1、關(guān)于發(fā)育毒性和致畸作用第1頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四2【目的要求】掌握外源化學(xué)物對(duì)生殖系統(tǒng)毒作用過(guò)程、特點(diǎn)及評(píng)價(jià)方法。掌握外源化學(xué)物對(duì)機(jī)體致畸作用（發(fā)育毒性）過(guò)程、特點(diǎn)、影響因素及評(píng)價(jià)方法。第2頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四3【內(nèi) 容】第一節(jié) 概述第二節(jié) 發(fā)育毒性與致畸性第三節(jié) 致畸（發(fā)育毒性）作用機(jī)制第四節(jié) 發(fā)育毒性和致畸作用的試驗(yàn)與評(píng)價(jià)第3頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四4反應(yīng)停(thalidomide)事件孕婦的理想選擇？ 1953年，聯(lián)邦德國(guó)一家名為Chemie Gruenenthal的制藥公司研究人員發(fā)現(xiàn)

2、， 反應(yīng)停（沙立度胺）具有一定的鎮(zhèn)靜安眠作用，而且 對(duì)孕婦懷孕早期的妊娠嘔吐療效極佳。 1957年10月1日該公司將反應(yīng)停正式推 向市場(chǎng)。第4頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四5當(dāng)時(shí)反應(yīng)停成了“孕婦 的理想選擇” ，在歐 洲、亞洲、非洲和南美洲被醫(yī)生大 量處方給孕婦以治療 妊娠嘔吐。科學(xué)家們?cè)谘兄品磻?yīng)停時(shí)，并沒(méi)有料到這種藥物會(huì)產(chǎn)生如此可怕的副作用。第5頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四6 令人恐怖的副作用 到了1960年，歐洲的醫(yī)生 們開(kāi)始發(fā)現(xiàn)，本地區(qū)畸形嬰兒的出生率明顯上升。這些嬰兒有的是四肢畸 形(主要是雙上肢的短肢畸形)，有的是腭裂，有 的是盲

3、兒或聾兒，還有 的是內(nèi)臟畸形。第6頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四7調(diào)查顯示，孕婦在末次月經(jīng)后第 34 50天是反應(yīng)停作用的敏感期。 在此時(shí)間段以外服用反應(yīng)停，一般不會(huì)導(dǎo)致胎兒的出生缺陷。1970年4月10日，案件的控辯雙方于法庭外達(dá)成了和解，ChemieGruenenthal公司同意向控方支付總額1.1億德國(guó)馬克的賠償金。第7頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四81960年，歐洲的醫(yī)生們開(kāi)始發(fā)現(xiàn)，本地區(qū)畸形嬰兒的出生率明顯上升。這些嬰兒以四肢畸形為主，還有的是腭裂、盲兒或聾兒，或內(nèi)臟畸形。1961年11月，聯(lián)邦德國(guó)漢堡大學(xué)的遺傳學(xué)家蘭茲博士根據(jù)自己

4、的臨床觀察提示反應(yīng)停可能具有致畸胎性。1961年底Thalidomide退出市場(chǎng)1962: FDA inspector FrancesOldham Kelsey receives anaward from President John F.Kennedy for blocking sale ofThalidomide in the UnitedStates梅里爾公司在申請(qǐng)前研究過(guò)“反應(yīng)停”對(duì)懷孕大鼠和孕婦的影響，但沒(méi)有出現(xiàn)畸形大鼠和畸形兒。Kelsey以數(shù)據(jù)不全為由，第8頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四9Thalidomide為什么導(dǎo)致畸形兒的出生？為什么畸形大都是四肢

5、短?。繛槭裁创笫鬀](méi)有出現(xiàn)畸形？為什么在梅里爾公司的研究中，halidomide沒(méi)有導(dǎo)致畸形兒的出生？第9頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四10胚胎早期發(fā)生第10頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四11 一、受精1精、卵膜的接觸并融合。2精核與其胞質(zhì)進(jìn)入卵細(xì)胞。3雌原核、雄原核形成。4雌、雄原核的靠攏、融合第11頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四12桑椹胚（morula）：受精后第3天，形成了1216個(gè)卵裂球組成的實(shí)心胚。胚泡：受精后第46天桑椹胚細(xì)胞繼續(xù)分裂，細(xì)胞間開(kāi)始出現(xiàn)小腔隙，并逐漸匯合成一個(gè)大腔，桑椹胚轉(zhuǎn)變?yōu)橹锌盏呐轄?。著?/p>

6、： 胚泡埋入子宮內(nèi)膜的過(guò)程；開(kāi)始于受精后第56天，完成于第1112天二、卵裂和胚泡形成第12頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四13三、植入著床： 胚泡埋入子宮內(nèi)膜的過(guò)程；開(kāi)始于受精后第56天，完成于第1112天第13頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四14四、胚層形成和分化（一）二胚層胚盤(pán)及相關(guān)結(jié)構(gòu)的形成1. 下胚層: 面向胚泡腔內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞形成的單層細(xì)胞。2. 上胚層: 其余內(nèi)細(xì)胞群細(xì)胞排列規(guī)則形成的細(xì)胞層。3. 二胚層胚盤(pán): 上下胚層緊密相貼，形成橢圓形盤(pán)狀結(jié)構(gòu)。形成的時(shí)間 第2周第14頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四15

7、（二）三胚層形成胚胎第3周初，胚盤(pán)尾端中線處的上胚層增生形成原條。第15頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四外胚層背側(cè)中線增厚神經(jīng)板溝緣愈合神經(jīng)管(neural tube)： 中樞神經(jīng)系統(tǒng)、 神經(jīng)垂體、 視網(wǎng)膜、 松果體等神經(jīng)褶神經(jīng)溝神經(jīng)嵴(neural crest)： 周?chē)窠?jīng)系統(tǒng)、 腎上腺髓質(zhì)等表面外胚層：表皮及其附屬器、內(nèi)耳膜迷路、角膜上皮等畸形： 前神經(jīng)孔不閉無(wú)腦兒 后神經(jīng)孔不閉脊髓裂（三）三胚層的分化第16頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四軸旁中胚層 體節(jié)生皮節(jié)：真皮生骨節(jié)：中軸骨(脊柱、肋骨）生肌節(jié)：軀干肌間介中胚層：泌尿生殖系統(tǒng)的原基側(cè)中

8、胚層體壁中胚層：體壁的骨骼、肌肉、血管、結(jié)締組織等原始體腔：心包腔、胸膜腔、腹膜腔臟壁中胚層：消化和呼吸系統(tǒng)的肌組織、血管、 結(jié)締組織等生心區(qū) 心臟的原基間充質(zhì) 結(jié)締組織、肌組織、血管第17頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四18 前腸(前端口咽膜) 內(nèi)胚層(原腸) 中腸(連卵黃囊) 消化、呼吸 后腸(末端泄殖腔膜) 系統(tǒng)上皮 另: 甲狀腺 甲狀旁腺 胸腺 上皮 中耳 膀胱 陰道第18頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四19五、胚體外形建立 第5周后，胚胎外形發(fā)生了一系列的變化。胚體顏面已形成，眼、耳和鼻已出現(xiàn)，肢芽形成四肢，外生殖器已發(fā)生，頸部出現(xiàn)，頭

9、已伸直，臍帶形成，胎兒懸浮于羊膜腔中。第8周末，胚體已成人形外形建立。 第19頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四20胎盤(pán)功能 (1)物質(zhì)交換：母體和胎兒物質(zhì)交換。(2) 屏障作用 胎盤(pán)膜：由合體滋養(yǎng)層、細(xì)胞滋養(yǎng)層和基膜、絨 毛內(nèi)結(jié)締組織、絨毛內(nèi)毛細(xì)血管的基膜 及內(nèi)皮細(xì)胞組成。 內(nèi)分泌功能 HCG：受精后第2周開(kāi)始分泌，第8周達(dá)高峰；HCS：受精后第2月開(kāi)始分泌，第8月達(dá)高峰；孕激素及雌激素：受精后第4月開(kāi)始分泌 第20頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四21胚胎發(fā)育分期 精子卵子受精卵 人胚胎在母體內(nèi)發(fā)育經(jīng)歷38周(38周7天/周 =266天)， 可分

10、為二個(gè)時(shí)期： 1. 胚期(embryo) 受精后18周 致畸敏感期 2. 胎期(fetus) 受精后938周 對(duì)致畸因子不敏感 3. 圍生期（圍產(chǎn)期） 第26周至出生后4周，此時(shí)期母嬰保健和護(hù)理應(yīng)特別注意，“圍生期醫(yī)學(xué)”因此誕生。第21頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四22 人類(lèi)胚胎的致畸敏感期第22頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四23第一節(jié) 概述第23頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四24畸胎學(xué)（Teratology, 古代）現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)畸胎學(xué)（十九世紀(jì)）發(fā)育毒理學(xué)（Developmental toxicology, 二十世紀(jì)）

11、第24頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四25Teratology (畸胎學(xué)) 來(lái)自于希臘語(yǔ)monster (怪胎) ，即 teras (畸胎) 。1651年，William Harvey提出發(fā)育障礙學(xué)說(shuō)：畸形起因于器官或結(jié)構(gòu)的不完全發(fā)育。 一、畸胎學(xué)第25頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四26物理、化學(xué)因素雞蛋畸形小雞：神經(jīng)管缺陷、無(wú)腦畸形、脊柱裂、獨(dú)眼畸形、心臟缺陷等作用時(shí)間在決定畸形類(lèi)型方面比損傷性質(zhì)更重要。二、現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)畸胎學(xué)第26頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四2720世紀(jì)早期，環(huán)境因素（溫度、微生物毒素和藥物）可干擾鳥(niǎo)

12、類(lèi)、爬行類(lèi)、魚(yú)類(lèi)和兩棲類(lèi)的發(fā)育。1935年，Hale報(bào)道維生素A缺乏可誘導(dǎo)母豬產(chǎn)下突眼和腭裂的畸形后代。后來(lái)，發(fā)現(xiàn)氮芥、錐藍(lán)、激素、抗代謝藥、烷化劑和缺氧等，均可引起哺乳動(dòng)物畸形。1940年澳大利亞風(fēng)疹大流行，次年流行嬰兒先天性白內(nèi)障、耳聾、智力不全、先天性心臟病1945年廣島長(zhǎng)崎原子彈爆炸，受輻射兒童出現(xiàn)小頭畸形、智力低下，一年內(nèi)死亡率25%三、發(fā)育毒理學(xué)第27頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四28三、發(fā)育毒理學(xué)第28頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四291950年，日本，先天性水俁病患者。 手足協(xié)調(diào)失常，甚至步行困難、運(yùn)動(dòng)障礙、弱智、聽(tīng)力及言語(yǔ)障

13、礙、肢端麻木、感覺(jué)障礙、視野縮小；重者例如神經(jīng)錯(cuò)亂、思覺(jué)失調(diào)、痙攣，最后死亡。三、發(fā)育毒理學(xué)第29頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四3020世紀(jì)70年代，Jones描述了酒精綜合征（FAS），包括面部畸形、宮內(nèi)和產(chǎn)后生長(zhǎng)遲緩 、精神運(yùn)動(dòng)和智力發(fā)育障礙等。三、發(fā)育毒理學(xué)胎兒酒精綜合癥（英文：Fetal alcohol syndrome，簡(jiǎn)稱(chēng)FAS）又稱(chēng)胎兒酒精癥候群，是母親在妊娠期間酗酒對(duì)胎兒所造成的永久出生缺陷，程度會(huì)按母親喝酒的份量、頻率及時(shí)間所影響。酒精會(huì)進(jìn)入胎盤(pán)，并阻礙胎兒的成長(zhǎng)及體重，造成獨(dú)特的臉部小斑，破壞神經(jīng)元及腦部結(jié)構(gòu)，并引起體質(zhì)、心智或行為等問(wèn)題第30頁(yè)，

14、共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四31孕婦吸煙也引起不良妊娠結(jié)局，包括流產(chǎn)、圍生期死亡、嬰兒猝死綜合征等?？煽ㄒ虮┞兑部梢鸲喾N不良發(fā)育效應(yīng)，如胎盤(pán)早期剝離、早產(chǎn)和流產(chǎn)、小腦畸形等三、發(fā)育毒理學(xué)第31頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四32上述事件讓人們認(rèn)識(shí)到生物、物理、化學(xué)和不良生活嗜好都可引起人類(lèi)畸形。1966年，F(xiàn)DA提出三段生殖毒性試驗(yàn)指南，包括對(duì)致畸等發(fā)育毒性的評(píng)價(jià)。1986年，美國(guó)環(huán)境保護(hù)局（EPA）提出可疑發(fā)育毒性危險(xiǎn)度評(píng)價(jià)指南，第一次提出要對(duì)化合物進(jìn)行發(fā)育毒性評(píng)價(jià)。三、發(fā)育毒理學(xué)第32頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四

15、33人類(lèi)成功妊娠結(jié)局（pregnancy outcomes）的比例非常低。美國(guó)統(tǒng)計(jì)，著床前丟失（早早孕丟失）超過(guò)50%，著床后丟失（流產(chǎn)、死胎）約占31%；新生兒嚴(yán)重畸形率約2-3%，1歲嬰兒67%，輕微畸形約14%；低出生體重占7%。1歲嬰兒死亡率1.4%，神經(jīng)功能異常占16-17%。我國(guó)衛(wèi)生部（1988）：29個(gè)省市19861987年1 243 284例圍產(chǎn)兒，先天畸形率1.3%，推算我國(guó)每年有3040萬(wàn)嚴(yán)重的先天畸形兒出生，其中很大比例在一年內(nèi)死亡。全球確認(rèn)的先天缺陷有7000多種，前五位為先天性心臟病、神經(jīng)管缺陷、血紅蛋白病、唐氏綜合征、蠶豆病。三、發(fā)育毒理學(xué)第33頁(yè)，共133頁(yè)，20

16、22年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四34出生缺陷原因尚未明了，估計(jì)15-25%為遺傳因素，4%歸因于母體狀況，3%為母體感染，1-2%由于臍帶阻斷等功能機(jī)械因素；與化學(xué)物或其他因素有明確關(guān)系的不到1%。其他不明出生缺陷可能與環(huán)境因子暴露有關(guān)。發(fā)育毒理學(xué)(developmental toxicology)：是研究出生前暴露于環(huán)境有害因子導(dǎo)致的異常發(fā)育結(jié)局及有關(guān)的作用機(jī)制、發(fā)病原理、影響因素和毒代動(dòng)力學(xué)等。包括受精卵、妊娠期、出生后、直到性成熟的發(fā)育過(guò)程。三、發(fā)育毒理學(xué)第34頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四35第35頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四3

17、6第二節(jié) 發(fā)育毒性與致畸性第36頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四37畸形：指發(fā)育生物體解剖學(xué)上的形態(tài)結(jié)構(gòu)的缺陷。分為嚴(yán)重畸形 (major) 和輕微 (minor) 畸形。前者對(duì)外觀、生理功能和 (或) 壽命有明顯影響，后者則只有輕微影響。致畸物或致畸原 (teratogen)：能引起畸形的環(huán)境因子。致畸性 (teratogenic effect or teratogenesis) 和致畸作用 (teratogenicity)：致畸物引起畸形的過(guò)程和能力。1. 畸形 (malformation)一、基本概念第37頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四3

18、8變異：是由遺傳和遺傳外因素控制的外觀變化，或由于分化改變而引起的差異。指同一種屬的子代與親代之間或子代的個(gè)體之間，有時(shí)出現(xiàn)不完全相同的現(xiàn)象，是小的或次要的改變。一般認(rèn)為變異不影響正常生理功能，更不危及生命。2. 變異 (variation)一、基本概念第38頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四39胚體毒性 (embryotoxicity)：指外源性理化因素對(duì)孕體著床前后直到器官形成期結(jié)束時(shí)的有害影響。 表現(xiàn)：胚體期染毒而出現(xiàn)畸胎、生長(zhǎng)遲緩、著床數(shù)減少和吸收胎，也偶有死胎。胎體毒性或胎兒毒性 (fetoxicity) ：對(duì)孕體器官形成期結(jié)束后的有害影響。 表現(xiàn)：胎兒死亡、體

19、重降低、骨化遲緩、功能缺陷以及結(jié)構(gòu)異常，甚至腫瘤。3. 胚體-胎體毒性一、基本概念孕體是指胎兒、胎膜和胎水構(gòu)成的復(fù)合體，孕體在整個(gè)妊娠期起著主導(dǎo)作用第39頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四40在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物發(fā)育毒性試驗(yàn)中，通常不去區(qū)分胎兒與胚體，所以使用胚胎毒性（embryo-fetal toxicity）更恰當(dāng)。廣義的說(shuō)胚胎毒性包括孕體結(jié)構(gòu)和功能方面的各種損害，一般情況下，胚胎毒性是指孕體的死亡和生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，而不包括結(jié)構(gòu)畸形。3. 胚體-胎體毒性一、基本概念第40頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四41一、基本概念發(fā)育生物體死亡 (death of t

20、he developing organism)：包括受精卵未發(fā)育即死亡或胚泡未著床即死亡 (早早孕丟失)，或著床后發(fā)育到某一階段死亡。早期死亡被吸收或自子宮排出，晚期死亡成為死胎。 生長(zhǎng)改變 (altered growth)：一般指生長(zhǎng)遲緩。當(dāng)胎兒生長(zhǎng)發(fā)育指標(biāo)低于正常對(duì)照的均值2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差時(shí)，可認(rèn)為生長(zhǎng)遲緩。4. 發(fā)育毒性 (developmental toxicity): 出生前后接觸有害因素，子代個(gè)體發(fā)育成體之前誘發(fā)的任何有害影響。第41頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四42一、基本概念結(jié)構(gòu)異常 (structural abnormality)：指胎兒形態(tài)結(jié)構(gòu)異常，即畸

21、形，包括外觀畸形、內(nèi)臟畸形和骨骼畸形。功能缺陷 (functional deficiency)：包括生理、生化、免疫、行為、智力等方面的異常。經(jīng)常在出生后，聽(tīng)力或視力障礙、生殖功能障礙、智力障礙等。4. 發(fā)育毒性 第42頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四43一、基本概念5. 出生缺陷 (birth defect)：指嬰兒出生前即已形成的發(fā)育障礙，包括畸形和功能缺陷。與營(yíng)養(yǎng)缺乏和環(huán)境有害因子有關(guān)的出生缺陷：先天性心臟病 (congenital heart disease): 在胚胎發(fā)育時(shí)期，由于心臟及大血管的形成障礙而引起的局部解剖結(jié)構(gòu)異常，或出生后心臟應(yīng)自動(dòng)關(guān)閉的通道未能

22、閉合。唇腭裂：最常見(jiàn)口腔頜面部畸形，分唇裂和腭裂第43頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四44一、基本概念 5. 出生缺陷 神經(jīng)管畸形：中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育畸形，包括無(wú)腦畸形和脊柱裂。母體懷孕初期葉酸缺乏是主要原因。尿道下裂 (hypospadia): 男性泌尿生殖系統(tǒng)最常見(jiàn)的先天畸形，尿道開(kāi)口于正常位置的下方。環(huán)境內(nèi)分泌干擾物。隱睪癥：睪丸下降不全，男性常見(jiàn)。低出生體重：子代出生時(shí)體重明顯低于正常值范圍。出生后1小時(shí)內(nèi)體重2500 g。第44頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四45一、基本概念6. 不良妊娠結(jié)局 (adverse pregnancy ou

23、tcomes) 指妊娠后不能產(chǎn)生外觀和功能正常的子代，包括所有的不良反應(yīng)，如流產(chǎn)、死胎、死產(chǎn)、功能生長(zhǎng)延緩、發(fā)育異常、新生兒和嬰幼兒期死亡等。第45頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四461. 發(fā)育各階段發(fā)育毒性作用的特點(diǎn)和致畸敏感期不同發(fā)育毒物可作用于不同發(fā)育階段，產(chǎn)生不同效應(yīng)。因此，孕體發(fā)育不同階段接觸各種發(fā)育毒物所引發(fā)的發(fā)育毒性反應(yīng)也不一樣。最易引起畸形的階段為器官形成期。二、發(fā)育毒性作用的特點(diǎn)和影響因素 第46頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四47第47頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四48（1）著床前期又稱(chēng)分化前期，從受

24、精時(shí)算起，到完全著床之前。人類(lèi)為受精后的第1112天；嚙齒類(lèi)動(dòng)物為最初的天。特點(diǎn)：受損的是早期胚胎的相對(duì)未分化細(xì)胞?？赏ㄟ^(guò)代償性細(xì)胞增生加以修補(bǔ)，很少發(fā)生特異的致畸效應(yīng)，通常是未分化細(xì)胞受化學(xué)毒物損傷而致胚泡死亡，稱(chēng)為著床前丟失。也有例外，如小鼠妊娠第2.5天、3.5天和4.5天用甲基亞硝脲處理可造成子代神經(jīng)管缺陷和腭裂。第48頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四49（2）器官形成期著床后孕體即進(jìn)入器官形成期，直到硬腭閉合；事件：細(xì)胞增殖、移動(dòng)和組合形成器官原基，即細(xì)胞結(jié)構(gòu)開(kāi)始分化，并逐漸形成不同的器官和組織。時(shí)間：人類(lèi)為第3-8周；大小鼠為第6-15天，家兔為6-18天；

25、特點(diǎn)：細(xì)胞增殖分裂速度很快，組織器官生長(zhǎng)旺盛，胚胎對(duì)致畸物特別敏感，細(xì)胞受損可導(dǎo)致結(jié)構(gòu)畸形、生長(zhǎng)遲緩或胚胎死亡。這一發(fā)育階段被稱(chēng)為致畸敏感期或致畸作用危險(xiǎn)期（critical period）。第49頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四50大多數(shù)器官對(duì)致畸作用有特殊的敏感期，及所謂的時(shí)間“靶窗”(target windows)；不同器官敏感期不同，且有交叉重疊。表現(xiàn)為：不同器官致畸高峰時(shí)間不同，此期內(nèi)不同時(shí)間給予致畸物會(huì)誘發(fā)不同器官畸形，同一天染毒可引起多個(gè)器官受損。（2）器官形成期第50頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四51 人類(lèi)胚胎的致畸敏感期（2）

26、器官形成期第51頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四52人、大鼠和家兔致畸敏感期及不同器官誘發(fā)畸形的“靶窗”（2）器官形成期第52頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四53致畸試驗(yàn)的染毒時(shí)間都包括整個(gè)敏感期，利于發(fā)現(xiàn)致畸效應(yīng)。同一致畸物，給予時(shí)間不同，會(huì)產(chǎn)生不同的畸形。即同一劑量同種致畸物在敏感期中與胚胎接觸，可因胚胎所處發(fā)育階段不同而出現(xiàn)不同的畸形。另外，器官形成期暴露也可以引起胚胎死亡。一胎多仔動(dòng)物 (如嚙齒類(lèi)) 胚胎死亡后被吸收，稱(chēng)吸收胎 (resorption), 在人和靈長(zhǎng)類(lèi)表現(xiàn)為流產(chǎn) (abortion)。（2）器官形成期第53頁(yè)，共133頁(yè)，

27、2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四54器官形成結(jié)束（以硬腭閉合為標(biāo)志）后即進(jìn)入胎兒期。事件：主要是組織分化、生長(zhǎng)和生理學(xué)成熟。時(shí)間：人類(lèi)是從第56-58天起，直到分娩。特點(diǎn)：胚胎的器官、系統(tǒng)的基本結(jié)構(gòu)形成后，致畸物難以使之發(fā)生結(jié)構(gòu)缺陷，通常是變形或異常而非畸形。胎兒期接觸外源性理化物質(zhì)，很可能對(duì)生長(zhǎng)和功能成熟產(chǎn)生效應(yīng)，如免疫系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和生殖器官功能異常，主要表現(xiàn)為：全身生長(zhǎng)遲緩、特異的功能障礙、經(jīng)胎盤(pán)致癌和偶見(jiàn)死胎。（3）胎兒期第54頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四55（3）胎兒期第55頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四56此期接觸外

28、源性化學(xué)物質(zhì)，主要表現(xiàn)在發(fā)育免疫毒性、神經(jīng)行為發(fā)育異常和兒童期腫瘤。圍生期接觸外源化學(xué)物，會(huì)嚴(yán)重影響胎兒T細(xì)胞、B細(xì)胞和吞噬細(xì)胞的發(fā)育、遷移、歸巢及功能，可能暫時(shí)甚至永久性地?fù)p傷機(jī)體的免疫系統(tǒng)。許多化學(xué)物質(zhì)具有發(fā)育神經(jīng)毒性，表現(xiàn)為對(duì)感覺(jué)、運(yùn)動(dòng)、認(rèn)知、學(xué)習(xí)、記憶等方面的影響。圍生期是一生中對(duì)致癌物最敏感的時(shí)期。因?yàn)榧?xì)胞增殖快、藥物代謝酶發(fā)育不全、免疫監(jiān)視功能低下，許多兒童高發(fā)腫瘤可能與出生前后暴露某些環(huán)境因素有關(guān)。（4）圍生期和出生后的發(fā)育期第56頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四572. 發(fā)育毒性的劑量反應(yīng)關(guān)系模式和閾值問(wèn)題較常見(jiàn)高度致畸作用，較少見(jiàn)在開(kāi)始生長(zhǎng)遲緩到致死劑

29、量之間，多設(shè)實(shí)驗(yàn)組，以確證無(wú)致畸作用第57頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四582. 發(fā)育毒性的劑量反應(yīng)關(guān)系模式和閾值問(wèn)題正常胎、生長(zhǎng)遲緩、結(jié)構(gòu)畸形和胚胎死亡同時(shí)存在。低劑量主要導(dǎo)致生長(zhǎng)遲緩、胚胎吸收和畸形，劑量增加，胚胎死亡占優(yōu)勢(shì)，直至整窩胚胎死亡。多為細(xì)胞毒性致畸物，包括烷化劑、抗癌藥及很多致突變物。第58頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四59在遠(yuǎn)低于胚胎致死劑量下即可出現(xiàn)致畸，甚至全窩致畸，致畸胎兒常常有生長(zhǎng)遲緩。劑量增加到遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)全窩畸形時(shí)才出現(xiàn)胚胎死亡，常伴有明顯的母體毒性。這種模式表示受試物有高度致畸作用，較少見(jiàn)，如沙立度胺、糖皮質(zhì)類(lèi)固醇

30、等。2. 發(fā)育毒性的劑量反應(yīng)關(guān)系模式和閾值問(wèn)題第59頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四60只有生長(zhǎng)遲緩和胚胎致死但沒(méi)有畸形發(fā)生。往往生長(zhǎng)遲緩先出現(xiàn)，曲線較平緩。較大劑量時(shí)才出現(xiàn)胚胎死亡，其曲線較陡，接近于“全或無(wú)”。被認(rèn)為是有胚胎毒性（包括胚胎致死性）的，但不具有致畸作用。2. 發(fā)育毒性的劑量反應(yīng)關(guān)系模式和閾值問(wèn)題第60頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四612. 發(fā)育毒性的劑量反應(yīng)關(guān)系模式和閾值問(wèn)題典型致畸作用的劑量-反應(yīng)曲線的斜率比較大，從致畸NOAEL到胚胎100%死亡的劑量往往只差2-4倍。從NOAEL到胚胎死亡劑量之間的劑量范圍叫致畸帶。致畸

31、帶越寬的致畸物，致畸危險(xiǎn)度越大。第61頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四62通常認(rèn)為哺乳動(dòng)物的發(fā)育毒性是一種有閾值的效應(yīng)；假定的閾值是低于它就不出現(xiàn)發(fā)育毒性的母體劑量。但是，發(fā)育毒性是否有閾值尚存在爭(zhēng)論很難用實(shí)驗(yàn)找出一個(gè)發(fā)生率很低的劑量-反應(yīng)關(guān)系，因?yàn)槟切枰獦O大的樣本數(shù)量，如每劑量組幾百到幾千窩的動(dòng)物；多數(shù)發(fā)育毒性機(jī)制還不了解，有的已知機(jī)制支持閾值的存在，而有些機(jī)制則不支持。2. 發(fā)育毒性的劑量反應(yīng)關(guān)系模式和閾值問(wèn)題第62頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四633. 發(fā)育毒性的物種差異發(fā)育毒性尤其是致畸作用與遺傳類(lèi)型有關(guān)，存在明顯的物種差異。這種差異是

32、因?yàn)椴煌锓N之間因代謝變化、胎盤(pán)類(lèi)型、胚胎發(fā)育的速度和方式的差異引起的。化學(xué)致畸物往往有各自的物種和品系，易感性主要取決于機(jī)體的基因型?；瘜W(xué)物生物轉(zhuǎn)化為活性中間代謝產(chǎn)物或終產(chǎn)物的速度和途徑與遺傳有關(guān)，而畸形僅發(fā)生在能形成活性代謝產(chǎn)物的物種。例如：反應(yīng)停 4000 mg/kg 大鼠、小鼠無(wú)致畸作用；0.51 mg/kg 人類(lèi) 極強(qiáng)致畸作用。第63頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四64致畸的物種差異：任何環(huán)境有害因素的損害效應(yīng)都存在物種品系及個(gè)體差異，在致畸作用中較突出。例如，殺蟲(chóng)劑西維因?qū)﹄嗍缶哂兄禄饔?，?duì)家免和倉(cāng)鼠并不致畸。農(nóng)藥敵枯雙對(duì)大鼠致畸作用明顯，但未得到人群調(diào)查

33、的證實(shí)資料。3. 發(fā)育毒性的物種差異目前致畸試驗(yàn)要求用兩種以上動(dòng)物，一般用一種嚙齒類(lèi)和一種非嚙齒類(lèi)，首選大鼠和家兔。第64頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四65母體毒性：化學(xué)毒物對(duì)受孕母體產(chǎn)生的損傷效應(yīng)。表現(xiàn)為增重減慢、功能異常、臨床癥狀、甚至死亡。母體毒性可直接或間接影響發(fā)育過(guò)程，導(dǎo)致發(fā)育毒性。影響發(fā)育的母體因素包括遺傳、疾病、營(yíng)養(yǎng)、應(yīng)激等，也可通過(guò)胎盤(pán)毒性影響發(fā)育。三、母體毒性與發(fā)育毒性1. 母體因素對(duì)發(fā)育毒性的影響第65頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四66遺傳學(xué)：孕母的遺傳結(jié)構(gòu)是胚胎發(fā)育的一個(gè)決定因素。如唇腭裂的發(fā)病率白種人明顯高于黑種人，主

34、要原因在于母體，而非胚胎本身的基因結(jié)構(gòu)。 疾?。耗阁w受病毒感染、未控制的糖尿病等疾病，將會(huì)對(duì)胚胎產(chǎn)生影響。如懷孕前三個(gè)月，母體高熱、病毒感染等均可能導(dǎo)致胎兒中樞神經(jīng)系統(tǒng)畸形。 1. 母體因素對(duì)發(fā)育毒性的影響第66頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四67營(yíng)養(yǎng)：母體蛋白質(zhì)、熱量、維生素、微量元素及酶的輔助因子缺乏將對(duì)胚胎產(chǎn)生影響。 應(yīng)激：不同形式的母體毒性可能通過(guò)誘導(dǎo)生理學(xué)應(yīng)激反應(yīng)而產(chǎn)生發(fā)育毒性。 對(duì)胎盤(pán)的毒性：胎盤(pán)是母體和胚胎進(jìn)行物質(zhì)交換的結(jié)構(gòu)，為胚胎提供營(yíng)養(yǎng)、氣體交換、廢物排出。胎盤(pán)可產(chǎn)生維持妊娠的關(guān)鍵激素，而且能代謝和儲(chǔ)存外源化學(xué)物。外源化學(xué)物既可透過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，同

35、時(shí)胎盤(pán)也可能是其作用靶點(diǎn)，或作為其儲(chǔ)存庫(kù)。1. 母體因素對(duì)發(fā)育毒性的影響第67頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四68非共效應(yīng)致畸物具有致畸作用，但無(wú)母體毒性出現(xiàn)，如反應(yīng)停共效應(yīng)致畸物母體毒性均無(wú)毒性出現(xiàn)致畸作用的同時(shí)也表現(xiàn)母體毒性僅具有母體毒性，但不具有致畸作用在一定劑量下，既無(wú)母體毒性，也不表現(xiàn)胚胎毒性母體毒性與發(fā)育毒性的關(guān)系2. 母體毒性與發(fā)育毒性的關(guān)系 第68頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四69父源性出生缺陷（paternal birth defect）影響因素：遺傳缺陷、年齡因素和外界暴露因素（職業(yè)和環(huán)境因素，化療和放療，其它藥物，飲酒和吸

36、煙等不良嗜好），這些因素通過(guò)父親對(duì)發(fā)育個(gè)體產(chǎn)生不良影響，叫父源性發(fā)育毒性（paternal-mediated developmental toxicity）;父源性暴露引起子代發(fā)育異常包括：流產(chǎn)、死胎、低出生體重、畸形、功能障礙等，甚至與兒童期腫瘤相關(guān)。父源性發(fā)育毒性的主要表現(xiàn)：自然流產(chǎn)或出生缺陷、兒童腫瘤、男女出生比例失調(diào) 四、父源性發(fā)育毒性第69頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四70（1）自然流產(chǎn)和出生缺陷、心血管畸形第70頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四71（2）兒童腫瘤 烴類(lèi)物質(zhì)的父源性暴露，可能與兒童腫瘤發(fā)生有關(guān)。目前出現(xiàn)最多的是白血病和

37、腦腫瘤。（3）男女出生比例失調(diào)父親暴露于TCDD（四氯二苯并-p-二惡英），導(dǎo)致后代“出生性別比（SSR）”明顯下降。第71頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四72經(jīng)流行病學(xué)調(diào)查證實(shí)的能引起人類(lèi)發(fā)育異常的發(fā)育毒物或致畸物有四十多種。藥物/化學(xué)物被認(rèn)為是引起先天畸形的主要非遺傳因素。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第72頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四73五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第73頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四74幾種較典型的人類(lèi)發(fā)育毒物/致畸物：1. 乙醇和吸煙：胎兒酒精綜合征：由父母嗜酒引起的后代缺陷，典型表現(xiàn)為

38、面部畸形、宮內(nèi)和產(chǎn)后生長(zhǎng)遲緩、精神運(yùn)動(dòng)和智力發(fā)展障礙等，生長(zhǎng)遲緩母親孕期飲酒最敏感和最常見(jiàn)的表現(xiàn)。胎兒煙草綜合征：吸煙孕婦出生的異常嬰兒。孕期吸煙可導(dǎo)致胎兒低出生體重。父親吸煙影響精子發(fā)生，并具發(fā)育毒性。尿道下裂、嬰兒生存能力下降，兒童腫瘤發(fā)病率增加。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第74頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四752. 己烯雌酚：既是致畸物又是致癌物己烯雌酚綜合征：己烯雌酚可跨越母親胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，導(dǎo)致后代生殖器官畸形和癌癥。如男性后代尿道下裂、睪丸和附睪異常、精子畸形，前列腺癌等；女性出現(xiàn)輸卵管畸形、子宮纖維以及陰道癌等。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第

39、75頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四763. 甲基汞甲基汞極易通過(guò)胎盤(pán)進(jìn)入胎兒體內(nèi)，在胎、幼兒體內(nèi)大量蓄積。水俁病，常見(jiàn)表現(xiàn)為末梢感覺(jué)障礙、中心性視野縮小、高頻域聽(tīng)力障礙和運(yùn)動(dòng)失調(diào)，統(tǒng)稱(chēng)Hunter-Russel綜合征。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第76頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四774. 鉛鉛能引起多系統(tǒng)毒性；神經(jīng)系統(tǒng)對(duì)鉛的毒性非常敏感，尤其是對(duì)兒童中樞神經(jīng)系統(tǒng)，由于胎兒及嬰幼兒時(shí)期的血腦屏障發(fā)育不完全，較容易進(jìn)入中樞神經(jīng)系統(tǒng)。鉛可降低兒童智商、導(dǎo)致注意力缺陷多動(dòng)障礙、降低閱讀學(xué)習(xí)能力。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第77頁(yè)，共133

40、頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四785. 視黃醛（維甲酸）是具有維生素A結(jié)構(gòu)或其功能相似的化合物；維生素A衍生物、13-反式-視黃酸和視黃酸可引起人類(lèi)胚胎畸形，主要包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)、面部和泌尿生殖系統(tǒng)畸形等。視黃酸受體的配體多為強(qiáng)致畸物。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第78頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四796. 反應(yīng)停1960-1962年，20多國(guó)家孕婦服用反應(yīng)停，全世界12000名胎兒出現(xiàn)短肢畸形，即海豹肢畸形。反應(yīng)停主要的毒性可能來(lái)源于代謝產(chǎn)物4-羥化反應(yīng)停和5-羥化反應(yīng)停；致畸機(jī)制包括：影響DNA復(fù)制和轉(zhuǎn)錄；影響生長(zhǎng)因子合成和表達(dá)；血管生成抑制；影

41、響軟骨生成；引起胚胎細(xì)胞上黏附因子如整合素的下調(diào)，阻礙細(xì)胞間、細(xì)胞與基質(zhì)間的相互作用；等。 五、已知的人類(lèi)發(fā)育毒物或致畸物第79頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四80相加作用：致畸劑量的6-MPr與無(wú)明顯效應(yīng)劑量的羥基脲 (HU) ，同時(shí)給藥未增加畸形；先給6-MPr畸形從0增加到29%，但6-MPr引起的畸形比單獨(dú)給藥減少；先給HU，使6-MPr引起的畸形增加近1/5。超相加作用：咖啡因和HU聯(lián)合給予引起的畸形率大大超過(guò)單獨(dú)給藥引起的畸形率之和。產(chǎn)生新的作用：HU和BUdR聯(lián)合給予懷孕小鼠產(chǎn)生兩種化合物所沒(méi)有的四肢畸形。六、外源化合物的聯(lián)合發(fā)育毒性第80頁(yè)，共133頁(yè)，

42、2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四81第三節(jié) 致畸（發(fā)育毒性）作用機(jī)制第81頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四82基因突變與染色體畸變干擾基因表達(dá)細(xì)胞損傷與死亡干擾細(xì)胞間的相互作用通過(guò)胎盤(pán)毒性引起發(fā)育毒性干擾母體穩(wěn)態(tài)發(fā)育免疫毒性機(jī)制發(fā)育神經(jīng)毒性機(jī)制?總的來(lái)說(shuō) 還不清楚！第82頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四83各種發(fā)育基因都可能成為某些發(fā)育毒物的靶。已知的誘變劑往往有潛在的致畸性，如電離輻射、烷化劑、亞硝酸鹽、多數(shù)致癌物。一、基因突變與染色體畸變第83頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四84二、干擾基因表達(dá)某些基因的表達(dá)受

43、到抑制或異常表達(dá)可能引起畸形。如在培養(yǎng)的小鼠胚胎中用反義寡核苷酸探針抑制或剔除原癌基因Wnt-l或Wnt-3a ，都可產(chǎn)生中腦和后腦，或中腦、后腦和脊髓的畸形。近年，非基因序列改變所致基因表達(dá)水平和基因功能的改變，即表觀遺傳學(xué)改變，也影響胚胎發(fā)育。包括DNA甲基化、組蛋白乙?；取Ｈ缭惺箫暳现刑砑尤玖夏军S酮誘發(fā)DNA甲基化，可改變子代的毛發(fā)。己烯雌酚引起人和嚙齒類(lèi)動(dòng)物生殖道發(fā)育異常和子代腫瘤易感性增加。第84頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四85三、細(xì)胞損傷與死亡細(xì)胞死亡在正常的胚胎發(fā)育尤其形態(tài)發(fā)生中扮演重要角色，包括系統(tǒng)匹配、軀體塑造、殘留結(jié)構(gòu)去除等。程序性細(xì)胞死亡方式

44、有多種，細(xì)胞凋亡研究最為廣泛。高溫、電離輻射、化學(xué)致畸物、病毒感染等可通過(guò)不同機(jī)制影響細(xì)胞凋亡。例如：反應(yīng)停誘導(dǎo)胚胎細(xì)胞凋亡，并通過(guò)抑制IGF-1和FGF的基因復(fù)制而阻止其表達(dá)，從而抑制血管形成；全反式視黃酸可通過(guò)box等凋亡基因編碼的信號(hào)通路而誘導(dǎo)凋亡；環(huán)磷酰胺、N-乙酸基-2-乙酰氨基芴、甲基汞等。第85頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四86三、細(xì)胞損傷與死亡第86頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四87三、細(xì)胞損傷與死亡一些致畸物可通過(guò)氧化損傷和DNA斷裂，引起細(xì)胞周期阻滯；環(huán)磷酰胺誘導(dǎo)DNA損傷可導(dǎo)致細(xì)胞周期紊亂和特定細(xì)胞群死亡第87頁(yè)，共13

45、3頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四88四、干擾細(xì)胞-細(xì)胞交互作用細(xì)胞間相互作用主要通過(guò)細(xì)胞通訊實(shí)現(xiàn)，包括縫隙連接通訊、膜表面分子接觸通訊等直接的細(xì)胞間通訊和由受體介導(dǎo)的細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)。滅鼠靈、苯巴比妥、氯丙嗪等抑制縫隙連接；反應(yīng)?；罨x產(chǎn)物引起胚胎細(xì)胞的粘連受體下調(diào)。第88頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四89五、通過(guò)胎盤(pán)途徑引起發(fā)育毒性對(duì)卵黃囊或絨毛膜尿囊胎盤(pán)有毒性的毒物有46種，包括鎘、砷、汞、香煙、乙醇、可卡因、內(nèi)毒素、水楊酸納等；如鎘，在妊娠中晚期通過(guò)胎盤(pán)毒性（壞死和血流減少）和抑制對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的傳送導(dǎo)致發(fā)育毒性。第89頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5

46、月20日，7點(diǎn)8分，星期四90六、干擾母體穩(wěn)態(tài)二氟苯水楊酸 母體貧血、紅細(xì)胞ATP損耗 兔中軸骨骼缺陷；二苯乙酰脲 母體葉酸代謝 致畸；羥基脲 子宮血流減少 胚胎顱面和心包出血；孕婦缺乏代謝前體或基質(zhì)（如維生素和無(wú)機(jī)鹽等）；環(huán)境內(nèi)分泌干擾物，影響內(nèi)源性激素水平，改變母體內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，引起發(fā)育毒性。第90頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四91七、發(fā)育免疫毒性機(jī)制胚胎期或圍生期暴露于外源化學(xué)物可暫時(shí)或永久地?fù)p傷機(jī)體的免疫反應(yīng)，且較低劑量即可導(dǎo)致胎兒明顯的免疫損傷；如，大鼠孕期GD7-16接觸低劑量氯氰菊酯，可損害子代免疫系統(tǒng)，明顯減少T淋巴細(xì)胞數(shù)量；農(nóng)藥氯丹孕期，可經(jīng)胎盤(pán)作用于

47、胎鼠，使后代免疫力下降；TCDD可能存在遠(yuǎn)期發(fā)育免疫毒性。第91頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四92八、發(fā)育神經(jīng)毒性機(jī)制子宮內(nèi)接觸神經(jīng)毒性化學(xué)物對(duì)發(fā)育神經(jīng)系統(tǒng)能產(chǎn)生損傷，如神經(jīng)元、突觸、軸突、髓鞘等，還有信號(hào)通路有些化學(xué)物破壞神經(jīng)細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和形態(tài)，有些導(dǎo)致功能異常。第92頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四93第四節(jié) 發(fā)育毒性和致畸作用試驗(yàn)與評(píng)價(jià)第93頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四94外源化學(xué)物發(fā)育毒性評(píng)價(jià)需四方面的資料 環(huán)境流行病學(xué)資料 控制下的臨床研究資料 動(dòng)物發(fā)育毒性試驗(yàn)資料 體外試驗(yàn)資料作為一個(gè)新產(chǎn)品的登記與審批，主

48、要根據(jù)前三類(lèi)資料。在前三類(lèi)資料中，首先是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)資料，因?yàn)榇蠖鄶?shù)情況下新產(chǎn)品在上市前，還沒(méi)有流行病學(xué)資料和控制下的臨床資料。第94頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四95一、動(dòng)物發(fā)育毒性試驗(yàn)優(yōu)點(diǎn)：容易控制接觸條件，控制接觸動(dòng)物的數(shù)量、年齡、狀態(tài)以及選擇檢測(cè)效應(yīng)指標(biāo)（終點(diǎn)）。缺點(diǎn)：動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果外推到人具有不確定性。第95頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四96對(duì)大多數(shù)化學(xué)物質(zhì)來(lái)說(shuō)，三段生殖毒性試驗(yàn)設(shè)計(jì)通常是最適當(dāng)?shù)?，關(guān)鍵因素是各個(gè)生殖階段之間不得有間隔，即在三個(gè)有關(guān)聯(lián)的階段接觸受試物的時(shí)期至少有一天的重疊，并能直接或間接地評(píng)價(jià)生殖過(guò)程的所有階段。一、動(dòng)物發(fā)

49、育毒性試驗(yàn)第96頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四97生殖發(fā)育過(guò)程可分為6個(gè)階段A. 從交配前到受孕：檢查成年雄性和雌性生殖功能、配子的發(fā)育與成熟、交配行為、受精。B. 從受孕到著床：檢查成年雌性生殖功能、胚胎著床前發(fā)育、著床。C. 從著床到硬腭閉合：檢查成年雌性生殖功能、胚體發(fā)育、主要器官形成。一、動(dòng)物發(fā)育毒性試驗(yàn)第97頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四98D. 從硬腭閉合到妊娠結(jié)束：檢查成年雌性生殖功能、胚體的發(fā)育與生長(zhǎng)、器官的發(fā)育與生長(zhǎng)。E. 從出生到斷乳：檢查成年雌性生殖功能、新生仔對(duì)宮外生活的適應(yīng)性、斷乳前的發(fā)育與生長(zhǎng)。F. 從斷乳到性成熟

50、：檢查斷乳后的發(fā)育與生長(zhǎng)，對(duì)獨(dú)立生活的適應(yīng)、達(dá)到完全的性功能。生殖發(fā)育過(guò)程可分為6個(gè)階段一、動(dòng)物發(fā)育毒性試驗(yàn)第98頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四99三段生殖毒性試驗(yàn)I段：生育力和早期胚胎發(fā)育毒性試驗(yàn)（一般生殖毒性試驗(yàn)）II段：胚體-胎體毒性試驗(yàn) (致畸試驗(yàn))III段：出生前后發(fā)育毒性試驗(yàn) (圍生期毒性試驗(yàn))第99頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四100第100頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四101第101頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四第102頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四

51、103第103頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四104第104頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四105第105頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1061. 發(fā)育毒性的流行病學(xué)生殖流行病學(xué)研究是父體和母體、孕體特定的暴露與生育結(jié)局之間統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)的科學(xué)；出生缺陷少見(jiàn)、人群暴露少見(jiàn)、人群樣本量小、研究周期短以及與生物學(xué)上關(guān)聯(lián)越大，越易建立特定暴露與不良生育結(jié)局之間的關(guān)系；如反應(yīng)停；其它，利用病例對(duì)照研究或隊(duì)列研究尋找關(guān)聯(lián)。面臨很大困難，樣本需求量很大，妊娠失敗率高，研究同質(zhì)性，記錄的專(zhuān)業(yè)性及混雜因素等。二、人群流行病學(xué)研究第106頁(yè)，

52、共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1072. 人類(lèi)發(fā)育毒物的確定經(jīng)動(dòng)物致畸試驗(yàn)的化學(xué)物有4100種，約66%無(wú)致畸作用，7%對(duì)一種以上動(dòng)物有致畸性，18%對(duì)大多數(shù)動(dòng)物有致畸性，9%可疑經(jīng)證實(shí)可引起人類(lèi)發(fā)育異常的致畸原只有40種左右；病例報(bào)告和出生缺陷監(jiān)測(cè)登記對(duì)獲得人類(lèi)發(fā)育毒性 證據(jù)是有用的。Schardein曾對(duì)28種人類(lèi)化學(xué)致畸物的證據(jù)進(jìn)行分析，有23種是人類(lèi)病例報(bào)告提出第一證據(jù)；只有4種化學(xué)物 (酒精、多氯聯(lián)苯、卡馬西平和可卡因)是通過(guò)分析流行病學(xué)研究提供第一手證據(jù)，而丙戊酸證據(jù)主要來(lái)自于出生缺陷登記分析。二、人群流行病學(xué)研究第107頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日

53、，7點(diǎn)8分，星期四108已知的人類(lèi)致畸物電離輻射：放射治療、放射性碘、原子武器感染：風(fēng)疹、巨細(xì)胞病毒、單純性皰疹、梅毒、弓形體病毒代謝失調(diào)：克汀病、糖尿病、苯丙酮酸尿、男性化腫瘤、高溫 藥物和化學(xué)品： 反應(yīng)停、 Abameetin、 酒精、 氨基蝶呤、 雄性激素、麻 醉劑、抗甲狀腺藥物、白消安、咖啡因、氯代聯(lián)苯類(lèi)、香豆素抗凝劑、環(huán)磷酰胺、二已基乙烯雌酚、敵螨普、三氟氯溴乙烷 、異維A酸、鋰、甲巰咪唑、有機(jī)汞化合物、有機(jī)溶劑類(lèi)、苯妥因、腐霉利、四環(huán)素、三甲惡唑烷二酮、丙(基)戊酸 第108頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四109第109頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日

54、，7點(diǎn)8分，星期四110確認(rèn)人類(lèi)致畸物的標(biāo)準(zhǔn)一種特殊的缺陷或幾種缺陷并發(fā)（綜合征）的頻率突然增加；缺陷的增加與某種已知的環(huán)境改變（如一種新藥廣泛應(yīng)用）相關(guān)聯(lián)；在妊娠的特殊階段已知暴露于某種環(huán)境的改變，產(chǎn)生有特征性缺陷的綜合征；缺少妊娠時(shí)引起的特征性缺陷嬰兒的其他共同的因子。第110頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四111（1）國(guó)際生物科學(xué)研究所: 1989年根據(jù)動(dòng)物試驗(yàn)中發(fā)育毒性效應(yīng)的類(lèi)型、嚴(yán)重性和發(fā)病率，將化學(xué)物分成四類(lèi)，并規(guī)定了不同類(lèi)型安全系數(shù)范圍。二、人群流行病學(xué)研究3. 致畸物及發(fā)育毒物的危險(xiǎn)性分類(lèi)第111頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1

55、123. 致畸物及發(fā)育毒物的危險(xiǎn)性分類(lèi)二、人群流行病學(xué)研究（2）ICH（人用藥品注冊(cè)技術(shù)要求國(guó)際協(xié)調(diào)會(huì)）人用藥物危險(xiǎn)性分類(lèi)ICH 規(guī)定：分為5類(lèi)，要求醫(yī)生在開(kāi)處方時(shí)遵守，使懷孕婦女按規(guī)定使用這些藥品。 第112頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四113A、B、C2：僅在明顯需要時(shí)，妊娠期間可使用；C1：僅在如果證明可能的效益與對(duì)胎兒的可能的危險(xiǎn)比較是可 取時(shí)，妊娠期間可使用；D：如果在懷孕期間使用，應(yīng)通知病人對(duì)胎兒可能的危害；X：在懷孕或可能懷孕的婦女中禁止使用。（2）ICH人類(lèi)用藥危險(xiǎn)度分類(lèi)第113頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四114（3）美國(guó)F

56、DA關(guān)于妊娠期和哺乳期用藥的危險(xiǎn)性分類(lèi)妊娠類(lèi)用藥分類(lèi)與ICH相同；哺乳期用藥也分為5類(lèi)：L1很安全，L2安全，L3中等安全，L4有害，L5禁忌（4）WHO和全球化學(xué)品統(tǒng)一分類(lèi)和標(biāo)簽制度（GHS）對(duì)于生殖毒物的危害分類(lèi)和哺乳期影響的危害分類(lèi)；第114頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1151. 體外初篩試驗(yàn)體外初篩試驗(yàn)中，大鼠全胚胎培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)、大鼠胚胎肢芽微團(tuán)實(shí)驗(yàn)和小鼠胚胎干細(xì)胞試驗(yàn)得到歐洲替代方法驗(yàn)證中心（ECVAM）驗(yàn)證，并被推薦可作為出生前發(fā)育毒性試驗(yàn)（OECD TG414）和生殖/發(fā)育毒性預(yù)篩試驗(yàn)（OECD GL421）三、發(fā)育毒性的初篩和替代試驗(yàn)第115頁(yè)，共133

57、頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1161. 體外初篩試驗(yàn)（1） 大鼠全胚胎培養(yǎng)（whole embryo culture, WEC）： 是從孕期第910天大鼠子宮取出胚胎，旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)，觀察胚胎存活（心跳、血液循環(huán)）和生長(zhǎng)發(fā)育情況（卵黃囊直徑、顱臀長(zhǎng)和頭長(zhǎng)、體節(jié)數(shù)和胚胎重）；根據(jù)Brown評(píng)分對(duì)器官形態(tài)分化做出評(píng)價(jià)。可以篩選化學(xué)物的發(fā)育毒性、探討其劑量反應(yīng)關(guān)系和作用機(jī)制。優(yōu)點(diǎn)：快速檢驗(yàn)致畸原；經(jīng)濟(jì)；能精確的控制胚胎的暴露。不足：技術(shù)操作要求精確，比較費(fèi)力；胚胎僅在器官發(fā)生期相對(duì)短暫的時(shí)間內(nèi)接觸藥物三、發(fā)育毒性的初篩和替代試驗(yàn)第116頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期

58、四1171. 體外初篩試驗(yàn)（2） 胚胎細(xì)胞微團(tuán)培養(yǎng)（micromass culture）：從孕期11天的大鼠胚胎獲取中腦區(qū)、肢芽區(qū)等部位細(xì)胞微團(tuán)，在培養(yǎng)瓶中，與化學(xué)物接觸共培養(yǎng)5天?？梢杂弥行约t染色判斷細(xì)胞存活；用Alcian藍(lán)染色判斷肢芽軟骨細(xì)胞分化數(shù)量；蘇木素染色判斷CNS細(xì)胞分化數(shù)量。求出IC50，評(píng)價(jià)化學(xué)毒物的細(xì)胞毒性和發(fā)育毒性。三、發(fā)育毒性的初篩和替代試驗(yàn)第117頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1181. 體外初篩試驗(yàn)（3） 小鼠胚胎干細(xì)胞試驗(yàn)（embryo stem cell test, EST）：小鼠胚泡內(nèi)細(xì)胞團(tuán)衍生的胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞），在特定條件下，

59、可定向分化為機(jī)體多種細(xì)胞，可用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞分化、組織形成過(guò)程的發(fā)育毒性研究。目前較成熟的ES細(xì)胞是小鼠ES細(xì)胞株D3，可分化為心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、胰島細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞等。優(yōu)點(diǎn)：1）以細(xì)胞株為研究對(duì)象，可不剖殺懷孕動(dòng)物；2）有定向分化為多種細(xì)胞的潛能，對(duì)模擬早提胚胎發(fā)育具有較強(qiáng)的代表性。三、發(fā)育毒性的初篩和替代試驗(yàn)第118頁(yè)，共133頁(yè)，2022年，5月20日，7點(diǎn)8分，星期四1192. 體內(nèi)初篩試驗(yàn)發(fā)育毒性體內(nèi)預(yù)篩試驗(yàn)（C.K. assay）：1995年列入OECD化學(xué)品測(cè)試準(zhǔn)則；依據(jù)：大多數(shù)出生前受到的損傷將在出生后表現(xiàn)為存活力下降和/或生長(zhǎng)障礙；方法：推薦用大鼠，主要觀察出生后4天內(nèi)外觀畸形、胚胎死亡、生長(zhǎng)遲緩等發(fā)育毒性表現(xiàn)；特點(diǎn)：所用動(dòng)物數(shù)少，檢測(cè)終點(diǎn)少，實(shí)驗(yàn)周期短，能提供生殖/發(fā)育毒性初步信息；近年來(lái)，ECVAM已提出采用上述三種體外初篩試驗(yàn)代替體內(nèi)初篩試驗(yàn)三、發(fā)育毒性的初篩和替代試驗(yàn)第119頁(yè)，共133頁(yè)，2022