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1、ICS65.120B 25DB12天津市地方標準DB12/T 9462020飼料中氨基酸的測定 離子交換色譜法Determination of amino acids in feeds-Ion exchange chromatography2020-06-29發(fā)布2020-08-01實施天津市市場監(jiān)督管理委員會發(fā)布DB12/T 946DB12/T 9462020II前言本標準依據(jù)GB/T 1.1-2009給出的規(guī)則起草。本標準由天津市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會提出并歸口。本標準起草單位:天津市畜牧獸醫(yī)研究所。本標準主要起草人:楊鴻雁、梁世岳、李玉鵬、陳龍賓、范寰、喬家運。 PAGE PAGE 4飼料中氨基
2、酸的測定 離子交換色譜法范圍本標準適用于飼料原料、配合飼料及濃縮飼料中氨基酸含量的測定。GB/T 603化試劑 方法所制及品制GB/T 6682析驗水規(guī)和驗法GB/T 14699.1GB/T 20195原理(飼料中的蛋白質(zhì)在堿的作用下,水解出色氨酸,經(jīng)離子交換色譜法分離并以茚三酮柱后衍生測定。GB/T 6682GB/T603 (6 mol/L)500mL1000 mLpH88%。301:91h30min, (7.2mol/L)600mL1000 mL(4 mol/L)167.8 g1000 mL14.71 g2.92 g10.50 g,500 mL5mL0.1 mL1000mL。(48%)99
3、.999%。LL172.50 mol/mL。(99.0%)105.7mg(純度99.0%)113.3 mg,用水溶解并定容至 250 mL,濃度均為 2.50 mol/mL,28保存,有效期 1 年。)127.5 mg0.1 mol/L 250 ml2.50 mol/mL,2811 mL25 mL100nmol/mL,2830.18 mm。0.1mg。570 nm440 nm按GB/T14699.1GB/T201950.18mm 孔徑(80)30mg70mg(5mg20mg0.1mg)于25mLmL鹽酸溶液,充氮氣約1min后擰緊瓶蓋,將水解管放入1101恒溫干燥箱,水解22h24h。冷50
4、mg100 mg(7.5 mg25 mg0.1 mg)于25 mLmin2(0 416h0.3mL30min10mL 鹽酸溶液,充氮氣約1min后擰緊瓶蓋,將水解管放入1101恒溫干燥箱,水解22h24h。冷卻25mL50 mg100 mg(7.5 mg25 mg0.1 mg)于10 mL1.5 mL1 min110120 h25 mLpH67注:以上三種方法依所要測定的氨基酸種類選用。將上述水解液過濾,取0.5 mL濾液于小試管中,置于氮吹儀,65吹干,必要時加少許水重復(fù)蒸干2次3次。準確加入2 mL5 mL檸檬酸鈉緩沖液,旋渦混合儀混勻,用0.22 m水系過濾器過濾到上機瓶中,待測。測定按照儀器使用說明書放置茚三酮溶液與pH1。圖1混合基標工液譜圖氨基酸含量計算見式(1)。W(%)=(1)式中:W某氨基
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