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耐酸耐熱菌的測(cè)定(企業(yè)內(nèi)控法)耐酸耐熱菌的測(cè)定(企業(yè)內(nèi)控法)耐酸耐熱菌的測(cè)定(企業(yè)內(nèi)控法)資料僅供參考文件編號(hào)：2022年4月耐酸耐熱菌的測(cè)定(企業(yè)內(nèi)控法)版本號(hào)：A修改號(hào)：1頁次：1.0審核：批準(zhǔn):發(fā)布日期：耐酸耐熱菌的測(cè)定（企業(yè)內(nèi)控法）適用范圍本方法僅適用于濃縮蘋果清汁中耐酸耐熱菌的測(cè)定。2、設(shè)備和材料2．1、廣口三角瓶，250mL、1000mL。2．2水浴箱：80℃2．3、冰箱。2．4、量筒：50mL。2．5、滅菌鑷子。2．6、酒精燈。2．7、培養(yǎng)箱：50±1℃2．8、玻璃鉛筆。2．9、溶劑過濾器。2.10、μm濾膜：?50mm。2．11、真空泵。2．12、溫度計(jì)。2．13、培養(yǎng)皿。2．14、高壓蒸汽滅菌鍋。3、培養(yǎng)基和試劑3．1、K氏培養(yǎng)基3．1．1、組成A：酵母浸膏1.25g蛋白胨2.50g葡萄糖0.5g瓊脂7.5g吐溫80將上述各種試劑放入1L的三角瓶中,加入500mL的蒸餾水,在電爐上加熱溶解后,在121℃3．1．2、組成B：蘋果酸1.25g將蘋果酸用10mL的蒸餾水溶解,通過一次性無菌注射器和針頭式過濾器連接,將蘋果酸溶液過濾到已滅菌的培養(yǎng)基中,混勻。3．1．3、平板制作當(dāng)已酸化的K氏培養(yǎng)基溫度降至50℃3．2、蒸餾水。4、檢驗(yàn)程序：檢樣適當(dāng)稀釋80℃無菌水膜過濾檢樣膜過濾膜放入平板培養(yǎng)基培養(yǎng)50±1℃菌落計(jì)數(shù)報(bào)告5、操作步驟5．1、將裝有150mL蒸餾水的三角瓶、μm的濾膜、50mL量筒、過濾裝置于121℃5．2、用已滅菌的50mL量筒取待檢濃縮果汁50mL，加入已滅菌的盛有150mL滅菌蒸餾水的三角瓶中，混勻。5．3將稀釋的樣品放入80℃的水浴中，同時(shí)放置一個(gè)帶有溫度計(jì)的控制樣，做為溫度控制。觀察溫度計(jì)，待溫度升至805．4、用已滅菌的μm的濾膜及真空抽濾裝置過濾熱處理后的果汁,移取抽濾裝置的上部,將鑷子在酒精燈上滅菌后,用鑷子將濾膜移置于預(yù)先準(zhǔn)備好的K氏培養(yǎng)基上,輕敲濾膜幾次,使其與濾膜充分接觸。同時(shí)還必須做空白對(duì)照（即用滅菌水代

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