1、血涂片制作血涂片制作及瘧原蟲鏡檢技術(shù)及瘧原蟲鏡檢技術(shù)煙臺市疾控中心 檢驗(yàn)科授課內(nèi)容1.厚、薄血膜血片制作方法。2.瘧原蟲的生活史及其各發(fā)育階段的基本特點(diǎn)。3.間日瘧、惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)與鏡檢技術(shù) 血膜的制作血膜的制作用于檢查瘧原蟲的血涂片有兩種：一種是將血液涂呈薄膜狀，稱薄血膜薄血膜；一種是血液涂成圓盤，稱厚血膜厚血膜。無特殊要求的可厚薄血膜分載玻片涂制。發(fā)熱病人血片發(fā)熱病人血片標(biāo)本片標(biāo)本片薄血膜的制作l薄血膜薄血膜 ：取一小滴血（約取一小滴血（約11.5微升的血量），將血微升的血量），將血滴置于載玻片中部，將推玻片的邊緣緊貼載玻片血滴前，滴置于載玻片中部，將推玻片的邊緣緊貼載玻片血滴前，

2、使血液沿推玻片邊緣散開約使血液沿推玻片邊緣散開約 2cm寬時，使推玻片與平寬時，使推玻片與平置的載玻片形成置的載玻片形成25350夾角，平穩(wěn)、均勻由右向左推夾角，平穩(wěn)、均勻由右向左推片，形成舌型、頭體尾分明的薄血膜（約片，形成舌型、頭體尾分明的薄血膜（約2.0-2.5cm寬寬 2.5-3.0cm長）。長）。l影響因素影響因素：速度快慢、血滴大小、推片與載玻片夾角速度快慢、血滴大小、推片與載玻片夾角大小等影響血膜的厚薄、大小。大小等影響血膜的厚薄、大小。l要求要求：制成的薄血膜外觀：厚薄均勻，無劃痕，無起伏，制成的薄血膜外觀：厚薄均勻，無劃痕，無起伏，邊緣整齊光滑舌狀血膜；在鏡下看邊緣整齊光滑舌

3、狀血膜；在鏡下看RBC平鋪互相接觸而平鋪互相接觸而不重疊。不重疊。l薄血膜位置薄血膜位置：薄血膜位于載玻片左：薄血膜位于載玻片左1/2處。處。 厚血片制作l厚血膜厚血膜 ： 用推玻片的一角，從取血部位刮取約用推玻片的一角，從取血部位刮取約4微微升左右血量，使血滴與平置的載玻片接觸，接著用推升左右血量，使血滴與平置的載玻片接觸，接著用推玻片角由里向外一個方向旋轉(zhuǎn)玻片角由里向外一個方向旋轉(zhuǎn)24圈，涂成直徑圈，涂成直徑0.81cm大小、圓形厚血膜。大小、圓形厚血膜。l厚血膜要求：厚血膜要求：外觀：圓形厚薄均勻，無劃痕。鏡下外觀：圓形厚薄均勻，無劃痕。鏡下觀察其厚度，以每油鏡視野觀察其厚度，以每油鏡視

4、野5-10個個WBC為宜。過厚為宜。過厚易于脫落，過薄達(dá)不到檢出率要求。易于脫落，過薄達(dá)不到檢出率要求。l厚血膜位置：厚血膜位置：位于玻片右半部分左位于玻片右半部分左1/2處處血膜編號血膜編號 血膜制成后，立即在玻片面上寫上受檢者的個人編號，以防差錯；待薄血膜干后玻片頭可粘貼患者信息，亦可用鉛筆在薄血膜頭寫上血片種類的代號，依次順序插入標(biāo)本盒內(nèi)。制片時機(jī)掌握（取血時間）l采血時間：采血時間： 現(xiàn)癥病人和流調(diào)普查時可不考慮取血時機(jī)。但在診斷或需要某期瘧原蟲作標(biāo)本時，則應(yīng)掌握適宜的取血時機(jī)。 l瘧疾典型的臨床表現(xiàn)：瘧疾典型的臨床表現(xiàn)：分前驅(qū)期、發(fā)冷（寒戰(zhàn)）期、發(fā)熱期、出汗期和間歇期五期。 1.采血

5、時間：采血時間： P.v 發(fā)作后發(fā)作后10小時內(nèi)小時內(nèi)采血，采血，各期（各期（R、T、S、G）瘧原蟲均可）瘧原蟲均可查見。見。 P.f 發(fā)作時采血可查到發(fā)作時采血可查到 R；發(fā)作；發(fā)作后后10天左右采血可查見天左右采血可查見 G。間日瘧（取血時間）l在前驅(qū)期（相當(dāng)于肝內(nèi)期瘧原蟲發(fā)育）因原蟲密度太低，鏡檢多為陰性陰性。l發(fā)熱期：外周血中以環(huán)狀體（小滋養(yǎng)體）環(huán)狀體（小滋養(yǎng)體）為主，也可見到裂殖體裂殖體；l發(fā)冷寒戰(zhàn)期（相當(dāng)于紅內(nèi)期，成熟裂殖體漲破紅細(xì)胞期），鏡檢多為裂殖體和環(huán)狀體裂殖體和環(huán)狀體。l出汗期：因原蟲密度太低，鏡檢多為陰性。l發(fā)作后數(shù)小時，間歇期：外周血中以大滋養(yǎng)大滋養(yǎng)體體為主，形態(tài)較易辯

6、認(rèn)，為診斷的有利時機(jī)。發(fā)作36-48h，可檢出裂殖體裂殖體。l發(fā)作1-2次后，配子體配子體出現(xiàn)較多。惡性瘧（取血時間）l惡性瘧：較理想的取血時間是在發(fā)作后至20h內(nèi)。l初發(fā)患者退熱后常查不到原蟲。l末梢血中檢出惡性瘧配子體配子體，是在末梢血出現(xiàn)環(huán)狀體環(huán)狀體之后的10天左右。 制作血膜的注意事項(xiàng) 1. 玻片清洗時，避免玻片碰撞、磨損。制作血膜的載玻片必須完全清潔而毫無油漬或污垢。制片時，手指只能持載片的邊緣，不能接觸玻片表面，以免油污使薄血膜產(chǎn)生空白區(qū)以及厚血膜脫落。作為推片的玻片邊緣一定要平滑，才能使推出的血膜均勻一致。制作血膜的注意事項(xiàng)l 2. 剛涂制的血膜要平放在標(biāo)本盒內(nèi)，厚血膜未干前勿使

7、標(biāo)本盒傾斜，以免血膜傾向一側(cè)，造成血膜厚薄不均，厚處不一溶血和著色而影響檢查結(jié)果；晾干血膜時應(yīng)注意防塵、防止蒼蠅、蟑螂等昆蟲吮吸血膜，干后應(yīng)及時裝入標(biāo)本盒并蓋嚴(yán)，新的木制標(biāo)本盒需敞開放置一段時間，讓木醇揮發(fā)后才能使用，以免厚血膜紅蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。制作血膜的注意事項(xiàng)l 3. 血膜讓其自然干燥，切忌用太陽曬或火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。夏天標(biāo)本盡可能2448小時內(nèi)固定染色；冬天也不能超過72小時。放置時間越久，厚血膜越不易脫血，染色效果也差。若不能及時染色，膜血膜宜先用甲醇固定（13分鐘）然后用過濾清水對厚血膜溶血，晾干固定后裝入盒內(nèi)蓋嚴(yán)，待以后染色。厚薄血膜的優(yōu)缺點(diǎn)及

8、適用范圍薄血膜：薄血膜：用血量少1-1.5ul，瘧原蟲的形態(tài)完整，便于瘧原蟲蟲種的鑒定。為保證檢測的敏感性，常耗時較多，不適用于大規(guī)模調(diào)查，常出現(xiàn)漏診。厚血膜：厚血膜：用血量較多4-5ul，瘧原蟲胞漿和核有一定程度的固縮，較難識別；但須查范圍小，節(jié)省時間，陽性檢出率較高。 血片的鏡檢原則血片的鏡檢原則1. 1. 鏡檢瘧原蟲，必須對正常厚薄血膜中各種血細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)和染色性質(zhì)能夠識別。2. 鏡檢瘧原蟲，首先要會看薄血膜，在基本上掌握薄血膜中瘧原蟲形態(tài)后，才鏡檢厚血膜。3.鏡檢瘧原蟲一般只查厚血膜，薄血膜僅作為原蟲分類時參考和血片編號之用。4.鏡檢瘧原蟲必須用油鏡頭配合5X低倍目鏡鏡檢，當(dāng)發(fā)現(xiàn)疑

9、難問題時可調(diào)換10X目鏡進(jìn)行觀察。5.檢查時應(yīng)從厚血膜的上緣開始，使血膜從上而下，自左至右，由右至左，一行接一行，一個視野稍疊一個視野順序地查完整個血膜。 薄血膜中常見的血液細(xì)胞中性粒細(xì)胞嗜酸性粒細(xì)胞單核細(xì)胞淋巴細(xì)胞紅細(xì)胞血小板瘧原蟲的生活史瘧原蟲的生活史及其及其 各發(fā)育階段的基本特點(diǎn)各發(fā)育階段的基本特點(diǎn)瘧原蟲生活史l人瘧原蟲完成其生活史需要人和按蚊兩人瘧原蟲完成其生活史需要人和按蚊兩個宿主。個宿主。l 1. 在按蚊體內(nèi)進(jìn)行在按蚊體內(nèi)進(jìn)行有性繁殖有性繁殖，按蚊，按蚊是瘧原蟲的是瘧原蟲的終末宿主終末宿主。l 2. 在人體內(nèi)進(jìn)行在人體內(nèi)進(jìn)行無性增殖無性增殖，人是瘧，人是瘧原蟲的原蟲的中間宿主中間宿

10、主。傳播媒介傳播媒介l中華按蚊瘧原蟲生活史 含成熟瘧原蟲子孢子按蚊 叮咬人 子孢子隨唾液進(jìn)入人體血液 約30分鐘 侵入肝細(xì)胞 裂體增殖 成熟裂殖體（含數(shù)以萬計裂殖子） 肝細(xì)胞破裂 裂殖子侵入紅細(xì)胞（開始紅細(xì)胞內(nèi)期紅細(xì)胞內(nèi)期發(fā)育） 發(fā)育 小滋養(yǎng)體（環(huán)狀體） 攝食營養(yǎng)、發(fā)育 大滋養(yǎng)體 核分裂、發(fā)育 未成熟裂殖體 核進(jìn)一步分裂 裂殖體（成熟） 被寄生紅細(xì)胞破裂 裂殖子釋放入血流 一部分被巨噬細(xì)胞吞噬。 一部分再侵入紅細(xì)胞，開始新的一輪發(fā)育。 一部分裂殖子在紅細(xì)胞內(nèi)不再進(jìn)行裂體增殖，而發(fā)育成雌、雄配子體。 在蚊體內(nèi)進(jìn)行有性生殖。 瘧原蟲生活史示意圖瘧原蟲生活史示意圖瘧原蟲生活史示意圖 （紅內(nèi)各期原蟲形

11、態(tài)） 瘧原蟲生活史示意瘧原蟲生活史示意由生活史看出由生活史看出瘧原蟲對人體的主要瘧原蟲對人體的主要致病階段致病階段： 是紅細(xì)胞內(nèi)期的裂體增殖期；主要是指紅細(xì)胞內(nèi)期的無性體小滋養(yǎng)體到成熟裂殖體，而不是紅細(xì)胞內(nèi)期的無性體配子體；具有流行病學(xué)意義的瘧疾具有流行病學(xué)意義的瘧疾傳染源傳染源： 是外周血內(nèi)有配子體的現(xiàn)癥病人和帶蟲者?？梢娫缙谠\斷治療的重要性?？梢娫缙谠\斷治療的重要性。復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)由肝內(nèi)期遲發(fā)型子孢子引起。由肝內(nèi)期遲發(fā)型子孢子引起。 人類瘧原蟲的 基本特征人體瘧原蟲的基本結(jié)構(gòu)人體瘧原蟲的基本結(jié)構(gòu)l人體瘧原蟲的基本構(gòu)造：人體瘧原蟲的基本構(gòu)造：胞核、胞質(zhì)和包膜胞核、胞質(zhì)和包膜瘧原蟲的結(jié)構(gòu)與鏡檢瘧原蟲

12、的結(jié)構(gòu)與鏡檢l 瘧原蟲形態(tài)檢查三要素：瘧原蟲形態(tài)檢查三要素： 胞核、胞質(zhì)和瘧色素胞核、胞質(zhì)和瘧色素感染人的瘧原蟲有四種: l惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲 P. falciparum l間日瘧原蟲間日瘧原蟲 P. vivaxl三日瘧原蟲三日瘧原蟲 P. malariae l卵形瘧原蟲卵形瘧原蟲 P. ovale 惡性瘧 P.falciparum 分布熱帶、亞熱帶，是非洲的重要疾病分布熱帶、亞熱帶，是非洲的重要疾病 我國流行區(qū)域?yàn)樵颇鲜『秃Ｄ鲜∥覈餍袇^(qū)域?yàn)樵颇鲜『秃Ｄ鲜?四種瘧原蟲中致病力最強(qiáng)，無免疫力者四種瘧原蟲中致病力最強(qiáng)，無免疫力者 感感染后出現(xiàn)急性癥狀染后出現(xiàn)急性癥狀,不及時治療可危及生命不及時

13、治療可危及生命間日瘧 P.vivax 間日瘧原蟲分布于間日瘧原蟲分布于我國大部分地區(qū)我國大部分地區(qū)，主要是中部，主要是中部地區(qū)。地區(qū)。 病程良性病程良性, 有復(fù)發(fā)。有復(fù)發(fā)。 遍布全球溫帶地區(qū)及大片熱帶地區(qū)。在熱遍布全球溫帶地區(qū)及大片熱帶地區(qū)。在熱 帶非洲，特別是西非則很少見。帶非洲，特別是西非則很少見。三日瘧 P.malariae l遍及熱帶和亞熱帶地區(qū)，特別是東、西非洲，圭亞那及印度遍及熱帶和亞熱帶地區(qū)，特別是東、西非洲，圭亞那及印度部分地區(qū)，呈片狀、塊狀分布部分地區(qū)，呈片狀、塊狀分布l三日瘧在三日瘧在我國非常少見我國非常少見，只在南方廣西有過散在報告，只在南方廣西有過散在報告l無復(fù)發(fā)無復(fù)發(fā)

14、卵形瘧 P.ovale又稱蛋形瘧原蟲又稱蛋形瘧原蟲,主要分布非洲。太平洋地區(qū)、緬甸、東南亞有主要分布非洲。太平洋地區(qū)、緬甸、東南亞有散在報告散在報告l在在我國已基本消滅我國已基本消滅l癥狀與間日瘧相似癥狀與間日瘧相似, 有復(fù)發(fā)有復(fù)發(fā)1.紅細(xì)胞通常漲紅細(xì)胞通常漲大大 2.薛氏點(diǎn)明顯薛氏點(diǎn)明顯 3.成熟環(huán)狀體粗成熟環(huán)狀體粗大大4.滋養(yǎng)體胞漿有滋養(yǎng)體胞漿有阿米巴樣偽足阿米巴樣偽足5.血片中可見各血片中可見各期的原蟲形態(tài)期的原蟲形態(tài)6.成熟裂殖體約成熟裂殖體約含含12-24個裂殖個裂殖子子 間日瘧（間日瘧（P. vivax ）鑒定要點(diǎn)）鑒定要點(diǎn)1.紅細(xì)胞不漲大紅細(xì)胞不漲大2.環(huán)狀體釬細(xì)環(huán)狀體釬細(xì), 一

15、個紅一個紅細(xì)胞內(nèi)可有幾個環(huán)細(xì)胞內(nèi)可有幾個環(huán)狀體狀體,環(huán)狀體內(nèi)可有環(huán)狀體內(nèi)可有2個核個核 3.環(huán)狀體可貼在紅細(xì)環(huán)狀體可貼在紅細(xì)胞邊緣胞邊緣 4.血片中沒有其他發(fā)血片中沒有其他發(fā)育期滋養(yǎng)體育期滋養(yǎng)體 5.配子體呈新月形或配子體呈新月形或臘腸形臘腸形6.成熟裂殖體約含成熟裂殖體約含6-32個裂殖子個裂殖子7.可出現(xiàn)茂氏點(diǎn)可出現(xiàn)茂氏點(diǎn)惡性瘧（惡性瘧（P.falciparum）鑒定）鑒定 要點(diǎn)要點(diǎn)1.紅細(xì)胞不漲紅細(xì)胞不漲大或略小大或略小2.環(huán)狀體可呈環(huán)狀體可呈方形方形3.胞漿不活躍胞漿不活躍呈帶狀形呈帶狀形 4.成熟滋養(yǎng)體成熟滋養(yǎng)體呈菊花狀呈菊花狀,內(nèi)內(nèi)含含6-12個裂個裂殖子殖子 5.核可能出現(xiàn)核可能

16、出現(xiàn)在環(huán)狀體邊在環(huán)狀體邊緣緣 三日瘧（三日瘧（P.malariae）診斷要點(diǎn)）診斷要點(diǎn)卵形瘧（卵形瘧（P. ovale）診斷要點(diǎn)）診斷要點(diǎn)1.紅細(xì)胞漲大紅細(xì)胞漲大 2.常見慧星狀常見慧星狀 (也稱齒輪狀也稱齒輪狀)3.環(huán)粗大環(huán)粗大 4.薛氏點(diǎn)明顯薛氏點(diǎn)明顯 5.成熟滋養(yǎng)體類成熟滋養(yǎng)體類似三日瘧原蟲似三日瘧原蟲但更粗大但更粗大6.成熟裂殖體約成熟裂殖體約含含4-12個裂殖個裂殖子子 種種周 圍 血周 圍 血中 發(fā) 育中 發(fā) 育階段階段紅細(xì)胞形態(tài)紅細(xì)胞形態(tài)瘧原蟲形態(tài)瘧原蟲形態(tài)大小大小點(diǎn)彩點(diǎn)彩胞漿胞漿瘧色素瘧色素裂殖子數(shù)裂殖子數(shù)惡性瘧原惡性瘧原蟲蟲環(huán)狀體環(huán)狀體配子體配子體正常正常常見常見茂氏茂氏點(diǎn)點(diǎn)

17、環(huán)狀體釬細(xì)，環(huán)狀體釬細(xì)，常見個核常見個核粗黑，配子粗黑，配子體中明顯體中明顯6-32平均平均 = 10-24間日間日瘧原瘧原蟲蟲各 期 滋各 期 滋養(yǎng)體養(yǎng)體裂 殖 體裂 殖 體和和配子體配子體漲大漲大,可達(dá)正可達(dá)正常的常的 1.5-2 倍倍薛氏薛氏點(diǎn)可點(diǎn)可出現(xiàn)出現(xiàn)阿米巴樣滋養(yǎng)阿米巴樣滋養(yǎng)體，淺藍(lán)色，體，淺藍(lán)色，活潑活潑金棕色金棕色不明顯不明顯12-24平均平均 = 16卵形卵形瘧原瘧原蟲蟲各期滋各期滋養(yǎng)體養(yǎng)體裂殖體裂殖體漲大漲大,可達(dá)正可達(dá)正常的常的 1.25-1.5倍倍薛氏薛氏點(diǎn)可點(diǎn)可出現(xiàn)出現(xiàn)卵圓形滋養(yǎng)體，卵圓形滋養(yǎng)體，藍(lán)色較深，核藍(lán)色較深，核較大較大深棕色深棕色明顯明顯4-12平均平均 =

18、 8三日三日瘧原瘧原蟲蟲各期滋各期滋養(yǎng)體養(yǎng)體裂殖體裂殖體和和配子體配子體正常正常西門西門氏點(diǎn)氏點(diǎn)少見少見圓形，藍(lán)色深，圓形，藍(lán)色深，核緊縮，滋養(yǎng)核緊縮，滋養(yǎng)體帶狀體帶狀深棕色，粗深棕色，粗明顯明顯6-12平 均平 均 = 8呈菊花狀呈菊花狀 薄血膜中薄血膜中 P.v 的形態(tài)的形態(tài)環(huán)狀體環(huán)狀體(P.v.R(P.v.R) ) 約占寄生紅細(xì)胞的約占寄生紅細(xì)胞的1/31/3，很少見到一個紅細(xì)胞寄生，很少見到一個紅細(xì)胞寄生2 2個環(huán)狀體和一個環(huán)狀體有個環(huán)狀體和一個環(huán)狀體有2 2個核。個核。 大滋養(yǎng)體(P.v.T)l經(jīng)經(jīng)8 81010小時，蟲體增大，胞質(zhì)增多，伸出偽足。小時，蟲體增大，胞質(zhì)增多，伸出偽足。

19、l出現(xiàn)黃褐色的瘧色素。出現(xiàn)黃褐色的瘧色素。l紅細(xì)胞脹大，變形，顏色變淡，并出現(xiàn)數(shù)量較多，淡紅色的紅細(xì)胞脹大，變形，顏色變淡，并出現(xiàn)數(shù)量較多，淡紅色的小點(diǎn)，稱薛氏小點(diǎn)小點(diǎn)，稱薛氏小點(diǎn)成熟裂殖體（成熟裂殖體（P.v.SP.v.S）紅細(xì)胞紅細(xì)胞： 脹大，褪色，可見薛氏小點(diǎn)。脹大，褪色，可見薛氏小點(diǎn)。大大 小小： 個體較大。個體較大。胞漿和核胞漿和核：裂殖子裂殖子12241224個平均個平均1616個，排個，排 列不規(guī)則，核紅色，胞漿淺蘭色。列不規(guī)則，核紅色，胞漿淺蘭色。色色 素素： 黃褐色常集于瘧原蟲的一邊。黃褐色常集于瘧原蟲的一邊。間日瘧原蟲雄配子體(P.v.G) 間日瘧原蟲雌配子體(P.v.G)

20、l蟲體較小，占滿脹大的紅細(xì)胞蟲體較小，占滿脹大的紅細(xì)胞l胞質(zhì)淺藍(lán)胞質(zhì)淺藍(lán)l核大疏松，淡紅色，多位于蟲體核大疏松，淡紅色，多位于蟲體的中央。的中央。l瘧色素分散瘧色素分散 l蟲體較大，占滿脹大的紅細(xì)胞蟲體較大，占滿脹大的紅細(xì)胞l胞質(zhì)致密，色深藍(lán)胞質(zhì)致密，色深藍(lán)l核小致密，深紅色，多位于蟲核小致密，深紅色，多位于蟲體一側(cè)體一側(cè)l瘧色素分散瘧色素分散 間日瘧大滋養(yǎng)體間日瘧大滋養(yǎng)體(T)(T)與配子體與配子體(G)(G)的區(qū)別的區(qū)別 T G蟲體： 較小較小 較大較大胞漿： 邊緣不規(guī)則可見空泡邊緣不規(guī)則可見空泡 邊緣規(guī)則無空泡邊緣規(guī)則無空泡 核： 較小、不規(guī)則較小、不規(guī)則 較大有不染色帶較大有不染色帶色

21、素： 較少、分布不勻，較少、分布不勻， 色素分布均勻色素分布均勻TGP.V 與與 P.f 鑒別報告鑒別報告1、當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)環(huán)狀體時，且數(shù)量較多，環(huán)纖細(xì)，此時應(yīng)、當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)環(huán)狀體時，且數(shù)量較多，環(huán)纖細(xì)，此時應(yīng)注意觀察全血膜有無間日瘧的其他期原蟲，如無可判定為注意觀察全血膜有無間日瘧的其他期原蟲，如無可判定為惡惡性瘧性瘧。 2、當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧原蟲時，此時應(yīng)注意觀察全血膜有、當(dāng)血膜中發(fā)現(xiàn)間日瘧原蟲時，此時應(yīng)注意觀察全血膜有無惡性瘧的配子體，如無可判為無惡性瘧的配子體，如無可判為間日瘧間日瘧，如有可判為此兩型，如有可判為此兩型瘧原蟲瘧原蟲混合感染混合感染。 3、當(dāng)全血膜中出現(xiàn)少數(shù)環(huán)狀體時，且形態(tài)

22、不典型，則最好、當(dāng)全血膜中出現(xiàn)少數(shù)環(huán)狀體時，且形態(tài)不典型，則最好間隔數(shù)小時后再取血檢查，如此時無間日瘧則可判為定間隔數(shù)小時后再取血檢查，如此時無間日瘧則可判為定惡性惡性瘧瘧。 鏡檢鏡檢 （1）一般只查）一般只查厚片厚片，薄片僅作為瘧原蟲分類，薄片僅作為瘧原蟲分類參考和編號用。參考和編號用。 （2）可先以）可先以油鏡頭配合油鏡頭配合5X低倍目低倍目鏡鏡檢，有鏡鏡檢，有疑問時可調(diào)換疑問時可調(diào)換10X目鏡目鏡進(jìn)行觀察。進(jìn)行觀察。 （3）檢查時應(yīng)從厚血膜的上緣開始，按下圖）檢查時應(yīng)從厚血膜的上緣開始，按下圖示意的順序方向，視野稍疊視野地查完整個血示意的順序方向，視野稍疊視野地查完整個血膜。膜。薄血膜瘧

23、原蟲形態(tài)間日瘧間日瘧 環(huán)狀體環(huán)狀體感染的紅細(xì)胞：感染的紅細(xì)胞：脹大脹大不明顯，基本正常。不明顯，基本正常。蟲體大小：蟲體大小：較大，約較大，約為紅細(xì)胞直徑為紅細(xì)胞直徑1/3。胞漿：胞漿：環(huán)狀，淺藍(lán)色。環(huán)狀，淺藍(lán)色。核：核：紅色，一個，偶紅色，一個，偶有二個。有二個。瘧色素：瘧色素：無。無。間日瘧間日瘧環(huán)狀體 （薄血膜） 間日瘧滋養(yǎng)體（薄血膜） 薄血膜間日瘧大滋養(yǎng)體形態(tài)感染的紅細(xì)胞：感染的紅細(xì)胞：脹大褪色，脹大褪色，出現(xiàn)形狀大小相等、分出現(xiàn)形狀大小相等、分布均勻、數(shù)目較多、鮮布均勻、數(shù)目較多、鮮紅色的薛氏小點(diǎn)。紅色的薛氏小點(diǎn)。蟲體大?。合x體大?。狠^大。較大。胞漿：胞漿：不規(guī)則，淺藍(lán)色，不規(guī)則，淺

24、藍(lán)色，出現(xiàn)阿米巴偽足，有空出現(xiàn)阿米巴偽足，有空泡。泡。核：核： 紅色，一個。紅色，一個。瘧色素：瘧色素：有，細(xì)小桿狀，有，細(xì)小桿狀，黃褐色，分布不均勻。黃褐色，分布不均勻。間 日 瘧 大 滋 養(yǎng) 體 蟲體不規(guī)則，較大；阿米巴蟲體不規(guī)則，較大；阿米巴樣空泡明顯；瘧色素細(xì)小，樣空泡明顯；瘧色素細(xì)小，黃褐色。黃褐色。紅細(xì)胞：脹大，褪色，可有薛氏小點(diǎn)。胞漿：較不規(guī)則，空泡小或消失，淺藍(lán)色。核： 紅色，分裂為二個以上。色素：黃褐色，分布不均勻。間日瘧間日瘧未成熟裂殖體未成熟裂殖體薄血膜瘧原蟲形態(tài)間間日日瘧瘧未未成成熟熟裂裂殖殖體體 間日瘧成熟裂殖體間日瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞紅細(xì)胞：脹大，褪色，可：脹大，褪色

25、，可見薛氏小點(diǎn)。見薛氏小點(diǎn)。大小大?。簜€體較大。：個體較大。胞漿胞漿：裂殖子：裂殖子1224個，通個，通常為常為1618個，排列不規(guī)個，排列不規(guī)則，胞漿淺藍(lán)色。則，胞漿淺藍(lán)色。核核；核紅色。核紅色。瘧色素瘧色素：黃褐色，常集于：黃褐色，常集于瘧原蟲的一邊。瘧原蟲的一邊。間日瘧雄（?。┡渥芋w間日瘧雄（?。┡渥芋w形態(tài)形態(tài)形狀大小形狀大小：圓形，蟲體較大。胞漿胞漿：淺藍(lán)色。核核：一個，較大，疏松，位于中央，淺紅色，周圍有明顯不著色帶。瘧色素瘧色素：黃褐色，散在分布。 間日瘧雌（大）配子體形態(tài)間日瘧雌（大）配子體形態(tài)形狀大小形狀大?。簣A形或橢圓形，較大。胞漿胞漿：深藍(lán)色。核核：一個，較小，深紅色，常偏

26、于一邊，核周可見明顯不染色帶。瘧色素瘧色素：黃褐色，均勻散在，數(shù)目較多。間日瘧原蟲雌配子體間日瘧原蟲雌配子體間日瘧原蟲雄配子體間日瘧原蟲雄配子體間日瘧原蟲間日瘧原蟲惡性瘧原蟲惡性瘧原蟲厚血膜厚血膜集中視集中視野野各各期期瘧瘧原原蟲蟲形形態(tài)態(tài)比比較較薄血膜中惡性瘧惡性瘧各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)各期瘧原蟲的形態(tài)結(jié)構(gòu)特點(diǎn)薄血膜瘧原蟲形態(tài)薄血膜瘧原蟲形態(tài) 惡性瘧環(huán)狀體感染的紅細(xì)胞：大小正常,顏色較深。蟲體大?。狠^小，約為紅細(xì)胞直徑1/5-1/6。胞漿：藍(lán)色，環(huán)狀纖細(xì),有時位于紅細(xì)胞的邊緣。常見多個原蟲同寄生于一紅細(xì)胞的現(xiàn)象。核：紅色一個,常有二個。瘧色素：無。惡性瘧原蟲-環(huán)狀體環(huán)纖細(xì),約為RBC直徑的

27、1/6，RBC不脹大核1個，但2個常見，紅細(xì)胞常含2個以上原蟲惡性瘧大滋養(yǎng)體受感染紅細(xì)胞：受感染紅細(xì)胞：大小正常，顏色較深，可出現(xiàn)較粗、大小不一、分布不勻、數(shù)目較少紅色茂氏小點(diǎn)。蟲體大小：蟲體大?。狠^小。胞漿：胞漿：藍(lán)色，圓形，堅(jiān)實(shí)，體積小。核：核：一個，紅色。瘧色素：瘧色素：較細(xì)的黑褐色顆粒，常集成塊。 惡性瘧大滋養(yǎng)體惡性瘧未成熟裂殖體紅細(xì)胞：紅細(xì)胞：大小正常，顏色較大小正常，顏色較深，可有茂氏小點(diǎn)。深，可有茂氏小點(diǎn)。大?。捍笮。?較小。較小。胞漿：胞漿：規(guī)則，圓形或卵圓形，規(guī)則，圓形或卵圓形，藍(lán)色。藍(lán)色。核：核：分裂為二個以上，紅色分裂為二個以上，紅色。瘧色素：瘧色素：黃褐色顆粒，常集黃褐

28、色顆粒，常集成黑褐色團(tuán)塊。成黑褐色團(tuán)塊。惡性瘧成熟裂殖體紅細(xì)胞紅細(xì)胞：大小正常，顏色大小正常，顏色 較深，可見茂氏小點(diǎn)。較深，可見茂氏小點(diǎn)。大小大?。合x體較小。蟲體較小。胞漿和核胞漿和核：裂殖子裂殖子832 個，通常為個，通常為818個，個， 排排列不規(guī)則，核紅色，胞漿列不規(guī)則，核紅色，胞漿藍(lán)色。藍(lán)色。色素色素：黑褐色，集中于中央黑褐色，集中于中央或一側(cè)?；蛞粋?cè)。惡性瘧成熟裂殖體 l裂殖子裂殖子8 83232個，通常個，通常8 81818個，排列不個，排列不規(guī)則規(guī)則l瘧色素集中成瘧色素集中成團(tuán)塊狀團(tuán)塊狀l蟲體占紅細(xì)胞蟲體占紅細(xì)胞體積的體積的2/32/3至至3/4 3/4 惡性瘧雌（大）配子體形

29、態(tài)形狀形狀：新月形，兩端稍尖。胞漿胞漿：深藍(lán)色。核核：一個，較小，致密，深紅色，位于中央，核周可見透明不染色帶。瘧色素瘧色素：黑褐色，密布于核的周圍。惡性瘧雄（小）配子體形態(tài)形狀：形狀：臘腸形，兩端臘腸形，兩端鈍圓。鈍圓。胞漿：胞漿：淺藍(lán)色或淡紫淺藍(lán)色或淡紫紅色。紅色。核：核：一個，較大，疏一個，較大，疏松，位于中央，淺松，位于中央，淺紅色，核周可見不紅色，核周可見不染色帶。染色帶。瘧色素：瘧色素：黑褐色，松黑褐色，松散分布于核周圍。散分布于核周圍。（未）成熟雌配子體與成熟大滋養(yǎng)體的形態(tài)鑒別蟲體大小:幾乎充滿被寄生的紅細(xì)胞l核:一個，較大且致密，周圍有一圈空白的不染色帶l胞漿:邊緣清楚，不含空

30、泡l瘧色素:顆粒較多較粗，均勻散在蟲體大小:不超過被寄生紅細(xì)胞的3/4l核:一個，延長呈帶狀，周圍無明顯的不染色帶l胞漿:邊緣不整齊，多有空泡l瘧色素:顆粒較少較細(xì)，分布不均勻厚血膜中瘧原蟲的形態(tài) 厚血膜由于用血量較多，涂制的血膜小，紅細(xì)胞重疊且干燥慢，致使蟲體皺縮，空泡消失，胞漿變形，各期瘧原蟲的體積都略微縮小，其中只有大、小滋養(yǎng)體的形態(tài)有較大改變，而裂殖體和配子體的形態(tài)則無明顯變化。厚血膜環(huán)狀體體形態(tài) 環(huán)狀體： 胞漿呈環(huán)狀或向核的一側(cè)或兩側(cè)收縮，使環(huán)的中間斷裂，或圍繞核。間日間日瘧原蟲瘧原蟲的環(huán)較大，常呈分號“；”和感嘆號“！”狀；惡性瘧惡性瘧原蟲原蟲的環(huán)纖細(xì)，常呈冒號“：”、飛鳥“.”、

31、V狀和斷環(huán)狀。 間日瘧小滋養(yǎng)體惡性瘧小滋養(yǎng)體惡性瘧原蟲厚血膜惡性瘧原蟲厚血膜厚血膜間日瘧大滋養(yǎng)體形態(tài) 間日瘧大滋養(yǎng)體間日瘧大滋養(yǎng)體呈阿米巴樣運(yùn)動，胞漿常斷裂幾塊或縮成圓形，核和瘧色素均被包在胞漿之中，著色深，只隱約可見紅色的核和黃綠色的瘧色素。胞漿可皺縮斷裂成幾個塊狀，大小不一，似互不連接。核位于胞漿之中或外邊。瘧色素分布不均勻。有些僅見胞漿和瘧色素而核看不清楚。 大滋養(yǎng)體厚血膜惡性瘧大滋養(yǎng)體形態(tài) 惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體惡性瘧原蟲大滋養(yǎng)體與薄血膜形態(tài)相似，常呈圓形，體小結(jié)實(shí)，瘧色素細(xì)小，金黃色，結(jié)成塊狀后，呈黑褐色。厚血膜厚血膜間日瘧配子體形態(tài)l間日瘧原蟲的配子體間日瘧原蟲的配子體呈圓形或卵圓形，

32、除蟲體略縮小且著色深外，均與薄血膜相似。雄配子體雄配子體核大，疏松，圓形或呈星狀，胞漿較少，著色淡，瘧色素顆粒大，數(shù)量較多，散在分布。l雌配子體雌配子體與圓形成熟的大滋養(yǎng)體相似，但配子體瘧色素顆粒粗大，多而散在分布。厚血膜厚血膜惡性瘧配子體形態(tài) 配子體配子體呈新月形或臘腸形，如血膜干燥較慢，則可縮成圓形，核居中，瘧色素圍在核周，外圍一圈胞漿。此外，還可見配子體的胞漿部分或全部消失，只留下核和瘧色素，或核和胞漿均消失，只留下一些瘧色素。 1.紅細(xì)胞通紅細(xì)胞通常脹大常脹大 2.薛氏點(diǎn)明薛氏點(diǎn)明顯顯 3.成熟環(huán)狀成熟環(huán)狀體粗大體粗大4.滋養(yǎng)體有滋養(yǎng)體有阿米巴樣阿米巴樣偽足偽足5.可見不同可見不同發(fā)育期的發(fā)育期的原蟲原蟲 間日瘧（間日瘧（P. vivax ）鑒定要點(diǎn)）鑒定要點(diǎn)1.環(huán)狀體釬細(xì)環(huán)狀體釬細(xì), 紅紅細(xì)胞不漲大細(xì)胞不漲大2.一個紅細(xì)胞內(nèi)一個紅細(xì)胞內(nèi)可有幾個環(huán)狀可有幾個環(huán)狀體體 3.環(huán)狀體內(nèi)可有環(huán)狀體內(nèi)可有2個核個核 4.環(huán)狀體可貼在環(huán)狀體可貼在紅細(xì)胞邊緣紅細(xì)胞邊緣 5.血片中沒有其血片中沒有其他發(fā)育期滋養(yǎng)他發(fā)育期滋養(yǎng)體體 6.配子體呈新月配子體呈新月形或臘腸形形或臘腸形 7.可出現(xiàn)茂氏點(diǎn)可出現(xiàn)茂氏點(diǎn)惡性瘧（惡性瘧（P.falciparum）鑒定要點(diǎn)）鑒定要點(diǎn)間間日日瘧瘧原原蟲蟲形形態(tài)態(tài) 惡惡性性