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1、分子生物學(xué)章節(jié)習(xí)題第一章 核酸的結(jié)構(gòu)與功能一、選擇題1不參與構(gòu)成DNA的物質(zhì)是AdAMP BdTMP CdUMPDdGMP EdCMP2核酸分子一級(jí)結(jié)構(gòu)的連接方式是A2,3-磷酸二酯鍵 B3,5-磷酸二酯鍵C2,5-磷酸二酯鍵 D糖苷鍵E氫鍵3含有較多稀有堿基的核酸是ArRNA BmRNA CtRNAD核仁DNA E線粒體DNA4已知某雙鏈DNA的一條鏈中A=30% G=24%,其互補(bǔ)鏈的堿基組成,正確的是AT和C 46% BA和T 46%CA和G 54% DT和G 46%ET和C 54%5作為第二信使的核苷酸是AcAMP BcCMP CcUMP DcTMP EAMP6核酸分子中儲(chǔ)存、傳遞遺傳
2、信息的關(guān)鍵部分是A戊糖構(gòu)象 B堿基的旋轉(zhuǎn)角 C堿基序列D戊糖磷酸骨架 E磷酸二酯鍵7用寡聚dT從總RNA中分離mRNA,是利用mRNA分子的哪一種特點(diǎn)A5端的帽子結(jié)構(gòu) B沉降系數(shù)小于25SC分子量小 D3端多聚AE分子中有發(fā)夾樣結(jié)構(gòu)8構(gòu)成核小體的基本成分是ARNA和組蛋白 BRNA和酸性蛋白CDNA和組蛋白 DDNA和酸性蛋白ErRNA和組蛋白9參與hnRNA的剪切和轉(zhuǎn)運(yùn)的RNA是ASnRNA BmRNA CHnRNA DtRNA ErRNA10不是核酸與蛋白質(zhì)復(fù)合物的是A核糖體B病毒C端粒酶D核酶E端粒11連接兩個(gè)核小體核心顆粒的組蛋白是AH1BH2ACH2BDH3EH412. NAD、FA
3、D、CoA三種輔酶在組成上的共同點(diǎn)是A均含有泛酸B均含有尼克酸C都是腺苷酸的衍生物D分子中都含有半胱氨酸E都含有磷酸核糖焦磷酸的核糖基13. 下列堿基對(duì)中,氫鍵數(shù)目正確的是AA=T G=CBA=T GCCAT GCDAT G=CEAU GC14. 關(guān)于核酸電泳的敘述,錯(cuò)誤的是A泳動(dòng)速度與分子大小有關(guān)B泳動(dòng)速度與分子構(gòu)象有關(guān)C聚丙烯酰胺電泳的分辨率最高D分子泳動(dòng)的方向與凈電荷有關(guān)E不能分離核酸或寡核苷酸混合物15. 核酸在260nm處有最大光吸收的原因是A嘌呤環(huán)有共軛雙鍵 B嘌呤和嘧啶環(huán)均有共軛雙鍵C核酸中具有磷酸二酯鍵 D核苷酸中具有N糖苷鍵E戊糖的呋喃型環(huán)狀結(jié)構(gòu)16. 關(guān)于RNA的敘述,正確
4、的是A電泳時(shí)泳向負(fù)極B通常以雙鏈形式存在C主要有mRNA、tRNA、rRNA三種DtRNA含量最多E鏈內(nèi)雙螺旋以A-T、G-C互補(bǔ)17. 維持DNA雙螺旋橫向穩(wěn)定的力是A堿基堆積力 B堿基對(duì)之間的氫鍵C雙螺旋內(nèi)的疏水作用D磷酸二酯鍵E二硫鍵18. DNA的二級(jí)結(jié)構(gòu)是A螺旋B片層C轉(zhuǎn)角D超螺旋E雙螺旋19. 合成DNA的原料是ANTPBNDPCdNTPDdNMPEdNDP20. 可與單鏈DNA 5-GCGTA-3雜交的RNA是A5-CGCAU-3B5-CGCUU-3 C5-UACGC-3D5-AUCGC-3E5-UAGGC-3二、名詞解釋1. DNA的變性與復(fù)性 (denaturation an
5、d renaturation of DNA)2核酸分子雜交(hybridization of nucleic acids) 3增色效應(yīng)與減色效應(yīng)(hyperchromic effect and hypochromic effect) 4Tm三、問(wèn)答題1簡(jiǎn)述Watson-Crick DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)模型的要點(diǎn)。2簡(jiǎn)述真核生物mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。3什么是核酸雜交? 有何應(yīng)用價(jià)值?參考答案一、選擇題1.C2.B3.C4.E5.A6.C7.D8.C9.A10.D11.A12.C13.B14.E15.B16.C17.B18.D19.C20.C二、名詞解釋1雙鏈DNA(dsDNA)在變性因素(如過(guò)酸、過(guò)堿
6、、加熱、尿素等)影響下,解鏈成單鏈DNA(ssDNA)的過(guò)程稱之為DNA變性。DNA變性后,生物活性喪失,但一級(jí)結(jié)構(gòu)沒(méi)有改變,所以在一定條件下仍可恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu)。熱變性的DNA經(jīng)緩慢冷卻后,兩條互補(bǔ)鏈可重新恢復(fù)天然的雙螺旋構(gòu)象,這一現(xiàn)象稱為復(fù)性,也稱退火。2在DNA變性后的復(fù)性過(guò)程中,將不同來(lái)源的DNA單鏈分子或RNA分子放在同一溶液中,只要在DNA或RNA的單鏈分子之間存在著一定程度的堿基配對(duì)關(guān)系,就可以在不同的分子間形成雜化雙鏈,這種現(xiàn)象稱為核酸分子雜交。3DNA變性時(shí),雙螺旋松解,堿基暴露,OD260值增高稱之為增色效應(yīng);除去變性因素后,單鏈DNA依堿基配對(duì)規(guī)律恢復(fù)雙螺旋結(jié)構(gòu),OD260
7、值減小稱為減色效應(yīng)。4DNA的變性從開(kāi)始解鏈到完全解鏈,是在一個(gè)相當(dāng)窄的溫度范圍內(nèi)完成的。在這一范圍內(nèi),紫外光吸收值達(dá)到最大值的50%時(shí)的溫度稱為DNA的解鏈溫度。三、問(wèn)答題1(1)DNA是一反向平行的雙鏈結(jié)構(gòu),脫氧核糖和磷酸骨架位于雙鏈的外側(cè),堿基位于內(nèi)側(cè),兩條鏈的堿基之間以氫鍵相連接。A始終與T配對(duì),形成兩個(gè)氫鍵(A=T),G始終與C配對(duì),形成三個(gè)氫鍵(GC)。堿基平面與線性分子結(jié)構(gòu)的長(zhǎng)軸相垂直。一條鏈的走向是53,另一條鏈的走向就一定是35。(2)DNA是一右手螺旋結(jié)構(gòu)。螺旋每旋轉(zhuǎn)一周包含10bp,每個(gè)堿基的旋轉(zhuǎn)角度為36。堿基平面之間相距0.34nm, 螺距為3.4nm,螺旋直徑為2n
8、m。DNA雙螺旋分子存在一個(gè)大溝和一個(gè)小溝。(3)維持雙螺旋穩(wěn)定的主要力是堿基堆積力(縱向)和氫鍵(橫向)。2(1)大多數(shù)真核生物mRNA在5-端以7-甲基鳥(niǎo)嘌呤三磷酸核苷為分子的起始結(jié)構(gòu),同時(shí)第一個(gè)核苷酸的C2也是甲基化的,這種mGpppNm結(jié)構(gòu)被稱為帽子結(jié)構(gòu)。帽子結(jié)構(gòu)在mRNA作為模板翻譯成蛋白質(zhì)的過(guò)程中具有促進(jìn)核糖體與mRNA的結(jié)合,加速翻譯起始速度的作用,同時(shí)可以增強(qiáng)mRNA的穩(wěn)定性。(2)在真核生物mRNA的3-端,大多數(shù)有一段長(zhǎng)短不一的多聚腺苷酸結(jié)構(gòu),通常稱為多聚A尾。一般由數(shù)十個(gè)至一百幾十個(gè)腺苷酸連接而成。因?yàn)樵诨騼?nèi)沒(méi)有找到它相應(yīng)的結(jié)構(gòu),因此認(rèn)為它是在mRNA生成后才加進(jìn)去的。
9、隨著mRNA存在時(shí)間的延續(xù),這段聚A尾巴慢慢變短。因此,目前認(rèn)為這種3-末端結(jié)構(gòu)可能與mRNA從核內(nèi)向胞質(zhì)的轉(zhuǎn)位及mRNA的穩(wěn)定性有關(guān)。3核酸雜交:熱變性后的DNA片段在進(jìn)行復(fù)性時(shí),不同來(lái)源的變性核酸(DNA或RNA)只要有一定數(shù)量的堿基互補(bǔ)(不必全部堿基互補(bǔ)),就可形成雜化的雙鏈結(jié)構(gòu)。此種不完全互補(bǔ)的雙鏈在復(fù)性時(shí)的結(jié)合稱為核酸雜交。應(yīng)用價(jià)值:應(yīng)用被標(biāo)記的已知堿基序列的單鏈核酸小分子作為探針,在一定條件下與待測(cè)樣品DNA單鏈進(jìn)行雜交,可檢測(cè)出待測(cè)DNA分子中是否含有與探針同源的堿基序列。用此原理,經(jīng)PCR擴(kuò)增后,可用于細(xì)菌、病毒、腫瘤和分子病的診斷。第二章 核苷酸代謝一、選擇題1食物中很少被機(jī)
10、體利用的組分是 A氨基酸B必需脂肪酸C維生素D堿基E己糖2不屬于嘌呤核苷酸從頭合成直接原料的是 ACO2 B甘氨酸C谷氨酸D天冬氨酸E一碳單位3嘌呤核苷酸合成時(shí)首先生成的是 AGMPBAMPCIMPDXMPEUMP4人體嘌呤核苷酸分解代謝的主要終產(chǎn)物是 A尿囊酸B尿酸C乳氫酸D黃嘌呤E尿素5作為第二信使的核苷酸是AcAMP BcCMP CcUMP DcTMP EAMP6嘌呤環(huán)的C-4和C-5來(lái)自ACO2 B丙氨酸C甘氨酸D谷氨酸E天冬氨酸7脫氧核糖核苷酸生成的主要方式是 A由核苷還原B直接由核糖還原C由一磷酸核苷還原D由二磷酸核苷還原E由三磷酸核苷還原8別嘌呤醇治療痛風(fēng)癥是因?yàn)槟芤种?A腺苷脫
11、氫酶B尿酸氧化酶C黃嘌呤氧化酶D鳥(niǎo)嘌呤脫氫酶E核苷磷酸化酶9dTMP合成的直接前體是 AdUMPBTMPCTDPDdCDPEdCMP10Lesch-Nyhan綜合征是因?yàn)槿狈?AHGPRT B腺苷激酶C核糖核苷酸還原酶D腺嘌呤磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶E硫氧化還原蛋白還原酶11嘧啶核苷酸從頭合成的限速反應(yīng)是AUMP的形成B乳清酸的形成CCMP的形成D氨甲酰磷酸的形成E氨甲酰天冬氨酸的形成12. 不需要PRPP作底物的反應(yīng)是 A5-磷酸核糖胺的形成B次黃嘌呤轉(zhuǎn)變?yōu)镮MPC腺嘌呤轉(zhuǎn)變?yōu)锳MPD腺苷轉(zhuǎn)變?yōu)锳MP E嘧啶生物合成中乳清酸苷的形成13. 5-FU抑制 AUTP生成CTP BCDP生成dCDPCdU
12、MP生成TMP DUDP生成dUDPEdUDP生成dUMP14. 催化dUMP轉(zhuǎn)變?yōu)門(mén)MP的酶是 A核苷酸還原酶B胸腺嘧啶核苷酸合成酶C核苷酸激酶D甲基轉(zhuǎn)移酶E脫氧胸苷激酶15. 阿糖胞苷抗腫瘤作用的機(jī)理是抑制 AIMP生成GMPBUTP生成CTPCIMP生成AMPDCDP生成dCDP EdUMP生成dTMP二、名詞解釋1. 嘌呤核苷酸的從頭合成 (de novo synthesis of purine nucleotide)2核苷酸的補(bǔ)救合成途徑 (salvage pathway of nucleotide) 三、問(wèn)答題1體內(nèi)嘌呤核苷酸的合成有哪兩條途徑?2以酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用的原理,說(shuō)明用
13、別嘌呤醇治療痛風(fēng)癥的機(jī)理。參考答案一、選擇題1.D2.C3.C4.B5.A6.C7.D8.C9.A10.A11.D12.D13.C14.B15.D二、名詞解釋1指由磷酸核糖、甘氨酸、天冬氨酸、谷氨酰胺、一碳單位及CO2等簡(jiǎn)單物質(zhì)為原料,經(jīng)過(guò)多步酶促反應(yīng)合成嘌呤核苷酸的過(guò)程。2指利用體內(nèi)游離的嘧啶堿或嘌呤堿、嘧啶核苷酸或嘌呤核苷酸為原料,經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的酶促反應(yīng)合成嘧啶核苷酸或嘌呤核苷酸的過(guò)程。三、問(wèn)答題1 從頭合成途徑:利用磷酸核糖、氨基酸、一碳單位及CO2等簡(jiǎn)單物質(zhì)為原料,經(jīng)過(guò)一系列的酶促反應(yīng),合成嘌呤核苷酸的過(guò)程。在此過(guò)程中的限速酶:PRPP合成酶及磷酸核糖酰胺轉(zhuǎn)移酶,反應(yīng)在肝組織的胞液中進(jìn)行,
14、分為兩個(gè)階段:首先合成次黃嘌呤核苷酸,然后次黃嘌呤核苷酸再轉(zhuǎn)變成腺嘌呤核苷酸和鳥(niǎo)嘌呤核苷酸。 補(bǔ)救合成途徑:利用體內(nèi)游離的嘌呤或嘌呤核苷,經(jīng)過(guò)簡(jiǎn)單的反應(yīng)過(guò)程,合成嘌呤核苷酸,主要在腦、骨髓中進(jìn)行,補(bǔ)救合成過(guò)程比較簡(jiǎn)單,消耗能量也比較少。有兩種酶參與嘌呤核苷酸的補(bǔ)救合成途徑:腺嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶和次黃嘌呤-鳥(niǎo)嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶,由PRPP提供磷酸核糖,它們分別催化AMP和IMP、GMP的補(bǔ)救合成。2(1)酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用的原理:抑制劑(I)與酶的底物(S)在化學(xué)結(jié)構(gòu)上相似,這兩者相互競(jìng)爭(zhēng)與酶的活性中心結(jié)合,如果酶與抑制劑結(jié)合形成EI復(fù)合物,就不能再結(jié)合底物S,導(dǎo)致酶與底物結(jié)合形成的復(fù)合物ES下
15、降,由于酶與抑制劑結(jié)合形成的中間物EI不能催化I發(fā)生變化,導(dǎo)致酶促反應(yīng)速度降低。由于抑制劑與酶的結(jié)合是可逆的,抑制程度則取決于抑制劑與酶的相對(duì)親和力與底物濃度的相對(duì)比例。即抑制劑的濃度越高,抑制程度就越大,反之,增加底物濃度,則可以減低甚至解除抑制。在競(jìng)爭(zhēng)性抑制中,Vmax不變,Km增大。(2)痛風(fēng)癥是由于患者血中尿酸含量升高,尿酸鹽晶體沉積關(guān)節(jié)、軟組織及腎等處,而導(dǎo)致關(guān)節(jié)炎、尿路結(jié)石及腎等疾病。如果能降低體內(nèi)的尿酸含量,將會(huì)緩解癥狀。臨床上用別嘌呤醇治療痛風(fēng)的機(jī)理是:別嘌呤醇與次黃嘌呤結(jié)構(gòu)類(lèi)似,是黃嘌呤氧化酶的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑,可以抑制尿酸的生成。別嘌呤與PRPP反應(yīng)生成別嘌呤核苷酸,這樣一方面
16、消耗PRPP而使其含量減少,另一方面別嘌呤核苷酸與IMP結(jié)構(gòu)相似,又可反饋抑制嘌呤核苷酸從頭合成的酶。這兩方面的作用均可使嘌呤核苷酸的合成減少,從而減少尿酸的生成。第三章 DNA的生物合成(復(fù)制)一、選擇題1FCrik中心法則遺傳信息的傳遞方式不包括ARNA蛋白質(zhì) BDNArRNA CDNADNA DRNADNA EDNAmRNA2M.Meselson和F.W.Stahl用15NH4Cl 證明的機(jī)制是A. DNA混合式復(fù)制 B. DNA轉(zhuǎn)錄為mRNA C. mRNA翻譯為蛋白質(zhì) D. DNA半保留復(fù)制 E. DNA全保留復(fù)制3不參與原核DNA復(fù)制的物質(zhì)是AdNTP BDna G CUvr BD
17、SSB ENTP4復(fù)制中維持DNA單鏈狀態(tài)的蛋白質(zhì)是ADna B BUvrB CSSB DRec A ELex A5DNA復(fù)制時(shí), 合成5-TAGATCC-3的互補(bǔ)序列是A5-GGATCTA-3 B5-CCTAGAT-3 C5-GGAUCUA-3 D5-GGAUAGA-3 E5-ATCTAGG-36關(guān)于DNA-pol 的敘述,錯(cuò)誤的是A有35外切酶活性 B有53外切酶活性C復(fù)制延長(zhǎng)中催化核苷酸聚合 D細(xì)胞中含量最少比活性最高E有53聚合酶活性7DNA復(fù)制保真性的敘述,錯(cuò)誤的是ADNA-pol的即時(shí)校讀功能BDNA-pol 對(duì)堿基的選擇性CDNA-pol 對(duì)模板的依賴性DDNA-pol對(duì)模板的高
18、親和性 E嚴(yán)格的堿基配對(duì)原則8DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶的作用是A解開(kāi)DNA雙螺旋間氫鍵 B復(fù)制時(shí)理順DNA鏈C使DNA異構(gòu)為核小體 D辨認(rèn)復(fù)制起始點(diǎn) E穩(wěn)定和保護(hù)單鏈DNA9復(fù)制中,RNA引物的作用是 A活化SSB B使岡崎片段延長(zhǎng)P%2C參與構(gòu)成引發(fā)體 D協(xié)助解螺旋酶作用 E提供3-OH末端供dNTP加入10紫外線照射最常引起的堿基二聚體是AC-C BC-TCT-TDT-U EU-C11DNA切除修復(fù)時(shí)DNA-pol;DNA連接酶; Uvr A;Uvr C、Uvr B作用順序是A、 B、 C、 、 D、 E、12. 著色性干皮病的分子基礎(chǔ)是AUvr類(lèi)蛋白缺乏 BDNA-pol 基因缺陷 CDNA-p
19、ol 基因突變DLex A類(lèi)蛋白缺乏EXP類(lèi)基因缺陷13. 關(guān)于逆轉(zhuǎn)錄酶的敘述,錯(cuò)誤的是A以單鏈RNA為模板 B以單鏈DNA為模板C水解雜化雙鏈中的RNAD促使新合成DNA轉(zhuǎn)入宿主細(xì)胞E能生成cDNA雙鏈14. 能直接以DNA為模板合成的物質(zhì)是A阻遏物 BhnRNA C引物酶D誘導(dǎo)劑 E輔阻遏物15. 參與DNA復(fù)制的物質(zhì)不包括A引物酶 B拓?fù)涿?C連接酶 D核酶 E SSB16. 關(guān)于端粒酶的敘述,錯(cuò)誤的是A以染色體DNA為模板 B是RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合物C催化端粒DNA生成 D含有RNA模板 E有逆轉(zhuǎn)錄酶活性17. 產(chǎn)生岡崎片段的原因是A復(fù)制速度過(guò)快 B拓?fù)涿缸饔蒙?C多個(gè)復(fù)制起始點(diǎn) D復(fù)
20、制與解鏈方向相反 ERNA引物過(guò)短18. 關(guān)于突變的敘述, 錯(cuò)誤的是A點(diǎn)突變導(dǎo)致錯(cuò)配 B缺失一定引起框移突變C插入不一定引起框移突變 D插入可改變密碼子閱讀方式 EA取代G是突變19. 為真核生物DNA連接酶供能的物質(zhì)是AGTP BATP CNAD+ DNADPH EFAD20. 不需要DNA連接酶參與的過(guò)程是ADNA復(fù)制 B切除修復(fù) CSOS修復(fù) DDNA復(fù)性 EDNA重組二、名詞解釋1. 中心法則(the central dogma)2. 基因和基因表達(dá)(gene and gene expression) 3. 半保留復(fù)制(semiconservative replication)4. 端
21、粒和端粒酶(telomere and telomerase) 5.逆轉(zhuǎn)錄和逆轉(zhuǎn)錄酶(reverse transcription and reverse transcriptase)三、問(wèn)答題1DNA復(fù)制時(shí)是如何保證其保真性的?2論述參與DNA復(fù)制的主要物質(zhì)及各自的功能。3用基因突變的觀點(diǎn)解釋鐮刀型紅細(xì)胞貧血病的發(fā)病機(jī)制。參考答案一、選擇題1.D2.D3.E4.C5.A6.B7.D8.B9.E10.C11.A12.E13.D14.B15.D16.A17.D18.B19.B20.D二、名詞解釋1DNA的遺傳信息轉(zhuǎn)錄為RNA,RNA通過(guò)翻譯指導(dǎo)合成蛋白質(zhì)。DNA還通過(guò)復(fù)制將遺傳信息代代相傳。1970
22、年發(fā)現(xiàn)RNA能逆轉(zhuǎn)錄為DNA,是對(duì)中心法則的補(bǔ)充。2基因是為生物活性產(chǎn)物編碼的DNA功能片段,這些產(chǎn)物主要是蛋白質(zhì)或各種RNA。通過(guò)轉(zhuǎn)錄和翻譯,將DNA分子上A,T,C,G四種符號(hào)所包含的序列信息,轉(zhuǎn)變?yōu)榈鞍踪|(zhì)分子上20種氨基酸的序列信息的過(guò)程稱為基因表達(dá)。3DNA生物合成時(shí),母鏈DNA解開(kāi)為兩股單鏈,每股單鏈分別作為模板,以dNTP(dATP、dGTP、dCTP、dTTP)為原料,按照堿基配對(duì)(AT、GC)規(guī)律與模板上的堿基配對(duì),經(jīng)依賴DNA的DNA聚合酶(DNA-pol)催化,合成一條與模板互補(bǔ)的新鏈, 新形成的兩個(gè)子代DNA 與親代DNA堿基序列一致,子代DNA分子中一股單鏈?zhǔn)菑挠H代完整
23、地接受過(guò)來(lái), 另一股單鏈?zhǔn)切潞铣傻?故稱為半保留復(fù)制。4端粒是位于真核細(xì)胞線性染色體末端的特殊結(jié)構(gòu),由一段串聯(lián)重復(fù)的DNA短序列與端粒結(jié)合蛋白構(gòu)成;端粒具有穩(wěn)定染色體結(jié)構(gòu),防止末端降解和融合的功能,并維持DNA復(fù)制的完整性。端粒復(fù)制要靠具有逆轉(zhuǎn)錄酶性質(zhì)的端粒酶來(lái)完成。端粒酶是一種由RNA和蛋白質(zhì)構(gòu)成的核糖核蛋白復(fù)合體,RNA分子含復(fù)制端粒DNA所需的核苷酸模板,蛋白質(zhì)部分具有逆轉(zhuǎn)錄酶活性,同時(shí)具有核酸內(nèi)切酶活性??纱呋肆NA的合成,維持染色體的完整。5. 指遺傳信息從RNA流向DNA。即以RNA為模板,dNTP為原料,在逆轉(zhuǎn)錄酶催化下,合成與RNA互補(bǔ)的雙鏈DNA的過(guò)程。逆轉(zhuǎn)錄酶 (依賴R
24、NA的DNA聚合酶)為多功能酶, 具有三種酶活性: RNA指導(dǎo)的DNA聚合酶:利用病毒RNA作模板合成一條互補(bǔ)DNA鏈; RNase H:水解RNA-DNA雜化雙鏈中的RNA鏈; DNA指導(dǎo)的DNA聚合酶:以新合成的DNA鏈為模板合成另一條互補(bǔ)DNA鏈。三、問(wèn)答題1DNA復(fù)制的保真性是與DNA聚合酶的作用有關(guān),DNA聚合酶對(duì)模板的依賴性,是子鏈與母鏈能準(zhǔn)確配對(duì),使遺傳信息準(zhǔn)確地延續(xù)和傳代的保證。其機(jī)制包括:(1) 遵守嚴(yán)格的堿基配對(duì)規(guī)律DNA聚合酶催化配對(duì)堿基的聚合;(2) 聚合酶在復(fù)制延長(zhǎng)中對(duì)堿基的選擇功能;(3) 復(fù)制出錯(cuò)時(shí)有即時(shí)的校讀功能,即及時(shí)識(shí)別錯(cuò)配的核苷酸并切除,加上正確的堿基。2
25、參與DNA復(fù)制的物質(zhì)有: 模板、底物(dNTP)、依賴DNA的DNA聚合酶(DNA聚合酶)、引物酶和引物、解螺旋酶、拓?fù)涿?、SSB、DNA連接酶等。其功能分述如下:(1)模板:是需要進(jìn)行復(fù)制的單鏈DNA,雙股母鏈DNA經(jīng)解鏈作用分成兩股單鏈均可作為模板。(2)底物:四種脫氧三磷酸核苷,即dATP、dGTP、dCTP和dTTP。(3)DNA聚合酶:見(jiàn)第一題。(4)引物酶和引物:催化引物合成的是一種RNA聚合酶,又稱引物酶。由于DNA 聚合酶沒(méi)有催化兩個(gè)游離的dNTP聚合的能力,只能在RNA引物的3-端開(kāi)始合成DNA鏈。 引物酶能使游離的NTP聚合生成一段短的RNA,并提供3-OH末端供dNTP加
26、入,RNA 引物的生成也需要模板。(5)解螺旋酶:模板對(duì)復(fù)制的指導(dǎo)是堿基的正確配對(duì),而堿基埋在雙螺旋的內(nèi)部。只有將DNA解成單鏈,才能起模板作用。大腸桿菌中發(fā)現(xiàn)的解鏈酶有DnaA,DnaB,DnaC。 DnaA蛋白辨認(rèn)復(fù)制起始點(diǎn),DnaB蛋白有解螺旋作用,DnaC蛋白輔助DnaB蛋白發(fā)揮作用。(6)拓?fù)涿?拓?fù)涿冈贒NA進(jìn)行復(fù)制時(shí),通過(guò)切斷并再連接DNA雙鏈中一股或雙股,改變DNA分子拓?fù)錁?gòu)象,避免DNA分子打結(jié)、纏繞、連環(huán),在DNA復(fù)制全過(guò)程都有作用。 拓?fù)涿改芮袛郉NA 雙鏈中一股并再連接,反應(yīng)不需ATP供能;拓?fù)涿改苁笵NA雙鏈同時(shí)發(fā)生斷裂和再連接,需ATP供能使DNA進(jìn)入負(fù)超螺旋。(7
27、)SSB:在復(fù)制中維持模板處于單鏈DNA狀態(tài)并保護(hù)DNA模板免受核酸酶降解。SSB的作用方式是隨著DNA分子的解鏈,能不斷的結(jié)合、解離,且SSB間有正協(xié)同效應(yīng)。(8)DNA連接酶:DNA連接酶可以連接DNA鏈3-OH末端和相鄰DNA鏈的5- P末端,形成3,5磷酸二酯鍵,消耗ATP。3鐮狀紅細(xì)胞貧血是由于正常血紅蛋白鏈第6號(hào)密碼子的點(diǎn)突變(CTCCAC),導(dǎo)致6谷氨酸殘基(GAG)被疏水性非極性氨基酸纈氨酸(GTG)取代,導(dǎo)致紅細(xì)胞呈鐮刀狀,易破碎引起的溶血性貧血。第四章 RNA的生物合成(轉(zhuǎn)錄)一、選擇題1關(guān)于DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的敘述,錯(cuò)誤的是A在體內(nèi)只有一條DNA鏈轉(zhuǎn)錄B兩個(gè)過(guò)程新鏈合成方向
28、都是53C復(fù)制的產(chǎn)物通常大于轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物D兩過(guò)程均需RNA為引物E聚合酶都需要Mg2Pribnow box 序列是指AAATAAABAAUAAACTAAGGCDTTGACAETATAAT3原核生物的DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶核心酶的組成是A BC DE4能特異性抑制原核生物RNA聚合酶亞基的是A利福平 B鵝膏蕈堿C假尿嘧啶 D亞硝酸鹽E氯霉素5真核生物中, RNA聚合酶催化生成的直接轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是AmRNA B18SrRNAC28S rRNA DtRNA%8s=MsoPlainText style=TEXT-INDENT: 5.25pt; LINE-HEIGHT: 18ptEhnRNA 6真核生物的轉(zhuǎn)
29、錄特點(diǎn)是A在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)進(jìn)行B需要因子辨認(rèn)起始點(diǎn)C需RNA聚合酶和多種蛋白質(zhì)因子D作模板的mRNA壽命最長(zhǎng),最穩(wěn)定E真核生物主要有5種RNA聚合酶7Rho因子的功能是A結(jié)合DNA模板鏈B增加RNA合成速率C參與轉(zhuǎn)錄的終止過(guò)程D釋放結(jié)合的RNA聚合酶E允許特定轉(zhuǎn)錄的起始8tRNA的轉(zhuǎn)錄后稀有堿基的生成不包括A脫羧反應(yīng) B還原反應(yīng)C轉(zhuǎn)位反應(yīng) D脫氨反應(yīng)E甲基化反應(yīng)9不屬于轉(zhuǎn)錄后修飾的是A腺苷酸聚合 B外顯子切除C5端加帽子結(jié)構(gòu)D內(nèi)含子切除 E甲基化10snRNA的功能是A參與DNA復(fù)制B參與RNA的剪接C激活RNA聚合酶D形成核糖體E是rRNA的前體11轉(zhuǎn)錄啟始前復(fù)合物的形成是指ARNA聚合酶與TAT
30、AAT結(jié)合BRNA聚合酶與TATA序列結(jié)合C多種轉(zhuǎn)錄因子與RNA聚合酶、DNA模板結(jié)合D因子與RNA聚合酶結(jié)合E阻遏物變構(gòu)后脫離操縱基因的復(fù)合物12. 關(guān)于tRNA合成的敘述,正確的是ARNA聚合酶I參與tRNA前體的生成BtRNA前體需切除5和3末端多余的核苷酸CtRNA前體中不含內(nèi)含子DtRNA3-末端需加上ACC-OHEtRNA前體不需化學(xué)修飾加工13. 真核生物mRNA剪接作用的敘述,錯(cuò)誤的是A將hnRNA中的內(nèi)含子剪切掉,最終成為成熟mRNAB內(nèi)含子序列起始為GU,終止于AG CmRNA前體的剪接過(guò)程需要進(jìn)行三次轉(zhuǎn)酯反應(yīng)DUsnRNP是構(gòu)成剪接體的組分EU2snRNP識(shí)別并與內(nèi)含子的
31、分支點(diǎn)結(jié)合14. 大腸桿菌RNA鏈合成的方向是A35 BCN CNC D53E35或5315. 哺乳動(dòng)物經(jīng)轉(zhuǎn)錄作用生成的mRNA是A內(nèi)含子 B單順?lè)醋?C多順?lè)醋覦間隔區(qū)序列 E插入序列16. 真核生物RNA合成受鵝膏蕈堿影響最大的是A45S-rRNA BhnRNA CS-rRNA DtRNA EsnRNA17. 核酶是指ADNA酶 BRNA酶C催化作用在細(xì)胞核內(nèi)的酶 D逆轉(zhuǎn)錄酶 E具催化作用的RNA18. 在生物界尚無(wú)充足證據(jù)過(guò)程的是ADNARNABRNADNA CDNADNA DRNA RNA E蛋白質(zhì)RNA19. DNA分子上可被RNA聚合酶特異識(shí)別的部位是A弱化子 B操縱子 C啟動(dòng)子D
32、終止子E沉默子二、名詞解釋1. 不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄(asymmetric transcription) 2. 斷裂基因(splite gene) 3. 外顯子和內(nèi)含子(exon and intron) 4. 剪接體(splicesome) 三、問(wèn)答題1簡(jiǎn)述原核生物與真核生物中的啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及功能。2簡(jiǎn)述真核生物成熟mRNA的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及各結(jié)構(gòu)的功能。3何謂RNA編輯?其主要作用機(jī)制是什么?意義何在?4簡(jiǎn)述利福平(利福霉素)抑制RNA生物合成分子機(jī)制。參考答案一、選擇題1.A2.E3.A4.A5.E6.C7.C8.C9.B10.B11.C12.B13.C14.D15.B16.B17.E18.E19.C二
33、、名詞解釋1有兩重含義,一是指雙鏈DNA分子中只有一股單鏈作為轉(zhuǎn)錄模板(模板鏈),另一股鏈不轉(zhuǎn)錄;二是模板鏈并非永遠(yuǎn)在同一單鏈上。2真核生物的結(jié)構(gòu)基因是由若干個(gè)編碼區(qū)和非編碼區(qū)互相間隔但又連續(xù)鑲嵌而成,這些基因稱為斷裂基因。3在斷裂基因及其初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物上出現(xiàn),并表達(dá)為RNA的核酸序列稱為外顯子。內(nèi)含子是隔斷基因線性表達(dá)而在剪接過(guò)程中被除去的核苷酸序列。4由核內(nèi)小型RNA(snRNA)和核內(nèi)蛋白質(zhì)組成的核糖核酸蛋白復(fù)合物,結(jié)合在hnRNA的內(nèi)含子區(qū)域,并把內(nèi)含子彎曲使兩端互相靠近,有利于剪接過(guò)程的進(jìn)行。三、問(wèn)答題1啟動(dòng)子是DNA分子中可以與RNA聚合酶特異結(jié)合的部位,也就是使轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的部位。在基
34、因表達(dá)的調(diào)控中,轉(zhuǎn)錄的起始是個(gè)關(guān)鍵。某個(gè)基因能否表達(dá)常常決定于特定的啟動(dòng)子起始過(guò)程。對(duì)原核生物100多個(gè)啟動(dòng)子的序列進(jìn)行了比較后發(fā)現(xiàn);在RNA轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游大約-10bp和-35bp處有兩個(gè)保守的序列,在-10bp區(qū)附近,有一組5-TATAAT-的序列,是Pribnow首先發(fā)現(xiàn)的,稱為Pribnow框,因富含AT,解鏈溫度低,兩條DNA鏈易分離,有利于RNA聚合酶發(fā)揮作用。是RNA聚合酶與DNA模板結(jié)合的部位。在-35bp區(qū)附近,有一組5-TTGACA-的序列,與轉(zhuǎn)錄起始的辨認(rèn)有關(guān),是RNA聚合酶中亞基識(shí)別并結(jié)合的部位。-35序列的重要性還在于它在很大程度上決定了啟動(dòng)子的強(qiáng)度。大多數(shù)啟動(dòng)子均有
35、上述的共同序列(consensus sequence),只有少數(shù)幾個(gè)核苷酸的差別。與共同序列愈一致的啟動(dòng)子,轉(zhuǎn)錄活性愈強(qiáng)。 真核生物的啟動(dòng)子有其特殊性,真核生物有三種RNA聚合酶,每一種都有自己的啟動(dòng)子類(lèi)型。以RNA聚合酶II的啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)為例,人們比較了上百個(gè)真核生物RNA聚合酶II啟動(dòng)子的核苷酸序列時(shí)發(fā)現(xiàn);在-25區(qū)有TATA框,又稱為Hogness框或Goldberg-Hogness框,其一致序列為T(mén)28A97A93A85A63T37A83A50T37,基本上都由A,T堿基所組成,離體轉(zhuǎn)錄實(shí)驗(yàn)表明,TATA框決定了轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)的選擇,天然缺少TATA框的基因可以從一個(gè)以上的位點(diǎn)開(kāi)始轉(zhuǎn)錄。在-7
36、5區(qū)有CAAT框,其一致的序列為GGTCAATCT。2mRNA分子帶有蛋白質(zhì)編碼信息,在翻譯中起模板作用。真核生物成熟mRNA主要由以下幾部分組成:(1)5端帽子結(jié)構(gòu):是mRNA 翻譯起始的必要結(jié)構(gòu),為核糖體小亞基提供識(shí)別位點(diǎn);增加mRNA的穩(wěn)定性,保護(hù)mRNA 免遭5外切核酸酶的降解;并在成熟轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的出核運(yùn)輸過(guò)程中發(fā)揮重要作用。(2)3端polyA尾結(jié)構(gòu):可能與mRNA從細(xì)胞核向細(xì)胞質(zhì)的轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān),對(duì)真核mRNA的翻譯效率具有一定作用,并能穩(wěn)定mRNA結(jié)構(gòu),保持一定的生物半衰期。(3)開(kāi)放讀碼框(ORF):mRNA上從起始密碼子AUG至終止密碼子之間的核苷酸序列稱為ORF,讀碼框內(nèi)每三個(gè)堿基
37、組成一個(gè)三聯(lián)體密碼,決定一個(gè)氨基酸。編碼蛋白質(zhì)的氨基酸序列。(4)5端和3端非翻譯序列:mRNA上位于ORF上游和下游的序列,不翻譯成蛋白質(zhì),但參與翻譯的調(diào)控。3RNA編輯廣泛存在于多種生物基因的轉(zhuǎn)錄后加工過(guò)程中,是在RNA分子上出現(xiàn)的一種修飾現(xiàn)象。mRNA在轉(zhuǎn)錄后因插入、缺失或核苷酸替換等,使mRNA的編碼序列發(fā)生改變,從而改變了DNA模板來(lái)源的遺傳信息,進(jìn)而翻譯出氨基酸序列不同的多種蛋白質(zhì)。RNA編輯主要包括:(1)核苷酸替換:包括CU、AI替換機(jī)制等。如載脂蛋白B(ApoB)的RNA編輯。在肝細(xì)胞中表達(dá)ApoB100,而在腸上皮細(xì)胞中,由于ApoB100的第26個(gè)外顯子中第6666666
38、8個(gè)核苷酸由CAA編碼的谷氨酰胺突變?yōu)門(mén)AA的終止子,即CU的替換,從而表達(dá)出截短的ApoB48。這種編輯機(jī)制可能是由識(shí)別下游RNA靶序列的一種胞嘧啶脫氨酶介導(dǎo)的。mRNA的編輯是調(diào)控基因在不同組織特異表達(dá)的方式。(2)可譯框的改變:主要是由于核苷酸的插入或刪除導(dǎo)致可譯框的改變,從而形成新的可譯框,進(jìn)而編碼出不同的蛋白質(zhì)。(3)向?qū)NA(gRNA):gRNA是一種在線粒體內(nèi)轉(zhuǎn)錄的短RNA(約5570個(gè)核苷酸),能以正常堿基配對(duì)或G-U方式選擇其5端錨區(qū)在mRNA上的互補(bǔ)序列,隨后為插入或丟失U提供模板,通過(guò)轉(zhuǎn)酯反應(yīng)、酶促編輯反應(yīng)等方式進(jìn)行RNA的編輯。編輯的結(jié)果不僅擴(kuò)大了遺傳信息,而且可能是
39、生物適應(yīng)中的一種保護(hù)措施。有些基因的主要轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物必須經(jīng)過(guò)編輯才能有效地起始翻譯或產(chǎn)生正確的可譯框,從而產(chǎn)生相應(yīng)功能的蛋白質(zhì),說(shuō)明RNA編輯是基因表達(dá)的一種重要的調(diào)控和補(bǔ)救機(jī)制。4原核生物的RNA聚合酶可受到一些抗生素的特異性抑制。如利福平(rifampicin)和利福霉素(rifamycin)是用于抗結(jié)核菌治療的藥物,它專(zhuān)一性地結(jié)合RNA聚合酶的亞基,阻斷RNA鏈中第一個(gè)磷酸二酯鍵的形成,但不防礙RNA聚合酶與模板DNA的結(jié)合,也不影響已經(jīng)起始的鏈的延長(zhǎng)。因此它抑制RNA合成的起始而不抑制其延長(zhǎng)。而對(duì)絕大多數(shù)真核生物RNA聚合酶而言,利福平則無(wú)抑制作用。因此臨床上利福平用作抗結(jié)核藥。第五章 蛋
40、白質(zhì)的生物合成(翻譯)一、選擇題1僅有一個(gè)密碼子的氨基酸是 A色氨酸、賴氨酸B蘇氨酸、甘氨酸C甲硫氨酸、甘氨酸D亮氨酸、丙氨酸E色氨酸、甲硫氨酸2密碼與反密碼配對(duì)時(shí),不遵從堿基 配對(duì)規(guī)律,稱為 A密碼的簡(jiǎn)并性B密碼的偏愛(ài)性C密碼的連續(xù)性 D密碼的擺動(dòng)性E密碼的通用性3真核生物核蛋白體中沒(méi)有的rRNA是 A18SB23SC5SD28SE5.8S4反密碼存在于 ADNA BtRNA CmRNA DrRNA EcDNA5不符合密碼的通用性的細(xì)胞器是A細(xì)胞核B微粒體C線粒體D內(nèi)質(zhì)網(wǎng)E高爾基體6氨基酰-tRNA合成酶的校正活性是A水解酯鍵B水解3,5磷酸二酯鍵C水解磷酸酯鍵D形成酸酐鍵E形成磷酸酯鍵7關(guān)
41、于核蛋白體,錯(cuò)誤的是A由rRNA和多種蛋白質(zhì)組成B分為大小亞基C是翻譯的場(chǎng)所D在細(xì)胞核內(nèi)起作用E一個(gè)mRNA上可附著多個(gè)核蛋白體8能促使大小亞基解離的因子是 AIF1 BIF2 CIF3 DEF-Ts EIF1與IF3 9EF-Tu的功能是 A協(xié)助氨基酰-tRNA進(jìn)入A位B促進(jìn)核糖體亞基聚合C促進(jìn)核糖體解聚D促進(jìn)mRNA與核糖體分離E促進(jìn)肽酰-tRNA移位10延長(zhǎng)因子EFG具有哪種酶的活性A轉(zhuǎn)肽酶B酯酶C轉(zhuǎn)位酶D轉(zhuǎn)甲酰酶E轉(zhuǎn)氨酶11肽鏈延長(zhǎng)過(guò)程的敘述,錯(cuò)誤的是 A又稱為核蛋白體循環(huán)B每循環(huán)一次延長(zhǎng)一個(gè)氨基酸C分為進(jìn)位,成肽和轉(zhuǎn)位三步D需要EFT、EFGE需要ATP供能12. 翻譯終止時(shí)激活轉(zhuǎn)肽
42、酶為酯酶活性的是ARF-1BRF-2CRF-3DRF-4ERR13. 蛋白質(zhì)合成中不消耗能量的階段是 A氨基酸活化B翻譯起始C進(jìn)位D成肽E轉(zhuǎn)位14. 關(guān)于多肽鏈一級(jí)結(jié)構(gòu)的翻譯后修飾,描述錯(cuò)誤的是A蛋白質(zhì)合成過(guò)程中N端總是甲酰甲硫氨酸B天然蛋白質(zhì)N端多數(shù)不是甲酰甲硫氨酸C脫甲酰基酶可除去N端甲?;鵇氨基肽酶可除去N端氨基酸E翻譯終止才能除去N端甲酰基15. 鴉片促黑皮質(zhì)素原水解加工生成的是 A胰島素 B糖蛋白 C脂蛋白 DACTH ETSH16. 可被信號(hào)肽酶裂解的部位是A加工區(qū)B疏水核心區(qū)C堿性氨基末端區(qū)D酸性羧基末端區(qū)E親水區(qū)17. 關(guān)于信號(hào)肽識(shí)別粒子(SRP)的描述,錯(cuò)誤的是 A由蛋白質(zhì)與
43、RNA組成的復(fù)合體B能特異識(shí)別結(jié)合信號(hào)肽C具有暫停蛋白質(zhì)合成的作用D可將正在合成蛋白質(zhì)的核蛋白體帶至膜外ESRP需與對(duì)接蛋白結(jié)合18. 白喉毒素可共價(jià)修飾的因子是AEF3BeEF1CEF1DeEF2EEF219. 干擾素通過(guò)何種方式使eIF2失活 A甲基化 BADP核糖基化C羧化 D磷酸化 E乙?;?0. 可辨認(rèn)結(jié)合分泌蛋白新生肽鏈N端的是A轉(zhuǎn)肽酶 B信號(hào)肽識(shí)別顆粒CGTP酶 DRNA酶 E對(duì)接蛋白二、名詞解釋1. 多聚核蛋白體(polyribosome) 2. 信號(hào)肽(signal peptide) 3開(kāi)放閱讀框架(open reading frame, ORF) 三、問(wèn)答題1三種RNA在蛋
44、白質(zhì)合成中各起何作用?2原核與真核生物翻譯起始階段各有何異同?3細(xì)胞核蛋白合成后如何靶向輸送到細(xì)胞核?4舉例說(shuō)明抗生素在翻譯水平抑菌的作用機(jī)理。參考答案一、選擇題1.E2.D3.B4.B5.C6.A7.D8.C9.A10.C11.E12.C13.D14.E15.D16.A17.D18.D19.B20.B二、名詞解釋1是由一個(gè)mRNA分子與一定數(shù)目的單個(gè)核蛋白體結(jié)合而成的,呈串珠狀排列。每個(gè)核蛋白體可以獨(dú)立完成一條肽鏈的合成,所以多核蛋白體上可以同時(shí)進(jìn)行多條肽鏈的合成,可以加速蛋白質(zhì)合成速度,提高mRNA的利用率。2各種新生分泌蛋白的N端存在保守的氨基酸序列稱信號(hào)肽,約13-36個(gè)氨基酸殘基,可
45、分為N端堿性區(qū)、疏水區(qū)和C端加工區(qū)三個(gè)區(qū)段??蓪⒑铣傻牡鞍踪|(zhì)引導(dǎo)至細(xì)胞的適當(dāng)靶部位,是決定蛋白質(zhì)靶向輸送特性的重要元件。3從mRNA 5端起始密碼子AUG到3端終止密碼子之間的核苷酸序列,各個(gè)三聯(lián)體密碼連續(xù)排列編碼一條蛋白質(zhì)多肽鏈,稱為開(kāi)放閱讀框架。 三、問(wèn)答題1mRNA是翻譯的直接模板, 原核生物的一種mRNA往往為功能相關(guān)的幾種蛋白質(zhì)編碼,而真核生物的一種mRNA一般只帶有一種蛋白質(zhì)的編碼信息。 tRNA是運(yùn)載體,攜帶特定氨基酸, 借反密碼與mRNA的密碼堿基互補(bǔ), 從而將所帶的氨基酸送到肽鏈的一定位置上。因此tRNA在翻譯過(guò)程中起接合體作用。 rRNA與多種蛋白質(zhì)構(gòu)成一巨大的核蛋白體,由
46、大、小亞基組成,是肽鏈合成的場(chǎng)所。2形成起始復(fù)合物的過(guò)程基本相似。相似之處在于:(1)都需消耗能量(2)都需多種起始因子參加(3)翻譯起始的第一步都需核蛋白體的大小亞基先分開(kāi)(4)都需mRNA、氨基酰-tRNA結(jié)合到核蛋白體小亞基上(5)mRNA在小亞基上就位都需一定的結(jié)構(gòu)成分協(xié)助(6)在結(jié)合有mRNA和起始tRNA的小亞基上,最后需加上大亞基(7)都需生成翻譯起始復(fù)合物不同之處在于:真核:(1)eIF種類(lèi)多(10多種)(2)核蛋白體是80s(40s+60s)(3)起始tRNA是met-tRNA(不需甲?;?)mRNA沒(méi)有S-D序列。mRNA在小亞基上就位需5端帽子結(jié)構(gòu)和帽結(jié)合蛋白及eIF
47、2(5)met-tRNA mRNA先于結(jié)合到小亞基上原核:(1)IF種類(lèi)少(3種)(2)核蛋白體是70s(30s+50s)(3)fmet-tRNA(需甲?;?)需S-D序列與16S-rRNA配對(duì)結(jié)合,及rps-1辨認(rèn)識(shí)別序列。(5)mRNA先于起始tRNA結(jié)合到小亞基上。3新合成胞核蛋白靶向輸送涉及幾種蛋白質(zhì)成分,包括核輸入因子和 一種小GTP酶Ran蛋白。輸入因子、雜二聚體可作為胞核蛋白受體,識(shí)別結(jié)合、核定位序列。靶向過(guò)程如下: 胞液合成胞核蛋白結(jié)合輸入因子、二聚體形成復(fù)合物,并被導(dǎo)向核膜的核孔。 由小GTP酶Ran水解GTP釋能,胞核蛋白-輸入因子復(fù)合物通過(guò)耗能機(jī)制跨核孔轉(zhuǎn)位,進(jìn)入核基
48、質(zhì)。 轉(zhuǎn)位中,輸入因子和先后從上述復(fù)合物解離,胞核蛋白定位細(xì)胞核內(nèi)。輸入因子、移出核孔再被利用。4抗生素具有殺菌或抑制細(xì)菌生長(zhǎng)的作用。目前,抗生素的種類(lèi)繁多,有不少直接作用于蛋白質(zhì)生物合成的各個(gè)階段。核蛋白體由大小不同的兩個(gè)亞基組成,某些抗生素通過(guò)與細(xì)菌核蛋白體的大小亞基結(jié)合妨礙翻譯過(guò)程;四環(huán)素族(包括四環(huán)素、土霉素、金霉素等)能抑制氨基酰-tRNA與原核細(xì)胞的核蛋白體結(jié)合,抑制細(xì)菌的蛋白質(zhì)生物合成。鏈霉素和卡那霉素可與核蛋白體的小亞基結(jié)合,改變小亞基構(gòu)象,造成讀碼錯(cuò)誤,阻斷翻譯延長(zhǎng)過(guò)程,使細(xì)菌蛋白失去活性。氯霉素能與原核生物的核蛋白體大亞基結(jié)合;抑制轉(zhuǎn)肽酶活性而阻斷翻譯延長(zhǎng)過(guò)程。大小亞基被結(jié)
49、合則使核蛋白體不能發(fā)揮正常功能,造成翻譯錯(cuò)誤。因而不能合成具有正常功能的蛋白質(zhì)。使細(xì)菌的生命活動(dòng)難以維持,達(dá)到抑菌目的。第六章 基因表達(dá)調(diào)控一、 選擇題【A型題】1關(guān)于啟動(dòng)序列的敘述,正確的是AmRNA分子上開(kāi)始被翻譯的序列B開(kāi)始轉(zhuǎn)錄生成mRNA的序列CRNA聚合酶識(shí)別結(jié)合的序列D阻遏蛋白結(jié)合的序列E產(chǎn)生阻遏蛋白的序列2乳糖操縱子示意圖中字母的含義,正確的是IPOZYAAO代表啟動(dòng)序列BI是操縱序列CI、P、O合稱結(jié)構(gòu)基因DZ、Y、A是結(jié)構(gòu)基因EP產(chǎn)生阻遏蛋白3關(guān)于各種類(lèi)型操縱子的敘述,正確的是A乳糖操縱子在無(wú)糖時(shí)開(kāi)放B乳糖直接誘導(dǎo)阻遏蛋白變構(gòu)C色氨酸操縱子在有色氨酸時(shí)開(kāi)放D乳糖操縱子的阻遏蛋
50、白是一種變性蛋白E阻遏蛋白是否結(jié)合于操縱序列,可以決定操縱子的關(guān)閉或開(kāi)放4直接誘導(dǎo)乳糖操縱子轉(zhuǎn)錄的物質(zhì)是A乳糖B葡萄糖C阿拉伯糖D半乳糖EcAMP5阻遏蛋白識(shí)別操縱子的位點(diǎn)是A啟動(dòng)子B結(jié)構(gòu)基因C阻遏物基因D操縱基因E增強(qiáng)子6在乳糖操縱子調(diào)節(jié)機(jī)制中,半乳糖的作用是A作為輔阻遏物結(jié)合阻遏物B作為阻遏物結(jié)合于操縱基因C使阻遏物變構(gòu)失去結(jié)合DNA的能力D抑制阻遏基因的轉(zhuǎn)錄E引物7能與DNA結(jié)合并阻止轉(zhuǎn)錄的蛋白質(zhì)稱A正調(diào)控蛋白B反式作用因子C誘導(dǎo)物D阻遏物E分解代謝基因活化蛋白8原核生物啟動(dòng)序列 -10區(qū)的共有序列稱ATATA盒BCAAT盒CPribnow盒D增強(qiáng)子EGC盒9DNA損傷修復(fù)的SOS反應(yīng)A
51、是一種保真性很高的復(fù)制過(guò)程BLexA蛋白是阻遏蛋白,使SOS基因處于阻遏狀態(tài)CRecA是一系列操縱子的阻遏蛋白DLexA是一系列操縱子的正性調(diào)節(jié)蛋白ERecA催化水解LexA使之激活10RNA聚合酶各轉(zhuǎn)錄因子(TF )中,能與TATA盒直接結(jié)合的是ATFABTFBCTFDDTFEETFF11關(guān)于“基因表達(dá)”的敘述,錯(cuò)誤的是A所有基因表達(dá)都經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄及翻譯過(guò)程B某些基因表達(dá)經(jīng)歷轉(zhuǎn)錄及翻譯過(guò)程C某些基因表達(dá)產(chǎn)物是蛋白質(zhì)分子D某些基因表達(dá)產(chǎn)物不是蛋白質(zhì)分子E某些基因表達(dá)產(chǎn)物是RNA分子12關(guān)于管家基因的敘述,錯(cuò)誤的是A在生物個(gè)體的幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá)B在生物個(gè)體的幾乎各生長(zhǎng)階段持續(xù)表達(dá)C在一個(gè)物種的
52、幾乎所有個(gè)體中持續(xù)表達(dá)D在生物個(gè)體的某一生長(zhǎng)階段持續(xù)表達(dá)E生物個(gè)體全生命過(guò)程的幾乎所有細(xì)胞中表達(dá)13基因表達(dá)調(diào)控的主要環(huán)節(jié)是A基因擴(kuò)增B轉(zhuǎn)錄起始C轉(zhuǎn)錄后加工D翻譯起始E翻譯后加工14lac阻遏蛋白結(jié)合乳糖操縱子(元)的AP序列BO序列CCAP結(jié)合位點(diǎn)DI基因EZ基因15cAMP與CAP結(jié)合后介導(dǎo)的正性調(diào)節(jié)發(fā)生在A有葡萄糖及cAMP較高時(shí)B有葡萄糖及cAMP較低時(shí)C沒(méi)有葡萄糖及cAMP較高時(shí)D沒(méi)有葡萄糖及cAMP較低時(shí)E葡萄糖及cAMP濃度極高時(shí)16增強(qiáng)子(enhancer)A是特異性高的轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子B是真核生物細(xì)胞核內(nèi)的組蛋白C原核生物的啟動(dòng)子在真核生物中就稱為增強(qiáng)子D是一些較短的能增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄的
53、DNA序列E是結(jié)構(gòu)基因中5端的DNA序列17關(guān)于增強(qiáng)子的敘述,正確的是A對(duì)啟動(dòng)子的作用有嚴(yán)格的專(zhuān)一性B作用有方向性C是近距離影響啟動(dòng)子的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件D具有增強(qiáng)轉(zhuǎn)錄的作用E具有抑制轉(zhuǎn)錄的作用18關(guān)于真核生物轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物(PIC)形成過(guò)程順序,正確的是ATATA,TFD,TFA,TFB,RNApol/TFF,TFEBTATA,TFA,TFB,TFD,RNApol/TFF,TFECTATA,TFA,TFB,TFD,RNApolDTATA,TFA,TFB,TFD,TFE,TFF ,RNApolETATA,TFA,TFB,TFE,RNApol,TFF【X型題】19真核生物啟動(dòng)子的特點(diǎn)有A至少包括一個(gè)
54、轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)BTATA盒控制轉(zhuǎn)錄起始的準(zhǔn)確性及頻率CGC盒位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)上游-25-30bpD富含GC的啟動(dòng)子一般含多個(gè)轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)E有些啟動(dòng)子不含TATA盒及GC盒20操縱子A只在真核生物中存在B啟動(dòng)子是操縱子的成分C結(jié)構(gòu)基因表達(dá)產(chǎn)物是一組執(zhí)行相關(guān)功能的酶或蛋白質(zhì)D含有結(jié)構(gòu)基因E含有調(diào)節(jié)基因21乳糖操縱子的作用方式是A半乳糖與阻遏蛋白結(jié)合使操縱序列開(kāi)放B阻遏蛋白經(jīng)變構(gòu)后與啟動(dòng)序列結(jié)合C結(jié)構(gòu)基因的產(chǎn)物與阻遏蛋白結(jié)合D誘導(dǎo)物使阻遏蛋白發(fā)生變構(gòu)不再與DNA結(jié)合E乳糖可直接與阻遏蛋白結(jié)合使其變構(gòu)22在lac操縱子(元)機(jī)制中起調(diào)控作用的DNA序列是AY基因BZ基因CCAP結(jié)合位點(diǎn)DO序列EP序列23增強(qiáng)
55、子A是遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始的DNA調(diào)節(jié)序列B決定基因表達(dá)的時(shí)間、空間特異性C可增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性D作用方式與其方向、距離無(wú)關(guān)E作用方式與其方向和距離關(guān)系密切24順式作用元件A是DNA分子中的調(diào)節(jié)序列B又稱為分子內(nèi)作用元件C多數(shù)不和RNA聚合酶直接結(jié)合D增強(qiáng)子是順式作用元件E發(fā)揮作用與方向、距離關(guān)系密切25DNA和蛋白質(zhì)的結(jié)合包括A阻遏物和操縱序列的結(jié)合B鋅指結(jié)構(gòu)和DNA雙螺旋的結(jié)合CDNA聚合酶和模板的結(jié)合D密碼子和反密碼子的結(jié)合E沉默子與特異蛋白的結(jié)合26關(guān)于真核基因表達(dá)與原核基因表達(dá)調(diào)控的敘述,正確的有A兩者RNA聚合酶不同B原核基因表達(dá)調(diào)控通常采用操縱子機(jī)制C阻遏蛋白的負(fù)性調(diào)節(jié)在原核基因表達(dá)中具
56、有普遍性D原核基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯同時(shí)進(jìn)行E正性調(diào)節(jié)在真核基因表達(dá)調(diào)控中占主導(dǎo)地位二名詞解釋1操縱子(元)(operon) 2增強(qiáng)子(enhancer) 3管家基因(housekeeping gene) 4順式作用元件(cis-acting element)。5反式作用因子(trans-acting factor)。三、簡(jiǎn)答題1簡(jiǎn)述基因表達(dá)調(diào)控的主要要素。2簡(jiǎn)述乳糖操縱子的結(jié)構(gòu)及其負(fù)性和正性調(diào)節(jié)。3簡(jiǎn)述真核基因表達(dá)調(diào)控的主要特點(diǎn)。4簡(jiǎn)述真核RNA聚合酶II轉(zhuǎn)錄因子(TFII)的作用及前起始復(fù)合物(PIC)形成過(guò)程。5從基因表達(dá)調(diào)控的不同層次說(shuō)明為什么人體內(nèi)蛋白質(zhì)的數(shù)量遠(yuǎn)大于基因的數(shù)量。參考答案一
57、選擇題1C 2D 3E 4D 5D 6C 7D 8C 9B 10C 11A 12D 13B 14B 15C 16D 17D 18A19ABDE 20BCDE 21AD 22CDE 23ABCD 24ABCD25ABCE 26ABCDE二、名詞解釋1操縱子(元)(operon) 原核生物的幾個(gè)功能相關(guān)的結(jié)構(gòu)基因往往排列在一起,轉(zhuǎn)錄生成一段mRNA,然后分別翻譯成幾種不同的蛋白質(zhì)。這些蛋白可能是催化某一代謝過(guò)程的酶,或共同完成某種功能。這些結(jié)構(gòu)基因與其上游的啟動(dòng)子,操縱基因共同構(gòu)成轉(zhuǎn)錄單位,稱操縱子。2增強(qiáng)子(enhancer) 真核生物基因上遠(yuǎn)離轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)(130kb)、決定基因的時(shí)間、空間特異
58、性表達(dá)、增強(qiáng)啟動(dòng)子轉(zhuǎn)錄活性的DNA序列,其發(fā)揮作用的方式通常與方向、距離無(wú)關(guān)。3管家基因(housekeeping gene) 某些基因產(chǎn)物對(duì)生命全過(guò)程都是必需的或必不可少的。這類(lèi)基因在一個(gè)生物個(gè)體的各生長(zhǎng)階段和幾乎所有細(xì)胞中持續(xù)表達(dá),通常被稱為管家基因。4順式作用元件(cis-acting element)。是指可影響自身基因表達(dá)活性的真核DNA序列。根據(jù)順式作用元件在基因中的位置、轉(zhuǎn)錄激活作用的性質(zhì)及發(fā)揮作用的方式,分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子及沉默子等。5反式作用因子(trans-acting factor)。大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達(dá)后,通過(guò)與特異的順式作用元件相互作用(DNA-蛋白質(zhì)
59、相互作用)反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄,故稱反式作用蛋白或反式作用因子。三、簡(jiǎn)答題1答:基因表達(dá)調(diào)控的主要要素包括:(1)特異DNA序列 某種基因特異的表達(dá)方式與具有調(diào)節(jié)功能的DNA序列有關(guān)。原核生物大多數(shù)基因表達(dá)是通過(guò)操縱子機(jī)制來(lái)實(shí)現(xiàn)的。乳糖操縱子中的調(diào)節(jié)序列有啟動(dòng)序列、操縱序列和CAP結(jié)合位點(diǎn)等。真核生物大多數(shù)基因表達(dá)幾乎普遍涉及編碼基因及編碼基因兩側(cè)的DNA序列順式作用元件,一般分為啟動(dòng)子、增強(qiáng)子和沉默子等。(2)調(diào)節(jié)蛋白原核生物基因調(diào)節(jié)蛋白分為三類(lèi):特異因子、阻遏蛋白和激活蛋白。特異因子決定RNA聚合酶對(duì)一個(gè)或一套啟動(dòng)序列的特異性識(shí)別和結(jié)合能力。阻遏蛋白可結(jié)合特異DNA序列操縱序列,阻遏基因
60、轉(zhuǎn)錄。激活蛋白可結(jié)合啟動(dòng)序列臨近的DNA序列,促進(jìn)RNA聚合酶與啟動(dòng)序列的結(jié)合,增強(qiáng)RNA聚合酶的活性。真核基因調(diào)節(jié)蛋白又稱轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子,絕大多數(shù)真核轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子由某一基因表達(dá)后,通過(guò)與特異的順式作用元件相互作用(DNA-蛋白質(zhì)相互作用)反式激活另一基因的轉(zhuǎn)錄,故稱反式作用因子,又稱為轉(zhuǎn)錄因子,分為基本轉(zhuǎn)錄因子和特異轉(zhuǎn)錄因子。(3)DNA-蛋白質(zhì)、蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用DNA-蛋白質(zhì)相互作用是指反式作用因子與順式作用元件之間的特異識(shí)別與結(jié)合。絕大多數(shù)調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合DNA前需通過(guò)蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用形成二聚體或多聚體。所謂二聚化就是指兩分子單體通過(guò)一定結(jié)構(gòu)域結(jié)合成二聚體,它是調(diào)節(jié)蛋白結(jié)合DNA時(shí)
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