1、精選ppt 菌落總數(shù)的測(cè)定方法菌落總數(shù)的測(cè)定方法精選ppt食品微生物檢驗(yàn)的指標(biāo)食品微生物檢驗(yàn)的指標(biāo)菌落的概念菌落的概念菌落總數(shù)的概念菌落總數(shù)的概念菌落總數(shù)的測(cè)定意義菌落總數(shù)的測(cè)定意義菌落總數(shù)的測(cè)定方法菌落總數(shù)的測(cè)定方法目錄:精選ppt食品微生物檢驗(yàn)的指標(biāo)食品微生物檢驗(yàn)的指標(biāo) 食品在食用前的各個(gè)環(huán)節(jié)中，被微生物污食品在食用前的各個(gè)環(huán)節(jié)中，被微生物污染往往是不可避免的。評(píng)價(jià)食品被微生物染往往是不可避免的。評(píng)價(jià)食品被微生物污染的程度，要采用微生物檢驗(yàn)指標(biāo)采進(jìn)污染的程度，要采用微生物檢驗(yàn)指標(biāo)采進(jìn)行。常采用的微生物檢驗(yàn)指標(biāo)為三項(xiàng)細(xì)菌行。常采用的微生物檢驗(yàn)指標(biāo)為三項(xiàng)細(xì)菌指標(biāo)，即細(xì)菌數(shù)量指標(biāo)，即細(xì)菌數(shù)量(主

2、要是菌落總數(shù)主要是菌落總數(shù))、大腸、大腸菌群最近似數(shù)和致病菌。菌群最近似數(shù)和致病菌。精選ppt一一菌落總數(shù)的概念菌落總數(shù)的概念 1.菌落總數(shù)菌落總數(shù) 菌落：菌落：指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長繁指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長物，它是殖而形成的能被肉眼識(shí)別的生長物，它是由數(shù)以萬計(jì)相同的細(xì)菌集合而成。由數(shù)以萬計(jì)相同的細(xì)菌集合而成。 菌落總數(shù)：菌落總數(shù)：指一定數(shù)量或面積的食品指一定數(shù)量或面積的食品樣品，在一定條件下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，使每樣品，在一定條件下進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)，使每一個(gè)活菌只能形成一個(gè)肉眼可見的菌落，一個(gè)活菌只能形成一個(gè)肉眼可見的菌落，然后進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)所得的菌落數(shù)量。通常然后進(jìn)行

3、菌落計(jì)數(shù)所得的菌落數(shù)量。通常以以lg或或1ml或或lcm2樣品中所含的菌落數(shù)量來樣品中所含的菌落數(shù)量來表示。表示。精選ppt二二菌落總數(shù)的測(cè)定意義菌落總數(shù)的測(cè)定意義 菌落總數(shù)是食品衛(wèi)生指標(biāo)中的重要項(xiàng)菌落總數(shù)是食品衛(wèi)生指標(biāo)中的重要項(xiàng)目，主要作為判定食品被污染程度的指標(biāo)。目，主要作為判定食品被污染程度的指標(biāo)。檢測(cè)食品中的菌落總數(shù)，可以了解食品在檢測(cè)食品中的菌落總數(shù)，可以了解食品在生產(chǎn)中，從原料加工到成品包裝受外界污生產(chǎn)中，從原料加工到成品包裝受外界污染的情況，從而反映食品的衛(wèi)生質(zhì)量。染的情況，從而反映食品的衛(wèi)生質(zhì)量。 菌落總數(shù)越多，說明食品的衛(wèi)生質(zhì)量菌落總數(shù)越多，說明食品的衛(wèi)生質(zhì)量越差，食品被病原

4、菌污染的可能性越大。越差，食品被病原菌污染的可能性越大。而菌落總數(shù)越少，說明食品的衛(wèi)生質(zhì)量越而菌落總數(shù)越少，說明食品的衛(wèi)生質(zhì)量越好，食品被病原菌污染的可能性越小。好，食品被病原菌污染的可能性越小。精選ppt三三菌落總數(shù)的測(cè)定方法菌落總數(shù)的測(cè)定方法 菌落總數(shù)的測(cè)定方法有菌落總數(shù)的測(cè)定方法有國家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法國家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法和和菌落總數(shù)的快速測(cè)定菌落總數(shù)的快速測(cè)定法。法。 1.國家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法：國家標(biāo)準(zhǔn)測(cè)定方法： （一）原理：（一）原理： 菌落總數(shù)的測(cè)定是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所生產(chǎn)的菌落菌落總數(shù)的測(cè)定是根據(jù)微生物在固體培養(yǎng)基上所生產(chǎn)的菌落的生理及培養(yǎng)特征進(jìn)行的。即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。的生理及

5、培養(yǎng)特征進(jìn)行的。即一個(gè)菌落代表一個(gè)單細(xì)胞。 測(cè)定時(shí)，首先將待測(cè)培養(yǎng)樣品制成均勻的，一系列不同稀釋測(cè)定時(shí)，首先將待測(cè)培養(yǎng)樣品制成均勻的，一系列不同稀釋度的稀釋液，并盡量是樣品中的微生物細(xì)胞分散，是指單個(gè)細(xì)胞度的稀釋液，并盡量是樣品中的微生物細(xì)胞分散，是指單個(gè)細(xì)胞狀態(tài)存在再取一定稀釋倍數(shù)的一定稀釋液接種到培養(yǎng)基上，使其狀態(tài)存在再取一定稀釋倍數(shù)的一定稀釋液接種到培養(yǎng)基上，使其均勻分布。菌落由單個(gè)細(xì)胞生長繁殖而成，因此通過統(tǒng)計(jì)菌落的均勻分布。菌落由單個(gè)細(xì)胞生長繁殖而成，因此通過統(tǒng)計(jì)菌落的數(shù)目，可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。數(shù)目，可計(jì)算出樣品中的含菌數(shù)。 我們計(jì)算出菌落數(shù)是培養(yǎng)基上我們計(jì)算出菌落數(shù)是培養(yǎng)基上

6、長出來的活的菌落數(shù)。長出來的活的菌落數(shù)。精選ppt（二）儀器設(shè)備（二）儀器設(shè)備 培養(yǎng)基箱，恒溫水浴鍋，天平，三角瓶，滅菌培培養(yǎng)基箱，恒溫水浴鍋，天平，三角瓶，滅菌培養(yǎng)皿，滅菌試管，玻璃珠，均質(zhì)機(jī)，滅菌刀，鑷養(yǎng)皿，滅菌試管，玻璃珠，均質(zhì)機(jī)，滅菌刀，鑷子子;酒精燈。酒精燈。（三）培養(yǎng)基和試劑（三）培養(yǎng)基和試劑1.營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基：按GB 4789.28中中4.7規(guī)定。規(guī)定。2.磷酸鹽緩沖稀釋液：按磷酸鹽緩沖稀釋液：按GB 4789.28中中3.22規(guī)定。規(guī)定。3.生理鹽水。生理鹽水。4.75%乙醇。乙醇。皿精選ppt(四四)檢驗(yàn)程序檢驗(yàn)程序 菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序如下菌落總數(shù)的檢驗(yàn)程序

7、如下 檢檢 樣樣 做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液做成幾個(gè)適當(dāng)倍數(shù)的稀釋液 選擇選擇23個(gè)適宜稀釋度個(gè)適宜稀釋度 各以各以1mL分別加入滅菌平皿內(nèi)分別加入滅菌平皿內(nèi) 每皿內(nèi)加入適量營養(yǎng)瓊脂每皿內(nèi)加入適量營養(yǎng)瓊脂 361 482h菌落計(jì)數(shù)菌落計(jì)數(shù)報(bào)報(bào) 告告 精選ppt (五五)操作步驟操作步驟 （一）、（一）、 檢樣稀釋及培養(yǎng)檢樣稀釋及培養(yǎng) （1）以無菌操作）以無菌操作,將檢樣將檢樣25g(或或mL)剪碎放于含有剪碎放于含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)或滅滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(nèi)或滅菌乳缽內(nèi)菌乳缽內(nèi),經(jīng)充分振搖或研磨做成經(jīng)充分振搖或研磨做成1 10的均勻稀釋液。的均勻稀

8、釋液。 固體檢樣在加入稀釋液后固體檢樣在加入稀釋液后,最好置均質(zhì)器中以最好置均質(zhì)器中以8 00010 000r/min的速度處理的速度處理1min,做成做成1 10的均勻稀釋液。的均勻稀釋液。 （2） 用用1mL滅菌吸管吸取滅菌吸管吸取1 10稀釋液稀釋液1mL,沿管壁徐沿管壁徐徐注入含有徐注入含有9mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(nèi)(注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液注意吸管尖端不要觸及管內(nèi)稀釋液),振搖試管振搖試管,混合均混合均勻勻,做成做成1 100的稀釋液。的稀釋液。精選ppt (3) 另取另取1mL滅菌吸管滅菌吸管,按上條操作順序按上條操作順序,做做10

9、倍遞增稀倍遞增稀釋液釋液,如此每遞增稀釋一次即換用如此每遞增稀釋一次即換用1支支1mL滅菌吸管。滅菌吸管。 (4) 根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì)根據(jù)食品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)要求或?qū)?biāo)本污染情況的估計(jì),選選擇擇23個(gè)適宜稀釋度個(gè)適宜稀釋度,分別在做分別在做10倍遞增稀釋的同時(shí)倍遞增稀釋的同時(shí),即即以吸取該稀釋度的吸管移以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內(nèi)稀釋液于滅菌平皿內(nèi),每每個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。個(gè)稀釋度做兩個(gè)平皿。 (5) 稀釋液移入平皿后稀釋液移入平皿后,應(yīng)及時(shí)將涼至應(yīng)及時(shí)將涼至46營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基基(可放置于可放置于461水浴保溫水浴保溫)注入平皿約注入平皿約15mL

10、,并轉(zhuǎn)并轉(zhuǎn)動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有動(dòng)平皿使混合均勻。同時(shí)將營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。稀釋液的滅菌平皿內(nèi)作空白對(duì)照。 (6) 待瓊脂凝固后待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平板翻轉(zhuǎn)平板,置置361溫箱內(nèi)培養(yǎng)溫箱內(nèi)培養(yǎng)482h。精選ppt(二二)、 菌落計(jì)數(shù)方法菌落計(jì)數(shù)方法 做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí)做平板菌落計(jì)數(shù)時(shí),可用肉眼觀查可用肉眼觀查,必要必要時(shí)用放大鏡檢查時(shí)用放大鏡檢查,以防遺漏。在記下各平板以防遺漏。在記下各平板的菌落數(shù)后的菌落數(shù)后,求出同稀釋度的各平板平均菌求出同稀釋度的各平板平均菌落總數(shù)。落總數(shù)。精選ppt2、菌落總數(shù)的快速測(cè)定方法、菌落總數(shù)的快速測(cè)定方

11、法1. 1. 適用范圍用于各類食品及飲用水中菌落總數(shù)的測(cè)適用范圍用于各類食品及飲用水中菌落總數(shù)的測(cè)定。定。2. 2. 方法原理方法原理將培養(yǎng)基、凝膠和酶顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣、將培養(yǎng)基、凝膠和酶顯色劑等加載在試紙片，經(jīng)加樣、培養(yǎng)后，細(xì)菌菌落在紙片上顯現(xiàn)出紅色菌斑，通過技培養(yǎng)后，細(xì)菌菌落在紙片上顯現(xiàn)出紅色菌斑，通過技數(shù)報(bào)告結(jié)果。數(shù)報(bào)告結(jié)果。3. 3. 操作方法操作方法（1 1）無菌稱取樣品）無菌稱取樣品25g25g（或（或25mL25mL）放入含有）放入含有225mL225mL無菌水無菌水的玻璃瓶（均質(zhì)袋）內(nèi)，經(jīng)充分振搖（均質(zhì)）做成的玻璃瓶（均質(zhì)袋）內(nèi)，經(jīng)充分振搖（均質(zhì)）做成1:101:1

12、0的稀釋液。用的稀釋液。用1mL1mL滅菌吸管吸取滅菌吸管吸取1:101:10稀釋液稀釋液1mL1mL，注入含有注入含有9mL9mL滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，用滅菌生理鹽水的試管內(nèi)，用1mL1mL滅菌吸管滅菌吸管反復(fù)吸吹制成反復(fù)吸吹制成1:1001:100的稀釋液、。以此類推，做出的稀釋液、。以此類推，做出1:10001:1000等稀釋度的稀釋液，每個(gè)稀釋度更換一支滅菌等稀釋度的稀釋液，每個(gè)稀釋度更換一支滅菌吸管。吸管。精選ppt（2）一般食品選3個(gè)稀釋度進(jìn)行檢測(cè)，含菌量少的液體樣品（如食用純水和礦泉水等）可直接用原液檢測(cè)。將檢驗(yàn)紙片放在水平臺(tái)面上，揭開上面的透明薄膜，用滅菌吸管吸取樣品原液或稀釋液1mL,均勻加到