1、關(guān)于病毒的遺傳分析第一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第一節(jié) 噬菌體的繁殖和突變型一 噬菌體的繁殖 （一）烈性噬菌體的感染周期 （二）溫和性噬菌體的感染周期 1 溶源周期： 原噬菌體: 溶源性細菌: 溶源性細菌的特點: 2 裂解周期： 溶源性細菌自發(fā)或經(jīng)誘發(fā)裂解細菌 釋放 子噬菌體。第二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二 噬菌體的突變型(一)快速溶菌突變型（r） (二)宿主范圍突變型（h） (三) 條件致死突變型 1 溫度敏感突變型 2 抑制因子敏感突變（sus） 噬菌體 細菌 正常

2、基因 sus+ su- 突變基因 sus su+ 第五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（1）抑制因子敏感突變的概念：例如：噬菌體mRNA基因 細菌tRNA基因反密碼子 正常 突變 突變 正?；颍?TAC 35TAG 3 3ATC 53ATG 5 mRNA 5UAC 3 5UAG 3 3AUC 5 3AUG 5 表型：酪氨酸 終止 5UAG 3酪氨酸酪氨酸3AUC 5 酪氨酸第六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月表8-2攜帶不同專一性抑制基因宿主中sus突變噬菌體的表現(xiàn)（2）噬菌體的抑制因子敏感突變型類型及表現(xiàn) 琥珀型（amber）UAG 赭石型（ocher）UAA 乳白型（

3、opal） UGA 第七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月一般而言，上述三種突變型不能在細菌中生存，但某些細菌突變株帶有抑制三種突變型的基因，事實上是宿主的 tDNA 基因突變，轉(zhuǎn)錄出的tRNA能識別終止密碼子并按第三位堿基擺動的原則，插入相應的氨基酸，故噬菌體具有終止密碼子突變型能夠在此類宿主中，利用宿主的抑制突變特性而正常繁殖。第八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月（二）無義突變與無義抑制突變無義突變：指一個為氨基酸編碼的密碼變?yōu)榻K止密碼的突變。 無義抑制突變：指能抑制無義突變表現(xiàn)的突變。第九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 噬菌體突變型快速溶菌突變型：2宿主范圍

4、突變型:3 條件致死突變型：第二節(jié) 重組測驗第十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 1 噬菌體雜交實驗 r47r+ X r+r104 B 10-6 10-2 B K()親組合：r47r+、r+r104， r+r+ 重組合：r+r+、r47r104， 共525 共370 2 重組值的計算 重組值重組噬菌斑數(shù) X 100 總噬菌斑數(shù)三 Benzer的重組測驗 0.0141在K()上生長的噬菌斑數(shù)X2X100 在B上生長的噬菌斑數(shù) 370X102 X2 X100 525X106第十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第十三張，PPT共三

5、十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三節(jié) 互補試驗 rIIA+B X rIIAB+ 一 互補試驗的概念和原理 1 互補試驗的概念: rII A+ B rII A B+ EcoliK() EcoliK()rII A+ BrII A B+第十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 2 互補試驗的原理 表型 有無功能互補 結(jié)論 反式: A+ B A B+ 反式: A+ B A B+ 3 互補試驗方法斑點測試法4 互補試驗的意義突變型 屬同一順反子野生型 屬不同順反子第十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二 順反子（基因）2 順反試驗：指將兩個

6、擬突變分別處于順式和反式， 根據(jù)其表型確定兩個突變是否是同一基因的試驗。 3 判斷方法: 順式 反式 分析結(jié)論：兩突變 + +/- - + -/- + 表現(xiàn)型 野生型 野生型 屬于兩個順反子 表現(xiàn)型 野生型 突變型 屬于同一順反子1 順反子的概念第十七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第十八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月三 互補測驗及結(jié)果 表8-8 X174突變的互補測驗結(jié)果 順反子 突 變 型 A am8,am18,am30,am33,am35,am50,am86,tsl28, B am14,am16,och5,ts9,tsl16,och1,och8,och11, C o

7、ch6 D am10,amH81, E am3,am6,am27, F am87,am88,am89, amH57,op6, op9,tsh6,ts41D G am9,am32,ts,ts79 H amN1,am23,am80,am90,ts4第十九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第二十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月T4突變型的互補試驗第二十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月四 基因內(nèi)互補1 基因內(nèi)互補的機理第二十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月2 基因內(nèi)互補與基因間互補的區(qū)別第二十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第四節(jié) 缺失作圖一 缺失

8、的特點 1 多bp的缺失； 2 具不可逆性； 3 有部分相同缺失突變型間不能通過重組恢復 野生型表型。二 缺失作圖的優(yōu)點：簡便、精確三 缺失作圖的條件四 缺失作圖的原理 P202原理：凡是能重組的，點突變一定不在缺失區(qū)內(nèi)； 凡是不能重組的，點突變一定在缺失區(qū)內(nèi)。第二十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月五 缺失作圖的方法步驟：如圖8-15 1 將待測點突變（X）先與幾個最大的缺失突變體 分別雜交，從中找出最小不重組和最大可重組 缺失突變； 2 從最小不重組區(qū)（PB242）中減去與之重疊的最 大重組區(qū)（A105）=點突變的位置（A5區(qū)內(nèi)）。 3 將點突變與A5區(qū)內(nèi)的幾個缺失突變體分別雜交

9、 根據(jù)結(jié)果確定：點突變就在A5區(qū)內(nèi)的c2區(qū)內(nèi)。第二十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月C2第二十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第五節(jié) 噬菌體基因組與原噬菌體一 噬菌體的基因組：由49000bp構(gòu)成 1 基因分類 頭部基因： 7個（必需基因：相鄰） 尾部基因： 11個（必需基因：相鄰） 噬菌斑形成必需的基因 復制所需基因：O、P 裂解、釋放所需基因：S、R基因 正調(diào)控基因：N、Q 附著區(qū)：att； 專一性重組所必需：int、xis 噬菌斑形成非必需的基因 溶源化所需：CI、CII、CIII 重組所必需：exo、red 第二十七張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月P1

10、33 圖5-6第二十八張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 2 噬菌體基因組的結(jié)構(gòu)特點:二 原噬菌體與合子誘導 1 原噬菌體： 2 合子誘導： Hfr()X F-受體菌裂解(進入F-后)b+原點d+ c+a+3 合子誘導與整合部位的確定第二十九張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月三 原噬菌體的插入與切除1 原噬菌體的插入與正常切除 P206 圖 8-17 2 原噬菌體的異常切除 P206 圖8-18 （1）轉(zhuǎn)導噬菌體：指帶有細菌基因的噬菌體。 （2）d 轉(zhuǎn)導噬菌體的特點：3 溫和性噬菌體的互補試驗與作圖 (1)與眾多已知位點的點突變作互補試驗，確定缺失區(qū)域 (2)用眾多已知缺失區(qū)域

11、的缺失品系對點突變進行缺失作圖第三十張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第三十一張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月整合態(tài)第三十二張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月attPdgal1dgal2 dgal3 dgal4 dgal5ABEGHM第三十三張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 位點專一性重組的分子機制一、噬菌體的整合和切除1. -DNA對E.coli的整合： POP + BOB BOPPOB 需要整合酶(Int拓撲異構(gòu)酶活性)和整合宿主因子(IHF)參與,非可逆反應。2. -DNA從E.coli的切離： BOPPOB POP + BOB 需要整合酶(Int)、

12、整合宿主因子(IHF)和切除酶(Xis)參與,非可逆反應。第三十四張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月 整合的過程: A. 具有對特異性DNA強烈親和力的Int與attP和attB位點結(jié)合；B. Int的拓撲異構(gòu)酶活性，使兩條雙鏈各自斷開一條單鏈，瞬間旋轉(zhuǎn)然后交換連接，形成Holliday中間體，C. 在另兩條單鏈之間發(fā)生同樣的斷裂重接，從而完成雙鏈間的重組。 返回第三十五張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月二、位點專一性重組的核苷酸序列1. POP:O為15bp(核心)富含A-T的非對稱序列； P為-160 0的160bp序列 P為0 80的80bp序列 共240bp2. BOB:B為-11 0序列 B為0 11序列 共23bp第三十六張，PPT共三十九頁，創(chuàng)作于2022年6月第六節(jié) 環(huán)狀排列與末端重復一 線狀DNA具有環(huán)狀遺傳圖 1噬菌體DNA結(jié)構(gòu)特點：具末端重復（末端冗余） 末端冗余:指DNA分子兩端