大網格吸附樹脂的吸附等溫線的制作一、實驗目的和要求通過實驗，加深對大網格樹脂吸附機理的理解；了解吸附等溫線的制作過程和操作方法。二、實驗原理大網格樹脂吸附法是利用樹脂表面分子（包括樹脂外表面和空隙的內表面）與生化物質分子間的范德華力作用，將液體中的生化物質吸附到樹脂表面，與大量雜質分離，然后再用適當?shù)娜軇⑵湎疵撓聛?。大網格聚合物吸附樹脂是一種應用廣泛的吸附劑，它與大網格離子交換樹脂的主要區(qū)別在于其內部結構沒有可與被交換的離子基團，因此，是利用分子間作用力進行吸附。吸附等溫線是表征不同物質吸附的特征曲線，表明在一定溫度下，樹脂吸附平衡時的吸附量與溶質濃度之間的函數(shù)關系，常用Langmui方程和Freundlich方程來描述，前者是建立在單分子吸附層的基礎上的，后者是經驗式。本實驗采用Freundlich方程式，它對本實驗樹脂的吸附行為具有更好的吻合性。Freundlich方程式如下：1m=Kpn（2—10—1）等式兩邊取對數(shù)，得到下式：】gm=K+1ig（2—10—2）n式中：m——吸附平衡時固相吸附量（mg/g樹脂）p吸附平衡時液相質量濃度（mg/ml）K和n常數(shù)由式（2—10—2）可見，lgm與lgP為線性關系，可由實驗求出。本實驗以木瓜蛋白酶為實驗對象，采用HZ802非極性大網格樹脂為吸附劑，在25r溫度下，制作吸附等溫線。三、實驗器材與試劑（一）器材水浴恒溫振蕩器，分光光度計，精密電子天平，25ml具塞試管，15ml試管、比色皿，真空泵，移液槍，燒杯，漏斗，濾紙等。（二）試劑大網格吸附樹脂，木瓜蛋白酶，95%乙醇，蒸餾水。四、操作方法（一）吸附等溫線的制作吸附樹脂的預處理新樹脂孔內還有合成樹脂時殘留的致孔劑等雜質，故應預處理除去。用95%乙醇于燒杯中浸泡樹脂，傾去上浮的雜質，反復多次，直到傾出的液體與蒸餾水混合不產生白色渾濁（澄清）為止。再用蒸餾水洗全傾出液無乙醇味即可，最后用真空抽濾，成為抽十樹脂。配木瓜蛋白酶稱取木瓜蛋白酶1g，溶于50ml蒸餾水，配成約20mg/ml的溶液。精確吸取上述溶液0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml于7只具塞試管中，加入蒸餾水，均稀釋至10ml，配成1、2、4、6、8、10、12mg/ml的溶液。稱取7份抽干吸附樹脂各0.5g，小心倒入上述7只具塞試管中，蓋上瓶蓋，置于25°C恒溫搖床6h左右。達到吸附平衡后取出，濾紙過濾液體到試管中，除去溶液中的樹脂，測定木瓜蛋白酶液相平衡的A值，帶入標準曲線求出對應的濃度。用以下求平衡時樹脂上的吸附量m（mg/g樹脂）：m_（p0-p）xVm0式中：P0和Pe——分別為溶液初始質量濃度和平衡質量濃度（mg/ml）V——溶液體積（ml）m0樹脂質量（g）以液相的平衡質量濃度（mg/ml）為橫坐標，樹脂的平衡吸附量（mg/g樹脂）為縱坐標，作25C時的吸附等溫線曲線圖。（二）制作木瓜蛋白酶濃度標準曲線精確稱取木瓜蛋白酶20mg與燒杯中，加入10ml蒸餾水，配制成2.0mg/ml的標準溶液吸取上述標準溶液0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml于試管中，分別用蒸餾水稀釋至5ml，然后用石英比色皿，在280nm分光光度計下測吸光值A。作線性回歸，求線性方程和相關系數(shù)R?！咀⒁馐马棥?/p>

用分光光度計測量木瓜蛋白酶時，應用石英比色皿（280nm下玻璃比色皿有吸光值）。木瓜蛋白酶用完后記得放回4°C冰箱。實驗數(shù)據(jù)可用Excel軟件分析?！緦嶒灉蕚洹績x器數(shù)量試劑帶塞25ml試官8支木瓜蛋白酶普通10ml試官8支蒸餾水漏斗1個95%乙醇濾紙若干1ml移液槍（及槍頭）1支20“1移液槍（及槍頭）1支小燒杯（100ml或50ml）1個石英比色皿2個HZ802大網格吸附樹脂10g布氏漏斗真空抽濾機分光光度計恒溫搖床五、實驗結果及分析1、實驗結果木瓜蛋白酶標準曲線的制作濃度（mg/ml）A值0.080.0370.160.0680.240.0100.320.1350.400.1700.480.201木瓜蛋白酶標準曲線值光吸濃度（mg/ml）y=0.4179x+0.0013R2木瓜蛋白酶標準曲線值光吸濃度（mg/ml）實驗結果A值液相平衡濃度（mg/ml）初始濃度（mg/ml）樹脂吸附量0.2130.50658052219.8683895670.5781.379995214212.400095721.1942.854032065422.91935871.8014.306532663633.869346731.9654.698971046866.020579092.6156.2543670731074.912658532.8686.85977506612102.804498725C吸附等溫曲線2345678液相平衡質量濃度25C吸附等溫曲線2345678液相平衡質量濃度（mg/ml）ooooooo20864211>脂樹？M量附吸衡平的脂樹R2=0.9661gp1gm-0.2953515130.9942462850.139877581.0934250380.4554588481.3602024620.6341277451.5298