1、基因工程基因工程每每100kg 豬或牛的胰腺中僅可提取豬或牛的胰腺中僅可提取45g。1979年，美國將年，美國將人的胰島素基因人的胰島素基因重組到重組到大腸桿菌大腸桿菌內(nèi)，實(shí)現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素，大大降低了生產(chǎn)成本。內(nèi)，實(shí)現(xiàn)了細(xì)菌生產(chǎn)胰島素，大大降低了生產(chǎn)成本。治療糖尿病特效藥 據(jù)WTO調(diào)查： 2005年全世界約有糖尿病患者1.8億人，我國約6000萬?；蚬こ痰母拍睿夯蚬こ蹋纸谢蚬こ蹋纸蠨NADNA重組技術(shù)重組技術(shù)。通俗的說，就是。通俗的說，就是按照按照人們的意愿人們的意愿，把一種生物的，把一種生物的某種基因某種基因提取出來，加提取出來，加以修飾改造，然后放到以修飾改造，然后放到另一種

2、生物的細(xì)胞另一種生物的細(xì)胞里，定向里，定向地改造生物的遺傳特性。地改造生物的遺傳特性?；蚬こ痰膭e名基因工程的別名操作環(huán)境操作環(huán)境操作對(duì)象操作對(duì)象操作水平操作水平基本過程基本過程問題探討：蘇云金芽孢桿菌含有一蘇云金芽孢桿菌含有一種可以合成毒蛋白的基因。種可以合成毒蛋白的基因。讓細(xì)菌的毒蛋白基因在讓細(xì)菌的毒蛋白基因在棉花細(xì)胞中表達(dá)，可培育出棉花細(xì)胞中表達(dá)，可培育出抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。抵抗棉鈴蟲害的抗蟲棉。想一想想一想需要做哪些關(guān)鍵工作？需要做哪些關(guān)鍵工作？蘇云金芽孢桿菌蘇云金芽孢桿菌普通棉花抗蟲棉普通棉花抗蟲棉一、限制性核酸內(nèi)切酶“分子手術(shù)刀” 1.1.主要來源：主要來源： 種類與命名：種類與

3、命名： 作用特點(diǎn)：作用特點(diǎn)： 4.4.限制酶識(shí)別序列限制酶識(shí)別序列 5.5.作用結(jié)果：作用結(jié)果：種類與命名： 現(xiàn)在已經(jīng)從約300種微生物中分離出了約4000種限制性內(nèi)切酶(限制酶)。粘質(zhì)沙雷氏桿菌粘質(zhì)沙雷氏桿菌（Serratia marcesens練習(xí)：流感嗜血桿菌的練習(xí)：流感嗜血桿菌的d d菌株菌株( ( HaemophilusHaemophilus influenzaeinfluenzae d ) d )中先后分離到中先后分離到3 3種限制酶，則分種限制酶，則分別命名為別命名為: :Hind、Hind和和Hind T12345 A12345HHHHHO T12345 A12345HHHHO

4、H2O +O限制酶DNA解旋酶區(qū)別切割特定的核苷酸序列切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯鍵的磷酸二酯鍵將將DNADNA兩條鏈的氫鍵兩條鏈的氫鍵打開形成兩條單鏈打開形成兩條單鏈限制酶DNA水解酶區(qū)別切割特定的核苷酸序列切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯鍵，形成片的磷酸二酯鍵，形成片段的段的DNA.DNA.切割磷酸二酯鍵，形成切割磷酸二酯鍵，形成單個(gè)的脫氧核苷酸。單個(gè)的脫氧核苷酸。能被限制性內(nèi)切酶特能被限制性內(nèi)切酶特異性識(shí)別的切割部位異性識(shí)別的切割部位都具有都具有回文序列回文序列：在切割部位，一條鏈在切割部位，一條鏈正向正向讀的堿基順序與讀的堿基順序與另一條鏈另一條鏈反向反向讀的順讀的順序完全序完全一致一

5、致。黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端平末端平末端平末端平末端同一種同一種DNADNA聚合酶聚合酶DNADNA連接酶連接酶區(qū)別區(qū)別1 1區(qū)別區(qū)別2 2相同點(diǎn)相同點(diǎn)1)1)只能將只能將單個(gè)核苷酸單個(gè)核苷酸連連接到已有的核酸片段上，接到已有的核酸片段上，形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵形成形成磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵1)1)在在兩個(gè)兩個(gè)DNADNA片段之片段之間間形成磷酸二酯鍵形成磷酸二酯鍵2)2)以以一條一條DNADNA鏈為模板鏈為模板，連接成一條互補(bǔ)連接成一條互補(bǔ)的的DNADNA鏈鏈2)2)將將DNADNA雙鏈上的雙鏈上的兩兩個(gè)缺口同時(shí)連接個(gè)缺口同時(shí)連接起來，起來，不需要模板不需要模板二、“分子縫合針” DNA連接酶催化磷酸二酯鍵形成催化磷酸二酯鍵形成類型三、“分子運(yùn)輸車” 基因進(jìn)入受體細(xì)胞的載體載體需要的條件：有1多個(gè)限制酶切點(diǎn)對(duì)受體細(xì)胞無害導(dǎo)入基因能在受體細(xì)胞中復(fù)制、表達(dá)有某些標(biāo)記基因，便于篩選常用運(yùn)載體： 細(xì)菌的質(zhì)粒 噬菌體衍生物或某些動(dòng)植物病毒假如目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后不能復(fù)制或不能轉(zhuǎn)錄，轉(zhuǎn)基因生物能有預(yù)想的效果嗎？作為分子運(yùn)輸車載體，如果沒有切割位點(diǎn)將會(huì)怎樣？霍亂菌的質(zhì)粒多個(gè)限制酶切點(diǎn)，你會(huì)用它來做分霍亂菌的質(zhì)粒多個(gè)限制酶切點(diǎn)，你會(huì)用它來做分子運(yùn)輸車嗎？子運(yùn)輸車嗎？目的基因有沒有進(jìn)入受體細(xì)胞，如何去發(fā)現(xiàn)？目的基因有沒有進(jìn)入受體細(xì)胞，如何去發(fā)現(xiàn)？