1、第1頁，共61頁。下一頁上一頁2第2頁，共61頁。下一頁上一頁（一）半保留復制、復制子、復制叉、雙（一）半保留復制、復制子、復制叉、雙向復制向復制DNA的呼吸作用、了解大腸桿菌的復制終的呼吸作用、了解大腸桿菌的復制終點點（二）（二）DNA復制的酶系復制的酶系P:97-99（三）（三）DNA復制的過程復制的過程3第3頁，共61頁。下一頁上一頁l1.復制原點復制原點l2.復制的起始復制的起始l引發(fā)引發(fā)l延伸：了解復制體的概念延伸：了解復制體的概念4第4頁，共61頁。下一頁上一頁l（一）復制的起始點（一）復制的起始點l（二）復制的過程（二）復制的過程l（三）（三）DNA復制的終止復制的終止 重點了解

2、端粒的復制重點了解端粒的復制P105-107放放錄像錄像 5第5頁，共61頁。下一頁上一頁lP108-112五、噬菌體和病毒五、噬菌體和病毒DNA的復制的復制l自學為主自學為主l重點教授重點教授P119的逆轉錄病毒的復制的逆轉錄病毒的復制6第6頁，共61頁。下一頁上一頁l移碼突變插入或缺失一個或兩個堿基使閱 讀框改變，造成氨基酸改變或終 止密碼子位置改變。3.據對遺傳信息的改變：據對遺傳信息的改變：l同義突變-點突變沒有改變所編碼的氨基酸。l錯義突變點突變使相應的氨基酸發(fā)生改變。l無義突變氨基酸密碼子因點突變而變?yōu)榻K 止密碼子。7第7頁，共61頁。下一頁上一頁基因突變基因突變血紅蛋白血紅蛋白鏈

3、基因突變鏈基因突變8第8頁，共61頁。下一頁上一頁9第9頁，共61頁。下一頁上一頁10第10頁，共61頁。下一頁上一頁11第11頁，共61頁。下一頁上一頁染色體結構的變異染色體結構的變異倒位倒位12第12頁，共61頁。下一頁上一頁13第13頁，共61頁。下一頁上一頁）插入序列、Mu噬菌體、轉座子、 返座子插入）體細胞自發(fā)突變癌癥）轉錄或轉錄后突變二、突變自然發(fā)生二、突變自然發(fā)生14第14頁，共61頁。下一頁上一頁Dots are cancer associated genes.15第15頁，共61頁。下一頁上一頁l非條件性的突變非條件性的突變l條件性的突變條件性的突變5.突變效應突變效應正向突

4、變正向突變回復突變回復突變：抑制突變：抑制突變6.影響基因的調控序列：啟動子突變體和影響基因的調控序列：啟動子突變體和組成型突變體組成型突變體16第16頁，共61頁。下一頁上一頁（一）自發(fā)突變（一）自發(fā)突變:DAN復制復制DNA自發(fā)的化學變化自發(fā)的化學變化堿基的異構互變堿基的異構互變DNA中4種堿基各自的異構體間都可自發(fā)地相互變化（例如烯醇式與酮式堿基間的互變。A:C17第17頁，共61頁。下一頁上一頁l堿基的脫氨基作用堿基的脫氨基作用l堿基的環(huán)外氨基有時會自發(fā)脫落，從而胞嘧啶會變成尿嘧啶、腺嘌呤會變成次黃嘌呤（H）、鳥嘌呤會變成黃嘌呤（X）等，遇到復制時，U與A配對、H和X都與C配對就會導致

5、子代DNA序列的錯誤變化。胞嘧啶自發(fā)脫氨基的頻率約為每個細胞每天190個。18第18頁，共61頁。下一頁上一頁19第19頁，共61頁。下一頁上一頁誘變：某些物理化學因素與生物體接觸使 基因突變。射線、化學誘變劑、）溴）化學物質修飾堿基復制時錯配）吖啶類染料易嵌入的堿基之間， 該處易插入突變。 （二）誘發(fā)突變20第20頁，共61頁。下一頁上一頁1.體外定向突變的原理：聚合酶鏈反應（）誘變：點突變、插入、缺失放錄像體外人工誘變（三）基因的人工誘變21第21頁，共61頁。下一頁上一頁l注意適應性突變與自發(fā)突變的區(qū)別注意適應性突變與自發(fā)突變的區(qū)別lP13522第22頁，共61頁。下一頁上一頁原核生物、

6、單倍體真核生物：溫度敏感突變體，下致死雙倍體真核生物：雜合體雜交、回交、自交純合體。三、突變三、突變 體的分離與分析體的分離與分析23第23頁，共61頁。下一頁上一頁、單鏈構象多態(tài)性分析（）： 點突變使構象改變。、限制性長度多態(tài)性分析（）： 點突變使酶切位點消失。、互補分析：兩突變體交配基因互補。、染色體顯帶：檢查染色體畸變。突變的分析突變的分析24第24頁，共61頁。下一頁上一頁基因打靶用同源重組的方法使染色體DNA得到定點修飾的方法?；蚯贸猛蛔兊幕蛑脫Q生物體內相應的正?；虻募夹g。 五、體內基因打靶與基因敲除25第25頁，共61頁。下一頁上一頁 過程：構建基因打靶載體（目標基因-ne

7、o-目標基因-tk）黑鼠胚胎干細胞 未重組:不生長 非同源重組:丙氧鳥苷培養(yǎng)基中不生長 同源重組:neo、丙氧鳥苷培基中均生長.參見教材P107-10926第26頁，共61頁。下一頁上一頁物理、化學因素誘導突變，復制錯誤每天上千次損傷。損傷修復系統(tǒng)使生殖細胞每年僅個錯配。 第三節(jié) 修復系統(tǒng)27第27頁，共61頁。下一頁上一頁）原核生物的聚合酶I、III外切酶活性。）錯配修復系統(tǒng)：mutH,L,S錯配矯正酶識別、切除錯配堿基。一、修復復制時發(fā)生的錯配28第28頁，共61頁。下一頁上一頁是修復DNA損傷最為普遍的方式，對多種DNA損傷包括堿基脫落形成的無堿基位點、嘧啶二聚體、堿基烷基化、單鏈斷裂等

8、都能起修復作用。這種修復方式普遍存在于各種生物細胞中，也是人體細胞主要的DNA修復機制。修復過程需要多種酶的一系列作用。教材P11529第29頁，共61頁。下一頁上一頁30第30頁，共61頁。下一頁上一頁31第31頁，共61頁。下一頁上一頁l糖基酶識別、切除損傷的堿基。l應該說目前對真核細胞的DNA修復的反反應類型、參與修復的酶類和修復機制應類型、參與修復的酶類和修復機制了解還不多，但DNA損傷修復與細胞突變、壽命、衰老、腫瘤發(fā)生、輻射效應、某些毒物的作用都有密切的關系。l人類遺傳性疾病已發(fā)現(xiàn)4000多種，其中不少與DNA修復缺陷有關，這些DNA修復缺陷的細胞表現(xiàn)出對輻射和致癌劑的敏感性增加。

9、32第32頁，共61頁。下一頁上一頁l例 如 著 色 性 干 皮 病著 色 性 干 皮 病 （ x e r o d e r m a pigmentosum）就是第一個發(fā)現(xiàn)的DNA修復缺陷性遺傳病，患者皮膚和眼睛對太陽光特別是紫外線十分敏感，身體暴光部位的皮膚干燥脫屑干燥脫屑、色素沉著色素沉著、容易發(fā)生潰潰瘍瘍、皮膚癌皮膚癌發(fā)病率高，常伴有神經系統(tǒng)障礙，智力低下智力低下等，病人的細胞對嘧啶二聚體和烷基化的清除能力降低33第33頁，共61頁。下一頁上一頁基因突變+遺傳重組生物體進化遺傳重組不同DNA分子斷裂、交換、連接而產生DNA片段的交換，并重新組合成新DNA的過程。分為廣義（獨立分配與交換）與

10、狹義（基因交換）。分為同源重組和非同源重組。第四節(jié)第四節(jié) 遺傳重組遺傳重組34第34頁，共61頁。下一頁上一頁同源重組同源或相似的DNA序列之間的交換。（一）同源重組模型 Holliday模型：同源染色體單條鏈斷裂交叉連接形成holliday結構分支遷移形成異源雙鏈區(qū)四條鏈斷裂、再交互連接完成雙鏈交換。35第35頁，共61頁。下一頁上一頁36第36頁，共61頁。下一頁上一頁37第37頁，共61頁。下一頁上一頁38第38頁，共61頁。下一頁上一頁交互重組一條親本DNA分子的一段雙鏈與另一條親本DNA分子對應的一段DNA發(fā)生交換，產生了兩條重組的DNA分子的重組現(xiàn)象。思考題：Holiday模型中無

11、交叉重組與交互重組的區(qū)別與聯(lián)系是什么？（切口、產物、共同點）39第39頁，共61頁。下一頁上一頁40第40頁，共61頁。下一頁上一頁41第41頁，共61頁。下一頁上一頁42第42頁，共61頁。下一頁上一頁43第43頁，共61頁。下一頁上一頁44第44頁，共61頁。下一頁上一頁RuvC切割位點的一致序列為：5-A/TTT G/C-345第45頁，共61頁。下一頁上一頁（一）噬菌體DNA的整合與切離 噬菌體整合進宿主菌DNA溶原狀態(tài)切離裂解生長整合過程與同源重組相似：整合酶切開 噬菌體和細菌染色體的核心序列交叉連接分支遷移7bp鏈交換（P125圖5-40） 切離：Xis切除酶46第46頁，共61頁

12、。下一頁上一頁位點特異性重組：不依賴于DNA序列的同源性，而依賴于能與催化DNA鏈斷裂和重新連接的酶結合于特異DNA序列。位點特異性重組與同源重組的區(qū)別： 部位 結果位點特異性重組 特異位點 DNA重排同源重組 切斷隨機，RecA蛋白 原有次序47第47頁，共61頁。下一頁上一頁48第48頁，共61頁。下一頁上一頁49第49頁，共61頁。下一頁上一頁attP:POP, 235bpattB:BOB, 23bp核心序列（O）：15bp50第50頁，共61頁。下一頁上一頁51第51頁，共61頁。下一頁上一頁l整合酶Int的三重功能：噬菌體的插入（成為原噬菌體，溶源）；原噬菌體的切離（進入溶源狀態(tài)）；拓撲異構酶活性（松弛DNA狀態(tài)att位點的超螺旋結構）宿主編碼的整合宿主因子：IHF由HimA編碼的亞基和hip編碼的 亞基構成，結合于attP，對整合起作用。 切除酶（ Xis ）：無需提供能源和輔助因子。 52第52頁，共61頁。下一頁上一頁53第53頁，共61頁。下一頁上一頁54第54頁，共61頁。下一頁上一頁55第55頁，共61頁。下一頁上一頁56第56頁，共61頁。下一頁上一頁57第57頁，共61頁。下一頁上一頁1.轉基因或基因敲除2.轉基因技術用于疾病治療3.基因打靶58第58頁，共61頁。下一頁上一頁59第59頁，共61頁。