研究課題：維生素C1研究課題：維生素C1維生素C（VitaminC，AscorbicAcid）又叫L-抗壞血酸，是一種水溶性維生素。食物中的維生素C被人體小腸上段吸收。一旦吸收，就分布到體內(nèi)所有的水溶性結(jié)構(gòu)中，正常成人體內(nèi)的維生素C代謝活性池中約有1500mg維生素C，最高儲(chǔ)存峰值為3000mg維生素C。2維生素C（VitaminC，AscorbicAc膠原蛋白的合成：膠原蛋白的合成需要維生素C參加，治療壞血病預(yù)防牙齦萎縮、出血：牙齦是軟組織，當(dāng)缺乏蛋白質(zhì)、鈣、VC時(shí)易產(chǎn)生牙齦萎縮、出血。預(yù)防動(dòng)脈硬化：可促進(jìn)膽固醇的排泄，防止膽固醇在動(dòng)脈內(nèi)壁沉積，甚至可以使沉積的粥樣斑塊溶解。抗氧化劑：可以保護(hù)其它抗氧化劑，如維生素A、維生素E、不飽和脂肪酸，防止自由基對(duì)人體的傷害。治療貧血：使難以吸收利用的三價(jià)鐵還原成二價(jià)鐵，促進(jìn)腸道對(duì)鐵的吸收，提高肝臟對(duì)鐵的利用率，有助于治療缺鐵性貧血。防癌：豐富的膠原蛋白有助于防止癌細(xì)胞的擴(kuò)散；VC的抗氧化作用可以抵御自由基對(duì)細(xì)胞的傷害防止細(xì)胞的變異；阻斷亞硝酸鹽和仲胺形成強(qiáng)致癌物亞硝胺。保護(hù)作用：在人的生命活動(dòng)中，谷胱甘肽和酶保證細(xì)胞的完整性和新陳代謝的正常進(jìn)行至關(guān)重要。功效3膠原蛋白的合成：膠原蛋白的合成需要維生素C參加，功效3酶：谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸組成的短肽，在體內(nèi)有氧化還原作用。它有兩種存在形式，即氧化型和還原型，還原型對(duì)保證細(xì)胞膜的完整性起重要作用。VC是一種強(qiáng)抗氧化劑，其本身被氧化，而使氧化型谷胱甘肽還原為還原型谷胱甘肽，從而發(fā)揮抗氧化作用。提高人體的免疫力：白細(xì)胞含有豐富的VC，當(dāng)機(jī)體感染時(shí)白細(xì)胞內(nèi)的VC急劇減少。VC可增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的趨化性和變形能力，提高殺菌能力。促進(jìn)淋巴母細(xì)胞的生成，提高機(jī)體對(duì)外來(lái)和惡變細(xì)胞的識(shí)別和殺滅。參與免疫球蛋白的合成。提高CI補(bǔ)體酯酶活性，增加補(bǔ)體CI的產(chǎn)生。促進(jìn)干擾素的產(chǎn)生，干擾病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄，抑制病毒的增生。提高機(jī)體的應(yīng)急能力：人體受到異常的刺激，如劇痛、寒冷、缺氧、精神強(qiáng)刺激，會(huì)引發(fā)抵御異常刺激的緊張狀態(tài)。該狀態(tài)伴有一系列身體，包括交感神經(jīng)興奮、腎上腺髓質(zhì)和皮質(zhì)激素分泌增多。腎上腺髓質(zhì)所分泌的腎上腺素和去甲腎上腺素是有酪氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，在此過(guò)程需要VC的參與。功效4酶：谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸組成的短肽，在體內(nèi)有氧維生素C在抗病毒和預(yù)防病毒性傳染病方面具有很高的應(yīng)用價(jià)值。如果我們普遍認(rèn)識(shí)到維生素C預(yù)防和治療病毒傳染病癥的原理并且按量服用，就可以預(yù)防很多病毒的傳播。5維生素C在抗病毒和預(yù)防病毒性傳染病方面具有很高的應(yīng)用價(jià)

目前研究維生素C測(cè)定方法的報(bào)道較多，如滴定法、光度分析法、高效液相色譜法等，各種方法各有特點(diǎn)。特別是高效液相色譜法是近年來(lái)發(fā)展較快的一種方法。6目前研究維生素C測(cè)定方法的報(bào)道較多，如滴定法、光度分析測(cè)定方法滴定法測(cè)定維生素C

分光光度測(cè)定維生素C

高效液相色譜法測(cè)定維生素C

7測(cè)定方法滴定法測(cè)定分光光度測(cè)高效液相色譜法72,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量維生素C能還原2,6-二氯酚靛酚染料。維生素C具有還原性的烯二醇基，我們通過(guò)氧化還原滴定來(lái)測(cè)定維生素C82,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量維生素C能還原2,62，6-二氯靛酚法原理2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在酸性介質(zhì)中為紅色，堿性介質(zhì)中為藍(lán)色，與Vc反應(yīng)后，生成無(wú)色的還原型酚亞胺，因此，在酸性條件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液顯玫瑰紅色，即為終點(diǎn)；無(wú)需另加指示劑。92，6-二氯靛酚法原理2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在取本品適量（約相當(dāng)于Vc50mg），用適量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸試液20ml,再用水稀釋置刻度，搖勻；精密量取稀釋液適量（約相當(dāng)于Vc2mg）置50ml的錐形瓶中,加偏磷酸-醋酸試液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液顯玫瑰紅色,并持續(xù)5s不褪；空白試驗(yàn)：取偏磷酸-醋酸試液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。計(jì)算：(V-V0)×F×T×WW×標(biāo)示量

標(biāo)示量%=反應(yīng)摩爾比１﹕１×100％測(cè)定方法10取本品適量（約相當(dāng)于Vc50mg），用適量水溶解，置100m維生素C2,6-二氯酚靛酚維生素C2,6-二氯酚靛酚（還原型）（氧化型，粉紅色）（氧化型）（還原型）++

====2,6-二氯酚靛酚染料的鈉鹽在水溶液中顯藍(lán)色，在酸性溶液中呈紅色，被還原后紅色消失。11維生素C2,6-碘量法原理：由于維生素C分子中的烯二醇基有極強(qiáng)的還原性，能被碘氧化，用碘滴定VCEC6H6O6/C6H8O6=0.18,EI2/I-=0.535終點(diǎn)：淀粉為指示劑，溶液出現(xiàn)穩(wěn)定的藍(lán)色即為終點(diǎn)反應(yīng)式：

12碘量法原理：由于維生素C分子中的烯二醇基有極強(qiáng)的還原性，能被注意！測(cè)定時(shí)：加HAC使溶液呈弱酸性

原因:(1)Vc還原性很強(qiáng)，在空氣中很容易被氧化，在堿性介質(zhì)中更甚(2)I2在堿性介質(zhì)中會(huì)發(fā)生歧化反應(yīng)加HAC可減少VC的副反應(yīng)，避免實(shí)驗(yàn)誤差13注意！13電位滴定法原理：根據(jù)滴定過(guò)程中電池電動(dòng)勢(shì)的變化來(lái)確定反應(yīng)終點(diǎn).Pt為指示電極，甘汞作參比電極E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數(shù))14電位滴定法原理：根據(jù)滴定過(guò)程中電池電動(dòng)勢(shì)的變化來(lái)確定反應(yīng)終點(diǎn)電位滴定法右圖：電位滴定法基本儀器裝置計(jì)算式：(與碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%優(yōu)點(diǎn)：解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時(shí)無(wú)法指示終點(diǎn)的問(wèn)題15電位滴定法右圖：電位滴定法基本儀器裝置152，4一二硝基苯肼分光光度法

原理：維生素C在空氣中尤其在堿性介質(zhì)中極易被氧化成脫氫抗壞血酸反應(yīng)式：

162，4一二硝基苯肼分光光度法原理：16pH>5,脫氫抗壞血酸內(nèi)環(huán)開(kāi)裂，形成二酮古洛糖酸二酮古洛糖酸17pH>5,脫氫抗壞血酸內(nèi)環(huán)開(kāi)裂，形成二酮古洛糖酸17脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波長(zhǎng)有最大吸收脎的結(jié)構(gòu)：18脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于分光光度法樣品溶液與VC標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述方法同樣處理500nm處測(cè)吸光度下圖：721型分光光度計(jì)19分光光度法樣品溶液與VC標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述方法同樣處理19

差示旋光法維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差異，而片劑輔料旋光度保持不變差示旋光法消除輔料的影響，直接測(cè)出該制劑的含量20

差示旋光法維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差示旋光法1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取維生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸鈉0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷卻的蒸餾水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液。2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系量取10.0mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)液于50mL量瓶中,用水稀釋至50mL。測(cè)定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氫氧化鈉固體(每次約50mg),每次溶解后,測(cè)定一次溶液的pH及其旋光度,得到維生素C溶液的pH及旋光度關(guān)系21差示旋光法1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系2差示旋光法選定pH為2.2和6.222差示旋光法選定pH為2.2和6.2222）差示旋光度與溶液濃度關(guān)系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)液各兩份,分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容；一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容，靜置3min后,用220mm測(cè)定管，以前者為空白，測(cè)定后者的差示旋光度(△a)。文獻(xiàn)結(jié)果：線性方程為△a=0205*C+0．05，r=0．99643）輔料干擾試驗(yàn)取混合輔料20mg(淀粉、硬脂酸鎂、EDTA、糊精等按處方比例混勻)兩份分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容,一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容,濾去不溶物,濾液在兩種pH值測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：輔料的差示旋光度為零，說(shuō)明輔料對(duì)維生素C含量的測(cè)定不干擾。232）差示旋光度與溶液濃度關(guān)系3）輔料干擾試驗(yàn)234）穩(wěn)定性試驗(yàn)同一測(cè)試樣品，在120min內(nèi)，每隔3min測(cè)定一次差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：差示旋光度基本不變5）回收率試驗(yàn)精密稱取維生素C精制品500.0mg兩份，分別置于50mL容量瓶中，各加入20mg輔料，分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液，測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：平均回收率為97.8％，變異系數(shù)cv為1.03％244）穩(wěn)定性試驗(yàn)5）回收率試驗(yàn)246）樣品測(cè)定取維生素C片劑10片，稱重研碎后分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液(相當(dāng)于含Vc20mg/mL)，濾去不溶物，測(cè)定濾液的差示旋光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算其含量。256）樣品測(cè)定25薄層掃描法維生素C具有較強(qiáng)還原性，可使藍(lán)色染料2，6-二氯靛酚鈉定量地還原成無(wú)色的酚亞胺，而本身被氧化成去氫抗壞血酸，利用此特征進(jìn)行薄層掃描法測(cè)定含量。

26薄層掃描法維生素C具有較強(qiáng)還原性，可使藍(lán)色染料2，（1）試紙的制備

2,6-二氯靛酚鈉(DCP-Na)溶于無(wú)水乙醇配成0.05%的DCP-Na乙醇溶液，濾紙?jiān)谑⒂蠨CP-Na乙醇溶液的展開(kāi)缸中浸漬3min，邊浸邊搖展開(kāi)缸，使濾紙均勻著色，充分被染料溶液所飽和。取出懸掛于暗處，晾干后，立即放入干燥器中避光保存，備用。操作方法與結(jié)果27（1）試紙的制備操作方法與結(jié)果27（2）緩沖溶液的配制

稱取檸檬酸水合物10g，放入1000ml容量瓶中，加入1M氫氧化鈉420ml，并用蒸餾水稀釋至刻度，此溶液的pH應(yīng)為3.5。否則，用酸或堿調(diào)整pH值，保存于冰箱中。

3）掃描條件確定在制備的染料試紙上定量點(diǎn)上維生素C對(duì)照品進(jìn)行掃描，維生素C在290nm處有最大吸收，420nm處無(wú)吸收，故選擇1=290nm，2=420nm．雙波長(zhǎng)反射式鋸齒掃描。28（2）緩沖溶液的配制3）掃描條件確定284）線性實(shí)驗(yàn)4.1）對(duì)照品溶液的配制精密稱取維生素C標(biāo)準(zhǔn)品100mg，用緩沖溶液配成lmg/ml的標(biāo)準(zhǔn)溶液。精密稱取維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液1、2、3、4、5ml，分別置于10ml容量瓶中，用緩沖溶液稀釋至刻度。4.2）測(cè)定用5l定量毛細(xì)管，分別吸取上述溶液各5l，點(diǎn)于試紙上。點(diǎn)樣后晾干，并將試紙固定在20cm×20cm玻璃板上，放入薄層掃描儀。測(cè)定△A的積分值(峰面積)作為縱坐標(biāo)Y，點(diǎn)樣量為橫坐標(biāo)X，得一直線方程Y=15692X+130225，r=0．9991

294）線性實(shí)驗(yàn)295）樣品的含量測(cè)定

取維生素C片10片，研細(xì)，精密稱取平均片重一片的粉末，放入100ml容量瓶中，加入緩沖液至刻度，振搖，使維生素C溶解，放置、澄清，用吸液管取3ml移至10ml容量瓶中，用緩沖液稀釋至刻度。用5l定量毛細(xì)管點(diǎn)樣品溶液與不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)液于同一試紙上，然后掃描測(cè)定峰面積，由工作曲線法計(jì)算維生素C片中的維生素C含量。305）樣品的含量測(cè)定306）回收率實(shí)驗(yàn)

精密稱取維生素C對(duì)照品20mg，其它原輔料適量，置10ml容量瓶中，加緩沖液稀釋至刻度，振搖，濾過(guò)，棄初濾液。分別吸取續(xù)濾液與對(duì)照品維生素C液各5l點(diǎn)于同一試紙上，按上述條件進(jìn)行掃描測(cè)定。316）回收率實(shí)驗(yàn)313232研究課題：維生素C33研究課題：維生素C1維生素C（VitaminC，AscorbicAcid）又叫L-抗壞血酸，是一種水溶性維生素。食物中的維生素C被人體小腸上段吸收。一旦吸收，就分布到體內(nèi)所有的水溶性結(jié)構(gòu)中，正常成人體內(nèi)的維生素C代謝活性池中約有1500mg維生素C，最高儲(chǔ)存峰值為3000mg維生素C。34維生素C（VitaminC，AscorbicAc膠原蛋白的合成：膠原蛋白的合成需要維生素C參加，治療壞血病預(yù)防牙齦萎縮、出血：牙齦是軟組織，當(dāng)缺乏蛋白質(zhì)、鈣、VC時(shí)易產(chǎn)生牙齦萎縮、出血。預(yù)防動(dòng)脈硬化：可促進(jìn)膽固醇的排泄，防止膽固醇在動(dòng)脈內(nèi)壁沉積，甚至可以使沉積的粥樣斑塊溶解?？寡趸瘎嚎梢员Ｗo(hù)其它抗氧化劑，如維生素A、維生素E、不飽和脂肪酸，防止自由基對(duì)人體的傷害。治療貧血：使難以吸收利用的三價(jià)鐵還原成二價(jià)鐵，促進(jìn)腸道對(duì)鐵的吸收，提高肝臟對(duì)鐵的利用率，有助于治療缺鐵性貧血。防癌：豐富的膠原蛋白有助于防止癌細(xì)胞的擴(kuò)散；VC的抗氧化作用可以抵御自由基對(duì)細(xì)胞的傷害防止細(xì)胞的變異；阻斷亞硝酸鹽和仲胺形成強(qiáng)致癌物亞硝胺。保護(hù)作用：在人的生命活動(dòng)中，谷胱甘肽和酶保證細(xì)胞的完整性和新陳代謝的正常進(jìn)行至關(guān)重要。功效35膠原蛋白的合成：膠原蛋白的合成需要維生素C參加，功效3酶：谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸組成的短肽，在體內(nèi)有氧化還原作用。它有兩種存在形式，即氧化型和還原型，還原型對(duì)保證細(xì)胞膜的完整性起重要作用。VC是一種強(qiáng)抗氧化劑，其本身被氧化，而使氧化型谷胱甘肽還原為還原型谷胱甘肽，從而發(fā)揮抗氧化作用。提高人體的免疫力：白細(xì)胞含有豐富的VC，當(dāng)機(jī)體感染時(shí)白細(xì)胞內(nèi)的VC急劇減少。VC可增強(qiáng)中性粒細(xì)胞的趨化性和變形能力，提高殺菌能力。促進(jìn)淋巴母細(xì)胞的生成，提高機(jī)體對(duì)外來(lái)和惡變細(xì)胞的識(shí)別和殺滅。參與免疫球蛋白的合成。提高CI補(bǔ)體酯酶活性，增加補(bǔ)體CI的產(chǎn)生。促進(jìn)干擾素的產(chǎn)生，干擾病毒mRNA的轉(zhuǎn)錄，抑制病毒的增生。提高機(jī)體的應(yīng)急能力：人體受到異常的刺激，如劇痛、寒冷、缺氧、精神強(qiáng)刺激，會(huì)引發(fā)抵御異常刺激的緊張狀態(tài)。該狀態(tài)伴有一系列身體，包括交感神經(jīng)興奮、腎上腺髓質(zhì)和皮質(zhì)激素分泌增多。腎上腺髓質(zhì)所分泌的腎上腺素和去甲腎上腺素是有酪氨酸轉(zhuǎn)化而來(lái)，在此過(guò)程需要VC的參與。功效36酶：谷胱甘肽是由谷氨酸、胱氨酸和甘氨酸組成的短肽，在體內(nèi)有氧維生素C在抗病毒和預(yù)防病毒性傳染病方面具有很高的應(yīng)用價(jià)值。如果我們普遍認(rèn)識(shí)到維生素C預(yù)防和治療病毒傳染病癥的原理并且按量服用，就可以預(yù)防很多病毒的傳播。37維生素C在抗病毒和預(yù)防病毒性傳染病方面具有很高的應(yīng)用價(jià)

目前研究維生素C測(cè)定方法的報(bào)道較多，如滴定法、光度分析法、高效液相色譜法等，各種方法各有特點(diǎn)。特別是高效液相色譜法是近年來(lái)發(fā)展較快的一種方法。38目前研究維生素C測(cè)定方法的報(bào)道較多，如滴定法、光度分析測(cè)定方法滴定法測(cè)定維生素C

分光光度測(cè)定維生素C

高效液相色譜法測(cè)定維生素C

39測(cè)定方法滴定法測(cè)定分光光度測(cè)高效液相色譜法72,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量維生素C能還原2,6-二氯酚靛酚染料。維生素C具有還原性的烯二醇基，我們通過(guò)氧化還原滴定來(lái)測(cè)定維生素C402,6-二氯酚靛酚滴定法測(cè)定維生素C含量維生素C能還原2,62，6-二氯靛酚法原理2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在酸性介質(zhì)中為紅色，堿性介質(zhì)中為藍(lán)色，與Vc反應(yīng)后，生成無(wú)色的還原型酚亞胺，因此，在酸性條件下，用2，6-二氯靛酚滴定至溶液顯玫瑰紅色，即為終點(diǎn)；無(wú)需另加指示劑。412，6-二氯靛酚法原理2，6-二氯靛酚是一種染料，其氧化型在取本品適量（約相當(dāng)于Vc50mg），用適量水溶解，置100ml量瓶中，加偏磷酸-醋酸試液20ml,再用水稀釋置刻度，搖勻；精密量取稀釋液適量（約相當(dāng)于Vc2mg）置50ml的錐形瓶中,加偏磷酸-醋酸試液5ml,用2,6-二氯靛酚滴定液滴定,至溶液顯玫瑰紅色,并持續(xù)5s不褪；空白試驗(yàn)：取偏磷酸-醋酸試液5.5ml，加水15ml，用2，6-二氯靛酚滴定液滴定。計(jì)算：(V-V0)×F×T×WW×標(biāo)示量

標(biāo)示量%=反應(yīng)摩爾比１﹕１×100％測(cè)定方法42取本品適量（約相當(dāng)于Vc50mg），用適量水溶解，置100m維生素C2,6-二氯酚靛酚維生素C2,6-二氯酚靛酚（還原型）（氧化型，粉紅色）（氧化型）（還原型）++

====2,6-二氯酚靛酚染料的鈉鹽在水溶液中顯藍(lán)色，在酸性溶液中呈紅色，被還原后紅色消失。43維生素C2,6-碘量法原理：由于維生素C分子中的烯二醇基有極強(qiáng)的還原性，能被碘氧化，用碘滴定VCEC6H6O6/C6H8O6=0.18,EI2/I-=0.535終點(diǎn)：淀粉為指示劑，溶液出現(xiàn)穩(wěn)定的藍(lán)色即為終點(diǎn)反應(yīng)式：

44碘量法原理：由于維生素C分子中的烯二醇基有極強(qiáng)的還原性，能被注意！測(cè)定時(shí)：加HAC使溶液呈弱酸性

原因:(1)Vc還原性很強(qiáng)，在空氣中很容易被氧化，在堿性介質(zhì)中更甚(2)I2在堿性介質(zhì)中會(huì)發(fā)生歧化反應(yīng)加HAC可減少VC的副反應(yīng)，避免實(shí)驗(yàn)誤差45注意！13電位滴定法原理：根據(jù)滴定過(guò)程中電池電動(dòng)勢(shì)的變化來(lái)確定反應(yīng)終點(diǎn).Pt為指示電極，甘汞作參比電極E池＝E+-E-+E液接電位＝EI2/I-+k(常數(shù))46電位滴定法原理：根據(jù)滴定過(guò)程中電池電動(dòng)勢(shì)的變化來(lái)確定反應(yīng)終點(diǎn)電位滴定法右圖：電位滴定法基本儀器裝置計(jì)算式：(與碘量法相同)Wvc=C(I2)V(I2)M(vc)/m(vc)*100%優(yōu)點(diǎn)：解決了滴定分析中遇到有色或渾濁溶液時(shí)無(wú)法指示終點(diǎn)的問(wèn)題47電位滴定法右圖：電位滴定法基本儀器裝置152，4一二硝基苯肼分光光度法

原理：維生素C在空氣中尤其在堿性介質(zhì)中極易被氧化成脫氫抗壞血酸反應(yīng)式：

482，4一二硝基苯肼分光光度法原理：16pH>5,脫氫抗壞血酸內(nèi)環(huán)開(kāi)裂，形成二酮古洛糖酸二酮古洛糖酸49pH>5,脫氫抗壞血酸內(nèi)環(huán)開(kāi)裂，形成二酮古洛糖酸17脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于硫酸的脎脎在500nm波長(zhǎng)有最大吸收脎的結(jié)構(gòu)：50脫氫抗壞血酸，二酮古洛糖酸均能和2，4－二硝基苯肼生成可溶于分光光度法樣品溶液與VC標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述方法同樣處理500nm處測(cè)吸光度下圖：721型分光光度計(jì)51分光光度法樣品溶液與VC標(biāo)準(zhǔn)溶液按上述方法同樣處理19

差示旋光法維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差異，而片劑輔料旋光度保持不變差示旋光法消除輔料的影響，直接測(cè)出該制劑的含量52

差示旋光法維生素C片在不同PH值的溶液中旋光度有顯著差示旋光法1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制準(zhǔn)確稱取維生素C精制品5.0g，乙二胺四乙酸鈉0.37g,置于100mL容量瓶中,用新沸冷卻的蒸餾水溶解,加水到指定刻度,配制成50mg/mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液。2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系量取10.0mL維生素C標(biāo)準(zhǔn)液于50mL量瓶中,用水稀釋至50mL。測(cè)定溶液的pH及旋光度,然后逐次分批加入氫氧化鈉固體(每次約50mg),每次溶解后,測(cè)定一次溶液的pH及其旋光度,得到維生素C溶液的pH及旋光度關(guān)系53差示旋光法1）標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制2）比旋光度與溶液pH值的關(guān)系2差示旋光法選定pH為2.2和6.254差示旋光法選定pH為2.2和6.2222）差示旋光度與溶液濃度關(guān)系吸取2.0、4.0、8.0、16.0、20.0mL的維生素C標(biāo)準(zhǔn)液各兩份,分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容；一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容，靜置3min后,用220mm測(cè)定管，以前者為空白，測(cè)定后者的差示旋光度(△a)。文獻(xiàn)結(jié)果：線性方程為△a=0205*C+0．05，r=0．99643）輔料干擾試驗(yàn)取混合輔料20mg(淀粉、硬脂酸鎂、EDTA、糊精等按處方比例混勻)兩份分別置于50mL的容量瓶,一份用pH2.2的鹽酸鹽緩沖液定容,一份用pH6.2的磷酸鹽緩沖液定容,濾去不溶物,濾液在兩種pH值測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：輔料的差示旋光度為零，說(shuō)明輔料對(duì)維生素C含量的測(cè)定不干擾。552）差示旋光度與溶液濃度關(guān)系3）輔料干擾試驗(yàn)234）穩(wěn)定性試驗(yàn)同一測(cè)試樣品，在120min內(nèi)，每隔3min測(cè)定一次差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：差示旋光度基本不變5）回收率試驗(yàn)精密稱取維生素C精制品500.0mg兩份，分別置于50mL容量瓶中，各加入20mg輔料，分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液，測(cè)定差示旋光度。文獻(xiàn)結(jié)果：平均回收率為97.8％，變異系數(shù)cv為1.03％564）穩(wěn)定性試驗(yàn)5）回收率試驗(yàn)246）樣品測(cè)定取維生素C片劑10片，稱重研碎后分別用鹽酸鹽緩沖液及磷酸鹽緩沖液配制成50mL溶液(相當(dāng)于含Vc20mg/mL)，濾去不溶物，測(cè)定濾液的差示旋光度，根據(jù)回歸方程計(jì)算其含量。576）樣品測(cè)定25薄層掃描法維生素C具有較強(qiáng)還原性，可使藍(lán)色染料2，6-二氯靛酚鈉定量地還原成無(wú)色的酚亞胺，而本身被氧化成去氫抗壞血酸，利用此特征進(jìn)行薄層掃描法測(cè)定含量。

58薄層掃描法維生素C具有較強(qiáng)還原性，可使藍(lán)色染料2，（1）試紙的制備

2,6-二氯靛酚鈉