經(jīng)瑞特染色，無核，經(jīng)瑞特染色后，紅細胞呈粉紅色，后，紅細胞呈粉紅色，邊緣較深，中央著色較邊緣較深，中央著色較淡。淡。 各種貧血患者，紅細胞形態(tài)和著色有不同程度的改變，觀察成熟紅細胞形態(tài)，有助于貧血的診斷和鑒別診斷。 成熟紅細胞的形態(tài)改變，常見以下幾種類型。 1.1.小紅細胞小紅細胞 直徑小于直徑小于66稱小稱小紅細胞，正常人偶見。出紅細胞，正常人偶見。出現(xiàn)較多中央淡染區(qū)擴大的現(xiàn)較多中央淡染區(qū)擴大的小紅細胞

58、，提示血紅蛋白小紅細胞，提示血紅蛋白合成減少，多見于缺鐵性合成減少，多見于缺鐵性貧血。貧血。 一、大小異常一、大小異常大紅細胞大紅細胞直徑大于直徑大于1010稱為大稱為大紅細胞，有時中央淡染紅細胞，有時中央淡染區(qū)不明顯，見于巨幼細區(qū)不明顯，見于巨幼細胞性貧血。胞性貧血。.巨紅細胞直徑大于15者稱巨紅細胞，常見于巨幼細胞性貧血。肝臟疾病等。一、大小異常一、大小異常 紅細胞大小不均紅細胞大小不均 紅細胞之間直徑相差紅細胞之間直徑相差一倍以上者稱為紅細胞一倍以上者稱為紅細胞大小不均，常見于增生大小不均，常見于增生性貧血及巨幼細胞性貧性貧血及巨幼細胞性貧血血。 二、形態(tài)異常2.橢圓形紅細胞呈長橢圓形，甚至呈長柱形，長度大于寬度的3倍4倍。正常人偶見，但最多不超過。常見于遺傳性橢圓形紅細胞增多癥，可達2575，巨幼細胞貧血和惡性貧血時也常見。 二、形態(tài)異常二、形態(tài)異常二、形態(tài)異常紅細胞中央淡染區(qū)呈裂口狀狹孔。正常人紅細胞中央淡染區(qū)呈裂口狀狹孔。正常人，增高見于遺傳性口形紅細胞增多癥，急性乙醇中，增高見于遺傳性口形紅細胞增多癥，急性乙醇中毒和毒和DICDIC時也可見少量口形紅細胞。時也可見少量口形紅細胞。.鐮刀形紅細胞紅細胞狹長似鐮刀，也有呈麥粒狀或冬青葉狀。主要見于Hb病。二、形態(tài)異常6.棘形紅細胞紅細胞表面帶有長短不一的針刺狀或尖刺狀突起，其間距不規(guī)則，突起的