1、免疫抑制劑的分類免疫抑制劑的分類第1頁 20 世紀60 年代初,Umezawa 提出了酶抑制劑概念認為微生物有機體內(nèi)酶及其抑制劑是共存造成了許多新篩選模型與方法建立，開創(chuàng)了從微生物代謝產(chǎn)物中尋找其它生理活性物質(zhì)新時代免疫抑制劑的分類第2頁微生物起源免疫調(diào)整劑免疫抑制劑的分類第3頁基礎概念免疫反應（immunoreaction）：機體免疫系統(tǒng)反抗原性異物所做出應答，是機體排除外來物質(zhì)主要防御機制，也是預防本身細胞變異而致病主要自穩(wěn)機制,亦稱免疫應答。免疫調(diào)整：指在免疫反應中，各種免疫細胞及其亞群間，細胞與各種細胞因子間存在著刺激與抑制，或正相與負相兩方面作用組成相互制約調(diào)整網(wǎng)絡，完成反抗原識別和

2、反應免疫療法（immunotherapy）:經(jīng)過影響機體免疫功效，到達預防和治療疾病目標，或稱免疫治療免疫抑制劑的分類第4頁免疫增強治療（immunopotentiate therapy）免疫增強劑（immunopotentiator）免疫抑制治療（immunosuppressive therapy）免疫抑制劑（immunosuppressant）免疫調(diào)整劑（immunomodulator）免疫抑制劑的分類第5頁各種免疫功效紊亂后引發(fā)相關(guān)疾病HIV感染后惡液質(zhì) 系統(tǒng)性紅斑狼瘡 Graves病免疫抑制劑的分類第6頁一、免疫反應及其調(diào)整參加免疫反應細胞主要有：APC 、T淋巴細胞、 B淋巴細胞AP

3、C作用T細胞按功效分為Th、Ts和 Tc （CTL）B細胞產(chǎn)生抗體，是免疫反應效應細胞免疫抑制劑的分類第7頁免疫抑制劑的分類第8頁 免疫抑制劑的分類第9頁免疫細胞間調(diào)整作用：T- M ，T-B， Th - Ts ， Ts - Tc ，其中Th 、 Ts 在免疫調(diào)整中起關(guān)鍵作用細胞因子免疫調(diào)整：免疫細胞釋放可溶性因子也參加免疫反應調(diào)整，這些因子包含IFN 、IL、CSF免疫抑制劑的分類第10頁 免疫抑制劑的分類第11頁 二、微生物起源免疫抑制劑 移植種類： 自體移植 同種同基因移植 同種異基因移植 異種移植免疫抑制劑的分類第12頁 移植排斥反應類型 超急性排斥 急性排斥 急性體液性排斥 急性細胞

4、性排斥 慢性排斥 本身免疫性疾病：機體免疫系統(tǒng)對本身成份發(fā)生免疫應答而造成疾病狀態(tài)免疫抑制劑的分類第13頁 免疫抑制治療始于1959年，分四個階段：利用全身Xray照射和細胞毒藥品（如環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤）殺傷體內(nèi)快速分裂細胞采取選擇性藥品（如類固醇、激素）和全身淋巴組織照射以消除免疫活性細胞選擇性作用于免疫活性細胞亞群，代表藥品CyA、抗淋巴細胞單克隆抗體 在同種移植反應中誘導對外來抗原耐受性免疫抑制劑的分類第14頁免疫抑制劑分類 依據(jù)藥理作用分類：激素類免疫抑制劑：糖皮質(zhì)激素DNA或RNA合成抑制劑：環(huán)磷酰胺、硫唑嘌呤、麥考酚酸、咪唑立賓細胞因子合成抑制劑：環(huán)孢菌素A、他克莫司細胞因子作用抑

5、制劑：西羅莫司、來氟米特、胍立莫司、SKF105685、MNA生物學免疫抑制劑：抗淋巴細胞球蛋白、莫羅單抗CD3、達克力莫、巴斯力莫、抗白細胞介素-受體抗體中藥及其有效成份：冬蟲夏草、雷公藤多甙免疫抑制劑的分類第15頁 依據(jù)制備起源分類：微生物發(fā)酵產(chǎn)物：環(huán)孢菌素A、他克莫司、西羅莫司、咪唑立賓全合成類：激素類、硫唑嘌呤、來氟米特、布列奎鈉半合成類：麥考酚酸、SDZIMM125、脫氧精胍菌素生物制劑：抗淋巴細胞球蛋白、抗胸腺細胞球蛋白、單克隆抗體免疫抑制劑的分類第16頁 依據(jù)應用先后分類：第1代：以皮質(zhì)激素、硫唑嘌呤、抗淋巴細胞球蛋白為代表非特異性、廣泛免疫抑制第2代：以環(huán)孢菌素A、他克莫司為代

6、表對T細胞相對特異性第3代：以單克隆抗體、西羅莫司、麥考酚酸為代表作用于抗原呈遞和分子間相互作用第4代：以抗白細胞介素-受體單克隆抗體、FTY20為代表針對改變細胞因子環(huán)境免疫抑制劑的分類第17頁70年代末，真菌產(chǎn)物環(huán)孢菌素A（cyclosporin A,CsA）發(fā)覺及其在抗移植排斥反應中應用揭開了從微生物產(chǎn)物中尋找新型免疫抑制劑序幕 起源菌：真菌、鏈霉菌為主、稀有放線菌、細菌也可結(jié)構(gòu)分類：大環(huán)內(nèi)酯類、雜環(huán)類、肽類、芳香族類（康樂霉素C）免疫抑制劑的分類第18頁幾個主要免疫抑制劑 1.環(huán)孢素(CsA，商品名新山地明) 1969-1970年瑞士山道士企業(yè)在巴塞爾微生物研究所進行抗真菌藥品篩選時,

7、從美國和挪威土壤中分離到兩種不完全真菌即光澤柱孢菌和多孔木霉(后正名為雪白白僵菌)產(chǎn)生窄譜抗真菌抗生素即環(huán)孢素。免疫抑制劑的分類第19頁1974年進行動物體內(nèi)免疫抑制活性研究 1978年首次應用于臨床腎移植試驗1980年實現(xiàn)CsA全合成1983年FDA同意用于臨床器官移植 免疫抑制劑的分類第20頁 化學性質(zhì)：是一個中性、高親脂性由11個氨基酸組成環(huán)聚肽免疫抑制劑。氨基酸序列變異大，尤其是在2位 除CsA外，其天然同系物有30各種 免疫抑制劑的分類第21頁 中性十一環(huán)肽化合物免疫抑制劑的分類第22頁作用機制： 抑制T細胞活化過程中IL-2 基因轉(zhuǎn)錄 增加TGF-表示 IL-2： 活化T細胞產(chǎn)生

8、T細胞增殖和產(chǎn)生細胞因子 B細胞增殖分泌抗體 免疫抑制劑的分類第23頁免疫抑制劑的分類第24頁NF-AT是一個T細胞特異性轉(zhuǎn)錄因子完整NF-AT有兩個亞基組成： NF-Atn位于核內(nèi)， NF-Atc位于胞漿內(nèi)免疫抑制劑的分類第25頁 臨床特點：主要用于器官移植（肝、心）最優(yōu)點是無骨髓抑制副作用最大缺點為有效治療量與腎毒性劑量很靠近聯(lián)適用藥（激素、AZP）有利于取得協(xié)同效應,降低毒副作用免疫抑制劑的分類第26頁2 .他可莫司(,FK506，普樂可復) ： 1987年日本首次從筑波鏈霉菌發(fā)酵液中提取一個23元環(huán)大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑免疫抑制劑的分類第27頁 是第一個用專門設計免疫抑制劑篩選模型篩選出

9、來免疫抑制劑, 同時發(fā)覺含有抗真菌活性1988年說明結(jié)構(gòu)1989年完成化學合成1994年FDA同意作為器官移植用免疫抑制劑應用于臨床免疫抑制劑的分類第28頁在結(jié)構(gòu)上與CsA不相關(guān)，但二者作用機制相同，均經(jīng)過鈣調(diào)磷酸酶作用而阻斷IL-2 轉(zhuǎn)錄免疫抑制劑的分類第29頁不一樣點： FK506胞內(nèi)結(jié)合蛋白為 FKBP, FK506腎毒性要比CsA小得多，因而治療窗口要大得多FK506免疫抑制作用約為CsA100倍，不良反應亦較CsA少，故有望取代CsA成為器官移植術(shù)后首選免疫抑制劑聯(lián)適用藥亦可取得協(xié)同效應免疫抑制劑的分類第30頁細胞因子合成抑制劑（CsA,FK-506)在胞漿與受體蛋白-免疫親和素結(jié)合

10、CyPA-CsA和FKBP-FK506作用靶-鈣調(diào)磷酸酶抑制NF-AT活性與IL-2基因表示免疫抑制劑的分類第31頁3 雷帕霉素（RPM，西羅莫司,雷帕鳴）是Ayerster試驗室于1975年從太平洋Easler島(RapaNui)土壤樣品中分離吸水鏈霉菌所產(chǎn)生代謝產(chǎn)物因其分離場所名稱為RapaNui島，所以又被稱為雷帕霉素(Rapamycin)1977年發(fā)覺含有免疫抑制作用1999年FDA允許將其作為一個安全性較高藥品用于防治腎移植后排斥反應是一個親脂性31元環(huán)三烯大環(huán)內(nèi)酯類免疫抑制劑的分類第32頁與FK506結(jié)構(gòu)非常相同免疫抑制劑的分類第33頁但作用于免疫系統(tǒng)方式不一樣RPM進入胞內(nèi)與FK

11、506競爭結(jié)合FKBP RPM-FKBP復合物作用靶蛋白不是鈣調(diào)磷酸酶，而是RPM 靶分子（mTOR)RPM主要作用抑制細胞因子（IL-2)與其受體結(jié)合所開啟信號轉(zhuǎn)導路徑，細胞因子作用抑制劑免疫抑制劑的分類第34頁 RPM（ 阻斷IL-2驅(qū)動T細胞增殖）與CsA（阻斷IL-2合成）含有強烈協(xié)同作用RPM與FK506適用時因為要競爭與FKBP結(jié)合，故存在拮抗作用,不宜適用對T淋巴細胞抑制作用能夠維持12小時以上，高出環(huán)孢素、FK506近10小時,可望用于慢性移植物排斥反應免疫抑制劑的分類第35頁Rapa除開發(fā)為免疫抑制劑外, 現(xiàn)已成功開發(fā)為用于治療心血管病“Rapa支架”和作用機理獨特、毒性低新

12、抗癌藥CCI-779免疫抑制劑的分類第36頁 4、麥考酚酸（Mycoyehenolic ，MPA）從霉菌(Penicillium brevicompactu)菌株培養(yǎng)液里提取精制得到為苯呋喃類化合物 免疫抑制劑的分類第37頁1896年Gosio發(fā)覺抗真菌抗生素1952年說明其化學結(jié)構(gòu)60年代用于治療牛皮癬等本身免疫性疾病1969年實現(xiàn)化學全合成1995年FDA同意作為免疫抑制劑應用于臨床免疫抑制劑的分類第38頁作用機制：抑制IMPDH脫氫酶 直接與B淋巴細胞作用抑制抗體產(chǎn)生 MPA較少引發(fā)嚴重骨髓抑制。無顯著肝、腎毒性，可用于基礎肝、腎功效不良器官移植患者。用MPA代替AZP新三聯(lián)治療可顯著提

13、升移植腎存活率，降低CyA和激素用量 嗎替麥考酚脂(MMF):MPA2-乙基脂類衍生物免疫抑制劑的分類第39頁 5、咪唑立賓(MZB,布累迪寧)是1971年由日本開發(fā)出免疫抑制劑，在20世紀70年代后期用于臨床為土壤真菌(Eupenicillium brefeldianum)產(chǎn)生咪唑類核酸物質(zhì)免疫抑制劑的分類第40頁作用機制：抑制IMPDH脫氫酶和GMP合成酶 直接與B淋巴細胞作用抑制抗體產(chǎn)生主要不良反應是胃腸道反應、血液系統(tǒng)障礙和過敏癥狀 MZB和MPA均為青霉菌產(chǎn)生含有抗真菌、抗腫瘤和免疫抑制活性抗生素二者化學結(jié)構(gòu)不一樣，但免疫抑制機制相同，均為抑制DNA合成免疫抑制劑免疫抑制劑的分類第4

14、1頁 6、脫氧精胍菌素( 15-Deoxyspergualin ,DSG) 1981 年,日本學者從側(cè)孢芽胞桿菌( Bacillus laterosporus ) 培養(yǎng)液中分離出精胍菌素,發(fā)覺其有免疫抑制活性第二年經(jīng)過對精胍菌素脫羥基化得到在體內(nèi)外都有很強生物活性15-脫氧精胍菌素 1987 年成功地將其全合成 1994 年由Nippon Kayaku 企業(yè)開發(fā)上市免疫抑制劑的分類第42頁 以上免疫抑制劑都含有抗真菌作用，能夠給咱們什么啟示呢？從免疫抑制劑開發(fā)新抗真菌抗生素如：美國ARIAD企業(yè)對Rapa進行化學改造以取得強效抗真菌抗生素從抗真菌抗生素開發(fā)新免疫抑制劑如：奇放線菌Str.spe

15、ctabilis發(fā)酵液中分離硝苯吡喃酮SNF4435C、D含有免疫抑制活性及抗白色念珠菌作用在尋找新免疫抑制劑時初篩篩選模型可試用體外抗真菌活性和免疫抑制活性相結(jié)合方法免疫抑制劑的分類第43頁 值得注意：不是全部免疫抑制劑都含有抗真菌作用不是全部抗真菌抗生素都含有免疫抑制活性免疫抑制劑的分類第44頁最近,首先從老“被舍棄”抗真菌抗生素中去開發(fā)可能有應用價值免疫抑制劑；首先繼續(xù)篩選新免疫抑制劑,而且也發(fā)覺了一些現(xiàn)有免疫抑制活性、又有抗真菌作用新化合物免疫抑制劑的分類第45頁微生物產(chǎn)生免疫抑制劑篩選方法（1）體外篩選方法： 1）促細胞分裂劑誘導小鼠脾細胞增殖作用經(jīng)典T-淋巴細胞促細胞分裂劑是兩種植

16、物促細胞分裂素：CoA、PHA淋巴細胞刺激程度能夠在加進植物凝集素條件下經(jīng)過測定培養(yǎng)物中增殖細胞或經(jīng)過測定3H-胸腺嘧啶摻進新合成DNA量而判定免疫抑制劑的分類第46頁淋巴細胞植物凝集素免疫增強劑組 3H-胸腺嘧啶摻入淋巴細胞量不加免疫增強劑對照組淋巴細胞植物凝集素免疫抑制劑組 3H-胸腺嘧啶摻入淋巴細胞量不加免疫抑制劑對照組CyA、B、C和靈紅菌素就是用這種方法篩選出來 免疫抑制劑的分類第47頁 2）混合淋巴細胞反應（MLR）定義：來自同種異體混合淋巴細胞，在體外培養(yǎng)時發(fā)生母細胞轉(zhuǎn)化而產(chǎn)生有絲分裂反應，取得殺傷細胞能力靶細胞增殖、應答細胞刺激作用程度可經(jīng)過測定3H-胸腺嘧啶摻進靶細胞量來判斷

17、，免疫增強劑可促進這個反應，而抑制劑則降低這種反應。 FK506、FR-900520、FR-900523、FR-65814就是經(jīng)過這種方法篩選出來免疫抑制劑的分類第48頁 3）IL-2產(chǎn)生抑制作用 CyA抑制IL-2，所以分析測定IL-2產(chǎn)生能用于篩選免疫抑制劑免疫抑制劑的分類第49頁2）體內(nèi)篩選方法：1）溶血空斑試驗（PFC,plaque forming cell）創(chuàng)造一個條件使釋放抗體細胞活性形成可見空斑把經(jīng)綿羊血紅細胞免疫小鼠脾臟制成脾細胞懸液,在半固體凝膠介質(zhì)中與綿羊血紅細胞混合在平皿內(nèi)鋪成薄層在37度孵育過程中或孵育后加入補體再次孵育后在靠近分泌特異性抗體淋巴細胞周圍綿羊血紅細胞被抗

18、體致敏,激活補體，產(chǎn)生溶血反應,出現(xiàn)可見空斑。加入免疫增強劑則空斑多于對照組，加免疫抑制劑則相反。免疫抑制劑的分類第50頁 2）遲發(fā)型過敏反應（DTH）定義：注射一個抗原進入經(jīng)一樣抗原免疫過動物皮膚，能引發(fā)局部致敏，表現(xiàn)為皮膚紅腫硬結(jié)，因為反應較慢，需要2448小時才能看出結(jié)果，所以稱為遲發(fā)型過敏反應。免疫增強劑促進此反應，抑制劑則顯著減弱該反應。免疫抑制劑的分類第51頁 3）移植物抗宿主反應（GvHR）定義：把淋巴細胞輸給不一樣基因背景宿主，被移植細胞能識別宿主細胞為外來并發(fā)生像混合淋巴細胞反應中一樣改變免疫抑制劑的分類第52頁四、微生物起源免疫增強劑 免疫增強劑分類： 免疫因子：轉(zhuǎn)移因子、免疫核糖核酸、胸腺肽 化學合成藥品：左旋咪唑、西咪替丁 微生物制劑：卡介苗、短小棒狀桿菌 中藥制劑：真菌多糖成份（香菇、靈芝）、藥用植物及其有效成份（人參、刺五加、黃芪多糖）免疫抑制劑的分類第53頁 微生物起源免疫增強劑： 1）Bestatin（烏苯美司）1976年，橄欖網(wǎng)狀鏈霉菌發(fā)酵液中分離，抑制細胞膜氨肽酶B和亮氨酸氨肽酶活性，提升免疫細胞功效當前唯一應用于臨床微生物次級代謝產(chǎn)物起源免疫增強劑 免疫抑制劑的分類第54頁 N-（2S,3