1、藥物分析第二章 藥物的鑒別試驗概述1 定義：藥物的鑒別試驗（identification test）是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學(xué)、物理化學(xué)或生物學(xué)方法來判斷藥物的真?zhèn)巍? 它是藥品質(zhì)量檢驗中的首項任務(wù)。3 它是確認(rèn)試驗，不能用來鑒別未知物。鑒別試驗的項目一 性狀藥物的性狀（description）反映了藥物特有的物理性質(zhì)，一般包括外觀、溶解度和物理常數(shù)等。1 外觀 指藥物的聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭、味等性質(zhì)。維生素B1：本品為白色結(jié)晶或結(jié)晶性粉末；有微弱的特臭，味苦；干燥品在空氣中迅即吸收約4%的水分。鑒別試驗的項目2 溶解度 它是藥物的一種物理性質(zhì)，在一定程度上反映了藥品的純度

2、。根據(jù)其描述，可以為分析方法和制劑提供溶劑選擇的依據(jù)。藥典的描述：極易溶解、易溶、溶解、略溶、微溶、極微溶解、幾乎不溶或不溶。（對應(yīng)的英文描述為：very soluble 、freely soluble 、 soluble 、sparingly soluble 、slightly soluble 、very slightly soluble 、 practically insoluble or insoluble）Ch.P(2005)關(guān)于藥品溶解行為的描述示例磺胺嘧啶：本品在乙醇或丙酮中微溶，在水中幾乎不溶；在氫氧化鈉試液中易溶，在稀鹽酸中溶解。苯巴比妥：本品在乙醇或乙醚中溶解，在氯仿中略溶，

3、在水中極微溶解；在氫氧化鈉或碳酸鈉溶液中溶解。鑒別試驗的項目3 物理常數(shù) 它是鑒定藥品質(zhì)量的重要指標(biāo)。其結(jié)果不僅對藥品具有鑒別意義，也反映了該藥品的純雜程度。藥典收載：相對密度、餾程 、熔點 、凝點 、比旋度 、折光率、吸收系數(shù)等。（1）熔點：熔點系指一種物質(zhì)按規(guī)定方法測定，由固體熔化成液體的溫度、熔融同時分解的溫度或在熔化時自初熔至全熔的一段溫度。鑒別試驗的項目（2）比旋度 在一定波長和溫度下，偏振光透過長1dm且每1ml中含有旋光性物質(zhì)1g的溶液時測得的旋光度稱為比旋度。它是反映手性藥物特性及純度的主要指標(biāo)，可用以區(qū)分藥品、檢查純度或測定制劑的含量。注意：1）計算時按干燥品或無水物計算。2

4、）應(yīng)寫明濃度和溶劑，若測定溫度不是20 ，應(yīng)注明。3）測定旋光度時，應(yīng)能準(zhǔn)確至0.01。鑒別試驗的項目（3）吸收系數(shù) 指在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度。一般有摩爾吸收系數(shù)和百分吸收系數(shù)兩種表示方式。后者是中國藥典收載的方法，以 表示。用于考察原料藥的質(zhì)量，以及本品制劑用紫外法測定含量的依據(jù)。鹽酸甲氧明：取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml約含30g的溶液，照分光光度法，在290nm的波長處測定吸收度，吸收系數(shù)（ ）為133144。鑒別試驗的項目（二）一般鑒別試驗(General identification test )依據(jù)某一類藥物的

5、化學(xué)結(jié)構(gòu)或理化性質(zhì)的特征，通過化學(xué)反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)?。無機藥物-其組成的陰離子和陽離子的特殊反應(yīng)。有機藥物-典型的官能團反應(yīng)。注意：如有干擾或為混合物，則不適合。有機氟化物原理：有機酸鹽1 水楊酸方法：取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液1滴，即顯紫色。原理：本品在中性或弱酸性條件下，與三氯化鐵試液生成配位化合物（中性，紅色；弱酸性，紫色。)芳香第一胺類方法：取供試品約50mg，加稀鹽酸1ml，必要時緩緩煮沸使溶，放冷，加亞硝酸鈉溶液（0.1mol/L）數(shù)滴，滴加堿性-萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成橙黃色到猩紅色沉淀。原理：先重氮化，再在堿性條件下與-萘酚偶合反應(yīng)。具體反應(yīng)式見書。托烷生物堿類

6、方法：取供試品約10mg,加發(fā)煙硝酸5滴，置水浴上蒸干，即得黃色的殘渣，放冷，加乙醇2-3滴，加固體氫氧化鉀一小顆，即顯深紫色。原理：無機金屬鹽1）鈉鹽、鉀鹽 、鈣鹽的顏色反應(yīng)鈉離子-顯鮮黃色鉀離子-顯紫色鈣離子-顯磚紅色2）銨鹽無機酸根1）氯化物鑒別一：與銀離子產(chǎn)生氯化銀沉淀。鑒別二：產(chǎn)生氯氣，氧化碘離子產(chǎn)生碘，使淀粉變藍。2）硫酸鹽鑒別一：與鋇離子產(chǎn)生硫酸鋇沉淀。鑒別二：與鉛離子產(chǎn)生硫酸鉛沉淀。鑒別試驗的項目（三）專屬鑒別試驗（Specific identification test） 是證實某一種藥物的依據(jù)，系根據(jù)每一種藥物化學(xué)結(jié)構(gòu)的差異及其所引起的物理化學(xué)特性不同，選用某些特有的靈敏的

7、定性反應(yīng)，來鑒別藥物的真?zhèn)?。具體內(nèi)容在各類藥物中介紹。三 鑒別方法（一）化學(xué)法 包括呈色反應(yīng)，沉淀反應(yīng)，產(chǎn)生熒光的反應(yīng)，生成氣體的反應(yīng)等。具體見書。還可以測定生成物的熔點，專屬性強，但煩瑣，耗時，現(xiàn)在應(yīng)用較少。（二）光譜法包括紫外光譜法和紅外光譜法?；瘜W(xué)鑒別法2 沉淀生成反應(yīng)鑒別法與重金屬離子的沉淀反應(yīng)；與硫氰化鉻銨的沉淀反應(yīng)（生物堿及其鹽，具有芳香環(huán)的有機堿及其鹽）；其他沉淀反應(yīng)化學(xué)鑒別法3 熒光反應(yīng)鑒別法4 氣體生成反應(yīng)鑒別法5 測定生成物的熔點。紅外光譜鑒別法紅外光譜法是分子的振動-轉(zhuǎn)動光譜，特征性強。用于鑒別組分單一、結(jié)構(gòu)明確的原料藥。中國藥典采用與對照圖譜進行比較。USP采用對照品法

8、。中國藥典收載的圖譜：在分辨率2cm-1條件下繪制，基線在90%透光率以上，最強吸收峰在10%透光率以下。其他比較新的方法1近紅外光譜法通過測定被測物質(zhì)在近紅外區(qū)（750-2500nm或12800-4000cm-1）的特征光譜并利用適宜的化學(xué)計量學(xué)方法提取相關(guān)信息后，對被測物質(zhì)進行定性定量分析的一種分析技術(shù)。2原子吸收光譜法利用原子蒸氣可以吸收由該元素作為陰極的空心陰極燈發(fā)出的特征譜線的特性，根據(jù)供試溶液在特征譜線處的最大吸收和特征譜線的強度減弱程度可以進行定性定量分析。其他比較新采用的方法3 NMR通過測定供試品指定基團上的質(zhì)子峰的化學(xué)位移和偶合常數(shù)進行藥物的鑒別。4X射線粉末衍射法主要用于結(jié)晶物質(zhì)的定性定量分析。防止藥物的不同晶型的雜質(zhì)的量。（三）色譜鑒別法TLC-比較斑點的Rf（比移值）和顏色。HPLC和GC-比較保留時間。質(zhì)譜法比較其質(zhì)譜圖中離子峰強度和相互關(guān)系。示例見書。（四）生物學(xué)法利用微生物或?qū)嶒瀯游镞M行鑒別的方法。如利用青霉素鈉溶液對金黃色葡萄球菌的抑菌作用進行鑒別。方法：取本品與已知的青霉素適量，分別加滅菌水制成每1ml 中約含50g的溶液，各取1ml，加入不少于200單位的青霉素酶溶液1ml，在37滅活1小時后，取滅菌濾紙片，分別用上述溶液浸濕，并用濾紙吸去多余的液體，置于攤布金黃色葡萄球菌CMCC（B）26003的培養(yǎng)基上，在37培養(yǎng)16小時，均