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文檔簡介
1、檢測生物組織中的糖類蛋白質(zhì)脂肪第1頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四檢測生物組織中的糖類、脂肪和蛋白質(zhì) 1.實驗原理第2頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四 斐林試劑蘇丹橘黃色紅色磚紅色沉淀紫色蘇丹 雙縮脲試劑鑒定物質(zhì)試劑實驗現(xiàn)象還原性糖脂肪蛋白質(zhì)淀粉 碘液 藍(lán)色 生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實驗原理第3頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第4頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四選材:含糖量較高的白色或近于白色的植物組織(排除色素對顯色的干擾),蘋果、梨最好 。 實驗流程(步驟)1.可溶性還原糖 制
2、備組織樣液:制漿:去皮、切塊、研磨,過濾:(用單層紗布)取液:(mL)顯色反應(yīng) mL組織樣液剛配制的斐林試劑mL現(xiàn)象: 呈現(xiàn)藍(lán)色變成磚紅色(用前混勻)5065.C水浴加熱2min葡萄糖,果糖,麥芽糖;蔗糖為非還原性糖第5頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四還原糖的檢測和觀察:第6頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四還原糖的檢測結(jié)果第7頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第8頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四2.脂肪的鑒定 取材:花生種子(浸泡h),去皮,將子葉削成薄片 制片:選取最薄的薄片移至載玻片中央在薄片上滴
3、加蘇丹(或蘇丹) 染液2 3滴,染色min滴加體積分?jǐn)?shù)為50%的酒精溶液12滴,洗去浮色(多余的蘇丹 )吸去余液,滴1-2滴蒸餾水,蓋上蓋玻片,制成臨時裝片顯微觀察:先在低倍鏡下找到已著色的薄片,后用高倍鏡觀察現(xiàn)象:有被染成橘黃色(或紅色)的脂肪微粒脂肪微粒第9頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四脂肪的檢測結(jié)果第10頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第11頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四3.蛋白質(zhì)的鑒定 選材與制備組織樣液:黃豆組織樣液(或雞蛋蛋清稀釋液)黃豆浸泡 去皮切片研磨過濾濾液 顯色反應(yīng)mL組織樣液雙縮脲試劑mL現(xiàn)象:無
4、色雙縮脲試劑滴紫色或紫紅色(創(chuàng)設(shè)堿性條件)(提供Cu2+)第12頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四蛋白質(zhì)的檢測結(jié)果第13頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四第14頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四4.淀粉的鑒定取材:馬鈴薯勻漿檢測:mL組織樣液碘液2滴現(xiàn)象: 搖勻后變成藍(lán)色第15頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四問題探討:1、在做還原糖、蛋白質(zhì)鑒定的實驗時,為什么要留出一部分樣液?作對照2、使用雙縮脲試劑時為什么B液只能加34滴而不能過量? 過量的雙縮脲試劑B會與試劑A反應(yīng),使溶液呈藍(lán)色,而掩蓋生成的紫色。3
5、、為什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久? 時間太長,Cu(OH)2懸濁液就沉淀在試管底部而無法參與反應(yīng)。深化第16頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四比較項目試劑及成分原理溶液濃度方法加熱與否結(jié)果可溶還原糖的鑒定斐林試劑NaOH和CuSO4磚紅色沉淀蛋白質(zhì)的鑒定雙縮脲試劑NaOH和CuSO4溶液呈紫色4、斐林試劑與雙縮脲試劑兩者有何不同?新配制的Cu(OH)2溶液在堿性環(huán)境下的Cu2+NaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.05g/mLNaOH濃度為0.1g/mLCuS04濃度為0.01g/mL先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合,而后立即使用。先加入Na0H1mL,然后再加CuS044滴,搖勻。(不能過量)水浴加熱不需要第17頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四知識結(jié)構(gòu)第18頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四1、青蘋果汁遇碘液顯藍(lán)色,熟蘋果汁能與斐林試劑作用產(chǎn)生磚紅色沉淀,下列結(jié)論中最合理的是 ( ) A青蘋果汁中有淀粉,不含還原糖 B熟蘋果汁中含還原糖,沒有淀粉 C蘋果轉(zhuǎn)熟時,大量淀粉水解成還原糖 D蘋果轉(zhuǎn)熟時單糖聚合成淀粉 C例題第19頁,共20頁,2022年,5月20日,5點51分,星期四、安徽阜陽劣質(zhì)奶粉事件震驚全國,引起世人注目。鑒定
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