1、“咳喘寧貼膏皮膚用藥毒性實(shí)行研究王晶，關(guān)東升，陳淑彥，司小兵摘要：目的：探究“咳喘寧貼膏皮膚用藥的寧靜性。要領(lǐng)：通過對(duì)康健家兔皮膚急性毒性試驗(yàn)、康健豚鼠皮膚刺激性試驗(yàn)及皮膚過敏性試驗(yàn)，不雅察“咳喘寧貼膏對(duì)動(dòng)物經(jīng)皮膚用藥的急毒、刺激和過敏性。效果：“咳喘寧貼膏對(duì)家兔完備皮膚和破壞皮膚未引起急性毒性反響；對(duì)豚鼠完備皮膚和破壞皮膚有輕度刺激性，但給藥后48h，這種刺激性消散；對(duì)豚鼠完備皮膚無致敏作用。結(jié)論：“咳喘寧貼膏臨床用藥寧靜、無毒。關(guān)鍵詞：“咳喘寧貼膏；急性毒性；皮膚刺激性；皮膚過敏性“咳喘寧貼膏是甘肅中醫(yī)學(xué)院劉世瓊傳授顛末多年臨床驗(yàn)證，并結(jié)合當(dāng)代藥理研究，重復(fù)挑選研制而成的純中藥外用穴位貼劑

2、。其應(yīng)用簡(jiǎn)樸、經(jīng)濟(jì)，多年來常在“三伏天用于治療支氣管哮喘和慢性支氣管炎，療效非常必定。為研究其用藥的寧靜性，本實(shí)行舉行了“咳喘寧貼膏皮膚用藥的動(dòng)物毒性實(shí)行研究，并為本產(chǎn)物的開拓提供理論根據(jù)。1質(zhì)料1.1實(shí)行動(dòng)物康健成年家兔12只，牝牡各半，體重2.00.5kg蘭州生物成品研究所動(dòng)物實(shí)行室提供，及格證號(hào)：醫(yī)動(dòng)字第14-004號(hào)；康健成年豚鼠36只，牝牡各半，體重30050g中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州獸醫(yī)研究所動(dòng)物實(shí)行室提供，及格證號(hào)SXK甘2022-0005。1.2實(shí)行藥品“咳喘寧貼膏由白芥子、甘遂、延胡索、蘇子、生姜汁等構(gòu)成，空缺紗膠貼劑有三層紗布和一層無刺激性膠布構(gòu)成，以上兩種受試物規(guī)格為：皮膚急性

3、毒性試驗(yàn)為710，皮膚刺激性試驗(yàn)為45，皮膚過敏試驗(yàn)為33，均由“咳喘寧貼膏課題組提供；2，4二硝基氯代苯上海試劑一廠，批號(hào)001201，闡發(fā)純硫化納萊陽化工實(shí)行廠，批號(hào)20220909。2要領(lǐng)和效果2.1“咳喘寧貼膏的皮膚急性毒性試驗(yàn)動(dòng)物分組：將12只家兔，按隨機(jī)數(shù)字表法分為3組，每組4只，牝牡各半。A組大劑量藥物貼劑組，即貼敷A組，為臨床用藥藥量的6倍；B組小劑量藥物貼劑組，即貼敷B組，為臨床用藥藥量的3倍；組空缺紗膠貼劑比較組。操縱要領(lǐng)：按文獻(xiàn)1要領(lǐng)，用3份硫化鈉，1份皂粉，7份淀粉，加水配成糊狀軟膏，將家兔右側(cè)背部脫毛702而不受傷，24h后，用75%乙醇消毒。按文獻(xiàn)2-3要領(lǐng)，A組于

4、脫毛處敷貼“咳喘寧貼膏含生藥量4g，8h后去掉，天天1次，共貼6次；B組于脫毛處敷貼“咳喘寧貼膏含生藥量4g，6h后去掉，隔天1次，共貼4次；組脫毛處敷貼滴4L生理鹽水的空缺紗膠貼劑。然后輕輕按壓2次，再用不干膠布結(jié)實(shí)，分籠豢養(yǎng)。末次撤除受試物后，用溫水撤除殘留受試物，于去掉受試物1、24、48、72h至7d，逐日不雅察動(dòng)物的體重、皮膚毛發(fā)、飲食、二便、呼吸、眼和黏膜的變革、精力狀態(tài)、四肢運(yùn)動(dòng)及殞命環(huán)境。假設(shè)對(duì)完備皮膚無毒性反響，那么在家兔左側(cè)背部脫毛702，24h后，用碘伏和75%乙醇消毒皮膚，再用消毒處置懲罰的400號(hào)細(xì)砂紙?jiān)诿撁幵斐刹羵?，使皮膚出現(xiàn)麋集出血點(diǎn)，以滲血為度，立即在擦傷部位

5、敷貼受試物。詳細(xì)要領(lǐng)及不雅察指標(biāo)同上，并舉行三組的比較比力。如遇殞命，應(yīng)實(shí)時(shí)舉行尸檢和肉眼不雅察，當(dāng)肉眼可見病變時(shí)，應(yīng)舉行病理構(gòu)造學(xué)查抄。HT“咳喘寧貼膏凹凸劑量應(yīng)用后，完備皮膚及破壞皮膚家兔皮毛光芒正常，對(duì)家兔的飲食、二便、呼吸、眼和黏膜變革，精力狀態(tài)，四肢運(yùn)動(dòng)均未造成任何影響，破壞皮膚均在給藥后第2d出現(xiàn)點(diǎn)狀血痂，第7d內(nèi)脫痂病愈。在不雅察期14d內(nèi)未出現(xiàn)急性毒性反響，無一只家兔殞命。與比較組體重比力，效果見表1。表“咳喘寧貼膏對(duì)皮膚急性毒性試驗(yàn)家兔體重的影響表1表現(xiàn):A、B組與組比力無明顯性差異(P0.05)，說明本藥對(duì)家兔體重?zé)o影響。2.2“咳喘寧貼膏的皮膚刺激性試驗(yàn)4-5動(dòng)物分組：將

6、12只豚鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為A組完備皮膚組、B組破壞皮膚組2組，每組6只，牝牡各半。操縱要領(lǐng)：按文獻(xiàn)1要領(lǐng)，于給藥前24h將豚鼠脊柱兩側(cè)對(duì)稱脫毛2塊而不損傷皮膚，每塊去毛面積約45約相稱于豚鼠體外貌積的10%，詳細(xì)操縱要領(lǐng)同皮膚急性毒性試驗(yàn)脫毛法。給藥接納擺布側(cè)自身比較。A組用75%乙醇消毒后，左側(cè)脫毛處敷貼“咳喘寧貼膏含生藥量4g，右側(cè)敷貼滴生理鹽水4L的空缺紗膠貼劑，8h后去掉，天天1次，一連給藥6d。B組用碘伏、75%乙醇消毒皮膚，再用消毒處置懲罰的400號(hào)細(xì)紗紙?jiān)诿撁幵斐刹羵蛊つw出現(xiàn)麋集出血點(diǎn)，以滲血為度，立即在擦傷部位敷貼受試物，詳細(xì)要領(lǐng)同A組完備皮膚組，天天1次，一連給藥

7、6d。末次敷貼受試物后，用溫水撤除殘留受試物，別離于去掉受試物后1、24、48、72h不雅察涂抹部位有無紅斑和水腫環(huán)境，是否有色素冷靜、出血點(diǎn)、皮膚粗糙或皮膚菲保按文獻(xiàn)6中“皮膚刺激性反響評(píng)分尺度逐日舉行刺激反響評(píng)分，記載各組逐日的評(píng)分值，盤算刺激指數(shù)均勻值:刺激指數(shù)均勻值=紅斑形成總分+水腫形成總分/動(dòng)物總數(shù)，按文獻(xiàn)6中“皮膚刺激強(qiáng)度評(píng)價(jià)尺度評(píng)價(jià)皮膚刺激強(qiáng)度。見表2。顛末不雅察創(chuàng)造，豚鼠完備皮膚組與破壞皮損組敷貼“咳喘寧貼膏后1h，豚鼠皮膚用藥部位有不顯著紅斑，個(gè)體出現(xiàn)顯著紅斑，無水腫，刺激強(qiáng)度為輕度刺激性，但以上皮膚改變?cè)谌コ幬锖?8h內(nèi)漸漸消散，各組自身比較部位均無紅斑、水腫出現(xiàn)，刺激

8、強(qiáng)度小于0.56，為無刺激性反響。兩組皮膚均無色素冷靜、出血點(diǎn)、粗糙和菲薄環(huán)境，損傷皮膚組動(dòng)物皮膚有點(diǎn)狀血痂，至48h開始脫落，給藥區(qū)與其自身比較區(qū)無顯著差異P0.05，故血痂是擦傷所致，非藥物引起，且破壞皮膚組動(dòng)物皮膚光芒程度、彈性與完備皮膚組無明顯差異。表2“咳喘寧貼膏對(duì)豚鼠皮膚的刺激試驗(yàn)注：A無刺激性;B輕度刺激性2.3“咳喘寧貼膏的皮膚過敏試驗(yàn)3，7皮膚過敏試驗(yàn)是通過動(dòng)物重復(fù)打仗受試物后，不雅察機(jī)體免疫體系在皮膚上的反響。是應(yīng)用受試物后產(chǎn)生免疫學(xué)通報(bào)的一種皮膚反響。在動(dòng)物初次打仗供試品一段時(shí)間后，再次舉行供試品的引發(fā)打仗，可不雅察動(dòng)物是否已出現(xiàn)過敏狀態(tài)，然后再通過不雅察引發(fā)打仗后的反響

9、來判斷受試動(dòng)物有無產(chǎn)生過敏反響。動(dòng)物分組：將24只豚鼠按隨機(jī)數(shù)字表法隨機(jī)分為3組，即A組：陰性比較組生理鹽水；B組：藥物貼劑組“咳喘寧貼膏；組：陽性比較組用闡發(fā)純丙酮臨用前配制成1%的致敏濃度和0.1%的引發(fā)濃度，即陽性致敏物為1%2，4二硝基氯代苯DNB，陽性引發(fā)物為0.1%DNB。每組8只，牝牡各半。操縱要領(lǐng)：(1致敏打仗：給藥前24h，將康健豚鼠背部脊柱左側(cè)按文獻(xiàn)1要領(lǐng)脫毛，詳細(xì)操縱要領(lǐng)同皮膚急性毒性試驗(yàn)脫毛法，脫毛區(qū)為33。用溫水洗凈豚鼠背部脊柱左側(cè)皮膚后，A組左側(cè)脫毛區(qū)敷貼滴0.2L生理鹽水的空缺紗膠貼劑；B組左側(cè)脫毛區(qū)敷貼“咳喘寧貼膏含生藥量0.2g；組左側(cè)脫毛區(qū)敷貼滴1%DNB0

10、.2L空缺紗膠貼劑。三組受試物均貼敷6h，試驗(yàn)第7d和第14d以同樣要領(lǐng)各重復(fù)1次，共計(jì)3次。(2引發(fā)打仗：于引發(fā)打仗敷貼前24h，再次在右側(cè)對(duì)稱部位脫毛33,詳細(xì)要領(lǐng)同上。于致敏打仗末次給藥后14d第28d在各組動(dòng)物背部右側(cè)脫毛區(qū)，A組敷貼滴0.2L生理鹽水的空缺紗膠貼劑;B組敷貼“咳喘寧貼膏含生藥量0.2g;組敷貼滴0.1%DNB0.2L空缺紗膠貼劑結(jié)實(shí)，三組均貼敷6h后，去除并用溫水洗凈受試物，馬上不雅察。然后于24、48、72h再次不雅察皮膚過敏反響環(huán)境，按文獻(xiàn)6中“皮膚過敏反響程度的評(píng)分尺度賜與評(píng)分，盤算各組各時(shí)間均勻分值，以反響受試物的致敏強(qiáng)度，同時(shí)不雅察豚鼠是否有站立不穩(wěn)、休克等

11、滿身過敏反響，按公式盤算致敏反響產(chǎn)生率：致敏反響產(chǎn)生率=有過敏反響動(dòng)物數(shù)無論程度輕重/動(dòng)物總數(shù)100%，按文獻(xiàn)6中“皮膚致敏性評(píng)價(jià)尺度根據(jù)致敏反響產(chǎn)生率評(píng)價(jià)致敏性。效果見表3。表3“咳喘寧貼膏對(duì)豚鼠皮膚過敏反響分值及評(píng)價(jià)藥物貼劑組與陰性比較組致敏引發(fā)打仗后不雅察，馬上至72h引發(fā)打仗部位均未出現(xiàn)紅斑及水腫，致敏率為0，陽性比較組自引發(fā)給藥6h后，馬上不雅察該組8只豚鼠皮膚：2只出現(xiàn)顯著紅斑為22分，此中1只伴委曲水腫為11分；6只出現(xiàn)嚴(yán)峻紅斑為36分，此中1只伴皮膚隆起約1水腫為31分，此中3只伴委曲水腫為13分，總積分29分，24h開始消退總積分為20分，48h總積分15分，72h后可見紅斑

12、及水腫，總積分為10分，致敏率100%。與A、B組比力，有顯著差異，表白“咳喘寧貼膏對(duì)豚鼠皮膚無致敏作用。3結(jié)論支氣管哮喘及慢性支氣管炎是臨床上常見又難治的呼吸道疾病，無論中醫(yī)西醫(yī)如今對(duì)其都缺乏抱負(fù)的治療要領(lǐng)?！翱却瓕庂N膏是經(jīng)導(dǎo)師多年臨床驗(yàn)證，并結(jié)合當(dāng)代藥理研究，重復(fù)挑選研制而成的用于治療支氣管哮喘及慢性支氣管炎行之有用的外用穴位貼劑。本貼劑敷貼于穴位外貌，一是通過透皮汲取而發(fā)揮藥物自己的治療作用；二是通過對(duì)相干經(jīng)絡(luò)腧穴的刺激而發(fā)揮經(jīng)絡(luò)體系的調(diào)解作用；三是該藥貼多年來常在“三伏天利用，能起到“時(shí)間療法作用，三重治療而到達(dá)健脾益腎、落氣平喘、化痰止咳的綜合治療作用，越發(fā)有用地促使全愈?！翱却瓕庂N

13、膏免疫學(xué)實(shí)行8也表白，該貼劑能進(jìn)步機(jī)體的免疫成效，有較好的化痰平喘作用。本實(shí)行效果表白：“咳喘寧貼膏豈論外用于家兔完備皮膚，照舊破壞皮膚均無急性毒性；外用于豚鼠完備皮膚，特殊是破壞皮膚有輕度刺激性，但給藥后48h內(nèi)可自行消散，其試驗(yàn)利用劑量是臨床用藥藥量的6倍，且由于“咳喘寧貼膏在臨床應(yīng)用時(shí)不是重復(fù)在同一穴位貼敷，故不影響藥物治療的一連性；外用于豚鼠皮膚無過敏反響。從毒理學(xué)方面說明“咳喘寧貼膏穴位貼敷治療支氣管哮喘和慢性支氣管炎是寧靜的外用制劑，值得臨床推廣應(yīng)用及開拓新產(chǎn)物。由于本處方不含毒性藥物，故按文獻(xiàn)6要求無需舉行恒久毒性試驗(yàn)。參考文獻(xiàn)：1郝慶幸.實(shí)行動(dòng)物學(xué).第2版.上海：第二軍醫(yī)大學(xué)出書社，2002：184-185.2謝秀瓊.中藥新制劑開拓與應(yīng)用.北京：人民衛(wèi)出生版社，2002：565-570.3錢芳，楊戒驕，杜琪,等.傷瘍愈軟膏皮膚毒性實(shí)行研究J.中國(guó)藥房,2022,157：405-406.4陳奇.中藥藥理實(shí)行要領(lǐng)學(xué).北京:人民衛(wèi)生出書社，1