1、第五章 DNA及基因組1The Runners-Up基因編輯技術CRISPR成像技術CLARITYHuman Stem Cells from Cloning（克隆人體胚胎干細胞）Mini-Organs(迷你器官）Cosmic Particle Accelerators Identified（宇宙粒子加速器）Perovskite Solar Cells(鈣鈦礦型太陽能電池)Why We Sleep（我們?yōu)槭裁匆X）Our Microbes, Our Health（我們的微生物）In Vaccine Design, Looks Do Matter（疫苗設計）2BREAKTHROUGH OF TH

2、E YEAR 2013:Runners up恐龍向鳥類進化The birth of birds年輕血液助推返老還童Young blood fixes old機器人自主合作Robots that cooperate仿人腦芯片Chips that mimic the brain印尼洞穴藝術Europes cave art has a rival治愈糖尿病的細胞Cells that might cure diabetes操控記憶Manipulating memories立方體衛(wèi)星Rise of the CubeSat擴充生命遺傳密碼 Giving life a bigger genetic alph

3、abet3BREAKTHROUGH OF THE YEAR 2014:Landing on a CometCombination therapies that help harness T cells and other immune cells in the cancer fight are a key area to watch.American Association for the Advancement of Science Science 2014;346:14505BREAKTHROUGH OF THE YEAR 2015:Clustered Regularly Interspa

4、ced Short Palindromic Repeats成簇的、規(guī)律間隔的短回文重復序列Runner Upthe year of the dwarf planetKenna wake human skeletonthe regeneration of Psychologythe discovery of new racefocused on the deep mantle flowthe successful development of the Ebola vaccine yeast production of opioid drugs the brain has lymphatic ch

5、annels Baer no loopholes in the experiment to confirm the quantum strange characteristics CRISPRs技術是一種由RNA指導Cas蛋白對靶向基因進行修飾的技術。 7基因組編輯技術可以實現三種基因組改造，即基因敲除，特異突變的引入和定點轉基因基因組編輯技術可以實現三種基因組改造，即基因敲除，特異突變的引入和定點轉基因基因組編輯是研究基因功能的重要手段之一，也可被用于人類遺傳性疾病的治療，因此這類技術成為現代分子生物學的研究熱點8Areas to Watch in 2016A physics satelli

6、teDog evolutionGravitational waves一、核酸研究簡史 第一階段：核酸的發(fā)現第二階段：發(fā)現核酸是遺傳物質第三階段：為分子生物學奠定基 礎的時期第四階段：分子生物學高速發(fā)展時期第一節(jié) DNA的結構與功能91889年 R.Altman 從動物細胞與酵母 菌中制備了核酸 1869年 F.Miescher 從膿細胞中得到 核質“Nuclein”第一階段：核酸的發(fā)現1894年 A.Kossel 和A.Neumann 從胸腺 中提取核酸101930年 正式提出核酸分為兩大類： 核糖核酸（RNA） 脫氧核糖核酸（DNA）1904年 Hammars 證明核酸中的糖是戊糖.1909

7、年 Levene和Jacobs鑒定核酸中的糖 是D-核糖.1912年 Levene 認為核酸由4種核苷酸 組成1929年 Levene 和Jacobs 確定胸腺核苷酸 中的糖是2-脫氧-D-核糖 11第二階段：發(fā)現核酸是遺傳物質 1944年 Avery等揭示了DNA是細菌的遺傳物質有莢膜的光滑型肺炎球菌（S型） 致病無莢膜的粗糙型肺炎球菌（R型） 不致病12 R型菌 R型菌 R型菌 + S型菌DNA S型菌DNA S型菌DNA （經蛋白酶水解） （經核酸酶水解） 部分克隆變?yōu)?部分克隆變?yōu)?不能變?yōu)?S型菌 S型菌 S型菌131952年 HersheyChase 通過噬菌體感染細菌的實驗表明病

8、毒的遺傳物質是DNA。141953年 J.D.Watson 和 F.Crick建立 了DNA雙螺旋結構模型 第三階段：為分子生物學奠定基礎的時期151958年 * Kornberg等發(fā)現了DNA聚合酶 ( DNA polymerase) * Meselson 等提出半保留復制， 闡明DNA復制的機理 * Crick提出了遺傳信息傳遞的 中心法則161965年 中國科學家人工合成牛胰島素1970年 Temin等發(fā)現了從RNADNA反轉錄現象， 使中心法則更完善1961年以后Jacob、Nirenberg和 Monod 等取得三個有意義的進展： 1) 證實了mRNA攜帶著DNA到蛋白質合成機制所

9、需要的信息 2) 發(fā)現了遺傳密碼 3) 發(fā)現了蛋白質依靠tRNA和核糖體的幫助翻譯17遺傳信息傳遞的中心法則（central dogma）DNAmRNA轉錄多肽鏈翻譯蛋白質翻譯后加工DNA復制逆轉錄RNA復制18第四階段：分子生物學高速發(fā)展時期1.1971年 限制性內切酶發(fā)現，DNA的 分離成為可能192. 直讀核苷酸序列方法 (1975年Sanger發(fā)明) 203. DNA體外重組技術 (1972年 Berg發(fā)明) 211982年 中國科學家人工合成酵母 丙氨酸t(yī)RNA1985年 Mullis建立PCR技術1981年 T.Cech發(fā)現四膜蟲rRNA前體的 自我拼接, 稱為ribozyme.

10、22人類科學史上的三大工程 人類基因組計劃曼哈頓原子計劃阿波羅登月計劃 1990年 美國正式啟動人類基因組計劃。(human genome project,HGP) 231999年7月 中國：3號染色體短臂30Mb區(qū)域（1%項目） 。 2001年8月 26日,繪制完成“中國卷” 人類基因組計劃參加國家： 美、英、日、法、德、中242003年4月六國政府首腦聯名發(fā)表六國政府首腦關于完成人類基因組序列圖的聯合聲明。251997年 英國愛丁堡羅斯林研究所首次 育成克隆羊。 26水稻基因組（Rice Genome）2001年10月，中科院、科技部和國家計委聯合向全世界宣布，中國率先完成水稻（秈稻）基因

11、組工作“框架圖”的繪制2002年4月5日，在Science 雜志上以封面文章的形式發(fā)表。 27*后基因組計劃（post-genome project） 又稱為功能基因組學 （functional genomics）* 蛋白質組（proteome）計劃 又稱為蛋白質組學（proteomics）28* 隨著許多新的RNA功能陸續(xù)被發(fā)現， 2000年各國科學家提出了RNA組的研究，稱為RNA組學（RNomics）* 生物信息學 (bioinformatics)* 系統(tǒng)生物學 (systems biology)29二、DNA研究的臨床應用 1. 疾病發(fā)病機理的研究 1） 遺傳性疾病 基因變異或基因缺陷

12、是疾病發(fā)生的根 本原因如:鐮刀狀紅細胞性貧血的致病因素是由 于珠蛋白第6位氨基酸由谷氨酸突變?yōu)?纈氨酸。 30 如：心血管疾病 型高脂蛋白血癥的形成主要是由于ApoE基因中第112位和第158位的G和C發(fā)生變異，蛋白質肽鏈上原來 Arg 變成Cys， 失去與ApoE受體結合的能力，使血脂升高312） 腫瘤癌基因激活和抑癌基因失活分化受阻腫瘤細胞（永生型） 32 2. 疾病的基因診斷 DNA診斷： *快速DNA點雜交 *限制性內切酶酶譜分析法 *DNA限制性片段長度多態(tài)性 分析法 （RFLP） *聚合酶鏈反應（PCR）產前診斷、植床前診斷 33 A BKb 1 2 3 1 2 3 Kb6.7 h

13、cs-B5.8 hcs-A3.8 hGH-N3.0 hGH-V1.2 hHG-V25.021.817.914.8單純性生長激素缺乏癥(IGHD)(isolated growth hormone deficience)圖中 A為BamHI酶解片段與hGH cDNA探針雜交放射自顯影圖 B為HindI酶解片段與hGH cDNA探針雜交放射自顯影圖 1 為正常人. 2 為IGHD患者. 3 為雜合子DNA hcs 為人絨毛膜促乳素. hGH 為人生長激素8.3 hcs-L34父親母親孩子GTCGTACGTGACACACACACACACACACACAGTACGATACGTGTCGTACGTGACACA

14、CACACACACACACACAGTACGATACGTGTCGTACGTGACACACACACACACACACACACAGTACGATACGTGTCGTACGTGACACACACACACACACACAGTACGATACGTGTCGTACGTGACACACACACACACACACACAGTACGATACGTGTCGTACGTGACACACACACACACACACAGTACGATACGT父親 母親 孩子46bp42bp40bp42bp42bp46bp40bp42bp40bpPCR結果的凝膠電泳：圖：某個CA2核苷酸重復的微衛(wèi)星在一個家系中的PCR檢測結果示意圖短串聯重復(short tandem

15、repeat,STR)多態(tài)性分析35 3. 疾病的預防與基因治療 1）采用基因工程產生疫苗藥物 2）基因治療36構件分子核苷酸nucleotide核苷nucleoside 磷酸phosphate 堿基bases 戊糖pentose 嘧啶pyrimidine 嘌呤purine 核糖ribose 脫氧核糖deoxyribose 三、核酸的結構核酸（多核苷酸Polynucleotide)（一）分子組成371.含氮有機堿 （1）嘧啶堿：胞嘧啶Cytosine 胸腺嘧啶Thymine 尿嘧啶Uracil （2）嘌呤堿：腺嘌呤Adenine 鳥嘌呤Guanine 3839 堿基上有修飾： 核苷的大寫字母前

16、加上代表修飾基團 的小寫字母右上方寫明堿基的第幾位 m2G 表示 2-N-甲基鳥苷 位置 m32 2 7G 表示 N2，N2，7-三甲鳥苷 數量 S4U 表示 4-硫代尿嘧啶甲基(3)稀有堿基40R苷412. 戊糖42順式腺苷反式腺苷3.核苷：C-N 糖苷鍵 嘌呤堿N9嘧啶堿N1戊糖C143假尿苷（C5C1）1OHOCH2OHOH1NHCOO5HN444. 核苷酸4512345464753環(huán)核苷酸 cAMP 、 cGMP 表示磷酸與3、5核苷 羥基相接 48（二）游離核苷酸的功能 ATP、 GTP、 UTP、 CTP 參于代謝 5-FU（5-氟尿嘧啶） 抗癌藥物 6-MP（6-巰基嘌呤） 抗癌

17、藥物 AZT 抗AIDS病毒（Azido thymidine 疊氮胸苷） cAMP 、cGMP 第二信使 495-氟尿嘧啶 FdUMP 胸苷酸合成酶 （5-FU） dTMP合成氨蝶呤/甲氨蝶呤 二氫葉酸還原酶抑制競爭抑制抑制結合胸腺嘧啶(T)5-氟尿嘧啶(5-FU)50次黃嘌呤(H)6-巰基嘌呤(6-MP)6-巰基嘌呤的結構651甲酰甘氨酰胺核苷酸（FGAR）PRPP谷氨酰胺（Gln）=PRA甘氨酰胺核苷酸（GAR）甲酰甘氨脒核苷酸（FGAM）5-氨基異咪唑-4-甲酰胺核苷酸（AICAR）5-甲酰胺基咪唑-4-甲酰胺核苷酸（FAICAR）IMP次黃嘌呤（H）PRPPPPi=AMP=PRPPPP

18、i=腺嘌呤（A）GMP=PRPPPPi鳥嘌呤(G)6-MP6-MP6-MP6-MP6-MP6-MP52AZT53（三）DNA的一級結構 1. DNA的一級結構是指脫氧核苷酸 （堿基）在DNA分子中的排列順序 2. DNA分子中脫氧核苷酸的連接方式： 3，5磷酸二酯鍵 3.直線形DNA有二個末端： 5磷酸末端 3羥基末端 54 A. 分子結構式 B線條式 C字母式551)端粒:真核生物染色體DNA是線性的,每復制一次， 子鏈的5有缺失（50-100bp）。3端有特殊的序列,線性DNA末端的復制必須的 -端粒端粒特征: 3端是由數百個串聯重復G豐富的6個核苷酸組成（AGGGTT）n,5-10kb,

19、高度保守人:5-AGGGTTAGGGTT-3端粒能穩(wěn)定染色體 4. 端粒（telomere）DNA結構與功能56線性DNA復制的末端 57熒光原位雜交顯示端粒和端粒序列58 端粒DNA的功能 a 保證線性DNA的完整復制 b 維持染色體的穩(wěn)定 c 決定細胞的壽命592）端粒酶（telomerase)-防止端?？s短的酶組成 蛋白質(DNA聚合酶)+RNA(合成端粒DNA的模板)唯一攜帶RNA模板的逆轉錄酶人端粒酶: 模板(RNA-端粒酶):3-CAAUCCCAAUC-5 合成(DNA): 5-AGGGTT-360正常體細胞缺乏端粒酶活性，故染色體隨細胞分裂而變短，細胞隨之衰老。人的生殖細胞，部分

20、干細胞染色體，腫瘤細胞和永生細胞系具有端粒酶活性。端粒酶和衰老、腫瘤有關：612009諾貝爾生理學或醫(yī)學獎 - 端粒酶（telomerase）Elizabeth Blackburn UCSFJack SzostakHHMI Carol GreiderJHU62DNA末端1.RNA和DNA單鏈互補序列識別結合2.以RNA為模板 的逆轉錄過程3.再發(fā)動新一輪的合成延長,合成較長的重復序列3）端粒酶的作用機制634.以延長的DNA單鏈為模板,3-OH為引物合成富含C的互補鏈645.哺乳動物中端粒末端形成大的環(huán)狀結構,環(huán)狀DNA+蛋白質 保護染色體3端的穩(wěn)定 端粒的環(huán)狀結構65 1)DNA分子十分巨大

21、，最小的DNA分子 也包含有幾千bp，分子量在106以上。 人類基因組含有約3.1647 109bp。5. DNA的一級結構特點6667 2)每一物種DNA都具有其特有的堿基 組成3) 有些堿基常被甲基修飾，稱為甲基 化(methylation)，是重要的表觀遺傳修飾。68(1) 細菌DNA甲基化 各種細菌都具有一定的甲基化模式， 在DNA分子中平均 1%的堿基被甲 基化。甲基化最多的是腺嘌呤和胞嘧啶69細菌DNA甲基化作用的生物學意義 a. 影響DNA的構象, 影響蛋白質與DNA的 相互作用, 以調節(jié)DNA 復制、轉錄、修 復、重組和包裝的過程。 如：發(fā)生在-GATC-的腺嘌呤，于DNA 復

22、制產生的錯誤堿基修復中起作用 b. 多發(fā)生于內切酶酶切位點，防止噬菌體 入侵，是一種細菌自身保護機制。 70 ( 2)真核細胞的DNA甲基化 胞嘧啶甲基化最多 約5%,生成為5-甲基胞嘧啶，大多發(fā)生在 CpG重復序列中。 可逆反應過程 甲基化酶與去甲基化酶成對存在，都對 CpG序列有特異性 71 CpG島 多種基因的啟動子區(qū)和第一外顯子（60）富 含CpG，稱為CpG島。 長約1-2kb，通常為非甲基化狀態(tài)。 在人類基因組內，存在有近3萬個CpG島； 散在的CpG則多為甲基化的。 DNA甲基化通常抑制基因表達，與人類 發(fā)育和腫瘤疾病關系密切。 72 6. DNA的一級結構的測定 1) 雙脫氧末

23、端 終止法Sanger法 2) 化學法Maxan-Gilbert法73Sanger雙脫氧末端 終止法測序的基本原理74Maxan-Gilbert化學法測序基本原理75DNA自動序列測定的基本原理76第一步：加入復制終止劑熒光檢測探頭電泳，看誰跑得快77第二步：熒光檢測78DNA全自動分析儀：ABI Prism 3700型全自動遺傳分析儀安瑪西亞DNA序列分析系統(tǒng)型號：MegaBACE 500/1000/4000 79（四）DNA的二級結構 Dr.Crick Dr.Watson801. DNA雙螺旋結構的提出 Watson和Crick在1953年提出了著 名的DNA雙螺旋結構模型。這個模 型不僅

24、解釋了DNA的理化性質，而 且將結構與功能聯系起來，大大推 動了分子生物學的發(fā)展。 81 * 雙螺旋提出的根據 1) DNA纖維晶體的x-衍射研究 1952年 Wilkins等 2) Chargaff的堿基分析 AT GC ATGC的比值 不同來源DNA是不同的 3) 堿基和核苷酸的結晶學資料82清晰的DNA X衍射圖83DNA 的X衍射圖Maurice Wilkins1916-2004Rosalind Elsie Franklin19201958 Chargaff 原則 （1）不同種生物DNA分子中的核苷酸排列順序不同 （有種族特異性） （2）同種生物不同組織器官細胞中DNA分子的核苷酸 排

25、列順序相同 (無組織器官特異性)（3）某一特定生物，其DNA堿基組成恒定（4）任何生物DNA堿基組成都符合 A=T， G=C， A+G=T+C8485 a. DNA雙鏈反向平行b. 堿基配對 * AT GC * 堿基是一個平面環(huán)分子。堿基平面垂直 于螺旋軸 * 相鄰堿基相距0.34nm，每10個堿基旋 轉1圈，雙螺旋螺距為3.4nm，相鄰兩個 堿基正好相差3602. DNA的雙螺旋結構的特點： 1) B型DNA結構 8687 堿基配對結構基88c在DNA雙螺旋分子上交替存在著 大溝和小溝 蛋白質通過大溝和小溝識別堿基序 列的特異性，其中大溝對于的識別、 結合尤為重要。89d維持雙螺旋的力量 氫

26、鍵 堿基堆積力（base stacking force） 堿基平面疊在一起，存在Van der Waals力 堿基 疏水性，在雙螺旋內部形成疏水的力量 -離子鍵903. DNA的右手螺旋和左手螺旋 * DNA構象與核苷酸順序堿基組成有關 并取決于環(huán)境條件（鹽類、相對濕度） * 主要構象類型：右手螺旋：A、B、C、D、E、T 型DNA左手螺旋：Z 型DNA91濕度和鹽類對DNA構象的影響多核苷酸鹽類相對濕度構象類型Na+75ANa+92BLi+44CLi+66BT2噬菌體DNANa+60TDNARNA雜合鏈Na+3392A天然RNA（逆轉錄病毒）Na+高達92ANa+43ZNa+高達92ALi+

27、81B天然DNAPoly (dG-dC)9293 右手螺旋 1）B型 生理條件下最普遍的形式 2）A型 RNA雙螺旋及DNARNA 雜交鏈（空間位阻小，有利于轉錄） 3）C型 線粒體DNA及一些病毒 4）D型、E型 存在于噬菌體等生物中94 3. 左手螺旋Z型DNA 1) 發(fā)現: 1979年 A. Rich等人工合成六聚體 d（CGCGCG）單晶進行X射線 衍射分析，數據表明是Z型骨架, 左手雙螺旋DNA 2) ZDNA的結構特點: a. 每個螺旋由12個堿基對構成，螺距 4.46nm，直徑 1.8nm9596 b. 脫氧胞苷的堿基取反式構象，脫氧 鳥苷的堿基是順式。在ZDNA中 GC交替而出

28、現順式和反式構象 交替。使糖-磷酸的主鏈的走向呈 “之”字型，這 樣Z-DNA主鏈呈鋸 齒狀（Zig-Zag）走向。 c. 大溝消失，小溝變深97d. 體內存在的Z-DNA序列特點: (1) DNA序列必須是嘌呤嘧啶交替排列 如： CGCGCG GCGCGC (2)序列中必須有5-甲基胞嘧啶的存在 98E. 與Z-DNA結合的特殊蛋白質FZ-DNA有利于DNA 的負超螺旋 打開G抗Z-DNA抗體993）Z-DNA的功能： 基因表達有關 Z-DNA抗體常常緊密地結合在染色 體的疏松部位,增強轉錄活性的位點。 100 基因調控 Z-DNA可能參與識別調控蛋白質。 基因重組 Willia等做的黑粉菌

29、實驗指出, Z-DNA 在基因重組中起非常重要的過渡作用. 在黑粉菌中有一種rec1酶能使染色體 第一次配對后互相交換片段, 在配對時 由rec1酶使Z-DNA的雙鏈產生 , 并且這 種酶與Z-DNA親和力比B-DNA高75 倍, Z-DNA與rec1酶緊密結合是這一 時期的主要特征.101 疾病治療與新藥開發(fā) Kim等研究表明, 一種關鍵的天花病毒蛋 白 E3L蛋白(已知該蛋白是病毒摧毀動 物細胞的防御系統(tǒng)所必需的)是通過 Z-DNA結合、干擾防御系統(tǒng)的運行來 行使功能的。102表2 右手螺旋與左手螺旋DNA分子的比較_項 目 A-DNA B-DNA Z-DNA_螺旋方向 右旋 右旋 左旋每

30、轉1圈堿基數 11 104 12螺旋直徑 2.55nm 2.37nm 1.84nm螺距 2.46nm 3.32nm 4.56nm堿基平面的傾角 19o l o 9 o大溝 窄，很深 寬，較深 平小溝 很寬，淺 窄，較深 很窄, 深_1034.三螺旋DNA（H DNA ；triple-helical DNA ） 三鏈DNA（triple strands of DNA) 是一條DNA鏈在DNA的大溝與DNA雙螺旋中的一條DNA鏈以氫鍵相結合形成的三股螺旋結構。 1041051）三螺旋DNA結構：（1） 三螺旋DNA是在DNA雙螺旋結構的 基礎上形成的，三鏈區(qū)的三鏈均為 同型嘌呤（homo puri

31、ne HPU）或 同型嘧啶 (homo pyrimidine HPY）106 （2） 根據三條鏈組成及相對位置可分為 Pu-Pu-Py（偏堿性介質中穩(wěn)定） Py-Pu-Py（偏酸性介質中穩(wěn)定）（3） 鏈中的堿基配對方式 兩個堿基符合Watson-Crick堿基配對 另個堿基按Hoogsteen模型 如：T A - T C G - C(第三位上的 “C” 必須質子化) A A - T 107108嘧啶核苷酸嘌呤核苷酸(a)嘧啶-嘌呤-嘧啶三螺旋DNA序列(b)三螺旋DNA結構示意圖ab1092） 生物學意義及應用： (1)三螺旋DNA結構常位于DNA一些重要 的部位。 如：復制的起始點或終點，轉

32、錄的調 控區(qū)或調節(jié)蛋白結合位點以及DNA重 組位點，提示與這些功能相關。 (2)豐富了DNA結構學說110b. 用寡聚DNA片段封閉轉錄因子結合 點關閉有害基因活病毒基因。 （抗腫瘤，病毒，寄生蟲等） (3) 基因治療中的應用a. 單鏈DNA片段可攜帶切割劑（核酸 內切酶，EDTA-Fe等）攜帶至DNA 的特定位點，選擇性切斷DNA。111 5.四螺旋DNA 1)發(fā)現在真核染色體末端含有一個 富含G的單鏈 DNA 尾巴，它在體內 的超螺旋 應力作用下，可自身回折 形成 Hoogsteen G-G 堿基對。兩個 DNA 分子或染色體分子可彼此連接 起來形成一個局部的四螺旋結構。112113 2)

33、 四螺旋DNA的結構 *四螺旋結構由多個G-四堿基體形 成右手螺旋，每圈含13個四堿基 體DNA。 *在四堿基體中，四條鏈以對稱和反 對稱構象交替存在。1141153) 可能的生物學意義 兩個DNA分子或染色體分子可彼此連接起來形成一個局部的四螺旋結構,這種結構可能起著穩(wěn)定染色體的作用 116（五）DNA超螺旋結構（三級結構） 1.DNA三級結構就是指雙螺旋DNA鏈 進一步扭曲、盤旋形成超螺旋結構。 *超螺旋： 負超螺旋（negative supercoil） 正超螺旋(positive supercoil)117 2. 生物體的閉環(huán)DNA都以超螺旋形式 存在, 如質粒、病毒、線粒體的DNA

34、118（六）真核生物染色體DNA 真核生物DNA分子呈線狀，其超螺旋結構不同于上述環(huán)狀DNA。它們主要存在于染色體，以核小體的形式再進一步盤繞折疊。119*核小體Nucleosome 1）核小體核心：組蛋白Histone八聚體 （H2A,H2B,H3,H4各兩分子） 1.75圈DNA超螺旋（146bp） 2）連接區(qū)：組蛋白H1 和 20-80 bp DNA雙螺旋120121DNA （2nm）核小體鏈（ 11nm，每個核小體200bp）纖絲（ 30nm，每圈6個核小體）突環(huán)（ 150nm，每個突環(huán)大約75000bp）玫瑰花結（ 300nm ，6個突環(huán)）螺旋圈（ 700nm，每圈30個玫瑰花）染色體（ 1400nm， 每個染色體含10個玫瑰花200bp）真核生物染色體DNA組裝122DNA的質量、長度和濃度計算方法 1. 長度 0.34 bp = （nm) 2. 分子質量 660 bp = （dal) 3. 濃度 50 OD260nm = g /ml (光徑為1cm)123(七)DNA的變性、復性和雜交 1. 變性（denaturation) 1）概念 ： 當DNA的二級結構和三級結構受到物理化學等因素的破壞而解體，其一級結構核苷酸間共價鍵并不斷裂，使配對堿基間氫