PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件的編寫PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件的編寫PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件的編寫資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件的編寫版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁(yè)次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：PCR實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件的編寫

湖南省臨床檢驗(yàn)中心

羅識(shí)奇

一、質(zhì)量體系文件的含義：質(zhì)量體系文件是實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作的依據(jù)，是描述實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量保障工作的一整套文件，而且它應(yīng)滿足質(zhì)量體系有效運(yùn)行的需要。

1、質(zhì)量體系文件具有以下特點(diǎn)：

法規(guī)性：經(jīng)批準(zhǔn)實(shí)施的質(zhì)量體系文件具有法規(guī)性，必須執(zhí)行；

適應(yīng)性：所有文件規(guī)定都以最實(shí)際，最有效的要求加以確定，以達(dá)到適用的目的；

唯一性：一個(gè)機(jī)構(gòu)只有唯一的質(zhì)量體系文件系統(tǒng)，一項(xiàng)質(zhì)量活動(dòng)只能規(guī)定唯一的程序；

見證性：質(zhì)量體系文件是質(zhì)量體系運(yùn)行的見證。

2、質(zhì)量體系文件的編寫原則：

系統(tǒng)協(xié)調(diào)原則：文件上下層之間應(yīng)相互銜接，相互協(xié)調(diào)，不應(yīng)互相矛盾，要構(gòu)成一個(gè)有機(jī)整體；

科學(xué)合理原則：文件不是對(duì)質(zhì)量體系的簡(jiǎn)單描述，而是要依據(jù)衛(wèi)生部關(guān)于《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理辦法》（以下簡(jiǎn)稱《辦法》）及中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力通用要求》（ISO導(dǎo)則17025－1999）的有關(guān)規(guī)定，結(jié)合本實(shí)驗(yàn)室工作特點(diǎn)和管理現(xiàn)狀，作到科學(xué)、合理、有效指導(dǎo)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)工作；

可操作實(shí)施原則：編寫質(zhì)量體系文件的目的在于貫徹實(shí)施，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)工作，所有編寫的質(zhì)量體系文件始終要考慮到可操作性，便于實(shí)施、檢查、記錄、追溯；

文件的裝訂應(yīng)是活頁(yè)的：質(zhì)量體系是動(dòng)態(tài)的，以便發(fā)現(xiàn)問題，便于修改；

文件應(yīng)為實(shí)驗(yàn)室人員方便地得到，并有效地使用。

3、質(zhì)量體系文件的內(nèi)容：

質(zhì)量手冊(cè)：按評(píng)審準(zhǔn)則描述的質(zhì)量體系；

程序文件：描述質(zhì)量體系所涉及到的各個(gè)部門的職能活動(dòng)，管理和各項(xiàng)具體檢測(cè)程序；

質(zhì)量計(jì)劃：質(zhì)量目標(biāo)、計(jì)劃修訂和完成的規(guī)定；

質(zhì)量記錄：表格、報(bào)告、各類記錄。

二、基因診斷實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量手冊(cè)書寫的基本格式：基因診斷實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系文件可按基因診斷實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量手冊(cè)形式命名。

1、封面：實(shí)驗(yàn)室名稱和標(biāo)志，質(zhì)量手冊(cè)的標(biāo)題、編號(hào)、發(fā)行版次、密級(jí)及發(fā)放登記號(hào)；

2、批準(zhǔn)頁(yè)：批準(zhǔn)人簽名、生效日期、持有人或部門（分受控和不受控兩類）。

批準(zhǔn)頁(yè)實(shí)例

質(zhì)量手冊(cè)

手冊(cè)版號(hào)：A

生效日期：××××年××月××日

總頁(yè)數(shù)：（包括此頁(yè)）

批準(zhǔn)人：×××

日期：××××年××月××日

副本控制：(不)受控類

編號(hào)：××持有人：×××

3、修訂頁(yè)：修訂頁(yè)用修訂表的形式說明質(zhì)量手冊(cè)各部分修訂狀態(tài)。

修訂表基本形式

修訂表

受控質(zhì)量手冊(cè)的持有者應(yīng)負(fù)責(zé)在收到修訂頁(yè)后立即將舊頁(yè)次換下。

4、手冊(cè)目錄：列出手冊(cè)文件序號(hào)、文件編號(hào)、文件標(biāo)題及頁(yè)碼。

5、前言，即實(shí)驗(yàn)室簡(jiǎn)介，需提供實(shí)驗(yàn)室名稱地址、通訊方式、經(jīng)歷和背景、規(guī)模、性質(zhì)以及對(duì)社會(huì)的各項(xiàng)承諾，如公正性聲明，要體現(xiàn)對(duì)衛(wèi)生部《辦法》精神的貫徹落實(shí)情況。

6、質(zhì)量方針和目標(biāo)：陳述質(zhì)量方針和目標(biāo)，并說明質(zhì)量方針和目標(biāo)如何為實(shí)驗(yàn)室全體人員所熟悉理解和執(zhí)行。

例：某醫(yī)院的質(zhì)量方針、目標(biāo)是：

準(zhǔn)確及時(shí)、嚴(yán)謹(jǐn)認(rèn)真公正求實(shí)、持續(xù)改進(jìn)

《質(zhì)量手冊(cè)》；保證體系為：

建立一系列的工作制度和標(biāo)準(zhǔn)操作程序建立室內(nèi)質(zhì)控、室間質(zhì)評(píng)的質(zhì)量保證體系建立質(zhì)量監(jiān)督機(jī)制不斷糾正、完善質(zhì)量體系

7、質(zhì)量管理機(jī)構(gòu)框圖：

一般有一定的任職條件，有相應(yīng)的職責(zé)和權(quán)力。

例圖：

8、基因診斷實(shí)驗(yàn)室工作制度

9、基因診斷實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作程序

10、基因診斷實(shí)驗(yàn)室記錄、報(bào)告單及表格

三、基因診斷實(shí)驗(yàn)室應(yīng)建制度Pro(Procedure)的編寫：

1、程序文件的管理和維護(hù)制度

目的：基因診斷程序文件是指導(dǎo)臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)活動(dòng)的法規(guī)性文件，屬內(nèi)部受控文件，不得擅自修改、涂改，不得遺失、外借翻印。為保持其現(xiàn)行有效和持續(xù)適應(yīng)性，并確立因條件變化進(jìn)行修改的程序。

編寫依據(jù)：

ISO/IEC170250－1999《檢測(cè)和校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室能力的通用要求》因衛(wèi)生部《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室技術(shù)驗(yàn)收表（checklist）》是根據(jù)ISO/IEC17025而設(shè)計(jì)

衛(wèi)生部《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理暫行辦法》及《臨床基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范》

適應(yīng)范圍：臨床檢驗(yàn)標(biāo)本；

內(nèi)容：程序文件應(yīng)包含下列內(nèi)容：文件名稱、編號(hào)、頁(yè)號(hào)、總頁(yè)數(shù)例：頁(yè)眉

頁(yè)底應(yīng)有：編寫人：××××××審核人：×××批準(zhǔn)人：×××生效日期：××××年××月××日及總頁(yè)碼。

編制及職責(zé)：程序文件由PCR實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人主持編寫、修訂、審核并保持它的現(xiàn)行有效性。由科主任批準(zhǔn)和頒布實(shí)施，并負(fù)責(zé)解釋。

發(fā)放與持有者責(zé)任：程序文件由科主任批準(zhǔn)發(fā)放，發(fā)放與回收要登記簽字，由PCR實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人保管，并組織全室工作人員認(rèn)真學(xué)習(xí)，了解內(nèi)容，熟悉其中各項(xiàng)規(guī)定，程序文件執(zhí)行情況納入實(shí)驗(yàn)室目標(biāo)管理，與獎(jiǎng)懲掛鉤。持有者調(diào)任時(shí)，要收回該程序文件。

修訂：科室任何工作人員均可提出對(duì)程序文件的修改建議，文件修改須經(jīng)有關(guān)人員討論，PCR實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人根據(jù)條件變化提出是否修改的決定，如作小的修改則可在修改頁(yè)上進(jìn)行，修改文件經(jīng)科主任審核批準(zhǔn)后，并填寫入程序文件修改頁(yè)。如果文件須作重大修改，PCR實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人可進(jìn)行改版。新版程序文件經(jīng)科主任批準(zhǔn)后生效，收回舊版，并予以銷毀，登記簽字后發(fā)出新版，保證工作現(xiàn)場(chǎng)只有唯一的，最新的使用版本。

2、基因診斷實(shí)驗(yàn)室工作制度Pro：

基因診斷實(shí)驗(yàn)室分區(qū)情況：各區(qū)實(shí)物用品應(yīng)有明顯標(biāo)識(shí)，嚴(yán)禁混用；

實(shí)驗(yàn)室工作人員均持證上崗；

為有效防止后擴(kuò)增區(qū)產(chǎn)物的污染，實(shí)驗(yàn)工作人員應(yīng)遵循單向走動(dòng)原則。前PCR區(qū)→標(biāo)本處理區(qū)→PCR擴(kuò)增區(qū)→PCR產(chǎn)物分析區(qū)，嚴(yán)禁人和物品反向流動(dòng)，進(jìn)入每個(gè)區(qū)前必須更換有該區(qū)特殊標(biāo)識(shí)的工作服和拖鞋，工作服及拖鞋均有專門的衣柜存放，每個(gè)區(qū)均有專用的一次性手套并有固定存放處。

實(shí)驗(yàn)室工作人員必須嚴(yán)格按照PCR實(shí)驗(yàn)室操作程序進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)開始前必須先做好室內(nèi)及工作臺(tái)的清潔消毒，離心管、吸頭等一次性用品均需高壓滅菌處理。

各實(shí)驗(yàn)區(qū)之間的試劑及樣品傳遞有條件的應(yīng)通過傳遞窗進(jìn)行。

非本室人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入，工作人員在工作時(shí)也不能隨意進(jìn)出，以免造成不應(yīng)有的污染。

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后應(yīng)用10％次氯酸鈉溶液消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，并用紫外線照射實(shí)驗(yàn)室，試驗(yàn)中使用過的吸頭、離心管等應(yīng)置于10％次氯酸鈉溶液中浸泡，消毒后集中焚毀（1）。

每天下班前處理好廢棄物品，關(guān)好水、電、門窗。

定期校準(zhǔn)和維護(hù)好PCR儀、離心機(jī)、水浴箱、冰箱等儀器設(shè)備。萬元以上的儀器設(shè)備應(yīng)做好使用登記工作。

引用文件及圖表：

（1）基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室工作制度。Pro:××（××為本制度在質(zhì)量手冊(cè)文件中的編號(hào)及頁(yè)碼。下同）3、實(shí)驗(yàn)室人員配置及培訓(xùn)制度：

目的：為保證實(shí)驗(yàn)室有足夠數(shù)量的稱職工作人員，特建立本制度。

適應(yīng)范圍：基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的人員配置、培訓(xùn)考核及管理等。

人員配制情況；

人員要求；

人員培訓(xùn)計(jì)劃：有計(jì)劃及記錄表(1)；

人員管理：有實(shí)驗(yàn)室人員一覽表(2)，并建立所有工作人員檔案(3)，包括人員學(xué)歷、任職資格、發(fā)表論文、科研成果等相關(guān)資料復(fù)印件裝訂成冊(cè)（活頁(yè)）。

引用文件及圖表。

（1）人員培訓(xùn)記錄表；

（2）實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表；

（3）實(shí)驗(yàn)室工作人員技術(shù)檔案。

4、實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理制度：

目的：為使實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理有序、在控而建立本制度。

適應(yīng)范圍：本制度適用于基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理。

制度細(xì)則：根據(jù)各自醫(yī)院及科室相關(guān)規(guī)定編寫

5、實(shí)驗(yàn)室材料的購(gòu)買和管理制度

目的：為保證PCR檢測(cè)所使用的試劑及耗材供貨渠道和質(zhì)量的穩(wěn)定、可靠，而建立本制度。

適應(yīng)范圍：適用于PCR實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)的試劑盒、實(shí)驗(yàn)耗材。

試劑和耗材的選購(gòu)：

檢測(cè)試劑應(yīng)與擴(kuò)增儀相配套，而且需三證齊全的商品試劑；

TiP頭必須使用有濾芯的PCR專用TiP頭；

其余耗材由醫(yī)院統(tǒng)一進(jìn)貨、管理等。

試劑及耗材的驗(yàn)收：

內(nèi)外包裝檢查按照試劑質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序執(zhí)行(1)；

上述檢查在到貨時(shí)完成，同時(shí)進(jìn)行記錄(2)；

試劑的性能檢查可見試劑質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序(1)；

耗材的實(shí)驗(yàn)檢測(cè)：如：離心管的檢測(cè)可用加溫和高速離心的辦法檢測(cè)其有無爆開或漏液情況。帶濾心吸頭可用適配加樣器配合吸取適量液體看其有無堵孔及漏現(xiàn)象發(fā)生，經(jīng)上述檢查，合格即可啟用，不合格則退貨。

試劑及耗材的儲(chǔ)存：一般驗(yàn)收后的PCR試劑應(yīng)存放于－20℃冰箱內(nèi)，無菌處理前的耗材存放于試劑準(zhǔn)備及貯存室，根據(jù)日常工作量，定期定量處理后放置于樣品制備室和擴(kuò)增室，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)定期檢查庫(kù)存、定期購(gòu)置試劑，并作好記錄(3)。

本制度引用的文件及登記本：

（1）試劑質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序

（2）試劑及耗材驗(yàn)收登記本

（3）試劑及耗材訂購(gòu)登記本。

6、儀器設(shè)備的管理制度：

目的：為保證PCR實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備得到妥善管理，使用的儀器設(shè)備保持在良好的工作狀態(tài)，特建立本制度。

適應(yīng)范圍：基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室所有的儀器設(shè)備。

制度細(xì)則：

基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室涉及的主要儀器設(shè)備：擴(kuò)增儀、恒溫金屬浴箱、高速離心機(jī)、高速冷凍離心機(jī)、可調(diào)移液器、混勻器、冰箱、超凈工作臺(tái)、移動(dòng)式紫外燈等。

建立設(shè)備檔案管理制度:儀器設(shè)備的一般情況：序號(hào)、名稱、制造商、接收日期、接收狀態(tài)、啟用日期、目前放置地點(diǎn)、接收人員簽字等，應(yīng)有儀器設(shè)備一覽表(1)，設(shè)備的一般情況及使用人應(yīng)用卡片形式貼在儀器表面；儀器設(shè)備的相關(guān)文件應(yīng)有：儀器設(shè)備的說明書、操作手冊(cè)、保修卡、相關(guān)儀器的管理負(fù)責(zé)人；儀器設(shè)備的損壞、故障、修理須在登記本上記錄如下內(nèi)容：日期、設(shè)備名稱、損壞或故障原因、修理單位、人員及修理結(jié)果，記錄人員簽名(2)。

儀器應(yīng)有工作狀態(tài)標(biāo)識(shí)，正常使用者貼綠色標(biāo)簽，有故障維修暫停使用的貼黃色標(biāo)簽，不能使用者貼紅色標(biāo)簽（禁用）。

儀器需按要求定期作校準(zhǔn)或檢定，應(yīng)有校準(zhǔn)標(biāo)識(shí)、注明校準(zhǔn)檢定日期及下次校準(zhǔn)或檢定日期，并應(yīng)作記錄，具體儀器校準(zhǔn)見儀器設(shè)備校準(zhǔn)SOP。

基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室儀器實(shí)行嚴(yán)格分區(qū)使用，并用不同顏色標(biāo)識(shí)。

儀器設(shè)備的報(bào)廢由室負(fù)責(zé)人提出申請(qǐng)后由院有關(guān)人員統(tǒng)一處理。

為保持儀器設(shè)備工作狀態(tài)的穩(wěn)定，應(yīng)對(duì)其進(jìn)行定期的維護(hù)和保養(yǎng)，具體見儀器維護(hù)保養(yǎng)文件。

為使擴(kuò)增儀處于穩(wěn)定工作狀態(tài)，在該電腦上不得使用非本室的外來軟盤，不能在電腦上加載其它程序和軟件，在使用本室軟盤進(jìn)行資料備份時(shí)，需預(yù)先殺毒方可使用。

引用文件及表格：

（1）基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備一覽表

（2）基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備維修登記本。

7、儀器設(shè)備的使用制度

目的：為保證儀囂設(shè)備得到正確的操作使用以滿足檢測(cè)質(zhì)量要求及保證儀器的使用壽命。

適用范圍：基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室所有儀器設(shè)備。

制度細(xì)則：

僅為本實(shí)驗(yàn)室工作人員有權(quán)使用實(shí)驗(yàn)室的儀器設(shè)備

本室工作人員在使用儀器前必須熟悉儀器的性能和操作程序，必須嚴(yán)格按照儀器標(biāo)準(zhǔn)操作程序SOP（standardoperationprocedure）操作（見各儀器操作SOP）。

因科研活動(dòng)的需要，使用本實(shí)驗(yàn)室儀器的非本室人員必須首先熟悉本程序的各項(xiàng)規(guī)定，并由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人對(duì)其使用儀器考核認(rèn)可后，方可使用。

儀器使用嚴(yán)格遵守分區(qū)使用的原則，并遵守標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

主要儀器使用后應(yīng)做好使用記錄和日常維護(hù)（見儀器設(shè)備的管理制度）。

8、儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)制度

目的：為保持儀器設(shè)備穩(wěn)定良好的功能狀態(tài)而建立。

適應(yīng)范圍：基因擴(kuò)增診斷實(shí)驗(yàn)室所有設(shè)備。

制度細(xì)則：

儀器設(shè)備的維護(hù)保養(yǎng)操作見相關(guān)SOP，并做好每天儀器的保養(yǎng)、周保養(yǎng)、月保養(yǎng)。建立儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)登記本（見各儀器設(shè)備保養(yǎng)登記本），效果及記錄由實(shí)驗(yàn)室主任負(fù)責(zé)檢查、監(jiān)督。

引用登記本：各儀器設(shè)備保養(yǎng)登記本。

9、儀器設(shè)備的校準(zhǔn)制度。

目的：為保證檢驗(yàn)儀器設(shè)備的有效性和準(zhǔn)確性而建立。

適用范圍：本制度適用于滿足基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)需要有可能對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成誤差的儀器設(shè)備。主要有：……擴(kuò)增儀、溫度計(jì)、恒溫水浴箱，可調(diào)移液器等。

制度細(xì)則：

上述設(shè)備在投入使用時(shí)要有校準(zhǔn)計(jì)劃，并按照儀器校準(zhǔn)程序校準(zhǔn)。(1)

如在檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)存在結(jié)果有漂移或偏差及其它可疑情況時(shí)，通過分析對(duì)可疑設(shè)備進(jìn)行校準(zhǔn)。

儀器設(shè)備維修后需進(jìn)行校準(zhǔn)，方可重新使用。

校準(zhǔn)的有效標(biāo)識(shí)：經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備在儀器標(biāo)簽上注明本次校準(zhǔn)的日期和結(jié)果及下次校準(zhǔn)的預(yù)定日期。

可調(diào)式移液器的校準(zhǔn)順序：按單一流向規(guī)定，首先校準(zhǔn)試劑準(zhǔn)備區(qū)及貯存區(qū)，然后依次校準(zhǔn)樣本處理區(qū)及PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)，每校準(zhǔn)完一個(gè)區(qū)的移液器，將其放回原處后，再取下一個(gè)區(qū)的移液器，進(jìn)行校準(zhǔn)。

建立校準(zhǔn)登記本（見各儀器設(shè)備校準(zhǔn)登記本：記錄每次校準(zhǔn)的情況并將校準(zhǔn)的結(jié)果送交科質(zhì)量負(fù)責(zé)人審閱核準(zhǔn)。

10、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)操作管理制度：

目的：PCR檢測(cè)是整個(gè)臨床擴(kuò)增檢驗(yàn)最主要的過程，為使其有序，在控，特建立。

適應(yīng)范圍：PCR檢測(cè)：樣本處理，核酸提取純化，擴(kuò)增產(chǎn)物分析整個(gè)過程。

制度細(xì)則：

核酸提取、純化、擴(kuò)增產(chǎn)物分析整個(gè)過程的具體操作見項(xiàng)目SOP文件及儀器使用SOP文件。(1-2)

試劑的分裝在試劑準(zhǔn)備區(qū)及貯存區(qū)內(nèi)進(jìn)行，最好由傳遞艙送至樣本制備區(qū)；樣本處理和核酸提取在樣本制備區(qū)內(nèi)進(jìn)行，加入模板后的反應(yīng)混合液由傳遞艙送至擴(kuò)增區(qū)；PCR擴(kuò)增及產(chǎn)物分析在擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行。

樣本的管理依據(jù)樣本管理制度及相應(yīng)的SOP(3)。

檢測(cè)時(shí)標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)中的“序號(hào)”作為檢測(cè)過程中的“檢測(cè)號(hào)”進(jìn)行傳遞。試管或其它蓋體分離的容器，檢測(cè)號(hào)標(biāo)識(shí)于管身1/3處。

移取所需體積的標(biāo)本后，立即蓋緊原始標(biāo)本管蓋，將標(biāo)本繼續(xù)保存于－20℃冰箱。實(shí)驗(yàn)結(jié)果的記錄依據(jù)實(shí)驗(yàn)記錄的管理制度。(4)

每次檢測(cè)過程必須有相應(yīng)的室內(nèi)質(zhì)控，室內(nèi)質(zhì)控的進(jìn)行依據(jù)相關(guān)SOP文件并作好記錄。(5-6)

檢測(cè)完畢的血清原始標(biāo)本保存一月。

引用的文件和表格：1、2、3、4、5、6（本文略，寫作時(shí)要明確標(biāo)出）。

11、實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)結(jié)果報(bào)告的管理制度。

目的：檢測(cè)結(jié)果的報(bào)告是檢驗(yàn)過程的最終輸出，為使報(bào)告生成、發(fā)放、管理受控，特建立。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室所有的臨床檢測(cè)項(xiàng)目的結(jié)果報(bào)告。

程序細(xì)則：

檢測(cè)結(jié)果報(bào)告應(yīng)準(zhǔn)確、清晰、明確和客觀；

實(shí)時(shí)熒光PCR測(cè)定結(jié)果數(shù)據(jù)要經(jīng)分析，避免因非特異性熒光而造成假陽(yáng)性結(jié)果，根據(jù)質(zhì)控品及室內(nèi)質(zhì)控判斷PCR擴(kuò)增的有效性，只有當(dāng)質(zhì)控品的擴(kuò)增結(jié)果符合項(xiàng)目SOP有關(guān)條件時(shí)，才可發(fā)出報(bào)告，否則應(yīng)重新測(cè)定。

定量測(cè)定的拷貝數(shù)/mI報(bào)告，并有相關(guān)檢測(cè)的參考范圍。如果高于測(cè)定方法線性范圍上限則對(duì)樣本稀釋再測(cè)，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)；如結(jié)果低于測(cè)定方法線性范圍下限，則報(bào)告小于測(cè)定范圍下限，而不能報(bào)告為“O”、陰性或其它各種形式的結(jié)果。

每份報(bào)告均應(yīng)包含以下信息：

標(biāo)題；報(bào)告的唯一性標(biāo)識(shí)；病人基本情況：姓名、性別、年齡、科別等；檢測(cè)標(biāo)本的特性和狀態(tài)；檢測(cè)標(biāo)本接收的日期和進(jìn)行檢測(cè)的日期；采用的檢測(cè)方法、檢測(cè)的設(shè)備；檢測(cè)標(biāo)本的參考值或參考范圍；實(shí)驗(yàn)操作及校核人員的簽字及簽發(fā)日期。

報(bào)告單的發(fā)放應(yīng)遵守科室的有關(guān)規(guī)定：

報(bào)告單分為二部分，如門診和住院部應(yīng)寫清楚如何與分別發(fā)放和接收?qǐng)?bào)告單報(bào)告單遺失時(shí)怎么辦怎么補(bǔ)發(fā)需郵寄的報(bào)告單如何發(fā)檢測(cè)報(bào)告的保密性，應(yīng)制定為病人的保密措施，如查詢?nèi)藛T在無任何有效證據(jù)（件）時(shí)不能提供其任何人的檢測(cè)結(jié)果信息。

12、實(shí)驗(yàn)室記錄的管理制度

目的：實(shí)驗(yàn)室記錄是質(zhì)量證明資料及質(zhì)量體系運(yùn)作的主要組成部分，為使資料的記錄、保存狀態(tài)在控，特建立。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于實(shí)驗(yàn)過程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)，文本資料的記錄和保存，主要有：病人標(biāo)本信息、實(shí)際操作記錄、實(shí)驗(yàn)檢測(cè)結(jié)果、原始申請(qǐng)報(bào)告單，儀器使用記錄、環(huán)境溫度、濕度記錄等。

制度細(xì)則：分為書面記錄和電子記錄。

書面記錄：

在樣本接收室接收標(biāo)本，接、收者均需在可接收登記本上簽字；(1)登記本上記錄病人信息包括：姓名、性別、檢測(cè)項(xiàng)目、標(biāo)本類別、編號(hào)等，將標(biāo)本帶入樣本處理室（血標(biāo)本閉蓋離心后）處理，登記本留在樣本接收室，對(duì)不符合要求的標(biāo)本在“拒收標(biāo)本登記本”上記錄。(2)并作相應(yīng)處理；登記本上的記錄不能涂改，需修改時(shí)可用紅筆在修改內(nèi)容上加雙杠并在備注欄說明；檢測(cè)過程中的記錄：專用實(shí)驗(yàn)的記錄本，不同區(qū)記錄本不能混用，試劑準(zhǔn)備及貯存室記錄每天檢測(cè)所用的試劑情況，如：名稱、批號(hào)、數(shù)量等；樣本制備室記錄檢測(cè)樣本數(shù)及本室內(nèi)進(jìn)行的操作過程。在擴(kuò)增和產(chǎn)物分析室記錄質(zhì)控結(jié)果和分析數(shù)據(jù)；(3)環(huán)境溫度、濕度(4)及冰箱溫度記錄(5)；實(shí)驗(yàn)記錄保存于各自實(shí)驗(yàn)操作區(qū)內(nèi)，至少保存兩年以上，兩年后交科室建檔封存。電子記錄：結(jié)果的電子保存；保存的文件標(biāo)識(shí)；電子保存的軟件備份及總匯打印均應(yīng)有相應(yīng)的規(guī)定與說明。

注意事項(xiàng)

不論是書面記錄、每日總匯打印還是電子記錄均須注意保密性：要寫具體措施；從PCR擴(kuò)增室?guī)С龅膶?shí)驗(yàn)記錄具有潛在的污染可能，操作人員應(yīng)嚴(yán)格遵守分區(qū)管理制度和防污染措施。

引用的文件及表格：1、2、3、4、5（本文略，寫作時(shí)要明確標(biāo)出）。

13、室內(nèi)質(zhì)控管理制度

目的：為嚴(yán)格控制基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室中各步驟的操作程序，保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性，以達(dá)

到預(yù)期的質(zhì)量。

適應(yīng)范圍：本制度適用于基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室臨床檢驗(yàn)項(xiàng)目的全過程。

制度細(xì)則：

由于核酸擴(kuò)增的高敏感性，為避免假陽(yáng)性和假陰性，必須對(duì)RNA和DNA分析的各步驟進(jìn)

行質(zhì)量控制，以保證測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性；

臨床標(biāo)本的質(zhì)量控制：按各項(xiàng)目SOP進(jìn)行；

試劑的質(zhì)量控制：按各項(xiàng)目SOP進(jìn)行；

質(zhì)量控制操作步驟：

血清質(zhì)量控制品：外購(gòu)衛(wèi)生部或廠家質(zhì)控品，自制質(zhì)控品要溯源，或比對(duì)試驗(yàn)；質(zhì)控品要有處理分析判斷；每次檢測(cè)質(zhì)控結(jié)果須有記錄；失控原因及糾正措施須有記錄。

室內(nèi)質(zhì)控圖的使用方法：

制訂最適合本室的質(zhì)控計(jì)劃；通過觀察圖形的規(guī)律性變化進(jìn)行誤差分析，消除誤差途徑，如:曲線漂移、趨勢(shì)性變化、連續(xù)多點(diǎn)分布在靶值一側(cè)、其它規(guī)律性變化(周期性)等。通過圖形的資料對(duì)比進(jìn)行誤差分析，解除誤差途徑，如每個(gè)月的月底將項(xiàng)目的全部質(zhì)檢血清檢測(cè)結(jié)果X和s與該批測(cè)定的X和s進(jìn)行比較，如果X發(fā)生了變化，說明準(zhǔn)確度發(fā)生變化提示有非隨機(jī)誤差存在。如果當(dāng)月s不同則表明檢測(cè)的精密度發(fā)生了變化。

14、生物防護(hù)與安全制度

目的：為預(yù)防實(shí)驗(yàn)室工作人員在工作中被感染和防止交叉污染。

適應(yīng)范圍：基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室工作人員。

制度細(xì)則：

污染途徑：空氣傳播:臨床標(biāo)本中的污染源在空氣中傳播；直接傳播：工作中偶然針刺，碎玻璃劃傷直接傳染；皮膚粘膜接觸：臨床標(biāo)本中的感染源通過破損皮膚粘膜接觸造成的感染；

預(yù)防措施：A、B、C、D等,要有針對(duì)性地寫出措施。

15、實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處理制度：

目的：為保證檢驗(yàn)質(zhì)量，防止交叉污染，并保護(hù)工作人員身體健康。

適應(yīng)范圍：實(shí)驗(yàn)室所有廢棄標(biāo)本、使用過的耗材等。

制度細(xì)則：

實(shí)驗(yàn)室放置裝有垃圾袋的有蓋污物桶，并貼有明顯的顏色標(biāo)識(shí)；

有潛在傳染性的樣品（如血、分泌物等），應(yīng)將此類樣品置污物袋內(nèi)交由保潔員負(fù)責(zé)，焚燒或按醫(yī)院規(guī)定統(tǒng)一處理；

試驗(yàn)過程中使用過的離心管、吸頭須置于10％次氯酸鈉中浸泡后置污物袋中，交由保潔員負(fù)責(zé)，按醫(yī)院規(guī)定統(tǒng)一處理；

實(shí)驗(yàn)使用過的一次性手套、帽子、口罩等置污物袋中交保潔員負(fù)責(zé)，按醫(yī)院規(guī)定統(tǒng)一處理；

檢測(cè)使用過的擴(kuò)增管裝入一次性塑料袋密封后置污物桶，交由保潔員，經(jīng)高壓消毒后按醫(yī)院規(guī)定統(tǒng)一處理。

16、實(shí)驗(yàn)室清潔消毒處理制度：

目的：為保證實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境清潔衛(wèi)生，防止交叉污染；

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、工作間、移液器等的清潔消毒工作；

制度細(xì)則：

每個(gè)實(shí)驗(yàn)室均應(yīng)有各自的清潔用具，不可混用；

實(shí)驗(yàn)室清潔應(yīng)按試劑準(zhǔn)備區(qū)及貯存室、樣本處理室、擴(kuò)增及產(chǎn)物分析室的方向進(jìn)行；

嚴(yán)格遵守實(shí)驗(yàn)室清潔消毒及污染應(yīng)急處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序(1)、及紫外線消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序(2)、并做好記錄(3-4)；

在實(shí)驗(yàn)過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺或擴(kuò)增儀內(nèi)毛細(xì)管斷裂，應(yīng)立即按實(shí)驗(yàn)室清潔消毒及污染應(yīng)急處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序處理。

引用的文件和表格：1、2、3、4(本文略，各自手冊(cè)要標(biāo)出)。

17、化學(xué)試劑管理制度：

目的：保證化學(xué)試劑的安全保存和充足備用；

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室使用的各種化學(xué)試劑。

制度細(xì)則：

實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)化學(xué)試劑驗(yàn)收登記后，分類編號(hào)，放于干燥冷暗處；

易燃、易爆、易揮發(fā)、易風(fēng)化、易潮解試劑，均應(yīng)密封，單獨(dú)分別保存于干燥、冷暗、安全處；

強(qiáng)酸、強(qiáng)堿要分開存放；

藥品標(biāo)簽，應(yīng)有藥品名稱、分子式、分子量、級(jí)別、雜質(zhì)含量、批號(hào)、廠名等，無標(biāo)簽者禁用；

應(yīng)有計(jì)劃地申請(qǐng)購(gòu)買試劑，以補(bǔ)充消耗和擴(kuò)充需要的新品種。

18、抱怨處理制度：

目的：重視被檢查單位或個(gè)人的抱怨和申訴，正確處理“抱怨”更加有效地改進(jìn)實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量體系。

適用范圍：適用于患者、臨床醫(yī)護(hù)人員針對(duì)檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量、服務(wù)質(zhì)量的投訴和/或抱怨。

制度細(xì)則：

抱怨的接受工作人員在接受抱怨時(shí)首先要做到語(yǔ)言文明，熱情接待；工作人員對(duì)抱怨申訴應(yīng)記錄，包括抱怨者姓名、地址、聯(lián)系方式、抱怨內(nèi)容；

抱怨的處理

如能當(dāng)時(shí)處理的抱怨應(yīng)給予及時(shí)解決，并記錄處理結(jié)果；(1)不能當(dāng)面答復(fù)的抱怨應(yīng)約定反饋時(shí)間，根據(jù)情況盡快召集相關(guān)人員商討處理方案，盡可能給予滿意答復(fù)，并記錄答復(fù)內(nèi)容；(1)抱怨的處理以抱怨者的滿意為目的，但必須遵重科學(xué)為原則，在不違背科學(xué)原則，醫(yī)療行為規(guī)范的基礎(chǔ)上，爭(zhēng)取抱怨者最大程度的理解；科室不能妥善解決的抱怨，應(yīng)移交醫(yī)院醫(yī)務(wù)處（科）遵循院醫(yī)務(wù)處（科）處理程序和辦法。

抱怨的善后：

對(duì)抱怨中反映出的影響到實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量及質(zhì)量體系有效性的問題，實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人應(yīng)會(huì)同科質(zhì)量負(fù)責(zé)人及其他相關(guān)人員及時(shí)分析存在問題，提出糾正措施，并由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人監(jiān)督執(zhí)行；如涉及到服務(wù)方式及質(zhì)量問題，應(yīng)參照科內(nèi)有關(guān)制度對(duì)違反科室管理制度的人員給予相應(yīng)處罰；投訴處理記錄存檔保存兩年。

引用的文件及表格：略，寫作時(shí)應(yīng)明確標(biāo)出。

四、基因診斷實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化操作程序SOP(standardoperatingprocedure)的編寫：

1、實(shí)驗(yàn)室清潔消毒及污染應(yīng)急處理程序：

目的：實(shí)驗(yàn)室用具的清潔消毒及污染的應(yīng)急處理，防止和減少實(shí)驗(yàn)污染，保證實(shí)驗(yàn)室工作正常運(yùn)行。

范圍：整個(gè)與基因擴(kuò)增相關(guān)工作場(chǎng)所：

工作程序：

各實(shí)驗(yàn)區(qū)清潔消毒工具只可專用，不可混用，要有該實(shí)驗(yàn)區(qū)明顯標(biāo)識(shí)；

實(shí)驗(yàn)完畢后，離心管、吸頭須置于10％次氯酸鈉溶液中浸泡后與患者樣品一起高壓滅菌后處理；

試驗(yàn)中使用的離心管、吸頭在使用前必須經(jīng)高壓滅菌消毒在消毒有效期內(nèi)使用；

每天對(duì)使用過的移液器用10％次氯酸鈉溶液進(jìn)行擦拭。每2周1次對(duì)移液器進(jìn)行高壓消毒；

實(shí)驗(yàn)完畢及時(shí)消除擴(kuò)增儀內(nèi)的毛細(xì)管，裝入密封塑料袋中，與其它生物污染品一同交醫(yī)院焚燒處理；

用10％次氯酸鈉（或75％酒精）清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和傳遞艙，并用可移動(dòng)紫外燈照射處理半小時(shí)；每周次工作服交院洗衣房洗滌消毒，不同實(shí)驗(yàn)的工作服隔天洗滌；

實(shí)驗(yàn)過程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，立即用浸有10％次氯酸鈉液的衛(wèi)生紙掩蓋30分鐘后，再用75％酒精擦拭，并用清水擦洗，并做相應(yīng)記錄；(1)

擴(kuò)增儀內(nèi)的毛細(xì)管在擴(kuò)增中若有斷裂或外濺，對(duì)所有可能污染物均要按上述方法嚴(yán)格消毒處理，并做相應(yīng)記錄；(1)

引用表格:本文略。

2、紫外消毒標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：對(duì)實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和實(shí)驗(yàn)室內(nèi)環(huán)境進(jìn)行消毒，防止和減少實(shí)驗(yàn)污染；

適應(yīng)范圍：本實(shí)驗(yàn)室的工作區(qū)和實(shí)驗(yàn)臺(tái)面及相關(guān)的設(shè)備；

操作程序：

實(shí)驗(yàn)開始前開啟各工作區(qū)的紫外燈，定時(shí)照射1小時(shí)，由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行；

實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)工作臺(tái)面用可移紫外消毒燈調(diào)至實(shí)驗(yàn)臺(tái)上方60－90cm處照射30分鐘，由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行；

每天工作結(jié)束后開啟各工作區(qū)的紫外燈，試劑準(zhǔn)備室定時(shí)照射2小時(shí)，樣本處理室和核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析室應(yīng)照射過夜，由實(shí)驗(yàn)室工作人員進(jìn)行。

3、試劑的質(zhì)檢操作程序：

目的：為保證實(shí)驗(yàn)室對(duì)試劑盒的驗(yàn)收質(zhì)量而建立。

適用范圍：適應(yīng)于基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)的臨床診斷試劑。

程序細(xì)則：

試劑盒內(nèi)外包裝的質(zhì)檢：外包裝的檢查：包裝應(yīng)完整無污無損，標(biāo)識(shí)清楚，廠家名稱、品名、批準(zhǔn)文號(hào)、生產(chǎn)及有效日期；內(nèi)包裝檢查：內(nèi)包裝是否有破損，泄漏，內(nèi)裝物是否

齊全、是否有相應(yīng)的使用說明書等；

試劑盒性能質(zhì)檢：

收到試劑后，目測(cè)試劑是否處于凍存狀態(tài)；核對(duì)試劑品種和數(shù)量，檢查試劑批號(hào)；及時(shí)將試劑轉(zhuǎn)入－20℃冰箱保存，并將上述檢測(cè)核對(duì)情況記錄在冊(cè)；啟用新批號(hào)試劑前一周對(duì)新批號(hào)試劑進(jìn)行效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)。效驗(yàn)實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置空白對(duì)照，陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各一。陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品梯度為102、103、104、105、106；如出現(xiàn)以下情況中任何一種的判斷為試劑不合格，不能用于臨床檢測(cè)：

①空白對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增。如擴(kuò)增曲線CT值大于25，需重復(fù)實(shí)驗(yàn)確證試劑污染；

②陽(yáng)性對(duì)照和陰性標(biāo)準(zhǔn)品均未檢出而陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品檢出率大幅下降，表示試劑失效或檢測(cè)靈敏度大幅下降；

陽(yáng)性對(duì)照未檢出，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品檢測(cè)正常，提示樣品提取液可能存在問題。重復(fù)新舊提出液陽(yáng)性對(duì)照實(shí)驗(yàn)，確定提取液失效問題。更換提取液后該批試劑方可使用；空白對(duì)照無擴(kuò)增，陰性對(duì)照有擴(kuò)增，排除其它污染可能性后，提取液存在污染可能，單獨(dú)用提取液點(diǎn)樣上機(jī)，出現(xiàn)擴(kuò)增，需更換提取液后方可使用該批試劑；陽(yáng)性對(duì)照檢出，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品未檢出或擴(kuò)增曲線明顯系統(tǒng)性CT值偏大5個(gè)循環(huán)以上，提示陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品存在問題，更換陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品后該批試劑方可投入使用；空白對(duì)照、陰性對(duì)照無擴(kuò)增，陽(yáng)性對(duì)照正常檢出，陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品導(dǎo)致的標(biāo)準(zhǔn)曲線之斜率（－～）、截距（26～34）、相關(guān)性（＜－均在使用范圍內(nèi)，表明該批試劑良好，可以投入臨床使用，將實(shí)驗(yàn)結(jié)果寫入記錄(1)。

使用記錄本：1.試劑質(zhì)檢記錄本。

4、溫度計(jì)校準(zhǔn)操作程序：

目的：保證溫度計(jì)的精確性。

適應(yīng)范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室所使用的溫度計(jì)。

程序細(xì)則：

溫度計(jì)校準(zhǔn)每年進(jìn)行一次；

由院設(shè)備科人員送計(jì)量局對(duì)溫度計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)；

經(jīng)校準(zhǔn)過的溫度計(jì)可作為恒溫金屬浴溫度校準(zhǔn)的參照。

引用表格：

（1）儀器設(shè)備校準(zhǔn)登記表。Tab××

5、恒溫金屬浴校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：確保恒溫金屬浴溫度的準(zhǔn)確性。

適用范圍：適用于本室現(xiàn)用的恒溫金屬浴。

程序細(xì)則：

金屬浴的設(shè)定溫度與實(shí)際溫度可能存在差異，應(yīng)定期對(duì)其進(jìn)行校準(zhǔn)（每月一次）。

采用比對(duì)校準(zhǔn)方法，即用經(jīng)計(jì)量局校準(zhǔn)的溫度計(jì)插入金屬浴的加熱孔中，調(diào)節(jié)恒控至一定的溫度（實(shí)驗(yàn)常用溫度：100℃），待恒溫?zé)袅敛⒊掷m(xù)10分鐘以上，觀察溫度計(jì)顯示溫度與設(shè)定溫度是否一致。

做好校準(zhǔn)記錄。

引用表格：

（1）儀器設(shè)備校準(zhǔn)登記本。Tab××

支持性文件：恒溫金屬浴箱使用說明書。

6、可調(diào)移液器校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序:

目的：確保可調(diào)移液器的準(zhǔn)確性。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于各種品牌、可調(diào)和多通道移液器。

程序細(xì)則：

校準(zhǔn)環(huán)境和用具要求：

室溫：20℃－25℃，測(cè)定中波動(dòng)范圍不大于±℃；電子天平：放置于無塵和無震動(dòng)影響的臺(tái)面上，房間盡可能有空調(diào)，稱量時(shí)，為保證天平內(nèi)的濕度（相對(duì)濕度60－90％），天平內(nèi)應(yīng)放置一裝有10ml蒸餾水的小燒杯，小燒杯10ml體積。測(cè)定液體：溫度為20－25℃的去氣雙蒸水。

選定標(biāo)準(zhǔn)體積。

擬校準(zhǔn)體積；可調(diào)式移液器標(biāo)定體積的中間體積；最小可調(diào)體積（不小于擬校準(zhǔn)體積的10％），如為固定體積可調(diào)式移液器，則只有一種校準(zhǔn)體積。

校準(zhǔn)步驟：

將移液器調(diào)至擬校準(zhǔn)體積，選擇合適的吸頭；調(diào)節(jié)好天平；來回吸吹蒸餾水3次，以使吸頭濕潤(rùn)，用紗布拭干吸頭；垂直握住移液器，將吸頭浸入液面2－3mm處，緩慢(1－3秒)一致的吸取蒸餾水；將移液器以30度角放入稱量燒杯中，緩慢一致地將移液器壓至第一檔，等待1－3秒，再壓至第二檔，使吸頭里的液體完全排出；記錄稱量值；擦干吸頭外面；按上述步驟稱10次；每次測(cè)定值的均值作為最后加樣器吸取的蒸餾水重量，按表1所列蒸餾水Z因子計(jì)算體積；按校準(zhǔn)結(jié)果調(diào)節(jié)移液器。無以上校準(zhǔn)條件者也可寫送院設(shè)備科或計(jì)量局校準(zhǔn)。附表：蒸餾水Z因子

7、××擴(kuò)增儀校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序

目的：保證循環(huán)儀正常運(yùn)行的準(zhǔn)確性和精密度，以獲得準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于×××擴(kuò)增儀。

程序細(xì)則：

新安裝的儀器以生產(chǎn)廠商的合格證明為校準(zhǔn)依據(jù)；

循環(huán)儀每年由廠商對(duì)其溫控系統(tǒng)進(jìn)行1次校準(zhǔn)，（購(gòu)買設(shè)備時(shí)應(yīng)寫進(jìn)合同）。

儀器使用過程中如發(fā)現(xiàn)溫度有漂移或懷疑實(shí)驗(yàn)結(jié)果不理想的可能原因是循環(huán)儀時(shí)，應(yīng)及時(shí)與廠商聯(lián)系對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)；

儀器故障維修后應(yīng)對(duì)儀器進(jìn)行校準(zhǔn)，合格后方可使用；

做好儀器的校準(zhǔn)記錄(1)；

引用的表格：

（1）儀器設(shè)備校準(zhǔn)登記表Tab××

支持性文件：×××擴(kuò)增儀使用說明書。

8、×××擴(kuò)增儀維護(hù)保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：對(duì)×××擴(kuò)增儀進(jìn)行維護(hù)，以保證儀器正常運(yùn)行。

適應(yīng)范圍：本SOP適用于×××擴(kuò)增儀。

程序細(xì)則：

×××擴(kuò)增儀在不使用時(shí)，閉蓋以減少灰塵進(jìn)入到加熱腔;

如果發(fā)現(xiàn)棱鏡上有灰塵，立即用干凈的棉棒和酒精擦拭；

每個(gè)月用干凈的棉棒和酒精擦拭加熱腔內(nèi)壁及棱鏡；

如發(fā)生毛細(xì)管斷裂，立即用沾有10％次氯酸鈉的抹布擦拭，再用無水乙醇擦拭，并用紫外燈照射過夜；

透鏡的清潔：在反應(yīng)艙底部有一個(gè)透鏡，儀器使用過程中，透鏡可能會(huì)沾上灰塵、水份，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可用專用擦鏡紙直接擦去，也可蘸取酒精擦拭透鏡。

引用表格：（1）儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)登記表Tab×××

支持性文件：×××擴(kuò)增儀操作手冊(cè)。

9、恒溫金屬浴箱維護(hù)保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

目的：對(duì)恒溫金屬浴進(jìn)行維護(hù)保養(yǎng)，以保證儀器正常運(yùn)行。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于恒溫金屬浴；程序細(xì)則：

如果發(fā)現(xiàn)儀器表面有污跡，則用10％次氯酸鈉清潔表面或用75％酒精擦拭；

每月用棉簽沾水清洗模塊上的錐孔，以保證Ependoff管與錐孔壁接觸充分，導(dǎo)熱良好；

如果實(shí)驗(yàn)過程中出現(xiàn)液體不慎泄漏，立即用軟布蘸10％次氯酸鈉反復(fù)清洗，然后再用75％酒精擦拭；

定期用經(jīng)校準(zhǔn)的溫度計(jì)測(cè)量其實(shí)際溫度并進(jìn)行校準(zhǔn)（每月一次）。

引用表格：（1）儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)登記表：Tab××

支持性文件：恒溫金屬浴箱使用說明書。

10、×××式離心機(jī)維護(hù)保養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

目的：對(duì)離心機(jī)進(jìn)行維護(hù)，保證儀器正常運(yùn)行。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)××離心機(jī)。

程序細(xì)則：

離心機(jī)不用時(shí)，拔下電源扦頭；

定期查看電機(jī)碳刷，當(dāng)其長(zhǎng)度小于6毫米時(shí)，必須及時(shí)更換；

每月用濕布和酒精擦離心機(jī)腔；

如果操作過程中出現(xiàn)液體不慎泄漏，立即用軟布蘸10％次氯酸鈉反復(fù)清洗，然后再用75％酒精擦拭。

引用表格：（1）儀器設(shè)備維護(hù)保養(yǎng)登記表。Tab××

支持性文件：××離心機(jī)使用說明書。

11、臨床標(biāo)本采集及處理標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：規(guī)范臨床待檢標(biāo)本的正確采集和處理。

適用范圍：基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本。

操作程序：

本實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)標(biāo)本：血清或血漿、痰、××、××

血液標(biāo)本：用真空采集管采集血液標(biāo)本，病區(qū)標(biāo)本由護(hù)士采集，門診標(biāo)本由檢驗(yàn)科門診抽血處專人采集，血標(biāo)本采集后2小時(shí)內(nèi)送達(dá)實(shí)驗(yàn)室（HCV采用EDTA抗凝血漿，所有抗凝劑嚴(yán)禁使用肝素，因肝素是Taq酶的強(qiáng)抑制劑。）如標(biāo)本采血量不足，嚴(yán)重溶血、采樣時(shí)間過長(zhǎng)（特別是進(jìn)行RNA檢測(cè)時(shí)）或出現(xiàn)其它不合要求的問題，應(yīng)拒收標(biāo)本，并在拒收標(biāo)本登記表上登記(1)。并告知相關(guān)科室。血液標(biāo)本離心后用一次性吸管吸取血清或血漿加入已消毒的的離心管中，用記號(hào)筆編號(hào)。化驗(yàn)單，原始標(biāo)本及離心管上的編號(hào)均應(yīng)一致；

痰標(biāo)本：用帶蓋的無菌一次性塑料瓶收集清晨第一口痰標(biāo)本送檢，對(duì)于無痰或少痰患者，可用45℃加溫的100g/LNaCL水溶液霧化吸入或改變體位使痰易于咳出。小兒可以輕壓胸骨柄上方以誘導(dǎo)咳痰，用消毒棉拭子刺激喉部引起咳嗽反應(yīng)等方法，用棉拭子采集痰標(biāo)本。標(biāo)本在室溫下保存不能超過24小時(shí)。樣本處理時(shí)，在樣本中加入2－3倍體積的4％NaOH溶液，旋轉(zhuǎn)一小時(shí)使其充分液化，取液化后的標(biāo)本1ml于無菌離心管中，13000rpm離心10min棄上清液，沉淀用生理鹽水洗滌2次，棄上清，保留存淀。編號(hào)方式同上，置－20℃保存待檢。

尿道或生殖道拭子：尿道或陰道分泌物由醫(yī)生用專用取樣拭子（滅菌，一次性）采集標(biāo)本，及時(shí)送檢。采集生殖道標(biāo)本要求病人在采樣前2小時(shí)內(nèi)不能排尿，采樣時(shí)將棉拭子伸入男性尿道或女性宮頸口2-3cm，旋轉(zhuǎn)一周以獲取上皮細(xì)胞，將取樣后的棉拭子放入含1ml無菌生理鹽水離心管中漂洗片刻在管壁上擠干后丟棄拭子，13000rpm離心10min，棄上清，保留沉淀。編號(hào)方式同上，置－20℃保存待檢。

尿液：由病人自留尿液于無菌封閉的杯中送檢。取1ml于無菌離心管中，13000rpm離心10min，棄上清，保留沉淀。編號(hào)方式同上，置－20℃保存待檢；

腦脊液和胸腹水：由臨床醫(yī)生采集后放入消毒的試管中及時(shí)送檢。取1ml于無菌離心管中，13000rpm離心10min，棄上清，保留沉淀。編號(hào)方式同上，置－20℃保存待檢。

引用登記本：（1）標(biāo)本拒收登記本：Reg××

12、臨床標(biāo)本的接收標(biāo)準(zhǔn)操作程序。

目的：使臨床檢測(cè)標(biāo)本符合要求，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

適應(yīng)范圍：基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本。

程序細(xì)則：

由PCR實(shí)驗(yàn)室派出專人負(fù)責(zé)標(biāo)本的接收，并實(shí)行雙簽制度：送檢者與接收者在標(biāo)本可接收登記本上簽名。(1)

標(biāo)本的接收應(yīng)獨(dú)立于三個(gè)實(shí)驗(yàn)區(qū)之外的接收區(qū)進(jìn)行，以避免因標(biāo)本的接收而頻繁出入樣本制備區(qū)而造成的污染。

對(duì)于檢驗(yàn)申請(qǐng)單填寫不完整，檢驗(yàn)單姓名與標(biāo)本姓名不符，標(biāo)本標(biāo)識(shí)不清的應(yīng)及時(shí)與臨床聯(lián)系退回并作記錄。(2)

標(biāo)本在下述情況下被視為不合格，工作人員有權(quán)拒收：

使用不適當(dāng)?shù)娜萜?；容器有破損；標(biāo)本外泄污染；標(biāo)本溶血；標(biāo)本量不足；室溫下放置時(shí)間過長(zhǎng)等。

對(duì)于驗(yàn)收合格的標(biāo)本，應(yīng)立即分裝并標(biāo)記，如不能及時(shí)檢測(cè)應(yīng)將其分類保存至－20℃冰箱。

使用登記本：

（1）標(biāo)本可接收登記本：Reg××

（2）標(biāo)本拒收登記本：Reg××

13、標(biāo)本的唯一性識(shí)別編制程序：

目的：規(guī)范臨床標(biāo)本唯一性標(biāo)識(shí)的編碼規(guī)則，保證在任何時(shí)候?qū)?biāo)本的識(shí)別不發(fā)生混淆。

適應(yīng)范圍：基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本的編碼。

程序細(xì)則：

按檢測(cè)類型分類標(biāo)記：根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目不同，每種檢測(cè)項(xiàng)目標(biāo)記唯一的代號(hào)。如乙型肝炎病毒標(biāo)記為GB、丙型肝炎對(duì)應(yīng)病毒標(biāo)記為GC、結(jié)核桿菌標(biāo)記為GTB。前加年、月、日。例：2003年元月15日的丙型肝炎病毒標(biāo)記為030115GC。

按化驗(yàn)單接收順序編號(hào)：在同種檢測(cè)類型的化驗(yàn)單中，按化驗(yàn)單順序編號(hào)。如第一個(gè)檢測(cè)乙型肝炎病毒的化驗(yàn)單編號(hào)為GB001。第二個(gè)檢測(cè)乙型肝炎病毒的化驗(yàn)單編號(hào)為GB002，以此類推。

實(shí)際編號(hào)為兩項(xiàng)原則合并，組成標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)。標(biāo)識(shí)共分三部分：標(biāo)本采集日期、檢測(cè)項(xiàng)目、該檢測(cè)批次的標(biāo)本序號(hào)，三部分間連接無間隔符號(hào)，例如：

整個(gè)標(biāo)識(shí)為10－12位，序號(hào)為001－009（序號(hào)可視單位標(biāo)本接收量定）。

標(biāo)本的唯一性標(biāo)識(shí)須字跡清晰明了，不得隨意作任何涂改，必要時(shí)，在舊標(biāo)識(shí)上劃雙線更改，更改后應(yīng)保持舊標(biāo)識(shí)可辨識(shí)。

14、臨床標(biāo)本的保存和安全處置標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：規(guī)范臨床標(biāo)本的保存和安全處置。

適用范圍：基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室的所有臨床檢測(cè)標(biāo)本。

程序細(xì)則：

標(biāo)本的保存：

血清或血漿標(biāo)本在4℃可保存48小時(shí)，－20℃可保存一個(gè)月；TB標(biāo)本不宜保存，應(yīng)在24小時(shí)內(nèi)處理完畢；提取的核酸標(biāo)本在48小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可置4℃保存，如48小時(shí)不檢測(cè)應(yīng)置－20℃保存，報(bào)告發(fā)出后按規(guī)定處理；原始血清/血漿樣本在報(bào)告發(fā)出前均置－20℃冰箱保存，不得丟棄。報(bào)告發(fā)出后，置－20℃冰箱保存一個(gè)月（1）以備查。

標(biāo)本的安全處置：

所有的標(biāo)本均可能具有傳染性，須嚴(yán)格遵守醫(yī)院內(nèi)有關(guān)院內(nèi)感染及日用垃圾的管理和處理規(guī)定。工作人員須注意保持并隨時(shí)檢查容器的完整和有無標(biāo)本外泄發(fā)生；

廢棄標(biāo)本經(jīng)確認(rèn)后，保持容器完整，置于廢棄標(biāo)本處，由衛(wèi)生處理人員統(tǒng)一收集焚燒處理。

使用登記本：（1）標(biāo)本超低溫保存登記本：Reg××

15、××擴(kuò)增儀標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：正確使用×××PCR檢測(cè)儀。

適應(yīng)范圍：適應(yīng)于×××擴(kuò)增儀。

程序細(xì)則：根據(jù)各自PCR檢測(cè)儀操作手冊(cè)描述。

引用的表格：（1）儀器設(shè)備使用登記表：Tab××

支持性文件：×××PCR檢測(cè)儀操作手冊(cè)。

16、恒溫金屬浴箱標(biāo)準(zhǔn)操作程序

目的：正確使用恒溫金屬浴箱。

適應(yīng)范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室恒溫金屬浴箱。

程序細(xì)則：

根據(jù)各自金屬恒溫浴箱使用說明書描述。

引用表格：（1）儀器設(shè)備使用登記表：Tab××

支持性文件：恒溫金屬浴箱使用說明書。

17、×××離心機(jī)標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：正確使用×××離心機(jī)。

適應(yīng)范圍：適用于本實(shí)驗(yàn)室使用的×××離心機(jī)。

程序細(xì)則：按×××離心機(jī)使用說明書描述。

引用表格：（1）儀器設(shè)備使用登記表：Tab××

支持性文件：×××離心機(jī)使用說明書。

18、試劑準(zhǔn)備及貯存室標(biāo)準(zhǔn)操作程序

規(guī)范本室進(jìn)行的工作，確保試劑正確制備和貯存。

適應(yīng)范圍：試劑的制備和貯存。

程序細(xì)則：

實(shí)驗(yàn)室所購(gòu)試劑經(jīng)驗(yàn)收登記后，按說明書中的要求貯存；

試劑取出先復(fù)溶至室溫，經(jīng)短暫離心，根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要量配置適量的核酸提取液和反應(yīng)混合液,不用的試劑及時(shí)放回原處；

做好詳細(xì)實(shí)驗(yàn)記錄，見試劑準(zhǔn)備室實(shí)驗(yàn)記錄本

(1)；

實(shí)驗(yàn)完畢，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)面(2)；

操作者必須戴手套，一次性帽子。

引用文件及使用的登記本：

（1）試劑準(zhǔn)備室工作記錄本：Reg××

（2）實(shí)驗(yàn)室清潔制度：Pro××

19、樣本處理室標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：規(guī)定在標(biāo)本制備室內(nèi)進(jìn)行的操作規(guī)則；

適應(yīng)范圍：所有在本區(qū)進(jìn)行的工作。

程序細(xì)則：

臨床標(biāo)本的接收、保存，核酸（DNA、RNA）提取、貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定RNA時(shí)CDNA的合成，在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行；

標(biāo)本的接收處理和保存按臨床標(biāo)本的管理制度及臨床標(biāo)本標(biāo)準(zhǔn)操作程序進(jìn)行；（1－2）

不同檢測(cè)項(xiàng)目的樣本核酸的提取和貯存，按相應(yīng)檢測(cè)項(xiàng)目的SOP進(jìn)行；(3)

核酸加入至擴(kuò)增反應(yīng)管中在本區(qū)的超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行，然后通過××（最好有傳遞艙）傳遞至擴(kuò)增區(qū)；

詳細(xì)做好實(shí)驗(yàn)記錄和儀器使用記錄，見樣本制備室實(shí)驗(yàn)記錄本(4)及儀器使用登記本；(5)

保持室內(nèi)空氣流通，避免發(fā)生氣溶膠污染。在實(shí)驗(yàn)完畢后，按實(shí)驗(yàn)室清潔消毒程序進(jìn)行清潔、消毒工作。見實(shí)驗(yàn)室清潔消毒制度。(6)

.引用的文件及使用登記本、表格：

（1）臨床標(biāo)本的管理制度：Pro××

（2）臨床標(biāo)本SOP：SOP××

（3）項(xiàng)目SOP：SOP××

（4）樣本制備室工作記錄本：Reg××

（5）儀器設(shè)備使用登記表：Tab××

（6）實(shí)驗(yàn)室清潔制度：Pro××

20、核酸擴(kuò)增及產(chǎn)物分析室標(biāo)準(zhǔn)操作程序：

目的：規(guī)范在本室進(jìn)行的工作，確保靶核酸擴(kuò)增的準(zhǔn)確性和有效性。

適應(yīng)范圍：核酸擴(kuò)增、產(chǎn)物分析和報(bào)告簽發(fā)。

程序細(xì)則：

核酸的擴(kuò)增、產(chǎn)物分析在本區(qū)進(jìn)行，本實(shí)驗(yàn)室采取×××PCR技術(shù)；

反應(yīng)管在樣本制備區(qū)加入模板并混勻后通過××（傳遞艙）傳遞至該區(qū)，不再開蓋；

必須設(shè)立陰、陽(yáng)性對(duì)照和質(zhì)控，與被測(cè)臨床標(biāo)本同步擴(kuò)增；

依據(jù)不同檢測(cè)項(xiàng)目SOP要求設(shè)定PCR工作程序，并記錄備案(1)。未經(jīng)實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人允許，不得隨意更改。

擴(kuò)增條件不一致的檢測(cè)項(xiàng)目不得一起擴(kuò)增；

檢測(cè)報(bào)告的簽發(fā)依據(jù)實(shí)驗(yàn)室結(jié)果報(bào)告管理制度；(2)

詳細(xì)做好實(shí)驗(yàn)記錄和儀器使用記錄，見各分區(qū)實(shí)驗(yàn)記錄本(3)及儀器設(shè)備使用登記本。(4)

不能從本區(qū)再進(jìn)入任何“上游”區(qū)域，降低本區(qū)的氣壓，以避免氣溶膠從本區(qū)漏出。在實(shí)驗(yàn)完畢后，按實(shí)驗(yàn)室清潔消毒程序進(jìn)行清潔、消毒工作(5)。

引用的文件及使用登記表：