HPLC法測(cè)定布洛芬片含量設(shè)計(jì)方案一、設(shè)計(jì)背景布洛芬是一種比較常用的非甾體類的抗炎藥，是20世紀(jì)50年代和60年代，是開(kāi)發(fā)治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎“超級(jí)阿司匹林”的過(guò)程中長(zhǎng)期研究的產(chǎn)物，具有緩解各種慢性關(guān)節(jié)炎的癥狀等，布洛芬具有優(yōu)異的消炎鎮(zhèn)痛作用，其作用比阿司匹林更強(qiáng)，比其他藥物更具有安全性，現(xiàn)如今布洛芬的合成方法也有許多種，在工藝生產(chǎn)過(guò)程中形式也各不相同。通過(guò)查閱各種相關(guān)的文獻(xiàn)，對(duì)布洛芬進(jìn)行含量測(cè)定，保證其藥品質(zhì)量的安全性、可靠性、準(zhǔn)確性，提供更有效的依據(jù)，為工業(yè)化生產(chǎn)檢測(cè)需要設(shè)計(jì)出簡(jiǎn)便、科學(xué)、易懂、適用性強(qiáng)的含量測(cè)定法案。圖1布洛芬化學(xué)結(jié)構(gòu)二、設(shè)計(jì)依據(jù)布洛芬片中的主要成分是布洛芬，其具有抗炎、鎮(zhèn)痛和解熱作用，《中國(guó)藥典》（2020年版第二部）采用酸堿滴定法測(cè)定布洛芬含量，但由于消耗時(shí)間長(zhǎng)、誤差較大，難以反應(yīng)實(shí)驗(yàn)的真實(shí)質(zhì)量，為進(jìn)一步完善布洛芬質(zhì)量控制方法，故使用HPLC法測(cè)定本制劑中布洛芬的含量，滿足對(duì)布洛芬片質(zhì)量控制的檢測(cè)要求，達(dá)到工業(yè)生產(chǎn)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。三、設(shè)計(jì)方案(一)儀器和試藥1.儀器LC-10ATvp高效液相色譜儀、紫外檢測(cè)儀、色譜柱、sartorius賽多利斯BSA224S電子分析天平。2.試劑試藥（1）標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品：購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定院，含量為98．3％的布洛芬片。（2）檢測(cè)樣品：送檢布洛芬片由實(shí)習(xí)單位提供。（3）試劑：甲醇、乙腈為色譜純,其它試藥、試劑均為分析純,水為超純水。（二）色譜條件（1）色譜柱：Ve—nusilMP18柱(4．6mm×250mm，5μm)。（2）流動(dòng)相：甲醇一已腈一磷酸二氫鈉溶液(0．02mol／L)(50：25：25)。（3）檢測(cè)波長(zhǎng)：263nm，（4）流速：1.0ml／min。（5）柱溫：30℃。（三）溶液的制備1.供試品溶液的制備取布洛芬樣品20片，進(jìn)行精密稱重。將所取樣品研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于布洛芬100mg)，放置于容量為200ml的容量瓶中，加入甲醇30ml，超聲15min,再加甲醇稀釋至容量瓶刻度線，搖勻?yàn)V過(guò)，即得供試品溶液。2.對(duì)照品溶液的制備另精密稱取布洛芬對(duì)照品適量,將其放置于容量為25ml的量瓶中,加入甲醇溶液10ml,超聲15min，再加甲醇稀釋至容量瓶刻度線，搖勻，即得對(duì)照品溶液。電子分析天平容量瓶（四）方法學(xué)考察1.色譜系統(tǒng)和系統(tǒng)適用性試驗(yàn)色譜柱為Ve—nusilMP18柱(4.6mm×250mm，5μm)，流動(dòng)相則為甲醇一已腈一磷酸二氫鈉溶液(0.02mol／L)(50：25：25)，檢測(cè)波長(zhǎng)設(shè)定為263nm，流速為1.0ml／min。樣品的進(jìn)樣量設(shè)定為20μl。理論塔板數(shù)按照布洛芬計(jì)算不得低于3500。分別取布洛芬樣品與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品溶液進(jìn)行測(cè)定。2.回收率試驗(yàn)精密稱取布洛芬供試品細(xì)粉適量(大約相當(dāng)于布洛芬25mg)，將其置于100ml的容量瓶中，并且分別向其中加入布洛芬對(duì)照品溶液2、4、6ml，按對(duì)照品溶液制備法制成3種不同濃度的溶液各3份，進(jìn)行樣品測(cè)定，求得布洛芬樣品的平均回收率。3.線性關(guān)系取“對(duì)照品溶液的制備”項(xiàng)下的對(duì)照品貯備液適量,分別精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml置10ml量瓶中,用流動(dòng)相稀釋至刻度,搖勻,分別取10μl注入HPLC儀,記錄色譜圖。以濃度x(mg/ml)為橫坐標(biāo),峰面積(y)為縱坐標(biāo),進(jìn)行線性回歸,得布洛芬回歸方程。根據(jù)回歸方程，確定線性關(guān)系是否良好。4.精密度試驗(yàn)精密量取線性關(guān)系考察項(xiàng)下的對(duì)照品溶液l0μL，重復(fù)進(jìn)樣6次，記錄峰面積，計(jì)算平均值和RSD。根據(jù)RSD值的結(jié)果，確定儀器的精密度是否良好。5.重復(fù)性試驗(yàn)取布洛芬供試品細(xì)粉適量,共6份,按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下方法，平行制備6份供試品溶液,按選定的色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定并計(jì)算含量。（五）樣品含量測(cè)定取樣品適量,按“供試品溶液的制備”項(xiàng)下方法制備供試品溶液;另取對(duì)照品適量,按“對(duì)照品溶液的制備”項(xiàng)下方法制備對(duì)照品溶液,各精密量取10μl注入HPLC儀,記錄色譜,測(cè)定峰面積,并按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算含量。外標(biāo)法計(jì)算公式如下：CC布洛芬片標(biāo)示量百分含量=四、設(shè)計(jì)小結(jié)可以按照上述實(shí)施方案的配制溶液、設(shè)定相關(guān)的色譜條件、進(jìn)行系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)（如不符合要求可以更換色譜柱并進(jìn)行）和測(cè)定，最終求得布洛芬片含量，布洛芬的藥品標(biāo)示量一般在95.0%~105.0%之間。樣品主峰的保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照品基本一致，所得結(jié)果應(yīng)符合藥典的規(guī)定，說(shuō)明用高效液相色譜法能更準(zhǔn)確的計(jì)算出布洛芬的含量能夠滿足于對(duì)布洛芬片質(zhì)量控制要求，。1.若需要分析多個(gè)溶液，若分離效果不佳，可以考慮調(diào)整柱溫或更換不同的色譜柱。2.布洛芬片保留時(shí)間、柱壓波動(dòng)應(yīng)在允許范圍之內(nèi)。五、參考資料[1]國(guó)家藥典委員會(huì).藥典（第二部）北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020.[2]主編卓菊、宋金玉.中藥制劑檢測(cè)技術(shù)(第2版).中國(guó)醫(yī)藥科技出版社.[3]米振清，范劍《藥學(xué)服務(wù)與研究》2009第二期-156.[4]曲建國(guó)《中國(guó)現(xiàn)代藥物應(yīng)用》2016第10期.六、致謝在本次畢業(yè)設(shè)計(jì)中，非常感謝指導(dǎo)老師，從選題到完成的各