1、草珊瑚離體不定叢芽誘導因子篩選的研究作者：潘見歡潘超美陳良堅黃崇才賴珍珍【摘要】【目的】探討影響草珊瑚不定芽誘導的培養(yǎng)因素，為建立草珊瑚初代離體培養(yǎng)體系提供依據(jù)。【方法】以草珊瑚下胚軸誘導獲得的無菌再生苗莖段為外植體，考察6芐氨基嘌呤(6BA)和吲哚丁酸(IBA)不同濃度配比、光照時間和強度以及溫度對草珊瑚離體不定芽高頻誘導的影響?！窘Y(jié)果】6BA和IBA組合能有效提高草珊瑚不定芽的誘導率，而高濃度的植物激素會抑制草珊瑚不定芽的生長;草珊瑚在散射光或弱直射光照射下生長勢頭好，暗培養(yǎng)或過強直射光會出現(xiàn)植株發(fā)黃、皺縮、甚至死亡的現(xiàn)象;在溫度為25時，草珊瑚不定芽誘導率達到100%，低于25或高于30

2、均不利于其生長?！窘Y(jié)論】以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，附加25mg/L6BA+01mg/LIBA，溫度為25，采用柔弱自然散射光或低于2000lx直射光照射，時間少于8h能有效促進草珊瑚離體不定芽的誘導，誘導率達8298%?！娟P(guān)鍵詞】草珊瑚/生長和發(fā)育;不定叢芽;培養(yǎng)基，條件性草珊瑚Sarcandraglabra(Thumb)Nakai，屬金粟蘭科Chloranthaceae草珊瑚屬Sarcandra，又叫九節(jié)茶、腫節(jié)風、接骨木，為多年生草本或亞灌木。草珊瑚具消炎、清熱、解毒和舒筋活血作用，臨床用于治療多種炎癥。最新研究發(fā)現(xiàn)草珊瑚對腫瘤，尤其是急性白血病有一定治療效果1。近年來草珊瑚已被開發(fā)成一系

3、列藥品和日用品，如草珊瑚口服液2、草珊瑚清口香3和草珊瑚注射液4等。隨著開發(fā)利用的不斷擴展，忽視了對其資源的保護，致使野生資源遭受毀滅性的破壞，因此挽救草珊瑚種質(zhì)資源的研究勢在必行。目前對草珊瑚的研究主要集中在常規(guī)栽培、藥材的組織鑒別以及化學成分組成的分析上，在離體快速繁殖方面的研究甚少。本文在建立草珊瑚離體快速繁殖培養(yǎng)體系研究的基礎(chǔ)上，對草珊瑚的離體叢芽誘導培養(yǎng)進行了多方面考察，旨在為腫節(jié)風藥材生產(chǎn)的源頭草珊瑚優(yōu)質(zhì)種苗(試管苗)繁育的規(guī)?；?、產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)奠定基礎(chǔ)?，F(xiàn)報道如下。1材料與方法11藥材試驗藥材采自廣州帽峰山野生草珊瑚，經(jīng)廣州中醫(yī)藥大學藥用植物學教研室潘超美教授鑒定，確認為金粟蘭科植物

4、草珊瑚Sarcandraglabra(Thumb)Nakai。取其種子，經(jīng)消毒后在無菌條件下誘導萌發(fā)，切取胚和下胚軸誘導獲得無菌叢芽和再生植株，以無菌再生苗的莖段作為誘導不定芽的材料(圖1)。12主要儀器與試劑6芐氨基嘌呤(6BA)由上海求精生化試劑儀器有限公司生產(chǎn)(批號：20060718);吲哚丁酸(IBA)由上海求精生化試劑儀器有限公司生產(chǎn)(批號：20070310);瓊脂粉由湛江新臺興海洋生物制品有限公司生產(chǎn)(批號：2007818);其他試劑均為化學純;DLCJ1F型單人雙面超凈工作臺由哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)有限公司提供;YXQSGD型全自動高壓滅菌鍋由廣東醫(yī)療器械廠提供;XS125A型電子分析天平由瑞士Sartorius公司提供。LRH300G型生物光照培養(yǎng)箱由廣東醫(yī)療器械廠提供。表1叢芽誘導培養(yǎng)基的L16(45)正交試驗設(shè)計13多種影響因子的篩選5采用MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，培養(yǎng)基按照常規(guī)方法，根據(jù)表1正交試驗設(shè)計的不同配方配制，添加30g/L的蔗糖、6g/L瓊脂粉，pH5860，121124(11kg/cm2壓力)滅菌15min。在無菌條件下，將草珊瑚無菌再生苗切成115cm長帶節(jié)莖段，接種于培養(yǎng)基中，每瓶34個。培養(yǎng)溫度(252)，光照用日光燈18002200lx，每天連續(xù)光照8h。28d后統(tǒng)計不定芽誘