生化反應(yīng)曲線

2022/10/291生化反應(yīng)曲線2022/10/221生化分析基本原理

生化反應(yīng)曲線內(nèi)容概況2022/10/292內(nèi)容概況2022/10/222羅氏生化分析系統(tǒng)產(chǎn)品線Cobas6000(c501)600T/HModularD2400T/HModularP800T/HCobasc311300T/HCobasc111180T/HCobas80002000T/H2022/10/293羅氏生化分析系統(tǒng)產(chǎn)品線Cobas6000(c501)Mcobas?8000模塊化組合分析系統(tǒng)

智能、高效、強(qiáng)勁

2022/10/294cobas?8000模塊化組合分析系統(tǒng)

物質(zhì)對(duì)光吸收的基本定律－Lambert-

Beer定律

Lambert－Beer定律表達(dá)為:

當(dāng)一束平行的單色光通過含有均勻吸光物質(zhì)的溶液時(shí),溶液的吸光度(A)與溶液的濃度(C)和光透過液層厚度(L)的乘積成正比。物質(zhì)對(duì)光吸收的吸光系數(shù)（e）為常數(shù)。☆其數(shù)學(xué)表達(dá)式：A=e*C*L

I入射光透射光I0==-------光吸收的基本定律=lightdetector2022/10/295物質(zhì)對(duì)光吸收的基本定律－Lambert-Beer定律

根據(jù)Lambert-Beer定律來計(jì)算待測物濃度如若吸光系數(shù)(ε)未知，我們就需要采用定標(biāo)曲線來計(jì)算待測物的濃度。

濃度(amountofsubstance)吸光度(amountofcolor)401 2 3 4 5 6706050302010Calibrator/standard標(biāo)準(zhǔn)品(cfas)待測樣本Concx=ΔAbsxxConcs

AbssConcx =待測樣本濃度Concs =標(biāo)準(zhǔn)品濃度Δ

Absx =樣本吸光度Abss =標(biāo)準(zhǔn)品吸光度

此值為定值2022/10/296根據(jù)Lambert-Beer定律來計(jì)算待測物濃度濃度(aLambert-Beer定律適合于任何均勻非散射的介質(zhì)

生化比色分析特定蛋白透射比濁分析Lambert-Beer定律分光光度法定量分析的依據(jù)2022/10/297Lambert-Beer定律生化比色分析特定蛋白透射比濁RocheHitachiPhotometer2022/10/298RocheHitachiPhotometer2022/1當(dāng)相應(yīng)的比色杯每一次通過光路系統(tǒng)時(shí)，光路系統(tǒng)會(huì)測量并記錄下相應(yīng)的吸光度光路系統(tǒng)可以測量后分光后12個(gè)波長的相應(yīng)吸光度。12有效波長:340,376,415,450,480,505,546,570,600,660,700,800nm多數(shù)檢測項(xiàng)目都使用雙波長檢測方法。（可去除干擾物對(duì)檢測結(jié)果的影響）Reactionsequence2022/10/299當(dāng)相應(yīng)的比色杯每一次通過光路系統(tǒng)時(shí)，光2022/10/29102022/10/22102022/10/29112022/10/2211儀器讀數(shù)的原理不同儀器每個(gè)循環(huán)周期的時(shí)間間隔ModularP18秒Cobasc70216秒CobasC5018秒ModularD12秒C31112秒反應(yīng)轉(zhuǎn)盤不停的周期旋轉(zhuǎn)當(dāng)相應(yīng)的比色杯通過光路系統(tǒng)時(shí)，光路系統(tǒng)會(huì)測量并記錄下相應(yīng)的吸光度在不同的時(shí)間點(diǎn)加入相應(yīng)的反應(yīng)試劑2022/10/2912儀器讀數(shù)的原理不同儀器每個(gè)循環(huán)周期的時(shí)間間隔反應(yīng)轉(zhuǎn)盤不停的周Reactionsequence2022/10/2913Reactionsequence2022/10/2213Instrumentcycle2022/10/2914Instrumentcycle2022/10/2214Endpointandrate(kinetic)assays自動(dòng)生化分析常用的方法有:終點(diǎn)法（EndPointAssays）：一般在整個(gè)反應(yīng)完成后再來檢測吸光度速率法（Rateassays）：一般在反應(yīng)的過程中監(jiān)測吸光度的變化情況2022/10/2915Endpointandrate(kinetic)as終點(diǎn)分析法時(shí)間吸光度A1tS+R1基于被測物質(zhì)在反應(yīng)過程中到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)或平衡點(diǎn)，根據(jù)該點(diǎn)吸光度的大小求出被測物濃度，稱為終點(diǎn)法。

終點(diǎn)法的計(jì)算：從時(shí)間-吸光度曲線來看，到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)，吸光度將不再變化。在達(dá)到終點(diǎn)時(shí)任取一點(diǎn)進(jìn)行測定，此時(shí)底物和產(chǎn)物的量都不再變化。吸光度A1S+R1吸光度2022/10/2916終點(diǎn)分析法時(shí)間吸光度A1tS+R1兩點(diǎn)終點(diǎn)法（2-pointend）一點(diǎn)終點(diǎn)法（1-pointend）一點(diǎn)終點(diǎn)單試劑（1-pointendpointassay–onereagent）一點(diǎn)終點(diǎn)雙試劑（1-pointendpointassay–tworeagents）三點(diǎn)終點(diǎn)法（3-pointend）

終點(diǎn)分析法（Endpointassays）2022/10/2917兩點(diǎn)終點(diǎn)法（2-pointend）終點(diǎn)分析法（Endpoi

兩點(diǎn)終點(diǎn)法

在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始時(shí)，選擇第一個(gè)吸光度，在反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)或平衡時(shí)選擇第二個(gè)吸光度，此兩點(diǎn)吸光度之差用于計(jì)算結(jié)果。2022/10/2918兩點(diǎn)終點(diǎn)法在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始去除了樣本的本底采用兩個(gè)測量點(diǎn)

針對(duì)兩個(gè)或多個(gè)試劑的項(xiàng)目第一個(gè)讀數(shù)點(diǎn)一般選在添加最后一個(gè)試劑之前第二個(gè)讀數(shù)點(diǎn)一般選在加入最后一個(gè)試劑之后且已經(jīng)達(dá)到了反應(yīng)終點(diǎn)

兩點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)C+D(顯色產(chǎn)物)+B1(試劑1)+B2(試劑2)A(樣本)Endpointassays2022/10/2919去除了樣本的本底兩點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)C+D(顯色產(chǎn)兩點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線–Cobasc702EndpointassaysSample+R1Mp1absbeforeadditionofR3Mp2absatreactionend2022/10/2920兩點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線–Cobasc702Endpoint兩點(diǎn)讀數(shù)的時(shí)間點(diǎn):第19點(diǎn)測量包含了樣本和試劑1的本底

sample+reagent1第

38點(diǎn)在加入所有試劑后，反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)

sample+reagent1+reagent2兩點(diǎn)終點(diǎn)法的應(yīng)用參數(shù)–Cobasc702測量的兩個(gè)讀數(shù)點(diǎn)方法類型總反應(yīng)時(shí)間（min）2PointEndpointassayapplicationsettings2022/10/2921兩點(diǎn)讀數(shù)的時(shí)間點(diǎn):兩點(diǎn)終點(diǎn)法的應(yīng)用參數(shù)–Cobasc7 RF-IIC4C3ASLCRPLIGGIGAIGM兩點(diǎn)終點(diǎn)法分析項(xiàng)目舉例Endpointassays2022/10/2922 RF-IIC4兩點(diǎn)終點(diǎn)法一點(diǎn)終點(diǎn)法A單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法例如:CHOL/TG….在反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)，即在時(shí)間-吸光度曲線上吸光度不再改變時(shí)選擇一個(gè)終點(diǎn)吸光度值，用于計(jì)算結(jié)果。B雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法Mg(雙試劑)…2022/10/2923一點(diǎn)終點(diǎn)法A單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法在反應(yīng)到單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointendpointassay–onereagent）不包含樣本的本底僅進(jìn)行一個(gè)點(diǎn)的測量檢測項(xiàng)目舉例：甘油三酯（TG）EndpointassaysA(樣本)

C+D(顯色產(chǎn)物)+B(試劑)2022/10/2924單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointendpointa單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線1-pointendpointassay–onereagentsEndpointassays2022/10/2925單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線1-pointendpoint不包含樣本的本底僅進(jìn)行一點(diǎn)測量應(yīng)用項(xiàng)目舉例：Magnesium不采用兩點(diǎn)終點(diǎn)法主要是樣本和R1體積相加仍<180uL(最小反應(yīng)體積，無法測量）雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointendpointassay–tworeagents）C+D(product)+B1(reagent1)+B2(reagent2)A(sample)2022/10/2926不包含樣本的本底雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointen1stentry: 方法類型2ndentry: 總分析時(shí)間3rd-6thentry: 測量點(diǎn)

一點(diǎn)終點(diǎn)法應(yīng)用參數(shù)（1PointEndpointassay）Utility-Application-Analyze2022/10/2927一點(diǎn)終點(diǎn)法應(yīng)用參數(shù)（1PointEndpointassTRIGL

CHO

一點(diǎn)終點(diǎn)法分析項(xiàng)目舉例Endpointassays2022/10/2928TRIGLCHO一點(diǎn)例如,多項(xiàng)同測組合試劑盒,CHO與TG同一測定

即雙終點(diǎn)法,在一個(gè)通道內(nèi)一次進(jìn)行兩項(xiàng)反應(yīng)相關(guān)的終點(diǎn)法測定.三點(diǎn)終點(diǎn)法2022/10/2929例如,多項(xiàng)同測組合試劑盒,CHO與TG同一測定上升increasing或下降decreasing終點(diǎn)法反應(yīng)的方向（ReactionDirection）2022/10/2930上升increasing或下降decreasing終點(diǎn)速率法

吸光度tt2t1t3t4△A1△A2△A3S+R時(shí)間A1

利用線性反應(yīng)期，計(jì)算出單位時(shí)間的吸光度變化△A/min，來計(jì)算酶的活性。單位時(shí)間的吸光度變化量是一致的在酶促反應(yīng)過程中,在反應(yīng)速度恒定期(線性反應(yīng)期)來連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或代謝產(chǎn)物變化速度的化學(xué)方法.2022/10/2931速率法

吸光度tt2t1t3t4△速率A法（RateA）兩點(diǎn)速率法（2-pointRate）

速率法（Endpointassays）2022/10/2932速率A法（RateA）速率法（Endpointassa速率A法

A單試劑速率法例如:ACP\AFU

B雙試劑速率法例如:ALT\AST\CK…在較長的反應(yīng)時(shí)間區(qū)段內(nèi),每隔一定時(shí)間讀取一次吸光度值,至少讀取4點(diǎn),得到3個(gè)△A,求出單位時(shí)間的反應(yīng)速率△A/min

.通過最小二乘法（leastsquaresmethod）2022/10/2933速率A法

A單試劑速率法B雙試劑速率法RateAassay–ModularPReag.atR3timingLastmp1st.mpSampleReag.atR1timingRateassays2022/10/2934RateAassay–ModularPReag.GOT/AST GGTGPT/ALT LipaseALP GLDHAmylase LDHCHE CKMB 速率A法-分析項(xiàng)目舉例EnzymesRateassays2022/10/2935GOT/AST GGT速率A法-分析項(xiàng)目舉例Enzymes2點(diǎn)速率法

2點(diǎn)速率法尿素氮指在時(shí)間-吸光度曲線上選擇兩個(gè)測光點(diǎn)，此兩點(diǎn)既非反應(yīng)初始吸光度亦非終點(diǎn)吸光度，這兩點(diǎn)的單位時(shí)間吸光度差值用于結(jié)果計(jì)算。2022/10/29362點(diǎn)速率法

2點(diǎn)速率法尿素氮2-pointRateassayRateassaysC+D(product)+B1(reagent1)+B2(reagent2)A(sample)Enzyme2022/10/29372-pointRateassayRateassaysC采用一種或多種試劑檢測兩個(gè)測量點(diǎn)檢測固定的間隔時(shí)間內(nèi)兩點(diǎn)的吸光度變化。

換算成

Abs/min參與計(jì)算在加入最后最后一個(gè)試劑之后進(jìn)行吸光度檢測。兩點(diǎn)速率法的特點(diǎn)2-pointRateassayRateassays2022/10/2938采用一種或多種試劑兩點(diǎn)速率法的特點(diǎn)2-pointRate2-pointRateassay–ModularPRateassays2022/10/29392-pointRateassay–ModularPAmmonia Acidphosphatase Non-prostaticphosphataseUrinary/CSFprotein BicarbonateUreaRateassays2點(diǎn)速率

法-分析項(xiàng)目舉例2022/10/2940Ammonia Rateassays2點(diǎn)速率法-分析項(xiàng)目ReactionDirection上升decreasing或下降increasing2022/10/2941ReactionDirection上升decreasing生化反應(yīng)曲線

2022/10/2942生化反應(yīng)曲線2022/10/22422022/10/29432022/10/22432022/10/29442022/10/22442022/10/29452022/10/22452022/10/29462022/10/22462022/10/29472022/10/22472022/10/29482022/10/22482022/10/29492022/10/22492022/10/29502022/10/22502022/10/29512022/10/22512022/10/29522022/10/22522022/10/29532022/10/22532022/10/29542022/10/22542022/10/29552022/10/22552022/10/29562022/10/2256ThankyouforyourattentionRocheDiagnostics(Shanghai)LimitedShanghai200031ChinaThispresentationisourintellectualproperty.Withoutourwrittenconsent,itshallneitherbecopiedinanymanner,norusedformanufacturing,norcommunicatedtothirdparties.COBASandLIFENEEDSANSWERSaretrademarksofRoche2022/10/2957ThankyouforyourattentionRo生化反應(yīng)曲線

2022/10/2958生化反應(yīng)曲線2022/10/221生化分析基本原理

生化反應(yīng)曲線內(nèi)容概況2022/10/2959內(nèi)容概況2022/10/222羅氏生化分析系統(tǒng)產(chǎn)品線Cobas6000(c501)600T/HModularD2400T/HModularP800T/HCobasc311300T/HCobasc111180T/HCobas80002000T/H2022/10/2960羅氏生化分析系統(tǒng)產(chǎn)品線Cobas6000(c501)Mcobas?8000模塊化組合分析系統(tǒng)

智能、高效、強(qiáng)勁

2022/10/2961cobas?8000模塊化組合分析系統(tǒng)

物質(zhì)對(duì)光吸收的基本定律－Lambert-

Beer定律

Lambert－Beer定律表達(dá)為:

當(dāng)一束平行的單色光通過含有均勻吸光物質(zhì)的溶液時(shí),溶液的吸光度(A)與溶液的濃度(C)和光透過液層厚度(L)的乘積成正比。物質(zhì)對(duì)光吸收的吸光系數(shù)（e）為常數(shù)。☆其數(shù)學(xué)表達(dá)式：A=e*C*L

I入射光透射光I0==-------光吸收的基本定律=lightdetector2022/10/2962物質(zhì)對(duì)光吸收的基本定律－Lambert-Beer定律

根據(jù)Lambert-Beer定律來計(jì)算待測物濃度如若吸光系數(shù)(ε)未知，我們就需要采用定標(biāo)曲線來計(jì)算待測物的濃度。

濃度(amountofsubstance)吸光度(amountofcolor)401 2 3 4 5 6706050302010Calibrator/standard標(biāo)準(zhǔn)品(cfas)待測樣本Concx=ΔAbsxxConcs

AbssConcx =待測樣本濃度Concs =標(biāo)準(zhǔn)品濃度Δ

Absx =樣本吸光度Abss =標(biāo)準(zhǔn)品吸光度

此值為定值2022/10/2963根據(jù)Lambert-Beer定律來計(jì)算待測物濃度濃度(aLambert-Beer定律適合于任何均勻非散射的介質(zhì)

生化比色分析特定蛋白透射比濁分析Lambert-Beer定律分光光度法定量分析的依據(jù)2022/10/2964Lambert-Beer定律生化比色分析特定蛋白透射比濁RocheHitachiPhotometer2022/10/2965RocheHitachiPhotometer2022/1當(dāng)相應(yīng)的比色杯每一次通過光路系統(tǒng)時(shí)，光路系統(tǒng)會(huì)測量并記錄下相應(yīng)的吸光度光路系統(tǒng)可以測量后分光后12個(gè)波長的相應(yīng)吸光度。12有效波長:340,376,415,450,480,505,546,570,600,660,700,800nm多數(shù)檢測項(xiàng)目都使用雙波長檢測方法。（可去除干擾物對(duì)檢測結(jié)果的影響）Reactionsequence2022/10/2966當(dāng)相應(yīng)的比色杯每一次通過光路系統(tǒng)時(shí)，光2022/10/29672022/10/22102022/10/29682022/10/2211儀器讀數(shù)的原理不同儀器每個(gè)循環(huán)周期的時(shí)間間隔ModularP18秒Cobasc70216秒CobasC5018秒ModularD12秒C31112秒反應(yīng)轉(zhuǎn)盤不停的周期旋轉(zhuǎn)當(dāng)相應(yīng)的比色杯通過光路系統(tǒng)時(shí)，光路系統(tǒng)會(huì)測量并記錄下相應(yīng)的吸光度在不同的時(shí)間點(diǎn)加入相應(yīng)的反應(yīng)試劑2022/10/2969儀器讀數(shù)的原理不同儀器每個(gè)循環(huán)周期的時(shí)間間隔反應(yīng)轉(zhuǎn)盤不停的周Reactionsequence2022/10/2970Reactionsequence2022/10/2213Instrumentcycle2022/10/2971Instrumentcycle2022/10/2214Endpointandrate(kinetic)assays自動(dòng)生化分析常用的方法有:終點(diǎn)法（EndPointAssays）：一般在整個(gè)反應(yīng)完成后再來檢測吸光度速率法（Rateassays）：一般在反應(yīng)的過程中監(jiān)測吸光度的變化情況2022/10/2972Endpointandrate(kinetic)as終點(diǎn)分析法時(shí)間吸光度A1tS+R1基于被測物質(zhì)在反應(yīng)過程中到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)或平衡點(diǎn)，根據(jù)該點(diǎn)吸光度的大小求出被測物濃度，稱為終點(diǎn)法。

終點(diǎn)法的計(jì)算：從時(shí)間-吸光度曲線來看，到達(dá)反應(yīng)終點(diǎn)時(shí)，吸光度將不再變化。在達(dá)到終點(diǎn)時(shí)任取一點(diǎn)進(jìn)行測定，此時(shí)底物和產(chǎn)物的量都不再變化。吸光度A1S+R1吸光度2022/10/2973終點(diǎn)分析法時(shí)間吸光度A1tS+R1兩點(diǎn)終點(diǎn)法（2-pointend）一點(diǎn)終點(diǎn)法（1-pointend）一點(diǎn)終點(diǎn)單試劑（1-pointendpointassay–onereagent）一點(diǎn)終點(diǎn)雙試劑（1-pointendpointassay–tworeagents）三點(diǎn)終點(diǎn)法（3-pointend）

終點(diǎn)分析法（Endpointassays）2022/10/2974兩點(diǎn)終點(diǎn)法（2-pointend）終點(diǎn)分析法（Endpoi

兩點(diǎn)終點(diǎn)法

在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始時(shí)，選擇第一個(gè)吸光度，在反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)或平衡時(shí)選擇第二個(gè)吸光度，此兩點(diǎn)吸光度之差用于計(jì)算結(jié)果。2022/10/2975兩點(diǎn)終點(diǎn)法在被測物反應(yīng)或指示反應(yīng)尚未開始去除了樣本的本底采用兩個(gè)測量點(diǎn)

針對(duì)兩個(gè)或多個(gè)試劑的項(xiàng)目第一個(gè)讀數(shù)點(diǎn)一般選在添加最后一個(gè)試劑之前第二個(gè)讀數(shù)點(diǎn)一般選在加入最后一個(gè)試劑之后且已經(jīng)達(dá)到了反應(yīng)終點(diǎn)

兩點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)C+D(顯色產(chǎn)物)+B1(試劑1)+B2(試劑2)A(樣本)Endpointassays2022/10/2976去除了樣本的本底兩點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)C+D(顯色產(chǎn)兩點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線–Cobasc702EndpointassaysSample+R1Mp1absbeforeadditionofR3Mp2absatreactionend2022/10/2977兩點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線–Cobasc702Endpoint兩點(diǎn)讀數(shù)的時(shí)間點(diǎn):第19點(diǎn)測量包含了樣本和試劑1的本底

sample+reagent1第

38點(diǎn)在加入所有試劑后，反應(yīng)達(dá)到終點(diǎn)

sample+reagent1+reagent2兩點(diǎn)終點(diǎn)法的應(yīng)用參數(shù)–Cobasc702測量的兩個(gè)讀數(shù)點(diǎn)方法類型總反應(yīng)時(shí)間（min）2PointEndpointassayapplicationsettings2022/10/2978兩點(diǎn)讀數(shù)的時(shí)間點(diǎn):兩點(diǎn)終點(diǎn)法的應(yīng)用參數(shù)–Cobasc7 RF-IIC4C3ASLCRPLIGGIGAIGM兩點(diǎn)終點(diǎn)法分析項(xiàng)目舉例Endpointassays2022/10/2979 RF-IIC4兩點(diǎn)終點(diǎn)法一點(diǎn)終點(diǎn)法A單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法例如:CHOL/TG….在反應(yīng)到達(dá)終點(diǎn)，即在時(shí)間-吸光度曲線上吸光度不再改變時(shí)選擇一個(gè)終點(diǎn)吸光度值，用于計(jì)算結(jié)果。B雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法Mg(雙試劑)…2022/10/2980一點(diǎn)終點(diǎn)法A單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法在反應(yīng)到單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointendpointassay–onereagent）不包含樣本的本底僅進(jìn)行一個(gè)點(diǎn)的測量檢測項(xiàng)目舉例：甘油三酯（TG）EndpointassaysA(樣本)

C+D(顯色產(chǎn)物)+B(試劑)2022/10/2981單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointendpointa單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線1-pointendpointassay–onereagentsEndpointassays2022/10/2982單試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的反應(yīng)曲線1-pointendpoint不包含樣本的本底僅進(jìn)行一點(diǎn)測量應(yīng)用項(xiàng)目舉例：Magnesium不采用兩點(diǎn)終點(diǎn)法主要是樣本和R1體積相加仍<180uL(最小反應(yīng)體積，無法測量）雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointendpointassay–tworeagents）C+D(product)+B1(reagent1)+B2(reagent2)A(sample)2022/10/2983不包含樣本的本底雙試劑一點(diǎn)終點(diǎn)法的特點(diǎn)（1-pointen1stentry: 方法類型2ndentry: 總分析時(shí)間3rd-6thentry: 測量點(diǎn)

一點(diǎn)終點(diǎn)法應(yīng)用參數(shù)（1PointEndpointassay）Utility-Application-Analyze2022/10/2984一點(diǎn)終點(diǎn)法應(yīng)用參數(shù)（1PointEndpointassTRIGL

CHO

一點(diǎn)終點(diǎn)法分析項(xiàng)目舉例Endpointassays2022/10/2985TRIGLCHO一點(diǎn)例如,多項(xiàng)同測組合試劑盒,CHO與TG同一測定

即雙終點(diǎn)法,在一個(gè)通道內(nèi)一次進(jìn)行兩項(xiàng)反應(yīng)相關(guān)的終點(diǎn)法測定.三點(diǎn)終點(diǎn)法2022/10/2986例如,多項(xiàng)同測組合試劑盒,CHO與TG同一測定上升increasing或下降decreasing終點(diǎn)法反應(yīng)的方向（ReactionDirection）2022/10/2987上升increasing或下降decreasing終點(diǎn)速率法

吸光度tt2t1t3t4△A1△A2△A3S+R時(shí)間A1

利用線性反應(yīng)期，計(jì)算出單位時(shí)間的吸光度變化△A/min，來計(jì)算酶的活性。單位時(shí)間的吸光度變化量是一致的在酶促反應(yīng)過程中,在反應(yīng)速度恒定期(線性反應(yīng)期)來連續(xù)觀察和記錄一定反應(yīng)時(shí)間內(nèi)底物或代謝產(chǎn)物變化速度的化學(xué)方法.2022/10/2988速率法

吸光度tt2t1t3t4△速率A法（RateA）兩點(diǎn)速率法（2-pointRate）

速率法（Endpointassays）2022/10/2989速率A法（RateA）速率法（Endpointassa速率A法

A單試劑速率法例如:ACP\AFU

B雙試劑速率法例如:ALT\AST\CK…在較長的反應(yīng)時(shí)間區(qū)段內(nèi),每隔一定時(shí)間讀取一次吸光度值,至少讀取4點(diǎn),得到3個(gè)△A,求出單位時(shí)間的反應(yīng)速率△A/min

.通過最小二乘法（leastsquaresmethod）2022/10/2990速率A法

A單試劑速率法B雙試劑速率法RateAassay–ModularPReag.atR3timingLastmp1st.mpSampleReag.atR1timingRateassays2022/10/2991RateAassay–ModularPReag.GOT/AST GGTGPT/ALT LipaseALP GLDHAmylase LDHCHE CKMB 速率A法-分析項(xiàng)目舉例EnzymesRateassays2022/10/2992GOT/AST GGT速率A法-分析項(xiàng)目舉例Enzymes2點(diǎn)速率法

2點(diǎn)速率法尿素氮指在時(shí)間-吸光度曲線上選擇兩個(gè)測光點(diǎn)，此兩點(diǎn)既非反應(yīng)初始吸光度亦非終點(diǎn)吸光度，這兩點(diǎn)的單位時(shí)間吸光度差值用于結(jié)果計(jì)算。2022/10/29932點(diǎn)速率法