1、2022-6-4儀器分析實驗1任務2：紫外可見分光光度計的使用紫外-可見分光光度法模塊之2022-6-4儀器分析實驗22022-6-4儀器分析實驗3 最新設計的 UV1801是通用型具有掃描功能的紫外可見分光光度計，可滿足各種應用的要求，可用在生物研究、生物工業(yè)、藥物分析、制藥、教學研究、環(huán)保、食品衛(wèi)生、臨床檢驗、衛(wèi)生防疫等領域。波長范圍： 1901100nm顯示方式： 六英寸高亮度藍色液晶顯示屏檢測器： 進口硅光二極管光源： 進口氘燈，進口鎢燈2022-6-4儀器分析實驗4波長范圍： 1901100nm顯示方式： 液晶檢測器： 進口硅光電池光源： 進口氘燈、進口鹵鎢燈具有波長掃描、時間掃描、

2、多波長測定等多種測量方法，可滿足不同測量的要求。2022-6-4儀器分析實驗5l1 1、定性分析、定性分析 通常根據(jù)吸收光譜的形狀、吸收峰的數(shù)目以及最大吸收波長的位置和相應的摩爾吸收系數(shù)進行定性鑒定。 一般采用比較光譜法：即在相同的測定條件下，比較待測物與已知標準物的吸收光譜曲線，如果它們的吸收光譜曲線完全等同，則可認為是同一物質。2022-6-4儀器分析實驗62022-6-4儀器分析實驗7在進行定性鑒定時，需要注意：在進行定性鑒定時，需要注意：1 1）. .測試溶劑測試溶劑：應當對標準物和待測物有良好的溶解：應當對標準物和待測物有良好的溶解度，本身在測定的波長內無光的吸收，有良好的穩(wěn)度，本身

3、在測定的波長內無光的吸收，有良好的穩(wěn)定性。定性。2 2）. .測試的條件測試的條件：標準物和待測物測試條件要完全相：標準物和待測物測試條件要完全相同，如溶劑、同，如溶劑、PHPH、離子強度、溫度及所用儀器等。、離子強度、溫度及所用儀器等。3 3）. .更改測試條件更改測試條件：為了防止測試數(shù)據(jù)的假象，要對：為了防止測試數(shù)據(jù)的假象，要對現(xiàn)有某些條件進行適當?shù)淖儞Q，改變其中的某些測現(xiàn)有某些條件進行適當?shù)淖儞Q，改變其中的某些測定條件，然后看標準物和待測物的吸收光譜是否仍定條件，然后看標準物和待測物的吸收光譜是否仍然完全相同。然完全相同。2022-6-4儀器分析實驗8l二、定量分析二、定量分析-標準曲

4、線法 配制一系列不同含量的待測組分的標準溶液，以不含待測組分的空白溶液為參比，測定標準溶液的吸光度。并繪制吸光度濃度曲線，得到標準曲線（工作曲線），然后再在相同條件下測定試樣溶液的吸光度。由測得的吸光度在曲線上查得試樣溶液中待測組分的濃度，最后計算得到試樣中待測組分的含量。2022-6-4儀器分析實驗9ACCxAx標準曲線標準曲線/ /工作曲線制作工作曲線制作根據(jù)光的吸收定律根據(jù)光的吸收定律: :吸光度與吸光物質吸光度與吸光物質的含量成正比，這的含量成正比，這是光度法進行定量是光度法進行定量的基礎，的基礎，標準曲線標準曲線就是根據(jù)這一原理就是根據(jù)這一原理制作的。制作的。2022-6-4儀器分析

5、實驗10定性分析與定量分析的基礎定性分析與定量分析的基礎定性分析基礎定性分析基礎定量分析基礎定量分析基礎物質對光的選擇吸收物質對光的選擇吸收物質的電子結構不同，所能物質的電子結構不同，所能吸收光的波長也不同，這就吸收光的波長也不同，這就構成了物質對光的選擇吸收構成了物質對光的選擇吸收基礎?；A。ABA )(maxA)(maxB在一定的實驗條件下，在一定的實驗條件下，物質對光的吸收與物質物質對光的吸收與物質的濃度成正比。的濃度成正比。A C增增大大2022-6-4儀器分析實驗11l 未知物的定性分析未知物的定性分析 未知物未知物40-60ug/mL稀釋稀釋未知物未知物10ug/mL210350n

6、m 波 長 (nm) Abs確定未知物及最大吸收波長確定未知物及最大吸收波長2022-6-4儀器分析實驗12 波 長 (nm) Abs 波 長 (nm) Abs苯甲酸苯甲酸水楊酸水楊酸2022-6-4儀器分析實驗13l 未知物定量分析未知物定量分析 水楊酸標水楊酸標準儲備液準儲備液1mg/mL精密吸取精密吸取10ml10ml定容至定容至100ml100ml，移取移取測量吸測量吸光度光度4ml6ml8ml10ml定容定容至至50ml50ml8ug/mL12ug/mL16ug/mL20ug/mL水楊酸未水楊酸未知液知液精密吸取精密吸取10ml10ml定容至定容至50ml50mlAx水楊酸水楊酸濃度

7、？2022-6-4儀器分析實驗14苯甲酸標苯甲酸標準儲備液準儲備液1mg/mL精密吸取精密吸取5ml5ml定容至定容至100ml100ml，移取移取測量吸測量吸光度光度2ml4ml6ml8ml定容定容至至50ml50ml2ug/mL4ug/mL6ug/mL8ug/mL水楊酸水楊酸未知未知液液精密吸取精密吸取5ml5ml定容至定容至50ml50mlAx苯甲酸苯甲酸2022-6-4儀器分析實驗15UV1101分光光度計的使用分光光度計的使用l1.初始化l2.主菜單2022-6-4儀器分析實驗16l3 3、定量分析、定量分析l選擇選擇PhotometryPhotometry（ 定量運算）定量運算）

8、時，時， 按數(shù)字鍵按數(shù)字鍵11， 則則畫面進入下一級子菜單，畫面進入下一級子菜單， 即即PhotometryPhotometry（ 定量運算）定量運算） 子菜單。子菜單。l如果希望返回上一級菜單，如果希望返回上一級菜單， 請按請按CLEAR RETURNCLEAR RETURN。如果。如果希望返回到主菜單畫面，希望返回到主菜單畫面， 請按請按MAIN MENUMAIN MENU。2022-6-4儀器分析實驗17l3.1 透過率/吸光度（%T/Abs）測定模式12022-6-4儀器分析實驗18條件設定條件設定2022-6-4儀器分析實驗19l（ 2） 自動調零（自動調零（ AUTOZERO） 條

9、件設定完成后， 儀器的顯示屏進入如圖3-8所示的畫面。此時將裝有空白樣品（ 例如蒸餾水） 的比色皿放入樣品室中， 再按START/STOP鍵， 可進行零點的自動調整。2022-6-4儀器分析實驗20l3） 測定測定l自動調零完成后，即可進行樣品的測定。將裝有空白樣品的比色皿取出， 換成裝有被測樣品的比色皿，再按START/STOP鍵進行測量。得到各對應波長的數(shù)據(jù)值后， 儀器的顯示屏進入如圖3-9 所示的畫面。如果希望更改測定條件，如果希望更改測定條件， 只要按只要按CLEAR RETURNCLEAR RETURN鍵，鍵， 即可返回條件設定畫面。即可返回條件設定畫面。2022-6-4儀器分析實驗

10、21l3.2 掃描測定模式主菜單主菜單2022-6-4儀器分析實驗22l在 MAIN MENU 主菜單畫面（ 圖3-2） 中， 按數(shù)字鍵2， 則畫面進入波長掃描子菜單， 如圖2022-6-4儀器分析實驗23（1）條件測定2022-6-4儀器分析實驗24l2 2） 基線校正（基線校正（ Baseline CalibrationBaseline Calibration）條件設定完成后， 儀器的顯示屏進入如圖3-39 所示的畫面。此時將裝有空白樣品（ 例如蒸餾水） 的比色皿放入樣品室中， 再按START/STOP鍵， 則可進行基線的自動校正。在掃描測定過程中，在掃描測定過程中， 如果按如果按START/STOP鍵，鍵， 則該鍵則該鍵起起STOP（ 停止）功能；停止）功能； 在其他情況下按在其他情況下按START/STOP鍵，鍵， 則該鍵起則該鍵起START（ 啟動）啟動） 功能。功能。2022-6-4儀器分析實驗25l3） 樣品測定樣品測定l基線校正完成后， 儀器的顯示屏會進入如圖3-41 所示的畫面。2022-6-4儀器分析實驗26l將裝有被測樣品的比色皿放入樣品室中， 按 START/STOP鍵， 則