1、1實(shí)驗(yàn)四實(shí)驗(yàn)四 放線菌、酵母菌和霉菌形態(tài)觀察放線菌、酵母菌和霉菌形態(tài)觀察 1.1 1.1 了解放線菌、酵母菌、霉菌的培養(yǎng)方法。了解放線菌、酵母菌、霉菌的培養(yǎng)方法。1.2 1.2 掌握放線菌、酵母菌、霉菌的制片技術(shù)和染色方法。掌握放線菌、酵母菌、霉菌的制片技術(shù)和染色方法。1.3 1.3 掌握觀察放線菌、酵母菌、霉菌的形態(tài)特征的方法。掌握觀察放線菌、酵母菌、霉菌的形態(tài)特征的方法。 1 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康?2.1 2.1 放線菌、霉菌和酵母菌在形態(tài)特征和生殖方式上有什么異放線菌、霉菌和酵母菌在形態(tài)特征和生殖方式上有什么異 同同? ?2.2 2.2 如何鑒別酵母菌細(xì)胞的活性如何鑒別酵母菌細(xì)胞的活性? ?

2、2.3 2.3 用乳酸石碳酸棉蘭染色液對霉菌制片有哪些優(yōu)點(diǎn)用乳酸石碳酸棉蘭染色液對霉菌制片有哪些優(yōu)點(diǎn)? ?2 實(shí)驗(yàn)原理實(shí)驗(yàn)原理(通過了解下列問題來掌握實(shí)驗(yàn)原理通過了解下列問題來掌握實(shí)驗(yàn)原理)34孢子囊孢子囊孢子囊梗孢子囊梗563 3 材料與方法材料與方法3.1 3.1 實(shí)驗(yàn)器材實(shí)驗(yàn)器材3.1.1 藥品：酵母菌染色液：酵母菌染色液：呂氏堿性美藍(lán)染液。呂氏堿性美藍(lán)染液。 霉菌染色液：霉菌染色液：乳酸石碳酸棉蘭染色液乳酸石碳酸棉蘭染色液3.1.2 菌種： Streptomyces sp.（鏈霉菌（鏈霉菌 ）, ,Saccharomyces cerevisiae （釀酒酵母（釀酒酵母 ），）， Pen

3、icillum citrinum （桔青（桔青霉）霉）, ,Rhizopus oryzae （米根霉），（米根霉），Aspergillus niger( (黑曲霉黑曲霉) )。3.1.3 儀器：顯微鏡（顯微鏡（MODEL E100MODEL E100）3.1.4 其它物品：酒精燈，載玻片，蓋玻片，擦鏡紙，接種環(huán)，酒精燈，載玻片，蓋玻片，擦鏡紙，接種環(huán)，鑷子、大頭針等。鑷子、大頭針等。73.2 3.2 方法方法3.2.1.1 3.2.1.1 插片法培養(yǎng)放線菌。按無菌操作要求，取鏈霉菌培養(yǎng)物插片法培養(yǎng)放線菌。按無菌操作要求，取鏈霉菌培養(yǎng)物在高氏一號培養(yǎng)基上密集劃線接種。用鑷子取無菌載片以在高氏一號

4、培養(yǎng)基上密集劃線接種。用鑷子取無菌載片以4545。角角插入培養(yǎng)基平板上。將平板倒置，于插入培養(yǎng)基平板上。將平板倒置，于2828培養(yǎng)培養(yǎng)3 35 5天天。3.2.1 3.2.1 放線菌制片與觀察。放線菌制片與觀察。3.2.1.2 3.2.1.2 制片、鏡檢、繪圖。用鑷子取長有培養(yǎng)物的蓋玻片，用制片、鏡檢、繪圖。用鑷子取長有培養(yǎng)物的蓋玻片，用擦鏡紙擦去背面培養(yǎng)物，將有菌面朝上放在載片上。先用低倍鏡擦鏡紙擦去背面培養(yǎng)物，將有菌面朝上放在載片上。先用低倍鏡觀察基內(nèi)菌絲、氣生菌絲、孢子絲和孢子的位置，接著換高倍鏡觀察基內(nèi)菌絲、氣生菌絲、孢子絲和孢子的位置，接著換高倍鏡觀察各部位的細(xì)微結(jié)構(gòu)，繪圖并說明各部

5、位的名稱。觀察各部位的細(xì)微結(jié)構(gòu)，繪圖并說明各部位的名稱。83.2.2 3.2.2 酵母菌制片與觀察。酵母菌制片與觀察。3.2.2.1 3.2.2.1 酵母菌培養(yǎng)。在麥芽法培養(yǎng)基平板上劃線接種釀酒酵母，酵母菌培養(yǎng)。在麥芽法培養(yǎng)基平板上劃線接種釀酒酵母，于于28 28 培養(yǎng)培養(yǎng)1 12 2天。天。3.2.2.1 3.2.2.1 美蘭染液水浸片法制片。滴一滴美蘭染液水浸片法制片。滴一滴0.1%0.1%呂氏堿性美藍(lán)染液呂氏堿性美藍(lán)染液于載片中央，用接種環(huán)按無菌操作取菌落邊緣培養(yǎng)物少許置于染于載片中央，用接種環(huán)按無菌操作取菌落邊緣培養(yǎng)物少許置于染液中，混合均勻?；蛉∑【婆囵B(yǎng)物少許滴加在染液中。加蓋片。液

6、中，混合均勻?；蛉∑【婆囵B(yǎng)物少許滴加在染液中。加蓋片。3.2.2.2 3.2.2.2 鏡檢及繪圖。將制片放置鏡檢及繪圖。將制片放置3 min 3 min 后，分別用低倍鏡和高倍后，分別用低倍鏡和高倍鏡觀察酵母菌的形態(tài)和出芽情況，并區(qū)分死、活細(xì)胞。染色鏡觀察酵母菌的形態(tài)和出芽情況，并區(qū)分死、活細(xì)胞。染色3 0 min 后，比較死、活細(xì)胞的比例。繪圖注意標(biāo)明各部分結(jié)構(gòu)。后，比較死、活細(xì)胞的比例。繪圖注意標(biāo)明各部分結(jié)構(gòu)。（細(xì)胞質(zhì)部分以細(xì)點(diǎn)表示）（細(xì)胞質(zhì)部分以細(xì)點(diǎn)表示）93.2.3 3.2.3 霉菌制片與觀察。霉菌制片與觀察。3.2.3.1 3.2.3.1 霉菌培養(yǎng)。按無菌操作方式將霉菌點(diǎn)接于在霉菌培

7、養(yǎng)。按無菌操作方式將霉菌點(diǎn)接于在PDAPDA培養(yǎng)基培養(yǎng)基平板上，于平板上，于28 28 培養(yǎng)培養(yǎng)3 35 5天。天。3.2.2.2 3.2.2.2 直接制片觀察法。滴一滴乳酸石碳酸棉蘭染液于載片上，直接制片觀察法。滴一滴乳酸石碳酸棉蘭染液于載片上，用鑷子取霉菌培養(yǎng)物少許，先于用鑷子取霉菌培養(yǎng)物少許，先于50%50%乙醇中浸一下先去脫落的孢子，乙醇中浸一下先去脫落的孢子，然后將培養(yǎng)物置于染液中，用大頭針小心將菌絲分開。加蓋片。然后將培養(yǎng)物置于染液中，用大頭針小心將菌絲分開。加蓋片。3.2.3.1 3.2.3.1 霉菌觀察。先用低倍鏡觀察菌體的各個部位，認(rèn)識霉菌霉菌觀察。先用低倍鏡觀察菌體的各個部位，認(rèn)識霉菌各部分結(jié)構(gòu)，必要時用高倍鏡觀察，尤其注意觀察產(chǎn)孢子結(jié)構(gòu)。各部分結(jié)構(gòu)，必要時用高倍鏡觀察，尤其注意觀察產(chǎn)孢子結(jié)構(gòu)。繪圖并標(biāo)明各部分名稱。繪圖并標(biāo)明各部分名稱。10實(shí)驗(yàn)報告實(shí)驗(yàn)報告1 1 用文字描述實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目、